解偶联蛋白2基因表达与胰岛β细胞分泌功能的关系及机制

目的 观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨解偶联蛋白2(UCP2)及相关的氧化应激在其中的作用及机制.方法 8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组,20只)和高脂饲料组(HF组,20只).饲养20周检测以下指标:(1)血浆硝基酪氨酸,丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹试验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注试验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较两组大鼠胰岛细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)以及UCP2mRNA表达的变化.(5)免疫组织化学染色及图像分析检测IRS-1,IRS-2在两组大鼠胰岛中的表达.结果 (1)HF组血浆硝基酪氨酸(0.17±0.01)μmol/L和MDA(22±5)nmol/L水平高于NC组(0.14±0.02)μmol/L,(13±3)nmol/L,(P均＜0.05),GSH水平(103±9)mg/ml明显低于NC组(142±9)mg/l,(P＜0.01);(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)较Nc组明显降低(P＜0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降(P＜0.01);(3)HF组胰岛细胞IRS-1及IRS-2mRNA表达分别降低42.3%、28.1%,UCP2表达增高32.5%(P均＜0.05).(4)HF组胰岛IRS-1和IRS-2的表达较对照组分别降低26.3%(P＜0.05)和11.2%(P＞0.05).(5)UCP2与胰岛细胞IRS-1 mRNA表达呈负相关(r=-0.621,P＜0.05);且与IRS-2mRNA表达也呈负相关(r=-0.416,P＜0.05).结论 长期高脂饲养能导致大鼠胰岛细胞胰岛素信号分子表达下降,β细胞胰岛素分泌功能受损,具体机制推测与UCP2相关的氧化应激增强有关.     

大剂量抗氧化剂对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及机制

目的:探讨大剂量抗氧化剂-N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-l-cysteine,NAC)对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及可能机制。方法:将59只8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组)、高脂饲料组(HF组)和高脂 NAC组(NAC组)。饲养20周,(1)测血浆及胰腺组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹实验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较各组大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和葡萄糖转运子-2(Glut-2)mRNA表达的变化。结果:(1)HF组血浆及胰腺MDA水平明显高于NC组,GSH水平低于NC组,NAC可以改善以上变化;(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)比NC组降低(P<0.01),用NAC后GIR明显改善(P<0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能下降,用NAC后可逆转上述变化;(3)HF组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2mRNA表达降低42.3%、28.1%、22.9%(P均<0.05);NAC组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2 mRNA表达与HF组相比增加40.2%、30.2%,19.1%(P均<0.05)。结论:大剂量抗氧化干预治疗能改善胰岛细胞胰岛素信号传导,逆转高脂饲养导致的大鼠胰岛细胞分泌功能紊乱,其机制可能与NAC纠正机体氧化及抗氧化失衡有关。     

胰岛素信号通路在高游离脂肪酸所致的β细胞功能紊乱中的作用及机制

目的:观察血浆游离脂肪酸(FFA)水平升高对β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨β细胞胰岛素信号通路在其中所起的作用及其机制. 方法: 将8周龄雄性SD大鼠随机分为脂肪乳输注组(FFA组,13只)和生理盐水输注组(NS组,12只).分别输注48 h,检测以下指标:(1)采血检测胰岛素, FFA水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹实验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)静脉葡萄糖耐量实验,评价活体胰岛β细胞分泌功能;(4)胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(5)采用实时荧光定量PCR方法检测肌肉中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)mRNA表达的变化;(6)用实时荧光定量PCR方法检测胰岛细胞IRS-1,IRS-2和葡萄糖转运子-2(Glut-2)mRNA表达的变化.结果:(1)FFA组血中胰岛素水平比NS组增高[(24.44±1.25) mIU/L vs (18.09±1.37) mIU/L,P＜0.05],FFA水平也显著高于NS组[(1.39±0.18) mmol/L vs (0.64±0.10) mmol/L,P＜0.001];(2)FFA刺激后,离体和活体的胰岛β细胞分泌功能均增强;(3)FFA组葡萄糖输注率(GIR)较NS组明显降低(P＜0.05),提示存在明显的外周胰岛素抵抗;(4)FFA组肌肉IRS-1 mRNA表达比NS组降低87.7%,IRS-2表达降低50.7%(P＜0.05);(5) FFA组胰岛细胞IRS-1 mRNA表达增加29.3%(P＜0.05),IRS-2及Glut-2分别增加345.1%和536.4%(P＜0.01).结论:血浆FFA水平短期升高,造成外周胰岛素抵抗的同时,对β细胞胰岛素分泌有刺激作用,此时胰岛细胞胰岛素信号通路分子基因表达增加.     

3T3L1脂肪细胞对大鼠胰岛β细胞功能障碍的影响

Objective To investigate the integrated effects of adipocytes on rat beta-cells, differentiated 3T3L1 adipocytes and rat islet cells co-culture system was established. Methods There were two groups; control group ( SD rat islet cells) and co-culture group (islet cells and 3T3L1 adipocytes co-culture system). Islet cells were obtained for determination of (1) insulin secretion and insulin content; (2) mRNA expressions of GLUT2, GCK and Kir6. 2; (3) protein expressions of IR-β, IRS-1 and their tyrosine phosphorylation leveL Results (1) At low glucose, insulin secretion of co-culture group increased compared with that of control group (0.79±0.35) ng·h-1 · ml-1 islet vs (0.38±0.09 ) ng · h-1 · ml-1 · islet, P = 0. 028 . At high glucose, insulin secretion of those two groups was almost at the same level (P =0.760). Compared with control group (2. 84 ±0.92) , stimulation index (SI, insulin release at high glucose/ low glucose) of co-culture system decreased to (1. 57 ±0. 61, P =0.04). And the insulin content of the both groups was almost at the same level (P=0.102). (2) The mRNA of GCK, GLUT2 and Kir6. 2 in co-culture group downregulated to (0. 27 ±0. 11, P = 0. 01) , (0. 34 ±0. 24, P = 0. 009) and (0.41 ± 0. 09, P = 0. 003) compared with control group (mRNA = 1). ( 3) The protein levels of IR-β, IRS-1 and their tyrosine phosphorylation decreased in co-culture system. Conclusions 3T3L1 adipocytes are involved in beta-cell dysfunction, which may facilitate the development of type 2 diabetes. The effects may be mediated by multiple pathways, which include downregulation of GSIS related gene expressions and suppression of islet cell insulin signaling.     

3T3L1脂肪细胞对大鼠胰岛β细胞功能障碍的影响

Objective To investigate the integrated effects of adipocytes on rat beta-cells, differentiated 3T3L1 adipocytes and rat islet cells co-culture system was established. Methods There were two groups; control group ( SD rat islet cells) and co-culture group (islet cells and 3T3L1 adipocytes co-culture system). Islet cells were obtained for determination of (1) insulin secretion and insulin content; (2) mRNA expressions of GLUT2, GCK and Kir6. 2; (3) protein expressions of IR-β, IRS-1 and their tyrosine phosphorylation leveL Results (1) At low glucose, insulin secretion of co-culture group increased compared with that of control group (0.79±0.35) ng·h-1 · ml-1 islet vs (0.38±0.09 ) ng · h-1 · ml-1 · islet, P = 0. 028 . At high glucose, insulin secretion of those two groups was almost at the same level (P =0.760). Compared with control group (2. 84 ±0.92) , stimulation index (SI, insulin release at high glucose/ low glucose) of co-culture system decreased to (1. 57 ±0. 61, P =0.04). And the insulin content of the both groups was almost at the same level (P=0.102). (2) The mRNA of GCK, GLUT2 and Kir6. 2 in co-culture group downregulated to (0. 27 ±0. 11, P = 0. 01) , (0. 34 ±0. 24, P = 0. 009) and (0.41 ± 0. 09, P = 0. 003) compared with control group (mRNA = 1). ( 3) The protein levels of IR-β, IRS-1 and their tyrosine phosphorylation decreased in co-culture system. Conclusions 3T3L1 adipocytes are involved in beta-cell dysfunction, which may facilitate the development of type 2 diabetes. The effects may be mediated by multiple pathways, which include downregulation of GSIS related gene expressions and suppression of islet cell insulin signaling.     

游离脂肪酸对人胰岛β细胞凋亡的影响及氨基胍的保护作用

目的:初步探讨游离脂肪酸对人胰岛β细胞凋亡的影响及其分子机制.方法:体外分离培养人胰岛细胞,免疫组化鉴定β细胞后分为对照组、游离脂肪酸组和氨基胍组,37℃、5%CO2培养72 h后做胰岛素释放实验,测定培养液上清胰岛素和一氧化氮(NO)水平.原位末端核苷酸标记法(TUNEL)和胰岛素免疫组化双染色法及ELISA检测胰岛β细胞凋亡,RT-PCR检测胰岛细胞p53 mRNA和bcl-2 mRNA表达水平.结果:游离脂肪酸组胰岛β细胞凋亡小体富计因子(6.37±3.4)、β细胞凋亡百分数(16.9%)、NO(187.35±20.99)μmol/L和p53 mRNA表达水平(0.645±0.029)均显著高于氨基胍组[分别为(1.17±0.2)、6.2%、(130.8±9.2)μmol/L和(0.47±0.02),P＜0.05]和对照组[分别为(1.11±0.4)、4.8%、(103.3±31.2)μmol/L和(0.35±0.03),P＜0.01],而胰岛素(9.27±1.13)mU·L-1·1×106cells和bcl-2 mRNA(0.131±0.046)表达水平则显著低于氨基胍组和对照组(P＜0.05).结论:游离脂肪酸可诱导人胰岛β细胞凋亡,其机制可能与胰岛β细胞抗氧化能力降低引起p53表达增加和bcl-2表达降低有关,氨基胍可部分防止游离脂肪酸诱导的人胰岛β细胞凋亡.     

知母醇提物对INS-1胰岛β细胞功能的影响

目的 研究知母醇提物对正常和抵抗INS-1胰岛β细胞的增殖及分泌功能的影响,探讨知母醇提物对正常细胞的毒性影响以及对胰岛素抵抗细胞的改善作用.方法 采用MTT法测定知母醇提物对正常INS-1胰岛B细胞的增殖作用;知母醇提物干预正常细胞及胰岛素抵抗INS-l胰岛β细胞,分为溶媒组(ME)、胰岛素分泌模型组(MC)、胰岛素抵抗组(IR)、阳性药格列本脲组(Gli)和罗格列酮组(ROZ)及知母醇提物组,测定各组基础胰岛素分泌(BIS)和葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)值.结果 知母醇提物质量浓度在0.3～ 30 μg/mL时对正常细胞有明显的增殖作用,与MC组的GSIS比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);与IR组的BIS和GSIS比较,知母醇提物浓度在3～ 30 μg/mL能显著促进细胞的BIS能力,同时其质量浓度在0.3 ～ 30 μg/mL能显著性促进GSIS功能.结论 知母醇提物在一定浓度范围内对正常INS-1胰岛β细胞的毒性较低,同时能通过促进正常细胞的增殖,增强其胰岛素分泌能力,改善细胞自身的胰岛素抵抗.     

小檗碱抑制IKKβ Ser 181磷酸化改善高糖诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的分子机制

目的 研究小檗碱对高糖诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用,探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制.方法 以25 mmol/L葡萄糖加0.6 nmol/L胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,予以小檗碱进行干预,同时以阿司匹林作为阳性对照,以2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄人法观察葡萄糖的转运率,用Western blotting 检测IKKβ蛋白,IKKβSer 181磷酸化,IRS-1蛋白,IRS-1 Ser 307磷酸化,PI-3K p85蛋白,GLUT4蛋白的表达.结果 25 mmol/L葡萄糖加0.6 nmol/L胰岛素作用18 h使3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运抑制60%,IKKβ Ser 181磷酸化、IRS-1 Ser 307磷酸化的表达增加,IRS-1和PI-3K p85蛋白的表达减少;同时加入小檗碱或阿司匹林则可逆转上述效应.但高糖、小檗碱、阿司匹林对3T3-L1脂肪细胞IKKl3蛋白、GLUT4蛋白的表达无明显影响.结论 小檗碱可以明显改善高糖诱导的胰岛素抵抗,其分子机制可能是小檗碱通过抑制IKKβ Ser 181磷酸化,使IRS-1丝氨酸残基磷酸化减少而酪氨酸残基磷酸化增加,调节胰岛素信号蛋白的表达来实现的.     

肥胖及限食对胰岛素分泌调节异常的影响

目的探讨饮食诱导肥胖及限食对C57BL/6小鼠血糖、胰岛β细胞分泌及形态学的影响。方法 8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照(n=12)、高脂肥胖(n=12)及限食组(n=12),连续观察12周。测定体重及血糖变化,通过腹腔胰岛素耐量实验、葡萄糖耐量实验、HE染色观察小鼠的胰岛β细胞功能和形态学变化,行静态葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验(GSIS)评估β细胞功能。结果与对照组小鼠体重相比,高脂肥胖组增加55.7%(P0.05),限食组下降12.8%(P0.05)。高脂小鼠胰岛素敏感性显著下降(P0.05),GSIS提示胰岛素分泌缺陷。限食组的空腹胰岛素分泌减少(P0.05),但早时相胰岛素分泌及GSIS胰岛素分泌正常,胰岛体积小(P0.05)。结论肥胖小鼠表现出胰岛β细胞功能紊乱和胰岛素抵抗,限食不影响胰岛素分泌反应,但空腹血胰岛素水平降低。     

葡萄糖转运蛋白2与糖尿病的关系研究进展

葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)是胰岛β细胞的主要葡萄糖载体,在胰岛β细胞分泌胰岛素的过程中有重要的作用。GLUT2和葡萄糖激酶被认为是胰岛β细胞内的葡萄糖传感器,从而使体内胰岛素分泌反应的强度受血中葡萄糖浓度的调节。本文从GLUT2分子结构与功能、表达调控、与葡萄糖激酶关系、与糖脂毒性的关系和在糖尿病中的作用5个方面加以阐述。     

IR-3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞的建立

目的探讨3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞（insulin resistant 3T3-L1 adipocytes cell, IR-3T3-L1）最佳的建立条件。方法采用
地塞米松（Dexamethason,DEX）、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤（3-isobutyl-methylxanthine, IBMX）和不同浓度的胰岛素（10-8、10-7、
10-6 mol·L-1）诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,Oil red O染色确定最佳胰岛素诱导浓度,继而用1 μmol·L-1 DEX
诱导建立IR-3T3-L1 脂肪胰岛素抵抗细胞。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶（Glucose oxidase-peroxidase, GOD-POD）法对
IR-3T3-L1细胞的最佳诱导时间（24~120 h）及其稳定时间（24~48 h）进行了考察。结果Oil red O染色发现3T3-L1前脂肪细胞
用DEX、IBMX和10-6 mol·L-1胰岛素诱导9 d,>90% 的前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞;用1 μmol·L-1 DEX培养96 h后,脂肪
细胞葡萄糖消耗率达到最大（P=0.0003）;稳定时间考察发现,在36 h内葡萄糖消耗与对照组比较有统计学意义（P<0.001）。结
论3T3-L1前脂肪细胞在1 μmol·L-1 DEX、0.5 mmol·L-1 IBMX 和10-6 mol·L-1最佳胰岛素浓度作用下诱导分化为成熟的脂肪细
胞后,用1 μmol·L-1 DEX培养96 h即可成功诱导成IR-3T3-L1-IR脂肪胰岛素抵抗细胞,且在36 h内稳定。
     

Relationship between islet beta cell dysfunction and gene expression of uncoupling protein-2 and possible mechanism thereof

OBJECTIVE: To study the effects of high fat diet on the functions of islet beta cells and the role of uncoupling protein-2 (UCP2) therein and possible mechanism. METHODS: Forty SD rats were randomly divided into two equal groups: high-fat-(HF) diet group, fed with HF diet for 20 weeks, and normal diet control (NC) group, fed with normal diet. At the end of the twentieth week blood samples were collected from the heart to determine the serum fasting blood glucose (FBG) and fasting insulin (FINS), and plasma nitrotyrosine, malondialdehyde (MDA), and glutamylcysteinylglycine (GSH), indicators of oxidative stress. Glucose infusion rate (GIR) was measured using euglycemic hyperinsulinemic clamp test to evaluate the peripheral insulin resistance. Pancreatic islets were isolated and collected. Islet perfusion was conducted to evaluate the insulin secretion in the islet beta cells. Real-time PCR was used to detect the expression of insulin receptor substrate-1 (IRS-1), IRS-2, and uncoupling protein 2 (UCP2) genes in the islet. Immunohistochemistry was used to detect the protein expression of IRS-1 and IRS-2. RESULTS: (1) The concentrations of plasma nitrotyrosine and MDA of the HF group were both significantly higher than those of the NC group (both P < 0.05). However, the plasma GSH of the HF group was significantly lower than that of the NC group (P < 0.01). (2) The blood glucose of both groups became stable since 60 min after the experiment and the GIR of the HF group was (5.25 +/- 1.2) mg x min(-1) x kg(-1), significantly lower r than that of the NC group [(13.6 +/- 1l.7) mg x min(-1) x kg(-1), P < 0.01). (3) The peak of glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) of the HF group was significantly lower than that of the NC group; and the GSIS peak increase In comparison with the NC group. (4) In comparison with the NC group, the mRNA expression levels of IRS-1 and IRS-2 genes of the HF group were significantly lower, by 42.3% and 28.1% respectively (both P < 0.05), and the expression of UCP2 was significantly higher, by 32.5% (P < 0.05). (5) Compared with the NC group, the protein expression levels of IRS-1 and IRS-2 in the islets of the HF group were lower, by 26.3% and 11.2% respectively, however not significantly (both P > 0.05). (6) There was a significantly negative correlation between the UCP2 and IRS-1/IRS-2 gene expression in islet beta cells in the HF group (r = -0.621 and r = -0.436, both P < 0.05). CONCLUSION: High-fat-diet impairs the expression of insulin signal transduction molecules and the function of islet beta cells that may be correlated with overexpression of UCP2. The basic insulin secretion of HF group was significantly higher than that of the NC group; but the glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) peak decreased in comparison with the NC group. Compared with the NC group, the protein expression levels of IRS-1 and IRS-2 in the islets of the HF group were lower, by 26.3% (P < 0.05) and 11.2% (P > 0.05) respectively.     

氯沙坦改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的机制研究

目的探讨氯沙坦改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的主要作用机制。方法以地塞米松诱导3T3-L1脂肪细胞,建立胰岛素抵抗细胞模型,根据细胞模型添加干预药物的不同分为模型对照组（不添加任何药物）、氯沙坦组（分别给予1、10、100μmol/L氯沙坦干预48 h）和wortmannin＋氯沙坦组,wortmannin＋氯沙坦组以100 nmol/L的磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂wortmannin预处理20 min后再加入100μmol/L氯沙坦干预48 h。观察脂肪细胞体积的变化,采用葡萄糖氧化酶法检测细胞培养上清液中葡萄糖的浓度,采用Western blotting分析脂肪细胞中PI3K和胰岛素受体底物1（IRS-1）的表达以及IRS-1丝氨酸磷酸化水平。结果与模型对照组比较,氯沙坦组脂肪细胞体积明显缩小（P〈0.01）,细胞培养上清液中葡萄糖的浓度显著降低（P〈0.01）,PI3K和IRS-1表达明显上升（P〈0.01）,IRS-1丝氨酸磷酸化水平显著下降（P〈0.01）但可被wortmannin阻断。结论氯沙坦可使3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的细胞体积缩小,并增加细胞对葡萄糖的利用,其机制可能与PI3K信号通路有关。     

养精种玉汤对胰岛素抵抗卵泡影响的实验研究

目的观察养精种玉汤复方水溶液对过多雄激素诱导的胰岛素抵抗（IR）卵泡胰岛素受体底物-1（IRS-1）和葡萄糖转运体-4（GLUT4）蛋白的影响,从而初步探讨其改善卵泡IR的机制。方法收集新鲜猪卵泡,经250μM丙酸睾酮（TP）作用48 h后,检测培养液上清残糖量,评估构建IR卵泡模型是否成功。采用蛋白印迹（Western Blot）检测IRS-1和GLUT4蛋白在正常组、抵抗组和复方组中的变化。结果 250μM的TP刺激48 h后,卵泡培养液上清残糖较正常组升高了29%（P〈0.05）。当卵泡产生IR后,其IRS-1与GLUT4蛋白表达量较正常组分别降低了74%与95%（P〈0.05）。然而加入养精种玉汤复方作用后,复方组IRS-1与GLUT4蛋白表达量较抵抗组分别升高了2倍与5倍（P〈0.05）。结论过多雄激素可以使卵泡产生IR,而养精种玉汤能够上调产生胰岛素抵抗卵泡IRS-1与GLUT4蛋白的表达,这可能是其改善IR的机制。     

胃旁路术对2型糖尿病大鼠肝脏葡萄糖转运体-2及葡萄糖激酶表达的影响

目的：观察胃旁路术（GBP）对自发性2型糖尿病（T2DM）大鼠（GK大鼠）肝细胞葡萄糖转运体-2（GLUT-2）及葡萄糖激酶（GCK）表达的影响,探讨其改善胰岛素抵抗的机制。方法30只8周龄雄性GK大鼠按照随机数字法分为手术组（10只）、假手术组（10只）、饮食配对组（10只）,另8周龄雄性SD作为空白对照组（10只）。检测和比较术前及术后1、2、4周各组大鼠空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）水平,应用蛋白印迹（Western blot）及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测各组术后4周肝脏组织GLUT-2、GCK mRNA及其蛋白的表达情况。结果 GK手术组术后1、2、4周FPG （（11.06±0.52） mmol／L、（7.49±0.34）mmol／L、（5.20±0.08）mmol／L）均低于术前水平（17.53±0.57）mmol／L）（均P＜0.05）;术后4周FINS由术前（11.90±0.75）mmol／L升至（14.20±1.23）mmol／L（P＜0.05）;术后4周GLUT-2、GCK mRNA及其蛋白表达明显增加（P＜0.01）。结论 GBP能上调T2DM大鼠肝细胞胰岛素信号转导通路中GLUT-2及GCK的表达,增强胰岛素受体后的信号转导,提高胰岛素的敏感性。     

褪黑素受体激动剂Neu-P11对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞IRS-1和GLUT-4表达的影响

目的探讨褪黑素受体激动剂Neu-P11对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞IRS-1和GLUT-4表达的影响。方法用高糖高胰岛素作用3T3-L1脂肪细胞24 h,建立胰岛素抵抗细胞模型。分别采用褪黑素、Neu-P11、褪黑素+luzindole(褪黑素受体拮抗剂)和Neu-P11+luzindole处理细胞,并以未加药细胞作为对照。用葡萄糖氧化酶法检测培养液中的糖含量并计算糖消耗量,用蛋白质印迹分析检测细胞内IRS-1、GLUT-4蛋白表达变化。结果胰岛素抵抗细胞用褪黑素和Neu-P11处理后,糖消耗量较未加药对照组升高(P<0.05),GLUT-4、IRS-1的蛋白表达也增高(P<0.05);褪黑素和Neu-P11分别与luzindole联合作用于细胞后,细胞的上述蛋白表达较单用褪黑素组和单用Neu-P11组降低(P<0.05),而与未加药对照组相比差异无统计学意义。结论褪黑素受体激动剂Neu-P11可提高胰岛素抵抗脂肪细胞的胰岛素敏感性,增加糖消耗量,这种作用可能与上调IRS-1、GLUT-4蛋白的表达有关。     

坎地沙坦对高脂饮食大鼠脂肪组织中两面神激酶2和蛋白酪氨酸磷酸酶-1B表达的影响

目的 观察坎地沙坦对高脂饮食大鼠脂肪组织两面内神激酶2(JAK2)和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP-1B)的影响.方法 45只雄性Wistar大鼠分为3组:正常对照组(NC)、高脂饮食组(HF)、高脂+坎地沙坦组(FC).FC组每天灌胃坎地沙坦8 mg/kg,其他两组分别给予等量生理盐水.16周后测定血清生化、胰岛素,行高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验,评价外周胰岛素抵抗程度.以RT-PCR方法和Western免疫印迹比较3组脂肪组织内JAK2和PTP-1B的mRNA和蛋白表达.结果 (1)HF组大鼠体重、肾周脂肪重量均明显高于NC和FC组(均P<0.05).(2)FC组总胆固醇、空腹胰岛素水平明显低于HF组[总胆固醇,FC组:(1.37 4±0.39)mmol/L,HF组:(2.01±0.26)mmol/L.P<0.05;空腹胰岛素,FC组:(3.03±1.37)mU/L,HF组:(4.76±2.75)mu/L,P<0.05],但胰岛素敏感指数及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)明显高于HF组[胰岛素敏感指数,FC组:(58±12)×10-3.HF组:(29±9)×10-3,P<0.05;血管紧张素Ⅱ,FC组:(61±11)mmol/L,HF组:(52±10)mmol/L,P<0.05].(3)FC组稳态葡萄糖输注率较HF组明显增高[FC组:(22±5)mg.kg-1.min-1,HF组:(14士4)mg·kg-1·min-1,P<0.05].(4)与HF组相比,FC组脂肪JAK2和PTPT-1B的mRNA和蛋白水平明显降低.结论 高脂饮食诱导的肥胖大鼠存在胰岛素抵抗并且JAK2和PTP-1B表达明显增高,二者均与AngⅡ升高有关,而坎地沙坦能逆转这种变化.