枸杞多糖对人肺癌A549细胞影响的研究

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对人肺癌A549细胞的影响及作用机制。方法:将LBP作用于肺癌A549细胞,应用M TT法、电镜和钙离子测定等技术测定LBP的抗肿瘤作用及作用机理。结果:LBP呈剂量依赖性(100m g/L~2000m g/L)地抑制人肺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡,并可使细胞内钙离子浓度升高。结论:LBP可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与细胞内钙离子浓度升高有关。     

双氢青蒿素对人肺腺癌A549细胞的体外抑制作用研究

目的 观察双氢青蒿素对肺腺癌A549细胞的体外抑瘤效应，并对其抗癌机理作出初步探索。方法 双氢青蒿素对体外培养肺腺癌A549细胞的生长抑制作用采用MTT检测法，细胞凋亡率检测用流式细胞术，并用荧光显微镜及透射电镜观察凋亡细胞的形态学特征。结果 双氢青蒿素半数抑瘤浓度为230nM，双氢青蒿素作用后细胞出现凋亡形态改变，流式细胞术结果出现凋亡峰。结论 双氢青蒿素有较明显抑瘤效应，其抗癌机理可能与诱导细胞凋亡有关。     

牛膝多糖硫酸酯和磷酸酯衍生物对人肺癌A549细胞的影响

目的探讨牛膝多糖硫酸酯(S-AbPS)和磷酸酯(P-AbPS)衍生物对人肺癌A549细胞的影响及其作用机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测牛膝多糖、S-AbPS和P-AbPS对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪观察S-AbPS和P-AbPS处理A549细胞后细胞凋亡的改变。结果S-AbPS和P-AbPS对A549细胞的增殖有抑制作用,且存在时间和剂量相关性。S-AbPS和P-AbPS的48 h抑瘤活性均较同浓度的牛膝多糖强。流式细胞仪分析显示,S-AbPS和P-AbPS均可不同程度地诱导细胞凋亡。结论S-AbPS和P-AbPS较牛膝多糖能更有效地抑制人肺癌A549细胞的增殖,其机制可能是通过诱导A549细胞凋亡而实现。     

S型与R型人参皂苷Rh2诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的体外研究

目的探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)能够诱导人肺腺癌A549细胞凋亡。方法采用MTT实验测定细胞增殖能力;台肦蓝染色法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数;电镜观察细胞凋亡。结果 30μg/mL的S型和R型人参皂苷Rh2作用于A549细胞48h后,死亡率均明显高于正常组细胞(P<0.05);20(S)-Rh2能阻滞细胞周期于G1期,并且2(S)-Rh2型的抗肿瘤活性明显强于20(R)-Rh2;电镜结果显示染色质浓集、断裂,核固缩并出现凋亡小体。结论 S型和R型人参皂苷Rh2均具有促进A549细胞凋亡的生物学功能。     

重组人5型腺病毒术中浸润注射治疗食管癌22例

目的 观察重组人5型腺病毒在术中浸润注射食管癌的临床疗效.方法 选取开胸探查术中确定不能切除的食管癌患者22例,术中给予瘤体内注射重组人5型腺病毒,于治疗期间密切观察患者的生命体征和不良反应;于术后第7天进行血常规、血液生化检查;8周后行纵隔CT平扫复查.结果 22例患者对重组人5型腺病毒术后瘤腔内注射耐受性良好,未见严重不良反应,复查纵隔CT,对肿瘤的控制有效率为86.36%.结论 重组人5型腺病有显著的抑瘤效果和良好的安全性.     

TNF-α对人肺癌A549细胞凋亡的影响

目的探讨TNF-α对人肺癌A549细胞凋亡的影响;方法培养人肺癌A549细胞,与TNF-α(10、100U·ml-1)共孵育,通过Western blot分析P53蛋白表达的变化,同时利用Annexin V/PI双染色流式细胞仪,检测人肺癌A549细胞凋亡率的变化。结果与空白组相比,TNF-α组的P53蛋白表达明显升高,且细胞凋亡率也明显升高,分别为1.22±0.62和1.65±0.38(P<0.01)。结论TNF-α可以诱导人肺癌A549细胞凋亡,从而可能起到抗肿瘤的疗效。     

利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响研究

目的:研究利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响。方法:以A549、Hela细胞为模型细胞,分别分为对照组和利巴韦林低、中、高剂量(20、40、80μmol/ml)组,作用24 h后检测各组细胞的存活率、迁移能力、凋亡情况、酸性膜泡积累情况、自噬标志蛋白LC3(以LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ为指标)的表达情况。结果:与对照组比较,利巴韦林能降低A549、Hela细胞的存活率(中、高剂量组差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)和迁移能力,增加A549、Hela细胞的凋亡率(低、中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)、酸性膜泡积累数量与剂量呈反相关,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.01),作用与剂量呈正相关。结论:利巴韦林可能通过诱导细胞自噬降低A549、Hela细胞的迁移并诱导其凋亡。     

杨梅酮对人肺腺癌A549细胞凋亡和细胞周期的影响

目的检测杨梅酮对体外人肺腺癌细胞A549细胞凋亡和细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪分别检测各组的细胞早期凋亡率和细胞周期百分率。结果杨梅酮能显著增加A549细胞早期凋亡率和G0/G1期的细胞比例,并且细胞凋亡率与杨梅酮浓度具有较好的量效关系。结论杨梅酮能显著增加体外人肺腺癌细胞A549细胞早期凋亡率,并可使A549细胞周期阻滞在G0/G1期。     

重组人5型腺病毒术中瘤腔内注射治疗脑胶质瘤的安全性研究

目的观察脑胶质瘤切除术后瘤腔注射重组人5型腺病毒注射液（安柯瑞）的安全性。方法按入选标准筛选脑胶质瘤患者21例，给予手术切除后瘤腔内注射安柯瑞。治疗前对患者进行全面体检，治疗期间密切观察患者的生命体征和不良反应，并于术后第7天、4周进行血常规、血液生化、尿常规检查。结果21例患者对安柯瑞术后瘤腔内注射耐受性良好，未见严重不良反应，主要不良反应是发热。结论安柯瑞应用于脑胶质瘤瘤腔内注射有良好的安全性。     

重组人p53腺病毒注射液逆转人耐药胃癌MGC-803细胞耐药性的体外试验研究

目的:研究重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)对体外人耐药胃癌MGC-803细胞的逆转作用及其可能的机制。方法:通过紫杉醇由低到高剂量诱导人胃癌MGC-803细胞内多耐药基因表达;不同剂量rAd-p53作用于人耐药胃癌MGC-803细胞不同时间后,MTT法检测细胞增殖抑制率,并计算半数有效抑制浓度(IC50),流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,免疫组织化学法和蛋白质印迹法测定多药耐药基因mdr1表达蛋白P糖蛋白(MDR1-Pgp)的表达。结果:rAd-p53可明显抑制人耐药胃癌MGC-803细胞增殖,呈时间-剂量依赖关系,作用24、48、72h的IC50分别为1889.85、998.44、354.91MOI;rAd-p53可阻滞人耐药胃癌MGC-803细胞周期于G2/M期并诱导其凋亡,可下调MDR1-Pgp蛋白表达。结论:人耐药胃癌MGC-803细胞的耐药性可能与MDR1-Pgp的高表达有关;rAd-p53可显著抑制人耐药胃癌MGC-803细胞的增殖并诱导耐药细胞凋亡,且呈剂量和时间依赖关系。     

5-对氟苄氧基杨梅醇对人肺腺癌A549-Homo BIRC5体内增殖的抑制作用及机制研究

目的 研究5-对氟苄氧基杨梅醇(myricanol 5-fluorobenzyloxy ether,5FEM)对人肺腺癌A549-Homo BIRC5体内增殖的抑制作用及机制。方法 构建A549-Homo BIRC5裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、溶剂(聚乙二醇400,2.5 mL·kg^-1)组和5FEM低、中、高剂量(20,40,80 mg·kg^-1)组,每组8只。各组每日腹腔注射给药,连续5周,每周测量移植瘤体积用于绘制肿瘤生长曲线,实验结束后处死裸鼠,剥离瘤体并称重。TUNEL法检测移植瘤组织细胞凋亡情况;RT-qPCR测定移植瘤组织中Caspase-9、PARP、Bax、Bcl-2和Survivin的mRNA表达水平;ELISA法检测瘤组织中Caspase-9、Survivin和PARP蛋白含量;免疫组化法检测瘤组织中Survivin、Caspase-9、Cleaved caspase-9、PARP和Cleaved PARP蛋白水平。结果 与模型组相比,5FEM(20,40,80 mg·kg^-1)能够显著减小移植瘤体积和减轻瘤重,呈一定剂量依赖性。TUNEL染色结果显示5FEM干预后肿瘤细胞凋亡较模型组明显增多。RT-qPCR结果显示,5FEM(20,40,80 mg·kg^-1)可以诱导瘤组织中Caspase-9和Bax的mRNA表达显著升高,并诱导Bcl-2、PARP和Survivin的mRNA表达降低。ELISA结果显示,5FEM(40,80 mg·kg^-1)可以显著增加瘤组织中Caspase-9蛋白表达量,并显著降低瘤组织中PARP和Survivin蛋白的表达量。免疫组化结果显示,5FEM(80 mg·kg^-1)处理后瘤组织中Caspase-9、Cleaved caspase-9和Cleaved PARP蛋白表达均显著升高,而PARP和Survivin蛋白表达被不同程度抑制。结论 5FEM可下调Survivin表达,促进Caspase-9和PARP活化,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肺腺癌A549-Homo BIRC5裸鼠移植瘤生长。     

阻断Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖

目的 Delta-like 4(DLL4)是Notch信号通路的配体之一,是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明DLL4的高表达与肺腺癌转移预后密切相关。该文旨在研究DLL4在A549细胞中的表达,以及DLL4基因表达对人A549细胞增殖与凋亡的影响。方法 (1)体外培养A549细胞,免疫细胞化学法检测DLL4在A549细胞中的表达及定位;(2)设计并化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lipofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染A549细胞,RT-PCR进行DLL4-mRNA定量,Western blot分别检测A549细胞DLL4蛋白的改变;(3)四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的存活和生长变化;(4)激光共聚焦显微镜检测Annexin V-FITC标记的A549细胞的细胞凋亡比率。结果 (1)A549细胞表达DLL4蛋白,且定位于胞浆中;(2)DLL4-mRNA和DLL4蛋白的表达在对照组与干扰组之间有显著差异(P0.05);(3)MTT检测显示抑制DLL4表达对A549细胞的增殖有抑制作用,DLL4干扰组细胞增殖抑制率为43.85%,未处理组细胞增殖抑制率为23.81%;(4)抑制DLL4基因表达,A549细胞的凋亡比率明显升高,DLL4干扰组细胞凋亡率为(25.01±4.32)%,未处理组细胞凋亡率为(14.24±0.98)%。结论 DLL4在A549细胞表达。特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。     

低剂量卡铂诱导人肺癌细胞A549过早性衰老的作用研究

目的考察低剂量卡铂诱导人肺癌细胞A549过早性衰老的作用。方法 A549细胞经不同浓度卡铂处理,采用MTT法和克隆形成率试验检测卡铂对细胞增生的抑制作用;β-半乳糖苷酶染色试验检测卡铂诱导细胞衰老情况;FCM法检测卡铂对细胞凋亡和细胞周期分布的影响;全波长荧光酶标仪检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平变化。结果低剂量卡铂能诱导细胞衰老;不同浓度卡铂作用细胞48 h后,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞显著增多;细胞周期多停滞于G0/G1期,S期显著减少,且细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。结论低剂量卡铂能诱导人肺癌细胞A549过早性衰老。     

斑蝥素对A549细胞增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥素对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法采用MTT法检测斑蝥素对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析A549细胞周期及斑蝥素对细胞周期的影响。结果斑蝥素对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G2/M期阻滞。结论斑蝥素对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。     

夏枯草乙醇提取物体外诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨夏枯草乙醇提取物对人肺癌细胞系A549细胞的增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响。方法不同质量浓度夏枯草提取物作用于人肺癌A549细胞,采用MTT比色法、细胞划痕实验等检测其对肿瘤细胞的生长及迁移的抑制作用,应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化情况,并使用Annexin-V FITC和PI双染试剂盒进行凋亡分析。结果一定质量浓度的夏枯草提取物可明显抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并呈量效和时效关系,可诱导细胞发生G0/G1期或G2/M期细胞周期阻滞,且Sub G1峰比例明显上升,在低、中质量浓度(1.0和2.0mg·L-1)时以晚期凋亡为主,在高质量浓度(4.0mg·L-1)时主要发生早期凋亡。结论夏枯草提取物可抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移,改变细胞周期,诱导肿瘤细胞凋亡。     

转铁蛋白增强青蒿琥酯对A549细胞增殖抑制活性

目的研究转铁蛋白增强青蒿琥酯对A549细胞的增殖抑制活性。方法采用MTr法检测青蒿琥酯单用或合用转铁蛋白对肺癌A549细胞的增殖抑制作用。结果青蒿琥酯对A549细胞的IC50值为144．76mg·L^-1,青蒿琥酯合用转铁蛋白后IC50值降为45．89mg·L^-1。结论转铁蛋白增强了青蒿琥酯对A549细胞的增殖抑制活性。