复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究

目的:研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽(Aβ)25-35(Aβ25-35)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:将SH-SY5Y细胞接种后分为对照、Aβ25-35(25μmol.L-1)和复方脑康胶囊(0.725g.mL-1)+Aβ25-35(25μmol.L-1)组。通过测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积,观察复方脑康胶囊对Aβ导致神经毒性的保护作用。结果:与对照组比较,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入复方脑康胶囊水提液后,可使上述指标恢复或接近正常。结论:复方脑康胶囊具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性。     

左旋丁苯酞对脑低灌注大鼠学习记忆及脑β-淀粉样肽含量的影响

目的：以老龄大鼠为研究对象,观察左旋丁苯酞（L－3－n—Butylphthalide,1－NBP）对脑低灌注大鼠学习记忆的改善作用,并研究其皮质及海马β-淀粉样肽（Aβ1-42）水平变化。方法：永久性结扎老龄大鼠双侧颈总动脉3个月,制备脑低灌注模型。实验分4组：假手术组、溶剂对照组、30mg·kg^－11-NBP和120mg·kg^－11—NBP组。1—NBP组连续给予1－NBP45d后,用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习和记忆以及保存记忆的能力。同时,取大鼠脑皮质及海马组织,用ELISA法检测Aβ1－42含量,以探讨1．NBP改善认识功能作用机制。结果：1-NBP可以显著缩短脑低灌注大鼠找到安全台的潜伏期,并明显增加脑低灌注大鼠在目标象限活动时间的百分比,明显降低大鼠皮质及海马AIM42含量。结论：1－NBP能改善脑低灌注大鼠的学习记忆缺陷,减少皮质及海马Aβ1－42的水平,这可能是改善脑低灌注大鼠认知功能的重要机制之一。     

β-淀粉样肽神经细胞损伤模型的建立及应用

目的：建立β-淀粉样肽神经细胞损伤模型，探讨工具药维生素E，加兰他敏，四乙基铵，多奈哌嗪对Aβ25-35孵浴造成细胞损伤的影响，寻找具有抗Aβ损伤作用的工具药。方法：（1）应用不同浓度Aβ25-35孵浴神经细胞24hr、48h、72hr，MTT法测定细胞存活率，以确定有效的损伤时间和剂量。（2）应用神经细胞损伤模型，预防性给予上述几种工具药，72hr后MTT法检测该模型细胞存活率。结果：（1）分别单独应用3μmol／L、10μmol／L Aβ25-35，     

芦丁对β淀粉样肽纤维化及细胞毒性的抑制作用

目的探索芦丁对Aβ25-35肽段淀粉样纤维化及纤维细胞毒性的抑制作用。方法在pH值为7.4、温度37℃孵育Aβ25-35肽,采用硫黄素(thioflavin T,ThT)荧光和透射电子显微镜检测多肽的淀粉样纤维化;以淀粉样纤维处理PC12细胞建立的细胞损伤模型,MTT法检测细胞存活率,以评估芦丁对β淀粉样纤维细胞毒性的抑制作用。结果 Aβ25-35肽段在pH值为7.4、温度37℃条件下,经孵育60h左右形成淀粉样纤维;芦丁抑制Aβ淀粉样纤维的形成,破坏纤维结构,并降低纤维诱导的细胞损害。结论芦丁能够抑制Aβ25-35的淀粉样纤维化和破坏成熟纤维结构,并降低Aβ纤维的细胞毒性。     

脑室灌注β-淀粉样肽致痴呆动物模型

目的　建立脑室灌注 β 淀粉样肽 (Aβ)致痴呆动物模型及观测指标。方法　微泵渗透对动物脑室进行灌注可溶性大片段Aβ ,侧脑室一次性注射聚集态小片段Aβ,侧脑室一次性注射可溶性大片段Aβ片段 ,侧脑室注射Aβ联用转化生长因子β(TGFβ)。 结果　上述方法处理后动物水迷宫和被动回避操作能力受损 ,学习和记忆功能损害 ,皮层和海马中胆碱乙酰转移酶 (ChAT)活性明显降低 ,抗氧化能力下降 ,海马神经元坏死或缺失 ,凋亡相关蛋白酶Bal 2、Bax和p5 3增加等。结论　上述方法均可选用来作为模拟AD病理特征的动物模型。     

二苯乙烯苷对高胆固醇血症致β-淀粉样肽增高大鼠模型的影响

目的　观察何首乌提取物二苯乙烯苷 (2, 3, 5, 4′ tetrhydroxystilbene 2 O β D glucoside,TSG)对高胆固醇血症致β 淀粉样肽(β amyloid,Aβ)增高大鼠模型脑海马区Aβ、血脂及血液流变学的影响,分析二苯乙烯苷抗老年性痴呆(AlzheimersDisease,AD)的作用机制。方法　以高胆固醇饲料(含 1%胆固醇, 0 3%胆酸盐 )喂饲大鼠 10wk,建立高胆固醇血症大鼠模型。用TSG连续灌胃 10wk,以免疫组织化学和放射免疫分析法测定脑海马区Aβ水平;以全自动生化分析法测定血清胆固醇 (CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL C)含量;而且测定了全血粘度及红细胞聚集性。结果高胆固醇饲料喂饲 10wk后,模型大鼠脑海马区可见Aβ蛋白表达及Aβ含量明显增加;血清CHO、LDL C明显升高;全血粘度及红细胞聚集性升高。TSG能降低脑海马区Aβ含量,抑制Aβ蛋白表达,减少血清CHO和LDL C含量,降低全血粘度及红细胞聚集性。结论　TSG能够减少脑Aβ的生成,降低血清胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平,改善血液流变学;具有治疗AD的应用前景。     

葛根素对β-淀粉样肽所致痴呆模型小鼠学习记忆的影响

目的 :研究葛根素对 β 淀粉样肽所致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的影响。方法 :以 β 淀粉样肽3μl(1mmol·L-1)icv制备小鼠学习记忆障碍模型 ,用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力。同时检测脑中及血中超氧化歧化酶 (SOD)、丙二酰醛(MDA)含量。结果 :葛根素 2 5和 5 0mg·kg-1均能改善模型小鼠的学习记忆 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。生化指标测定显示葛根素能使模型小鼠脑及血中的SOD增多、MDA减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :葛根素可对抗 β 淀粉样肽的神经毒性 ,其机制可能与清除脑自由基及提高抗氧化活性作用有关     

人参总皂苷对β-淀粉样肽致小鼠记忆障碍的影响

目的　研究人参总皂苷对 β 淀粉样肽 (β AP)所致学习记忆障碍的影响。方法　给小鼠一次性icv凝聚态 β AP活性片段 (2 5～ 35 ) 3μl (1 0mmol·L-1)造成早老性痴呆动物模型 ,采用避暗试验及Morris水迷宫试验 ,观察人参总皂苷对 β AP(2 5～ 35 )神经毒性的对抗作用。 结果　一次性icv凝聚态 β AP(2 5～ 35 )能导致学习记忆障碍。人参总皂苷(10 0 ,5 0 ,2 5mg·kg-1,ig)可明显改善 β AP(2 5～ 35 )所致被动回避性记忆障碍和空间记忆障碍。结论　人参总皂苷可对抗 β AP(2 5～ 35 )的神经毒性 ,改善 β AP(2 5～ 35 )引起的学习记忆障碍     

参乌胶囊对东莨菪碱大鼠记忆行为及脑内乙酰胆碱脂酶的影响

目的：观察复方中药参乌胶囊对东莨菪碱大鼠学习记忆及脑内乙酰胆碱脂酶的影响。方法：采用Wistar大鼠随机分为：对照组（Con），模型组：东莨菪碱（Sco）腹腔注射组，阳性对照组：安理申＋东莨菪碱，中药参乌胶囊＋东莨菪碱（参乌胶囊低、中、高3个剂量）组，共6组，每组10只，实验前分别灌胃给药或蒸馏水一周，于第7天开始造模并进行Morris水迷宫测试。实验时，除Con组每天腹腔注射等体积生理盐水，     

半枝莲黄酮对β-淀粉样蛋白所致星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨半枝莲黄酮(SBF)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)损伤星形胶质细胞的干预作用。方法培养第3代星形胶质细胞分为空白对照组,模型对照组和半枝莲黄酮小、中、大剂量组。半枝莲黄酮小、中、大剂量组细胞分别给予17.5,35.0和70.0μg·m L-1半枝莲黄酮作用24 h后,模型对照组和半枝莲黄酮小、中、大剂量组细胞再分别加入终浓度Aβ25-35100μmol·L-1继续作用24 h。噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率,分光光度法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,免疫组织化学方法测定细胞内LDH的合成量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定培养液中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率降低49.94%(P<0.01)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮小、中和大剂量组细胞存活率分别提高12.50%(P<0.05),16.67%(P<0.01)和2.08%(P>0.05)。与空白对照组比较,模型对照组细胞培养上清液中LDH减少36.65%(P<0.01)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮小、中和大剂量组LDH分别增加11.35%(P>0.05),26.40%(P<0.01)和32.44%(P<0.01)。与空白对照组比较,模型对照组星形胶质细胞LDH蛋白表达的阳性面积比例降低24.92%(P<0.05)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮中和大剂量组LDH蛋白表达的阳性面积比例分别提高31.20%和53.60%。与空白对照组比较,模型对照组细胞培养液中IL-1β和IL-6水平分别降低23.60%和15.47%(P<0.01)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮小、中和大剂量组IL-1β释放量分别增加5.74%(P>0.05),24.82%(P<0.01)和6.86%(P>0.05);IL-6释放量分别增加11.30%(P<0.05),17.39%(P<0.01)和3.87%(P>0.05)。结论半枝莲黄酮对Aβ25-35引起的星形胶质细胞损伤具有保护作用,这可能有利于阐述半枝莲黄酮治疗阿尔茨海默病的作用机制。     

急性缺血性卒中患者血液中β-淀粉样肽的变化

目的研究β-淀粉样肽（β-amyloid，AB）代谢改变与急性缺血性卒中（acute ischemic stroke，AIS）的关系。方法选取40例急性缺血性卒中患者和40例年龄相当的正常人作为对照，应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），测定了血液中可溶性Aβ1-40及Aβ1-42的水平。结果AIS患者血清Aβ1-40水平较正常对照显著升高（P〈0．01），而血浆Aβ1-42水平较正常对照显著降低（P〈0．01），血液中Aβ1-42／Aβ1—40及总体AB水平较正常对照显著降低（P〈0．01）。结论急性缺血性卒中过程中存在的β淀粉样肽蛋白（β-amyloid precursor protein，APP）表达上调以及相伴随的短暂Aβ水平变化，可能是脑急性损伤和灌流不足的结果。     

肉苁蓉总苷对β-淀粉样肽所致阿尔采末病小鼠模型学习记忆的影响及其机制

目的研究肉苁蓉总苷(G lycosides of c istanche,GCs)对β-淀粉样肽(β-AP)所致阿尔采末病(AD)模型小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法采用小鼠脑室内一次性微量注射β-AP25-35诱发β-AP在脑内的沉积,造成AD小鼠模型。10 d后,一次性训练被动回避跳台实验测定AD小鼠学习记忆能力;检测脑组织SOD活性、MDA含量及GSH-Px活性;电子显微镜检测脑组织神经细胞的病理变化;TUNEL法检测脑细胞凋亡;免疫组化SABC法检测Bax/Bc l-2的表达。结果GCs可提高β-AP所致AD小鼠学习记忆水平;降低脑组织MDA含量,提高SOD及GSH-Px活性;使脑组织中某些病理改变得到改善;降低脑细胞凋亡率;使Bax的表达减弱,Bc l-2的表达增强。结论GCs对β-淀粉样肽所致AD小鼠学习记忆能力提高,其作用机制可能与其增强自由基清除酶活性,防止脂质过氧化作用,抑制β-AP在脑内的沉积及抑制脑细胞凋亡有关。     

冰片注射液对缺血再灌注大鼠脑内炎症反应的影响

目的观察冰片注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的局部炎症反应的影响。方法线栓法阻塞大鼠左侧大脑中动脉,建立脑缺血再灌注模型,进行肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白介素-1β(IL-1β)的免疫组化染色。结果冰片治疗组ICAM-1的免疫阳性小血管数、IL-1β及TNF-α的免疫阳性细胞数,局部白细胞浸润数目等均有不同程度减少(P<0.01或P<0.05)。结论冰片可以抑制大鼠脑缺血再灌注损伤时炎症细胞因子的表达,减少白细胞的浸润,降低脑缺血再灌注损伤的程度。     

参乌益智胶囊治疗血管性痴呆的临床研究

目的 观察参乌益智胶囊治疗血管性痴呆的临床疗效.方法 将80例血管性痴呆患者数字表法随机分为对照组和治疗组,每组40例.在常规治疗基础上,对照组予吡拉西坦片口服,治疗组予以参乌益智胶囊口服.60d为1个疗程.比较治疗前后简单智力状况检查(MMSE)量表积分、Blessed行为量表积分变化.结果 两组治疗前后MMSE积分、Bcessed行为量表积分均明显改善(均P＜0.05);治疗后治疗组MMSE积分、Bcessed行为量表积分分别为(19.83±5.24)分、(7.18±4.21)分,均优于对照组的(20.01±4.89)分、(7.23±3.99)分(t=4.148,2.141,均P＜0.05).结论 参乌益智胶囊能改善轻、中度血管性痴呆患者认知功能,提高患者记忆力、计算力、定向力,增强患者行为能力,减轻痴呆症状,取得较好近期疗效.     

二苯乙烯苷对APP转基因小鼠学习记忆能力和脑内β-淀粉样肽表达的影响

目的:观察从中药何首乌提取的二苯乙烯苷(TSG)对APP转基因小鼠学习记忆能力、β-淀粉样肽(Aβ)和分泌酶的影响。方法:将APP转基因小鼠随机分为模型组,TSG 0．05和0．2 g·kg-1组,同月龄同背景C57BL／6J小鼠为对照组,各组小鼠从4月龄始连续灌胃给药6个月。用morris水迷宫观察小鼠学习记忆能力,用免疫组化法观察小鼠海马APP,Aβ,β位点剪切酶(BACE,即β-分泌酶)和代表γ-分泌酶的早老蛋白-1(PS-1)的表达。结果:10月龄转基因小鼠模型组与正常对照组相比,模型组学习记忆能力明显降低,海马APP,Aβ和PS-1的表达明显增强。TSG能显著改善模型小鼠学习记忆能力,降低脑内APP、Aβ的生成,抑制海马PS-1的表达。在正常对照组、模型组和TSG组之间,β-分泌酶表达没有明显差异。结论:TSG能减少脑内Aβ形成,改善学习记忆能力,作用机理可能与减少APP生成和抑制γ-分泌酶的表达有关。     

线粒体在β-淀粉样肽产生的神经损伤过程中的作用

β-淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)是阿尔采末病(Alzheimer's disease,AD)病人脑内老年斑的核心成分,它由细胞产生并聚积以后,可以表现出很强的神经毒性,是诱发AD的主要因素。研究发现,在Aβ神经毒性的产生过程中线粒体扮演了重要的角色,它可能既充当了Aβ攻击的靶点又担任了Aβ发挥神经毒性的中介。本文将简要介绍线粒体在这种神经损伤过程中发挥的作用以及针对线粒体为靶向的一些相关药物研究。     

β-淀粉样肽25-35致记忆障碍大鼠中枢双孔钾通道亚型mRNA表达的改变

目的　研究聚集态 β 淀粉样肽2 5 3 5(β AP2 5 3 5)致记忆障碍大鼠模型中枢双孔钾通道亚型mRNA表达的变化。方法　Morris水迷宫实验检验大鼠空间学习记忆能力 ,用RT PCR方法检测大脑皮层和海马中 3种双孔钾通道TREK 1 ,TREK 2和TRAAKmRNA的表达。结果　在Morris水迷宫实验中 ,β AP2 5 3 5注射组大鼠d 1 ,d 2和d 4的潜伏期均比对照组显著延长。β AP2 5 3 5注射组大鼠大脑海马中TREK 1 ,TREK 2和TRAAKmRNA的表达比对照组明显升高 ;而在皮层中的表达变化不显著。结论　侧脑室注射聚集态 β AP2 5 3 5致大鼠学习记忆障碍的同时可诱发中枢双孔钾通道亚型的表达改变     

姜黄素对β-淀粉样肽(25-35)诱导去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素(Cur)对β-淀粉样肽(25-35)(βamyloid peptide-25-35,Aβ25-35)诱导体外去血清培养的PC12细胞周期异常与凋亡的影响.方法PC12细胞用常用的去血清培养使细胞同步于G0期,用MTT比色法分析细胞存活率,流式细胞仪检测分析细胞周期与凋亡,Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21基因的变化.结果用不同终浓度(0,1.25,2.5,5,10,20 μmol·L-1)Cur预处理去血清培养的PC12细胞1 h,再用Aβ25-35处理24 h,细胞存活率增加;Aβ25-35引起的S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P＜0.01),亚二倍体峰消失;核固缩、碎裂减少;p21 mRNA表达和P21蛋白表达增加.结论Cur可以影响Aβ25-35诱导的去血清培养PC12细胞周期分布及减少凋亡,可能与上调p21的表达有关.     

利拉鲁肽对膝骨关节炎大鼠炎症反应的影响

目的 探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽对膝骨关节炎大鼠模型炎症反应的改善作用.方法 选取成年雄性SD大鼠60只,分为模型组、假手术组和利拉鲁肽组,每组20只.模型组和利拉鲁肽组大鼠通过关节腔内注射单碘乙酸盐(MIA,4 mg)诱导大鼠膝骨关节炎模型.假手术组大鼠关节腔内注射相同体积的生理盐水.拉鲁肽组大鼠皮下注射利拉鲁肽(50μg·kg-1·d-1)用于上调GLP-1受体(GLP-1R)的表达,共处理4周.蛋白质印迹法(Western blotting)检测GLP-1R、蛋白激酶A(PKA)、环状单磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、Ⅱ型胶原(collagenⅡ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4(ADAMTS-4)的表达.免疫沉淀技术检测GLP-1R与PKA/CREB信号通路之间的相互作用.结果 与假手术组相比,模型组大鼠膝关节软骨组织中GLP-1R的蛋白相对表达量明显下调[(1.12±0.11)比(0.34±0.04)],而利拉鲁肽组(0.87±0.07)明显高于模型组(P<0.05).与假手术组相比,模型组大鼠膝关节软骨组织中PKA和CREB的磷酸化情况均被显著抑制(P<0.05),利拉鲁肽处理可显著提高PKA和CREB的磷酸化水平(P<0.05).模型组大鼠膝关节软骨组织中的aggrecan和collagenⅡ蛋白水平显著降低,利拉鲁肽组的两种蛋白的表达均显著升高(P<0.05).与假手术组相比,模型组大鼠的TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-13和ADAMTS-4蛋白表达水平均显著上调,利拉鲁肽处理可显著抑制膝骨关节炎大鼠膝关节软骨组织中上述因子的上调(P<0.05).结论 利拉鲁肽在膝骨关节炎大鼠模型中具有较好抗炎活性,可显著改善膝关节软骨组织.