Bcl-2蛋白表达与人类不同年龄段椎间盘组织细胞凋亡的相关性研究

目的:探讨凋亡相关蛋白Bcl-2在人类不同年龄段椎间盘组织细胞凋亡的作用.方法:采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)、免疫组织化学方法以及HE染色法对人类...     

非小细胞肺癌Bcl-2及Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

①目的探讨非小细胞肺癌Bcl-2、Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系。②方法采用SABC免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织Bcl-2、Bax蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平;用TUNEL法检测细胞凋亡情况。③结果肺癌组织Bcl-2蛋白的表达显著高于癌旁肺组织（x^2=4．74,P〈0．05）;肺癌组织Bax蛋白的表达显著低于癌旁肺组织（x^2=5．65,P〈0．05）;肺癌组织中细胞凋亡指数（AI）和增殖指数（MI）均明显高于癌旁正常肺组织（t=8．28、9．62,P〈0．01）;Bcl-2蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显低于表达阴性组（t=2．41,P〈0．05）;Bax蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显高于表达阴性组（t=2．62,P〈0．05）;Bcl-2、Bax蛋白的表达均与MI无关（t=0．70、0．22,P〉0．05）。④结论Bcl-2蛋白具有抑制肺癌细胞凋亡作用,而Bax蛋白具有促进肺癌细胞凋亡作用,因肺癌组织存在Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,导致细胞增殖和凋亡失衡,在肺癌发生、发展过程中可能具有重要作用。     

人胎盘滋养细胞凋亡与其调控蛋白Bcl-2及Bax的研究

目的 探讨人妊娠各期胎盘滋养细胞凋亡与其调控蛋白Bcl-2及Bax之间的关系.方法 采用TUNEL法检测人妊娠各期胎盘滋养细胞的凋亡情况,采用免疫组织化学方法检测人妊娠各期胎盘滋养细胞层Bcl-2,Bax的表达情况.结果 细胞凋亡在早、中、足月和过期妊娠4组胎盘滋养层中表达随孕期的增长逐渐增多,差异有显著性(P＜0.01).Bcl-2,Bax在4组胎盘滋养层的表达及Bax/Bcl-2值均随孕期的增长逐渐增强(P＜0.05).结论 在人的整个妊娠时期中,胎盘滋养细胞凋亡与Bax/Bcl-2的比值正相关.此外,Bcl-2和Bax虽单独具有调控细胞凋亡的功能,但其相互间的比例对细胞凋亡的影响更为重要.     

30例自然流产患者绒毛滋养细胞凋亡及调控蛋白Bcl-2、Bax的表达研究

目的通过观察绒毛合体滋养细胞凋亡以及凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在自然流产患者中的表达,探讨细胞凋亡在自然流产的发病机制。方法采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学法对30例自然流产患者绒毛合体滋养细胞中调亡指数及凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax阳性表达率进行检测,并以30例人工终止早孕的健康妇女做对照(对照组),所有数据采用SPSS16.0 进行统计学分析。结果自然流产组绒毛滋养细胞中凋亡指数为(32.45±5.87)%,明显高于对照组的(19.38±4.16)%,差异有统计学意义(P<0.01)。Bax和Bcl-2在两组合体滋养细胞中的阳性率比较显示,自然流产组中Bax阳性率增高,Bcl-2阳性率下降,Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论绒毛合体滋养细胞凋亡明显增加、Bax阳性率增高和Bcl-2阳性率下降在自然流产中产生重要作用。     

龙葵碱调控 Bcl-2 与 Bax 蛋白表达及 caspase-3 活性诱导HepG2 细胞凋亡的研究

目的 探讨龙葵碱诱导 HepG2 细胞凋亡的作用机制。方法 透射电镜观察凋亡细胞形态变化,原位缺口末端检测法 (TUNEL 法) 检测 DNA 断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,间接免疫荧光法激光共聚焦扫描显微术检测 Bcl-2 与 Bax 蛋白表达,比色法检测 caspase-3 活性的变化。结果 在透射电镜下观察,龙葵碱组细胞出现细胞固缩,染色质致密,核凝聚固缩,染色体断裂形成核碎块,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态。TUNEL 法发现龙葵碱高、中、低剂量组 HepG2 细胞均有绿色荧光,阴性对照组无荧光。流式细胞术分析表明 0.4、2、10 μmol/L 龙葵碱作用 HepG2 细胞 24 h 凋亡率分别为 4.0%、8.5%、20.1%。同时,龙葵碱升高 caspase-3 活性,下调 Bcl-2 蛋白表达,上调 Bax 蛋白表达。结论 龙葵碱通过降低 Bcl-2/Bax 的值,激活 caspase-3 酶活性诱导 HepG2 细胞凋亡。     

电磁辐射对Raji细胞损伤效应及其Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 比对性研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)、S波段高功率微波(S-band high power microwave,S-HPM)和X波段高功率微波(X-band high power microwave,X-HPM)三种不同波段电磁辐射,对Raji细胞的损伤效应和对其Pax和Bcl...     

IP_6诱导肝癌细胞HepG2凋亡及其对Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的研究肌醇六磷酸（IP6）对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用及其对相关蛋白表达的影响。方法将不同浓度IP6作用于体外培养的HepG2细胞,应用Hoechst 33258染色在荧光显微镜下观察HepG2细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测IP6对HepG2细胞凋亡率的影响;免疫细胞化学法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化。结果荧光显微镜下可观察到细胞凋亡的形态学改变;IP6作用后的HepG2细胞凋亡率升高且与药物剂量呈依赖关系（F=342.15,q=2.98～28.53,P〈0.05）;与0 mmol/L IP6组相比,1.0、2.0、3.0 mmol/L IP6组均有效抑制Bcl-2的表达（F=110.21,q=5.88～16.92,P〈0.05）,上调Bax的表达（F=26.00,q=2.97～8.19,P〈0.05）。结论 IP6可能通过调控Bcl-2及Bax蛋白的表达而诱导HepG2细胞的凋亡。     

凋亡相关基因Bcl-2和Bax在宫颈病变的变化

目的:探讨Bcl 2和Bax在宫颈癌发生发展中的变化。方法:采用SP免疫组织化学法,分别对36例宫颈上皮内瘤变CINⅠ、40例CINⅡ、48例CINⅢ及56例浸润性宫颈鳞癌(ISCC)组织中的Bcl 2和Bax蛋白进行了检测,并以40例正常宫颈鳞状上皮作对照。结果:Bcl 2蛋白在正常宫颈鳞状上皮,CINⅠ, CINⅡ,CINⅡ,和宫颈癌组织中表达率分别为15. 00 %, 22. 22%, 30. 00%, 58. 33%和53. 57 %。表达在正常与CIN和宫颈癌之间差异有显著性P<0. 05,且和组织分化程度有关。Bax在它们之间表达率分别为17. 5%, 83. 33 %,70. 00%, 52. 08%和53. 57 %, 表达在正常与CIN和宫颈癌之间差异有显著性(P<0. 01)。结论:宫颈鳞状上皮非典型性增生和鳞状上皮癌中均有Bcl 2Bax过表达,表明它们在鳞状上皮癌发生,发展中起作用,和宫颈癌早期发生有关,在ISCC阶段其调控作用可能已经紊乱。     

肺鳞癌中Bcl-2、Bax蛋白的表达与细胞凋亡的临床意义

目的检测Bcl-2、Bax蛋白及细胞凋亡在鳞癌中的表达,探讨其在鳞癌的发生、发展机制方面的作用。方法随机选择50例鳞癌手术标本及30例癌旁正常组织,应用免疫组化pv-9000法检测Bcl-2、Bax的表达,TUNEL法检测细胞凋亡指数（AI）。结果鳞癌中Bcl-2、Bax、AI的表达均高于正常组织（P〈0.05）;Bcl-2、Bax、AI在不同分化程度、TNM分期、淋巴结是否转移组中差异有统计学意义（P〈0.05）;AI在鳞癌不同直径组差异有统计学意义（P〈0.05）;鳞癌中Bcl-2积分与AI成负相关关系（r=-0.73,P〈0.05）,Bax积分与AI成正相关关系（r=0.78,P〈0.05）。结论 Bcl-2可能参与了肺癌初期的发生、发展并抑制了细胞凋亡;Bax与进展中肺癌细胞凋亡水平的升高有关。     

幽门螺杆菌感染的慢性胃炎Bcl-2、Bax蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的：研究Bcl-2、Bax蛋白在幽门螺杆菌（Hp)感染的慢性胃炎中的表达,探讨Hp感染与细胞凋亡的关系。方法：通过内镜活检、组织病理学检查、尿素酶试验及Warthin-Starry银染色,诊断慢性浅表性胃炎（CSG）117例。采用免疫组化法同步检测胃粘膜Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：Bcl-2在Hp阳性表达的阳性率为24．5％,与Hp阴性组比较无显著性差异（P＞0．05）;在Hp阳性轻、中、重度组的阳性率分别为20．0％、28．6％、23．5％,与Hp阴性各型CSG组亦无显著性差异（P＞0．05).Bax在Hp阳性组中表达的阳性率为81．1％,在Hp阳性轻、中、重度组的阳性率分别为80．1％、81．0％、82．4％,显著高于相同病变中Hp阴性组（P＜0．05）。在Hp感染的CSG中,Bcl-2与Bax呈反向表达。结论：Hp阳性CSG各组Bcl-2蛋白的低表达和Bax蛋白的高表达提示这两种蛋白参与了Hp感染胃粘膜上皮细胞凋亡的调控。     

TRAIL在正常椎间盘细胞中的分布及表达

目的了解肿瘤坏死因子超家族成员TRAIL在正常椎间盘不同部位中的表达及TRAIL/DR4诱导的细胞凋亡情况。方法将31个包括髓核、纤维环及软骨终板的正常椎间盘组织制成石蜡标本后切片,免疫组化方法检测TRAIL的表达,计算阳性细胞所占的百分比。结果在髓核、纤维环及软骨终板中存在TRAIL的表达,其中髓核中TRAIL表达高于纤维环及软骨终板,纤维环中表达最低,差异有显著性（F=23.51,q=3.190-9.526,P〈0.05）。结论TRAIL在正常椎间盘组织的不同部位存在着区域性分布,在正常椎间盘组织中可能存在着由TRAIL/DR4诱导的第3种凋亡途径。     

瘦素及其受体在椎间盘组织的表达及意义

目的探讨瘦素及其受体在椎间盘组织表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测正常椎间盘(21个)与退变椎间盘(39个)组织中瘦素及其受体的表达,用免疫细胞化学技术检测体外培养的纤维环细胞中瘦素及其受体的表达。结果退变椎间盘组织中瘦素及其受体的表达高于正常椎间盘组织,差异有显著性(t=3.223、5.553,P<0.05)。体外培养的纤维环细胞中可以检测到瘦素及其受体表达。结论椎间盘组织存在瘦素及其受体;瘦素可能在椎间盘退变中发挥作用。     

RCS大鼠感光细胞凋亡与Bcl-2蛋白的表达

目的 探讨遗传性视网膜色素变性中感光细胞凋亡及其可能的基因调控机制。方法 对RCS大鼠及对照SD大鼠的视网膜组织结构进行光镜观察、细胞凋亡及Bcl-2蛋白免疫组织化学检测。结果 RCS大鼠生后15d视网膜的感光细胞视杆层及外节增厚,视杆层的厚度在25d达到高峰。感光细胞的数目在25d时有所下降,到出生后60d,仅少许感光细胞存留。出生后25～40d,RCS大鼠视网膜可见外核层TUNEL染色阳性的感光细胞,阳性细胞数35d最多。30-40d内核层和节细胞层可见Bcl-2蛋白免疫组化阳性表达细胞,35d时内核层阳性表达细胞数最多。外核层一直未见明显Bcl-2蛋白阳性表达细胞。结论 RCS大鼠视网膜变性过程中。感光细胞发生了凋亡。Bcl-2原癌基因可能不参与感光细胞的保护机制。     

抗癌活性肽对荷人胃癌裸鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究抗癌活性肽(anti-cancer bioactive peptide,ACBP)对荷人胃癌裸鼠的生长和抑癌作用,探讨其诱导细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax的表达及其临床意义.方法:采用透射电镜、流式细胞术(flow cytometry,FCM)和琼脂糖凝胶电泳方法,观察和检测肿瘤细胞的凋亡及其相关基因Bcl-2、Bax的表达.在裸鼠皮下建立人胃癌模型,将30只裸鼠随机分为对照组、ACBP组和CTX组.结果:对照组、ACBP组、CTX组的肿瘤重分剐为0.52±0.12g、0.23±0.03g和0.12±0.01g,与对照组相比,后两组体重抑瘤率分别为48.08%和76.92%,ACBP组、CTX组的胃癌生长受到明显抑制,差异有显著性(P<0.01);凋亡指数(apoptotic index,AI)分别为4.05%、13.75%和7.09%,以ACBP组极为显著(P<0.01),且ACBP组裸鼠的体重、饮食及活动状态均高于CTX组和对照组.Bcl-2在对照组表达最高,ACBP组最低;Bax正好相反,后者最高,前者最低.琼脂糖凝胶电泳在ACBP组和CTX组出现明显的DNA"梯形"条带;流式细胞仪直方图显示ACBP组和CTX组呈现明显的亚二倍凋亡峰;透射电镜可见典型的凋亡小体,对照组未见有明显的凋亡小体存在.结论:ACBP对胃癌有明显的抑癌作用和诱导胃癌细胞凋亡的功能,能显著提高荷瘤体的生存质量.     

人退变椎间盘细胞培养及细胞凋亡的研究

①目的通过对退变椎间盘细胞进行培养及细胞凋亡的研究,进一步了解椎间盘退变的细胞因素。②方法将12例腰椎间盘突出症病人术中切取的髓核组织分别进行培养,并对不同培养时期的髓核细胞进行细胞凋亡的研究。③结果退变椎间盘细胞可在体外进行培养并传代,随着年龄增长,细胞的生长周期延长,活力降低,细胞凋亡加快。④结论随年龄增长,椎间盘细胞退变逐渐加重。     

凋亡相关基因Bax,Bcl-2在大鼠急性胰腺炎中表达的研究

目的 :探讨凋亡调控基因Bax ,Bcl- 2在胰腺组织中的表达情况与急性胰腺炎严重程度的关系。方法 ;制作大鼠急性重型胰腺炎和急性轻型胰腺炎模型。制模后 3h取材 ,查血清胰淀粉酶及应免疫组化SABC法检测胰腺组织中基因Bax ,Bcl- 2蛋白表达。结果 :急性胰腺炎时 ,基因Bax蛋白表达在胰腺腺泡细胞胞浆 ,急性轻型胰腺炎组和急性重型胰腺炎组均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且急性轻型胰腺炎组高于急性重型胰腺炎组 (P <0 .0 5 ) ;Bcl- 2蛋白表达在胰腺导管细胞胞浆 ,对照组Bcl- 2蛋白表达弱 ,急性轻型胰腺炎组和急性重型胰腺炎组表达明显增强 ,急性重型胰腺炎组高于急性轻型胰腺炎组 ,统计学处理急性轻型胰腺炎组和急性重型胰腺炎组之间无显著性差异 ,但急性轻型胰腺炎组、急性重型胰腺炎组与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :Bax基因在大鼠的急性胰腺炎过程中可能参与诱导胰腺腺泡细胞凋亡 ,减轻胰腺炎症反应程度 ;而Bcl- 2基因可能参与防止导管细胞凋亡而促进其增生并且形成导管管状复合体     

C反应蛋白调节bcl-2/bax蛋白表达诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的观察不同浓度C反应蛋白对体外培养的人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,hUVEC）凋亡的影响及其分子机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用吖啶橙/溴化已啶荧光染色观察凋亡细胞形态。四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）分别测定与不同浓度C反应蛋白（5mg/L、10mg/L、20mg/L）作用12、24、48h后hUVEC的增殖率,流式细胞仪和Western blotting分别检测与不同浓度C反应蛋白作用24h后的细胞早期凋亡率及bcl-2/bax蛋白表达水平。结果随着C反应蛋白浓度的增加,hUVEC的MTT值逐渐降低,而细胞早期凋亡率则逐渐升高。与对照组相比,24h后高C反应蛋白组MTT值明显下降（P〈0.05）,而细胞早期凋亡率显著增加（P〈0.01）。内皮细胞在高C反应蛋白作用24h后,bcl-2蛋白表达减弱,bax蛋白表达增强,它们的表达量与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 C反应蛋白可能通过调节bcl-2/bax蛋白表达诱导人内皮细胞凋亡。     

小鼠阴道疱疹感染与Fas蛋白粘膜上皮细胞中的表达

目的　探讨HSV 2小鼠阴道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,以及Fas蛋白的表达与细胞凋亡的相关关系,有助于阐明HSV 2感染后病毒与细胞相互作用的分子机理,为HSV 2病毒 感染疾病的诊断、治疗提供一定的实验和理论依据。方法将HSV 2接种于小鼠阴道,建立HSV 2阴道粘膜面直接感染动物模型,分不同天数处死,取其阴道固定于10%福尔马林。用HE染色、TUNEL染色研究HSV 2小鼠阴 道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,用免疫组化法研究Fas蛋白分子在阴道上皮细胞中 的表达水平,分析与细胞凋亡的相关关系。结果小鼠阴道HSV 2感染后的粘膜上皮细胞病理学改变为:22份标本 中同时伴有细胞坏死、炎症浸润及凋亡细胞阳性表达,标本中可达粘膜上皮的1/4区域。这些形态改变从实验感 染的第1天至第11天均可见到。小鼠阴道感染HSV 2后,Fas蛋白从感染第3天起可见到表达(22/24)。凋亡细 胞指数与Fas阳性细胞指数呈正相关(r=0.9660,P<0.05)。结论HSV 2直接感染小鼠阴道后可同时引起炎症、 细胞溶解性坏死及诱导阴道上皮细胞凋亡。HSV 2感染小鼠阴道后阴道上皮细胞Fas分子呈高表达,与凋亡细胞 指数呈正相关,提示Fas对HSV 2诱导的粘膜细胞凋亡起上调作用;可进一步研究作为阴?