B-SAg研究进展

Ｂ细胞抗原（Ｂ┐ＳＡｇ）能刺激Ｂ细胞大量增殖、分化，对ＶＨ基因产物呈特异性结合，还可激活补体级联反应。在人类某些感染性疾病、自身免疫性疾病和ＡＩＤＳ等病理过程中具有重要影响，对其深入研究可能为治疗这些疾病寻求新的途径。     

超抗原与自身免疫性疾病

超抗原是指一些细菌外毒素和逆转录病毒的基因产物，包括Ｔ细胞超抗原（Ｔ－ＳＡｇ）和Ｂ细胞超抗原（Ｂ－ＳＡｇ）。它与自身免疫性疾病密切相关，参与免疫性疾病的致病过程。这为自身免疫性疾病发病机制的研究提供了新途径。     

B细胞超抗原与自身免疫性疾病

Ｂ 细胞超抗原（ Ｂ Ｓ Ａｇ） 能与 Ｂ 细胞抗原识别受体（ Ｂ Ｃ Ｒ） 上普通抗原结合部位外的区域结合,与大部分 Ｂ 细胞发生反应,激活大量自身反应性 Ｂ 细胞; Ｂ Ｓ Ａｇ 还能和血浆中许多可溶性 Ｉｇ 结合,形成大量免疫复合物,激活补体系统使炎症反应加强;临床上 Ｓ Ｌ Ｅ、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎等自身免疫病的发病与 Ｂ Ｓ Ａｇ 有关。 Ｈ Ｉ Ｖｇｐ１２０ 作为 Ｂ Ｓ Ａｇ 感染大量 Ｂ 细胞,加重 Ａ Ｉ Ｄ Ｓ 的症状。 Ｂ Ｓ Ａｇ 对自身抗体的强大吸附作用使得 Ｂ Ｓ Ａｇ 可用于某些自身免疫病的治疗。     

乙型肝炎病毒表面抗原S基因在人5型重组腺病毒中…

从美国Ｗｙｅｔｈ公司引进ｐＡｄ５△Ｅ３载体，将乙型肝炎病毒表面抗原基因（ＨＢＶＳ）ＰｒｅＳ２＋Ｓ，腺病毒晚期表达盒＋ＨＢＶＳ基因插入Ｅ３区，与ＥｃｏＲＩ消化的Ａｄ５ＤＮＡＡ片段共转染细胞获得重组腺病毒，相应命名为ｒＡｄ５Ｓ，ｒＡｄ５ＭＳ，ｒＡｄ５Ｓ２Ｓ。对所获得的重组病毒进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）分析，证实重组病毒中含有目的基因，用ＥＬＩＳＡ分析ｒＡｄ５ＭＳ的表达量，其病变细胞和上清液滴度均为１：     

Epstein—Barr病毒膜抗原在昆虫细胞sf9中的表达,纯 …

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒膜抗原基因（ＥＢＶ－ＭＡ）称ＭＡ１和截去穿膜区的ＭＡ基因称ＭＡ２分别插入杆状病毒表达载体ｐＶＬ－９４１。将两种重组质粒分别与杆状病毒ＤＮＡ共转染ｓｆ９细胞后获得Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ１和Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ２两种重组病毒，表达产物分别位于重组病毒感染的细胞表面或释放到细胞培养液中。免疫荧光方法检查，在感染的细胞表面表达产物与抗ＭＡ的单克隆抗体特异性地结合，ＳＤＳ－Ｐ     

从小鼠乳腺肿瘤病毒来观察超抗原和逆转录病毒的感染

超抗原（ＳＡｇ）可通过刺激Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖβ链诱导强烈的免疫反应。小鼠乳腺病毒是一种牛乳传递的逆转录病毒，可转录ＳＡｇ，而ＳＡｇ诱导的免疫应答又通过Ｔ细胞使被感的Ｂ细胞扩增，从而维持了病毒的生存。     

一种恶性疟原虫保护性抗原重组复合基因表达产物诱发小鼠…

本文用ＥＬＩＳＡ间接法检测了一种恶性疟原虫保护抗原重组复合基因表达产物诱导小鼠体液免疫学的反应，该复合基因包含了编码ＭＳＡ１，ＭＳＡ２和ＲＥＳＡ上的Ｔ和／或Ｂ细胞刺激位点的基因片段，同时加有ＩＬ－１和ＴＴ上的广谱Ｔ细胞刺激位点的基因片段，该复合基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中的表达产物（简称复合抗原）在用和无佐剂的条件下免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠后，均产生了明显的抗复合抗原的抗体，同时也产生了明显的抗可溶性裂殖子抗     

从小鼠服腺肿瘤病毒来观察超抗原和逆转录病毒的感染

超抗原可通过刺激Ｔ细胞受体Ｖβ链诱导强烈的免疫反应。小鼠乳腺病毒是一种牛乳传递的逆转录病毒，可转录ＳＡｇ，而ＳＡｇ诱导的免疫应答又通过Ｔ细胞使被感的Ｂ细胞扩增，从而维持了病毒的生存。     

Epstein—Barr病毒壳抗原的纯化及其在检查血清抗体…

为了建立纯化Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒壳抗原（ＥＢＶ－ＶＣＡ）的方法，用于酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测人因清中的相关抗体，我们用重组昆虫病毒在感染的ｓｆ９细胞中表达ＥＢＶ－ＶＣＡ。感染的细胞经裂解后，层析纯化表达产物。用经的ＶＣＡ作为抗原包虫被ＥＬＩＳＡ板或硝基纤维膜，检查血清中ＶＣＡ／ＩｇＡ和ＶＣＡ／ｇＧ抗体，为ＥＢＶ感染的的检测和ＮＰＣ的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。     

抗人Ig轻链系列单抗的研制：Ⅲ抗人Ig游离λ型轻链共同抗原决定…

用多例提纯的ＢＪ－λ混合免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Ｓｐ２／０融合，获得３株稳定分泌抗人Ｉｇ游离λ链ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株（ＡＨλＤ８、ＡＨλ１Ｃ１和ＡＨλ２Ｃｌ）。它们分泌的ＭｃＡｂ均能与我室所有１７例ＢＪ－λ起强反应，但不与结合的λ型轻链及Ｋ型轻链反应，表明这３株ＭｃＡｂ可能是抗人Ｉｇ游离λ链共同抗原决定簇的。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。添加ＥＬＩＳＡ表明它们识别相同的表位。     

一种恶性疟原虫保护性抗原重组复合基因表达产物诱发小鼠体液免疫反应的研究

本文用ＥＬＩＳＡ间接法检测了一种恶性疟原虫保护性抗原重组复合基因表达产物诱导小鼠体液免疫的反应。该复合基因包含了编码ＭＳＡ１、ＭＳＡ２和ＲＥＳＡ上的Ｔ和／或Ｂ细胞刺激位点的基因片段，同时加有ＩＬ－１和ＴＴ上的广谱Ｔ细胞刺激位点的基因片段。该复合基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中的表达产物（简称复合抗原）在有和无佐剂的条件下免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠后，均产生了明显的抗复合抗原的抗体，同时也产生了明显的抗可溶性裂殖子抗原的抗体。相反，用可溶性裂殖子抗原免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠则不能产生明显的抗复合抗原的抗体。另外，经复合抗原免疫的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠也能产生明显的抗复合抗原的抗体     

抗Epstein－Bars病毒壳抗原gp125单克隆抗体的研制

用重组痘苗病毒在１４３细胞上表达的ｇＰ１２５粗提物免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，用杂交瘤技术获得７株稳定分泌抗Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｓ（ＥＢ）病毒ｇｐ１２５单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对杂交瘤细胞及单克隆抗体进行一系列分析和鉴定，初步建立了用表达产物及特异性单克隆抗体检测ＥＢ病毒ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体的三步ＥＬＩＳＡ法。用此法检测ＩｇＡ／ＶＣＡ阳性的鼻咽癌病人血清及ＩｇＡ／ＶＣＡ阴性的正常人血清，结果完全吻合。     

用于研究DLA—DRB1基因分型的寡核苷酸引物对的选择

我们用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法研究了ＤＬＡⅡ类基因。为寻找合适的引物，用四对不同的引物：ＤＬＡ－ＤＲ－ＳＰ／Ｓｔｏｐ，ＤＬＡ－ＳＰ／Ｐ３，ＨＬＡ－ＤＲＢ－ＧＨ４６／５０及ＨＤＡ－ＤＲＢ－ＡＭＰ－Ａ／Ｂ进行了一系列扩增，只有引物对ＨＬＡ－ＤＲＢ－ＡＭＰ－Ａ／Ｂ获得了满意的结果，其类似核苷酸序列在ＤＬＡ－ＤＲＢｃＤＮＡ的核苷酸序列内被发现，特异性也为Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析所证实，内切酶ＨａｅⅡ类基     

红细胞抗原免疫印迹法在抗SSA抗体分型中的应用

建立了以人红细胞为ＳＳＡ抗原来源的免疫印迹法（ＲＢＣ－ＩＢＴ）检测ＳＳＡ抗体。此法的敏感性略低于常规的对流免疫电泳法（ＣＩＥ），但可检出部分ＣＩＥ中阴性的ＳＳＡ抗体阳性血清，而且尚可鉴定出ＳＳＡ抗体的两种亚型（５２ＫＤ和６０ＫＤ）。检测了干燥综合症（ＳＳ）、系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）及类风湿性关节炎（ＲＡ）等三组病人血清，其中ＳＳ和ＳＬＥ两组在ＳＳＡ抗体亚型的分布上差异显著。抗５２ＫＤＳＳＡ抗体主要分布于ＳＳ组（Ｐ＜０．０５），而抗６０ＫＤＳＳＡ抗体主要见于ＳＬＥ组（Ｐ＜０．０５），ＲＢＣ－ＩＢＴ中，非特异或不明显色带极少见，而ＳＳＡ抗体带清晰、易辨。     

沈阳汉族人群HLA—DR,DQ,DP的DNA分型研究

使用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对９４名沈阳汉族健康人群进行了ＨＬＡ第Ⅱ类抗原等位基因的完全分型，共发现６６种等位基因，基中ＤＲＢ１２８种，ＤＲＢ３３种，ＤＲＢ５４种，ＤＱＡ１８种，ＤＱＢ１３种，ＤＰＢ１０种，分析了ＤＲ－ＤＱ连锁的五位点单倍型，共发现３８种，其中２１种是在白人为主的人群已发现过的。本研究提出了中国东北人群ＨＬＡ第Ⅱ类抗原等位基因的遗传基本情况，可用于疾病研究的对照和其他中国群资料的比较。     

乙肝病毒新型免疫原性多肽的设计,合成

在乙肝病毒高分辨率免疫识别的基础上，以Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白的优势Ｂ细胞表位Ｂ１、Ｂ２为基础，引入不同的Ｔｈ细胞表位Ｔｈ１、Ｔｈ２，结构参照ＭＡＰ设计，采用固相合成法，合成了ＭＡＰ１和ＭＡＰ２。产物经毛细管电泳分析和氨基酸组分鉴定。本研究为不同表位的重新组合构建新型多肽抗原及疫苗提供了线索。     

乙型肝炎患者自身混合淋巴细胞反应的探讨

本文建立了细胞自身免疫识别和相互作用的体外模型－自身混合淋巴细胞反应（ＡＭＬＲ）的实验方法，并对１０２例ＨＢＶ感染者非Ｔ－Ｔ细胞间ＡＭＬＲ进行了研究。结果表明，不同临床类型的乙肝患者ＡＭＬＲ均有不同程度的缺陷，且ＡＭＬＲ缺陷与血清ＨＢＶ复制也存在相关性。ＡＭＬＲ缺陷与刺激细胞相关与反应性Ｔ细胞无关；在刺激细胞对ＡＭＬＲ的诱导中，ＤＲ抗原起主要作用，ＤＱ抗原也有一定的作用；乙型肝炎患者刺激细胞表面Ｄ     

Epstein-Barr病毒壳抗原的纯化及其在检查血清抗体中的应用

为了建立纯化Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒壳抗原（ＥＢＶ－ＶＣＡ）的方法，用于酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测人血清中的相关抗体，我们用重组昆虫病毒在感染的ｓｆ９细胞中表达ＥＢＶ－ＶＣＡ。感染的细胞经裂解后，层析纯化表达产物。用纯化的ＶＣＡ作为抗原包被ＥＬＩＳＡ板或硝基纤维膜，检查血清中ＶＣＡ／ＩｇＡ和ＶＣＡ／ＩｇＧ抗体，为ＥＢＶ感染的检测和ＮＰＣ的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。     

过敏性哮喘病人备解素因子B的遗传多态性

对６２名已知ＨＬＡ型别的无血缘关系的过敏性哮喘（ＡＡ）患者及４９６名健康人员的ＥＤＴＡ抗凝血浆用琼脂糖高压电泳及免疫固定的方法进行Ｂｆ分型。ＡＡ患者组中，ＢｆＳＳ、ＢｆＳＦ、ＢｆＳＳ０．７、ＢｆＦＦ、ＢｆＦＳ０．７表型分布频率与正常对照组比较均无统计学意义上的差别。提示Ｂ因子本身与ＡＡ发病无直接关联。但把Ｂｆ抗原与ＤＲ、ＤＱ抗原结合起来分析则发现ＡＡ病人中有ＤＲ７、ＤＱ２、ＢｆＳＦ这一表型的频率远远高于正常对照组，ＲＲ值高达２５．７，（ｘ２＝１１．２０，Ｐ＜０．０１）。而ＤＲ７、ＤＱ２、ＢｆＳＦ表型频率则低于正常对照组，ＲＲ值为０．０６（ｘ２＜＝７．２６，Ｐ＜０．０５）这一结果提示编码ＤＲ７、ＤＱ２和ＢｆＳＦ的基因不论以反式或顺式同时存在在染色体上时就大大增强了个体对ＡＡ的易感程度。     

抗核抗体启动原新观点的学术意义

新近 ,我们根据本室近十年的研究结果 ,提出了活化淋巴细胞核抗原量和性质的改变是诱导抗核抗体生成的启动原的新观点 ,其主要依据是 :①ＳＬＥ患者外周血Ｂ细胞、Ｔ细胞和单核细胞已被活化[1,2 ] ;②空肠弯曲菌 (ＣＪ Ｓ131)活化的Ｔ细胞接种 (ＴＣＶ)不仅不能预防和治疗由ＣＪ Ｓ131所引起的ＳＬＥ样反应 ,反而可引起抗核抗体 (ＡＮＡ)生成[3 ] ;③不同原因活化的Ｔ细胞、Ｂ细胞和ＬＡＫ细胞均能诱导ＡＮＡ生成[4] ;④活化淋巴细胞核、染色质以及ｄｓＤＮＡ和组蛋白均具有免疫原性[5 7] ;⑤活化淋巴细胞的核抗原如ＳｍＢ Ｂ’表达明显增高…