慢性氟中毒作用下小鼠切牙成釉细胞的改变

目的 通过观察慢性氟中毒作用下小鼠切牙成釉细胞形态学变化,探讨氟斑牙形成机制。方法培养制作小鼠氟斑牙动物模型,在不同时期肉眼观察各时期成活小鼠切牙颜色及釉质表面变化;45d后处死动物,HE染色,光镜观察小鼠切牙成釉细胞各个时期的细胞形态学变化。结果 随着小鼠日常饮用水中氟化钠浓度的增加和时间的延长,小鼠切牙氟斑牙形态学改变逐渐加重;小鼠切牙成釉细胞扭曲变形,正常的高柱状形态丧失,胞内空泡,大小不等的黑色颗粒,托姆斯突被异位物质压迫等细胞形态学改变逐渐加重。结论 氟对小鼠切牙的毒性效应在其发育初始阶段即已产生影响,并与时间和剂量有密切关系,从小鼠切牙发育初始阶段研究氟斑牙的致病机制可能会有所启示。     

硒对氟致小鼠成釉细胞DNA损伤的作用研究

目的:探讨硒对氟致小鼠成釉细胞DNA损伤的拮抗作用。方法:小鼠成釉细胞未经氟化钠处理为对照组;以氟化钠浓度分别为0.25,0.50,1.00,2.00,4.00mmol/L处理作为单独染氟组;以2.50,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3为单独染硒组;以2.50,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3+0.25,0.50,1.00,2.00,4.00mmol/L氟化钠为联合作用组。细胞作用24h后,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测DNA单链断裂情况。结果:与对照组相比,单独染硒组小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值显著性升高(P<0.05),而单独染硒组以上指标均明显下降(P<0.05)。2.50,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3+氟化钠联合作用小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值明显低于对照组和相同剂量单独染氟组(P<0.05),且高于相应剂量的单独染硒组(P<0.05)。与2.50μmol/L Na2SeO3+氟化钠联合染毒组比较,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3+各剂量氟化钠联合作用组Olive尾矩均升高(P<0.05)。结论:过量摄入氟化物可导致小鼠成釉细胞DNA损伤,而适量的硒对氟致DNA损伤有一定的拮抗作用,且实验浓度为2.50μmol/L时其拮抗效果较好。     

氟化物作用下小鼠切牙成釉细胞中胞内转导信号Smad4分布与表达的变化

目的 :观察不同程度的氟中毒对小鼠切牙成釉器中 Smad4表达、分布的影响 ,探讨氟斑牙的形成细胞内机制。方法 :分别用饮水加 5 0 mg/ L Na F、1 0 0 mg/ L Na F建立小鼠慢性氟中毒模型 ,SABC免疫组化法检测小鼠切牙成釉器细胞内 Smad4的分布与表达。结果 :在分泌前期和分泌期 ,两实验组切牙成釉细胞中 Smad4的表达均明显低于对照组。结论 :氟化物可能通过抑制对成釉细胞中 Smad4的表达来干扰其正常分化和行使功能     

氟对小鼠成釉细胞Nrf2表达及核浆分布的影响

目的:探讨氟对小鼠成釉细胞Nrf2基因表达、蛋白质生成及蛋白核浆分布的影响。方法:采用不同浓度NaF(0. 25,0. 50,1. 00,2. 00,4. 00 mmol/L)分别作用成釉细胞24 h;同时采用叔丁基对苯二酚(tBHQ,50 mmol/L)预处理成釉细胞12 h后再采用不同浓度NaF(0. 25,0. 50,1. 00,2. 00,4. 00 mmol/L)作用24 h。用RT-PCR和Western Blot检测细胞Nrf2 mRNA和蛋白表达水平以及蛋白核浆分布情况。结果:与对照组比较,单独染氟组小鼠成釉细胞Nrf2 mRNA表达逐渐升高,其中1. 00 mmol/L和4. 00 mmol/L单染氟组Nrf2 mRNA表达显著升高(P<0. 05)。大部分单染氟组Nrf2核蛋白和浆蛋白表达上调,其中1. 00 mmol/L和2. 00 mmol/L单染氟组Nrf2核蛋白上调明显(P<0. 05),0. 25 mmol/L和2. 00 mmol/L的单染氟组Nrf2浆蛋白表达显著升高(P<0. 05)。tBHQ预处理后,与同剂量单独染氟组比较,除1. 00 mmol/L剂量,其他组Nrf2 mRNA相对表达量均显著升高(P<0. 05)。除4. 00 mmol/L剂量,各剂量组Nrf2核蛋白及浆蛋白的表达量均显著增多(P<0. 05)。在0. 25,1. 00,2. 00 mmol/L的剂量条件下,tBHQ处理组核浆比值与tBHQ对照组相比明显上升(P<0. 05)。结论:氟在一定的剂量条件下,可激活小鼠成釉细胞Nrf2信号因子,上调其基因及蛋白质表达,促进蛋白核转位。     

慢性氟中毒大鼠心肌的超微结构

报告了给氟剂量和时间均不同的大鼠心肌超微结构的变化,其改变的程度与给氟的剂量和时间呈正相关。心肌细胞中的细胞核、线粒体、肌丝、肌质网等均有改变,其中以线粒体的变化最为显著。     

慢性氟中毒对小鼠切牙胚内釉上皮TGF-betal表达的影响

目的：观察慢性氟中毒对小鼠切牙胚内釉上皮表达TGF-betal的影响，探讨TGF-betal在氟牙症发生机制中的作用。方法：给小鼠分别喂以含0、50、100ppmNaF的饮水，6周后免疫组化观察结果。结果：图像分析显示加氟组TGF-betal的表达水平低于空白组。结论：氟可能通过抑制TGF-betal的表达干扰内釉上皮的分化和基质分泌，导致氟牙症的发生。     

成釉细胞纤维肉瘤间叶细胞的电镜和免疫组化研究

为探讨成釉细胞纤维肉瘤（ Ａ Ｆ Ｓ）间叶细胞的本质及特征, 作者采用免疫组化和电镜技术,对３例 Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞进行了研究,并与６例成釉细胞纤维瘤进行比较。结果显示： Ａ Ｆ Ｓ的间叶细胞主要由成纤维细胞构成,此外尚有少许未分化间叶细胞和组织细胞, 偶见肌纤维母细胞。成纤维细胞仅表现 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 阳性。肌纤维母细胞呈 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ, Ｈ Ｈ Ｆ３５及 α Ｓ Ｍ Ａ 阳性。组织细胞 Ｐ Ｇ Ｍ１ 和ｋｐ１标记均阳性, 可能是炎症或免疫反应的产物。与成釉细胞纤维瘤比较, Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞具备较高的 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 阳性标记率, 提示 Ａ Ｆ Ｓ的增生活性较高。     

高氟对人成釉细胞的凋亡作用及相关基因表达的影响

目的观察高氟区和非高氟区人牙胚成釉细胞形态变化及凋亡相关基因bc l-2及bax的表达。方法经知情同意在高氟区及非高氟区分别取引产胎儿牙胚设为试验组与对照组,组织学观察,免疫组化技术检测成釉细胞中bc l-2及bax的表达,测定母体尿氟。结果试验组母体尿氟含量高于正常范围(P<0.01),成釉细胞排列不规则,高度变矮,少量细胞发生扭曲,并在细胞质内有空泡产生,TUNEL检测显示有较多凋亡细胞,与对照组相比bc l-2表达减弱,bax表达增强。结论高氟导致人牙胚成釉细胞损伤及凋亡。高氟对成釉细胞的凋亡作用可能是通过调节Bc l-2和Bax表达机制诱导细胞凋亡发生。     

氟斑牙形成的分子机制研究进展

氟中毒（fluorosis）是由于通过饮水、食物和空气等途径长期摄入过量氟,导致人体中氟蓄积,从而引起以氟斑牙、氟骨症为主要特征的一种慢性全身性疾病。     

高脂饮食对小鼠睾丸超微结构的影响

目的探讨高脂饮食对Apo E基因敲除小鼠睾丸超微结构的影响。方法将12只C57BL/6J雄性小鼠分为对照组和实验组:对照组为野生型小鼠,给予普通饮食;实验组为Apo E基因敲除小鼠,给予高脂饮食。饲养12周后,取睾丸组织制片,应用透射电镜观察其超微结构变化。结果与对照组比较,实验组超微结构变化主要表现为:①生精细胞出现退行性改变:线粒体肿胀空泡变性,粗面内质网扩张,核糖体脱颗粒,胞内出现电子密度较高的异常结构;②支持细胞线粒体肿胀空泡化,核膜外侧出现致密沉淀物,胞内出现较大空泡;③生精小管基膜厚薄不均,成波浪式皱褶;④睾丸间质细胞内线粒体和脂滴明显减少,线粒体呈空泡状,粗面内质网扩张;⑤毛细血管内皮细胞内线粒体空泡变性,粗面内质网上核糖体脱颗粒。结论高脂饮食可导致小鼠睾丸超微结构发生病理学改变,可能对小鼠睾丸功能有一定影响。     

硒对氟斑牙发生的拮抗作用及其对Beclin1表达的影响

目的 研究硒对小鼠氟斑牙发生的拮抗作用,并检测其对自噬相关基因Beclin1表达的影响。方法 将36只2月龄费城癌症研究所（institute of cancer research, ICR）雄鼠,随机分为3组,每组12只,建立饮水型氟斑牙模型,用亚硒酸钠（Na2SeO3）进行干预,具体分组为： 对照组（ddH2O）、氟化钠组（200mg/L NaF）、硒组（2mg/L Na2SeO3+200mg/L NaF）,喂养8周后,观察氟斑牙发生情况,记录其长度并计算小鼠下颌切牙增长率;分离下颌骨后,进行micro-CT扫描,测量小鼠切牙唇侧硬组织厚度;H-E染色观察成釉细胞的变化,免疫组化方法检测Beclin1的表达。结果 氟化钠组氟斑牙检出率为100%,表现为小鼠切牙白垩色改变;硒组未发现明显氟斑牙症状,形态与色泽介于正常与极轻度之间;micro-CT结果显示,氟化钠组切牙唇侧硬组织厚度比对照组薄,硒组介于两者之间(P<0.01);H-E 结果显示,氟化钠组成釉细胞排列紊乱,极性消失;而对照组与硒拮抗组成釉细胞呈栅栏状,排列整齐规则;免疫组化结果显示,3组中成釉细胞从分泌期到成熟期Beclin1的阳性表达均呈逐渐增强的表达趋势,且Beclin1在氟化钠组表达明显强于正常组,硒组介于两者之间。结论 2mg/L硒离子浓度对氟斑牙的发生有一定拮抗作用;其作用机制可能是通过抑制成釉细胞自噬的发生,进而减轻过量氟对小鼠切牙毒性影响。     

慢性氟中毒对大鼠硬组织氟含量的影响

目的研究慢性氟中毒Wistar大鼠不同组织和性别氟含量的变化,探讨釉质与牙本质氟含量之间的关系。方法选择20只Wistar大鼠,按性别分雌雄各两组。饮氟组分为雌雄各一亚组,饮用含100 mg/L氟离子的氟化钠双蒸水;余单纯饮用双蒸水组为对照组,7周后处死。氟离子选择电极法检测各组氟含量的变化。结果饮氟组骨氟及牙氟含量均高于对照组（P〈0.05）;不同性别间氟含量差异无统计学意义（P〉0.05）;氟牙症牙本质氟含量与釉质氟含量差异有统计学意义（P〈0.05）。结论氟对硬组织具有特殊亲和力,氟对牙本质亲和力高于釉质;相同氟暴露情况下,性别对大鼠氟牙症的氟含量无明显影响。     

食物烹饪后氟含量变化的研究

模拟我国日常烹饪主食的方法,对食物烹饪前后氟含量的变化进行了测定。结果显示:水沸时氟散失量很少,水氟浓度随煮沸时间延长而增加;水煮食物其氟含量高于生食但其值不等于水氟加粮氟,各种粥较烹饪前氟含量增加:大米为60%～204%,玉米糁为42%～186%,小米为79%～174%;小麦面为80%～120%,蒸馒头氟含量增24%～49%,焖蒸大米氟增50%～240%,捞蒸可使米氟下降,煤火烤烧饼其表层氟增加84%～362%,而饼心为生面氟的97%～131%,黄豆加工成豆腐氟增加量为2 mg/kg。本结果为准确计算总摄氟量中的食物氟,指导高氟区群众合理烹调,减少摄氟量提供了依据。     

地方性氟中毒病区与非病区8-12岁儿童氟斑牙及与血清化学元素的关系

目的了解8-12岁儿童氟斑牙患病情况,探讨化学元素与氟斑牙的关系。方法采用现况调查的方法对104例8-12岁儿童进行氟斑牙调查,了解儿童氟斑牙患病情况,依据Dean法对儿童氟斑牙进行诊断和分度,应用IRIS IntrepidⅡXSP ICP光谱仪测定血清钙(Ca)、铜(Cu)、铁(Fe)、镁(Mg)、磷(P)、锌(Zn)的含量。结果地方性氟中毒重病区、中病区、对照区8-12岁儿童氟斑牙检出率分别为93.0%,81.5%和11.8%。血清Ca、Cu、Fe、Mg、P、Zn在该三组儿童体内的分布不同(FCa=12.150,P<001;FCu=3.326,P<0.05;FFe=11.893,P<001;FMg=13.053,P<001;FP=3.131,P<0.05;FZn=28.019,P<001)。钙含量中病区低于对照区(P<0.001);铁含量中病区高于对照区(P<0.001);镁含量重病区、中病区均低于对照区(P<0.001);磷含量重病区低于对照区(P<0.05);锌含量重病区高于对照区,中病区低于对照区(P<0.05)。氟斑牙患者镁含量低于正常儿童(t=2.14,P<0.05),其余化学元素在两组的分布未见有统计学差异。结论饮水氟浓度越高,氟斑牙检出率越高。钙和镁对氟斑牙的发生有拮抗作用。     

江苏丰县地方性氟中毒现况研究

目的了解丰县地方性氟中毒现况及病因。方法采用整群随机抽样的方法,对1个城区和2个乡镇900余人进行调查。采用Dean法进行氟斑牙诊断。结果丰县氟斑牙患病率为77．0％,氟骨症患病率为23．7％。饮用浅层地下水的居民氟斑牙患病率为84．8％,饮用自来水的人群其患病率是74．2％,二者有差异（P〈0．01）。改水前后出生的人群氟斑牙患病率分别是78．0％、63．9％。2组人群氟斑牙患病率有差异（P〈0．01）。吸烟的人群氟斑牙患病率为85．4％,非吸烟人群患病率是73．8％,吸烟人群氟斑牙患病率高于非吸烟的人群（P〈0．01）。常食高钙食物者氟斑牙患病率是72．2％,不常食高钙食物者患病率为84．7％,两者比较有统计学意义（P〈0．01）。以柴为主要燃料的居民氟斑牙患病率（84．3％）高于其他人群（煤：74．2％;气：70．1％）。专科及以上文化程度人群氟中毒患病率（60．3％）最低,与其他人群相比有差异（文盲：84．3％;小学：87．3％;初中：74．0％;高中：71．6％）。地方性氟中毒患病率城市明显低于乡村。结论改水取得了一定效果,但丰县地方性氟中毒病情仍然较重,该地区地方性氟中毒不仅与饮用水有关,也与饮食结构、行为生活方式、文化程度、卫生服务等有关,防治工作需多方位进行。     

不同性别氟中毒大鼠模型的比较研究

目的构建雄性和雌性氟中毒大鼠动物模型,探讨氟中毒性别差异性。方法选择48只体重150 g左右清洁级SD大鼠,分为对照组和染氟组。模型组自由食用含氟饲料,饲料含氟量100 mg/kg。每三天动态观察大鼠日常情况、体重、氟斑牙的变化,分别于70 d雌性大鼠和110 d雄性大鼠全部出现氟斑牙时股动脉取血处死一批大鼠,采用氟离子选择电极法检测大鼠尿氟和骨氟含量。结果对照组雌雄大鼠实验全过程均未出现氟斑牙。染氟组雌鼠和雄鼠首次出现肉眼氟斑牙时间在染氟60 d和80 d左右,雄鼠首次出现氟斑牙比雌鼠晚约20 d。染氟30 d左右雌雄大鼠进入快速生长期,雌雄大鼠体重差异有显著性(P0.01)。随染氟时间延长,110 d染氟组雄鼠和雌鼠体重高于对照组。随染氟时间延长,雌雄大鼠尿氟和骨氟逐渐升高,染氟组明显高于对照组,差异有显著性(P0.01),尿氟和骨氟与染氟时间呈正相关。雄鼠尿氟和骨氟高于雌性,差异有显著性(P0.01),尿氟和骨氟受性别的影响。结论构建氟中毒雌雄大鼠动物模型的体重、出现氟斑牙时间、尿氟和骨氟水平存在性别差异。     

慢性氟中毒对小鼠切牙胚内釉上皮TGF-beta1表达的影响

目的 :观察慢性氟中毒对小鼠切牙胚内釉上皮表达 TGF- beta1的影响 ,探讨TGF- beta1在氟牙症发生机制中的作用。方法 :给小鼠分别喂以含 0、5 0、1 0 0 ppm Na F的饮水 ,6周后免疫组化观察结果。结果 :图像分析显示加氟组 TGF- beta1的表达水平低于空白组。结论 :氟可能通过抑制 TGF- beta1的表达干扰内釉上皮的分化和基质分泌 ,导致氟牙症的发生。