慢性缺氧抑制肺动脉平滑肌细胞钾通道活性

目的研究慢性缺氧性肺动脉高压发生机制中钾通道活性改变的作用，及其开放剂卡吗克林（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）对钾通道活性的调控作用。方法２０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为对照组１０只和缺氧组１０只，缺氧组大鼠缺氧３周，每天缺氧８小时；运用急性酶分离法对Ｗｉｓｔａｔ大鼠肺动脉平滑肌细胞进行了分离；应用膜片钳小片膜单通道技术，分别对正常和慢性缺氧３周大鼠的肺动脉平滑肌细胞的钾离子通道进行了测定；记录并比较了两组大鼠肺动脉平滑肌细胞钙、ＡＴＰ激活性钾通道（Ｋ＋ＣａＡＴＰ）和延迟整流性钾通道的活性，并观察了ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ对缺氧组大鼠钾通道的影响。结果慢性缺氧组大鼠肺动脉平滑肌细胞钙、ＡＴＰ激活性钾通道（Ｋ＋ＣａＡＴＰ）和延迟整流性钾通道的活性均比正常组低，ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可使慢性缺氧组Ｋ＋ＣａＡＴＰ的活性明显增高（Ｐ均＜０．０１）。结论慢性缺氧可明显抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道活性，这可能在慢性缺氧性肺动脉高压的发病机制中发挥重要的作用，钾通道开放剂ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可作为降低缺氧性肺动脉高压的有效药物。     

细胞膜超极化与脑血管调节

细胞膜超极化是血管，尤其是脑血管舒张调节的重要机制。文章就内皮细胞超极化因子及其作用机制作了介绍。在脑血管，ＡＴＰ敏感钾通道（ＫＡＴＰ）和钙激活钾通道（ＫＣａ）在脑血管调节方面起着重要作用。内源性诱导ＫＡＴＰ和ＫＣａ激活超极化机制与内皮源性因子的作用是相互联系的。在脑缺氧、低血压等病理状态时，其血管舒张机制与钾通道的激活所引起的超极化有关。     

低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道基因表达的研究

本研究拟通过观察钾通道基因表达的变化,阐明低氧性肺动脉高压(ＨＰＨ)肺血管重建的形成机制及其在ＨＰＨ发病中的作用。一、材料与方法1雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠20只,体重250～300ｇ。随机分为低氧组和对照组,每组10只。将低氧组大鼠置于有机玻璃舱内,以氮气调控舱内的氧浓度为(100±05)%。舱内ＣＯ2由钠石灰吸收,水蒸气由硅胶吸收,每日低氧8ｈ,连续3周。对照组置于同一实验室内。2腹腔内注射50ｍｇ/ｋｇ戊巴比妥钠麻醉。以插入导管法测定肺循环血流动力学,暴露右侧颈外静脉,插入硅胶管经右心房、右心室至肺动脉,导管另一端接压力传感器(ＴＰ2…     

钾通道活性降低促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

低氧性肺动脉高压 (ＨＰＨ)的病理基础是肺小动脉收缩反应增强和结构重建。研究发现 ,缺氧通过抑制电压依赖钾通道使肺动脉平滑肌细胞 (ＰＡＳＭＣｓ)收缩。ＰＡＳＭＣｓ增殖是ＨＰＨ血管重建的重要组成部分 ,目前还不清楚钾通道在其中所起的作用。我们的研究旨在明确钾通道活性降低对培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ增殖的作用。材料与方法　细胞培养 :采用酶消化法培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ,经免疫组化法鉴定细胞纯度为 98%。膜片钳试验 :各种钾通道阻断剂对ＰＡＳＭＣｓ钾电流 (ＩＫ)的影响采用标准膜片钳全细胞记录法[1] 进行。细胞增殖 :5～ 10代ＰＡ…     

急性缺氧抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞钙ATP钾通道

目的研究急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道活性的影响，以探讨钾通道活性改变在急性低氧性肺血管收缩（ＨＰＶ）反应中所起的作用。方法应用膜片钳单通道技术，在对称性高钾溶液中，于急性酶分离的大鼠单个肺动脉平滑肌细胞的内面向外式膜片（ｉｎｓｉｄｅｏｕｔｐａｔｃｈ）上，记录外向性钾通道电流，并用常氧和低氧的细胞浴液持续灌流肺动脉平滑肌细胞，以观察其对外向性钾通道电流的影响。结果在记录的外向性钾电流中，证实了一种电流为钙、ＡＴＰ激活性钾通道（Ｋ＋ＣａＡＴＰ）；用低氧的细胞浴液灌流肺动脉平滑肌细胞可明显抑制这种钙、ＡＴＰ激活性钾通道的活性（Ｐ＜０．０１）。而钾通道开放剂卡吗克啉（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）对低氧所抑制的肺动脉平滑肌细胞钙、ＡＴＰ激活性钾通道具有明显的激活作用（Ｐ＜０．０１）。结论急性低氧可通过对钙、ＡＴＰ激活性钾通道的抑制作用，使肺动脉平滑肌细胞膜发生去极化，肺动脉收缩而导致急性肺血管阻力增加，进而产生肺动脉高压。肺动脉平滑肌细胞钙、ＡＴＰ激活性钾通道活性的降低，可能在低氧性肺血管收缩反应中起着重要的作用。Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可作为拮抗低氧性肺血管收缩的有效药物之一。     

克罗吗啉对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压和血浆内皮素水平的影响

克罗吗啉对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压和血浆内皮素水平的影响程德云陈文彬肖欣荣内皮素（ＥＴ）和离子通道改变在低氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）的发病中可能起重要作用。为探讨ＥＴ和钾通道在ＨＰＨ发病中的相互作用，我们对ＨＰＨ大鼠采用三磷酸腺苷（ＡＴＰ）敏感性钾...     

ATP敏感性钾通道开放剂治疗脑缺血的前景

钾通道开放剂是近期开发的新型心血管类药物 ,也是医学、药学领域继钙拮抗剂后又一研究热点。ＡＴＰ敏感性钾通道 (ＡＴＰ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅＫ+ ｃｈａｎｎｅｌ,ＫＡＴＰ)开放剂是目前研究最多、应用最广的钾通道开放剂。从 80年代中期开始对其进行研究至今 ,已取得了显著进展。至今有 18个化合物进入临床实验阶段 ,10 0多个化合物在临床前研究阶段并评价出各自的药理学与实验治疗学特征。以血管平滑肌和胰腺 β细胞ＫＡＴＰ为靶标 ,开发出一系列激动剂和拮抗剂 ,已成功应用于抗高血压、抗心肌缺血和治疗非胰岛素依赖型糖尿病等[1] 。近年…     

复方红景天对大鼠慢性缺氧性膈肌损害保护作用的实验研究

为探讨慢性缺氧对膈肌肌力、膈肌肌电图 (ＥＭＧｄｉ)和超微结构的影响及复方红景天 (为青藏高原狭叶红景天佐以青海产的沙棘、枸杞组成 )对缺氧性膈肌损害的保护作用 ,对此我们进行了研究分析。材料与方法　Ｗｉｓｔａｒ大鼠 30只 ,雌雄各半 ,随机分为 3组 ,每组 10只。慢性缺氧组 (Ａ组 ) :放入常压缺氧箱内 (氧浓度为 0 10 0± 0 0 0 5 ) ,缺氧 8ｈ/ｄ ;慢性缺氧加复方红景天组 (Ｂ组 ) :缺氧方法同Ａ组 ,每日缺氧前灌服复方红景天溶液 1 0ｇ/ｋｇ ;对照组 (Ｃ组 ) :常氧条件下喂养。 3组动物 5周后用 3 %戊巴比妥钠注入腹腔麻醉 ,打开…     

脱氢表雄甾酮对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道的作用

目的　研究钾通道开放剂脱氢表雄甾酮 (DHEA)对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道 (KCa)的作用和缺氧性肺动脉高压的降压作用。方法　 50只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 ,10只 )和慢性缺氧组 (B组 ) ,B组又随机分为B1、B2 、B3 、B4 组 (每组各 10只 ) ,B组大鼠均以常压缺氧 3周建立大鼠慢性缺氧肺动脉高压模型。采用急性酶分离法分离得到大鼠肺动脉平滑肌细胞(SMCs)。应用膜片钳技术 ,在对称性高钾溶液中 ,于急性分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞的内面向外式膜片 (inside outpatch)上 ,分离出KCa电流。比较A组和B1组KCa电流活性 ;观察DHEA对B1组KCa通道电流的激活作用。应用右心插管技术 ,测定给药前后B2 、B3 、B4 组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)和平均体动脉压 (mSAP)等血流动力学指标。结果　B组大鼠肺动脉平滑肌细胞KCa活性比A组大鼠显著降低 (P <0 0 1)。DHEA可明显激活慢性缺氧所抑制的B1组大鼠肺动脉平滑肌细胞的KCa电流。给缺氧大鼠静脉注射DHEA可明显降低其mPAP(P <0 0 1) ,而对mSAP无明显作用 (P >0 0 5)。结论　缺氧对KCa通道的抑制作用在缺氧 3周大鼠缺氧性肺动脉高压发病中起着重要作用 ;DHEA可直接激活KCa活性而拮抗慢性缺氧对KCa的抑制作用 ;DHEA对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压可产     

心血管系统中ATP敏感性钾通道的研究进展

心血管系统中ＡＴＰ敏感性钾通道的研究进展第一军医大学附属南方医院何建新综述赖世忠审校ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴ，ｃｈａｎｎｅｌ）首先是在心肌细胞上发现的［１］，随后证实，ＫＡＴＰ通道也存在于骨骼肌细胞、平滑肌细胞、胰腺β细胞及大脑神经元的细胞膜上［２...     

三磷酸腺苷敏感性钾通道在参与各种心肌预处理中的作用研究进展

心肌预处理的保护机制比较复杂 ,与心肌三磷酸腺苷 (ＡＴＰ)敏感性钾通道 (ＫＡＴＰＣ)的开放有密切关系。本文总结有关ＫＡＴＰＣ在参与各种预处理中的作用研究进展。1　ＫＡＴＰＣ结构和特性哺乳动物心肌有两种ＫＡＴＰＣ :一种通常所指的是位于细胞膜上的ＫＡＴＰＣ(ｓａｒｃＫＡＴＰＣ) ,另一种分布在线粒体内膜上即ｍｉｔｏＫＡＴＰＣ。前者由 4种内向整流Ｋ+通道 (Ｋｉｒ)和 4种硫脲类受体 (ＳＵＲ)组成的异源八聚体。Ｋｉｒ家族中Ｋｉｒ 6 .1、Ｋｉｒ 6 .2形成ＫＡＴＰＣ的孔 ,并与ＳＵＲ1、2Ａ、2Ｂ结合形成有功能的ｓａｒｃＫ ＡＴ…     

N^ω——硝甘——L——精氨酸甲酯增强大鼠慢性缺氧性肺高压的研究

目的：建立大鼠慢性氧性肺动脉高压（ＣＨＰＨ）模型，通过注入Ｎ＾ω－－硝基－－Ｌ－－清氨酸甲酯（Ｌ－－ＮＡＭＥ）探讨内源性一氧化氮（ＮＯ）地ＣＨＰＨ的调节作用。方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠（ｎ＝３０）进行１周及２周缺氧，每时程缺氧大鼠按性别、年龄、体重配伍、分至对照组、缺氧组、缺氧＋Ｌ－ＮＡＭＥ组。缺氧采用常压氧舱法（Ｏ２１１％，ＣＯ２〈３％），缺氧前腹腔注射Ｌ－ＮＡＭＥ。在１周及２周缺结束时对肺动脉平均     

慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流的影响

目的:研究慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道(Kv)电流的影响。方法:雄性SD大鼠50只随机分为常氧对照组(10只)和慢性缺氧5d、10d、20d及30d组(各10只)。慢性缺氧组大鼠每天在低氧仓中予以缺氧8h,分别取缺氧5d、10d、20d及30d的大鼠进行实验。应用全细胞膜片钳技术记录肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流(IK)。结果:慢性缺氧显著减低大鼠肺动脉平滑肌细胞的IK峰值及Ⅰ~Ⅴ曲线漂移。慢性缺氧5d后肺动脉平滑肌细胞的IK密度及Ⅰ~Ⅴ曲线与常氧组均差异无统计学意义(P0.05),而慢性缺氧10d后肺动脉平滑肌细胞的IK密度及Ⅰ~Ⅴ曲线与常氧组均差异有统计学差异(均P0.05);随着缺氧时间延长,IK密度的峰值进一步降低。结论:慢性缺氧可降低肺动脉平滑肌细胞Kv通道电流密度。     

三磷酸腺苷敏感性钾通道在心肌缺血预适应中的作用

采用结扎家兔左冠状动脉左室支复制心肌缺血预适应（ＩＰ）模型，研究三磷酸腺苷敏感性钾（ＫＡＴＰ）通道在ＩＰ中的作用。结果表明：ＩＰ能缩小梗塞面积和恢复再灌注期心脏功能；活化ＫＡＴＰ通道显著加强ＩＰ的作用，尤以恢复心功能为著；阻滞ＫＡＴＰ通道则抑制ＩＰ的作用。提示ＫＡＴＰ通道活化与ＩＰ作用有关。     

ATP-依赖的钾通道介导长期饮酒的益处

长期小量饮酒通过活化腺苷受体的蛋白激酶Ｃ ,保护心肌少受缺血损伤。作者验证下述假说 :ＡＴＰ 依赖的钾通道(ＫＡＴＰ)介导这些益处。狗饲以酒精 (1.5ｇ/ｋｇ)或水 ,与干的食物混和 ,每日两次 ,共 12周。安置测量血液动力学的仪器后 ,给予生理盐水 (溶媒 )或ｇｌｙｂｕｒｉｄｅ(0 .1ｍｇ/ｋｇ静脉注射 ) ,然后结扎冠状动脉 6 0ｍｉｎ ,随后再灌注 3ｈ。事先经酒精处理的狗与对照狗比较 ,梗死面积 (ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｃｈｏｒｉｄｅ染色 )明显减小至左室缺血面积的 14%± 1% (2 5 %± 2 % )。单ｇｌｙｂｕｒｉｄｅ…     

基因突变致β细胞KATP通道超敏感性可致新生鼠严重糖尿病

β细胞中葡萄糖升高致ＡＴＰ ＡＤＰ比值升高 ,从而关闭Ｋ通道导致细胞去极化 ,Ｃａ2 + 内流使胰岛素分泌而降低血糖。因而人们推测基因突变致β细胞中ＫＡＴＰ 通道对ＡＴＰ ＡＤＰ升高的敏感性降低 ,继而胰岛素分泌不足而致糖尿病。方法与设计　构建突变ＫＡＴＰ 基因质粒重组子 ,分别为Ｋｉｒ6.2亚单位Ｎ端 2 30缺失 (Ｋｉｒ6.2 [△Ｎ2 30 ])及Ｋｉｒ 6.2亚单位Ｎ端 2 30缺失合并 1 85点突变 (Ｋｉｒ 6.2 [△Ｎ2 30 ,Ｋ1 85Ｑ])。将两种突变基因于Ｃ端与绿荧光蛋白 (ＧＴＰ)融合 (以利于检测 ) ,使其与ＫＡＴＰ磺脲类受体 1亚单位Ｄ…     

蛋白激酶C-核因子κB信号转导通道对人肺动脉平滑肌细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响

目的　探讨蛋白激酶C(PKC) 核因子κB(NF κB)信号转导通道对人肺动脉平滑肌细胞 (HPASMCs)增殖和血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法　体外培养HPASMCs ,用工具药PKC激活剂 12 肉豆蔻酰 13 乙酸佛波酯 (PMA)和NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC) ,将HPASMCs分为对照组、PMA组和PMA PDTC组在常氧和缺氧条件下培养。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测VEGFmRNA表达 ,Westernblot法检测VEGF和NF κB的抑制蛋白IκBα蛋白表达 ,免疫细胞化学法检测NF κBp6 5的表达和定位 ,流式细胞术检测细胞周期时相分布。结果　( 1)NF κBp6 5胞核染色阳性率、IκBα蛋白相对表达量及细胞周期G2 /M % :常氧或缺氧PMA组与相应对照组、PMA PDTC组比较差异均有显著性 (P均 <0 0 5 ) ;缺氧PMA组与常氧PMA组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 2 )VEGFmRNA和蛋白表达 :常氧对照组、PMA组、PMA PDTC组组间差异均无显著性 (P均 >0 0 5 ) ;缺氧PMA组均高于缺氧对照组、缺氧PMA PDTC组、常氧PMA组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。 ( 3)缺氧PMA组NF κB胞核染色阳性率、VEGF蛋白相对表达量、G2 /M %之间均呈正相关 (r =0 5 87～ 0 710 ,P均 <0 0 5 )。结论　常氧培养HPASMCs存在PKC NF κB信号转导通道 ;     

Cromakalim对心肌细胞内游离钙的影响

采用荧光素染色法，以ＡＣＡＳ５７０型粘附细胞仪研究ＡＴＰ敏感性钾通道特异性激动剂ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ对正常心肌细胞内Ｃａ２＋的作用及对缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋的影响。结果显示：ｃｒｏ－ｍａｋａｌｉｍ降低正常心肌细胞内Ｃａ２＋的浓度；同时明显减轻缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋超载现象。二者均呈良好的量效关系。提示：ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可能有减轻缺氧再给氧损伤的作用。     

电压门控钾通道在慢性缺氧性肺动脉高压发展中的作用

目的:探究慢性缺氧对肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道（Kv）的影响及其在慢性缺氧性肺动脉高压发生发展中的作用。方法:50只雄性SD大鼠随机分为常氧对照组（10只）和慢性缺氧5 d、10 d、20 d及30 d组（各10只）。慢性缺氧组大鼠每天在低氧仓中予以缺氧8 h,分别取缺氧5 d、10 d、20 d及30 d的大鼠进行实验。测量平均肺动脉压（mPAP）并应用全细胞膜片钳技术记录肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流（IK）。结果:慢性缺氧显著减低大鼠肺动脉平滑肌细胞的IK峰值及I V曲线漂移。慢性缺氧5 d组肺动脉平滑肌细胞的IK密度及I V曲线与常氧组均没有显著差异;而慢性缺氧10 d组肺动脉平滑肌细胞的IK密度及I V曲线与常氧组均有显著差异(P< 0.05),随着缺氧时间的延长,IK密度的峰值进一步降低。与常氧组相比较,慢性缺氧10 d组大鼠的mPAP明显增加(P<0.05),随着缺氧时间的增加,mPAP进一步增加;mPAP的增加与IK密度的下降呈负相关(r=-0.89769,P<0.01)。结论:慢性缺氧在引发肺动脉高压的过程中伴随有肺动脉平滑肌细胞Kv通道的活性降低,提示Kv参与了肺动脉高压的发生发展。     

钾通道开放剂与肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡

肺动脉平滑肌细胞 (ＰＡＳＭＣｓ)增殖和凋亡的变化是低氧性肺动脉高压 (ＨＰＨ)血管重建的重要组成部分 ,钾通道活性改变在这两方面的作用还不清楚 ,我们的研究旨在明确钾通道开放剂对ＰＡＳＭＣｓ增殖和凋亡的作用。材料与方法　细胞培养 :酶消化法培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ,细胞纯度为 98%。细胞增殖 :继代ＰＡＳＭＣｓ按 5× 1 0 3/孔接种于 96孔板 ,长满后静止 48ｈ ,加入 1 0 %胎牛血清 (ＦＣＳ ,美国ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ公司 )和不同浓度的钾通道开放剂比那地尔(Ｐｉｎ ,美国Ｓｉｇｍａ公司 ) ,2 4ｈ后按ＣｅｌｌＴｉｌｔｅｒＴＭ(美国Ｐｒ…