胃癌组织中抑癌基因APC／MCC杂合性缺失的研究

应用多聚酶链反应与限制性片段长度多态性分析法，对４５例手术切除胃癌组织腺癌性息肉基因／结直肠癌突变基因杂合性缺失进行分析。结果表明ＡＰＣ、ＭＣＣ基因ＬＯＨ率分别为２１．７％和３１．３％，ＡＰＣ／ＭＣＣ缺失率为３０．０％。     

胃癌粘膜基因不稳与染色体端粒长度改变的研究

目的 探讨端粒长度与微卫星不稳定（MSI）和APC/MCC及DCC基因杂合丢失（LOH）的关系。方法 采用Southern杂交检测端粒限制性片段长度;采用PCR为基础的方法对MSI、LOH和移码突变进行分析。结果 68例胃癌中,至少有1个位点发现MSI者17例（25%）。将MSI分为高频率MSI（≥2个位点）8例、低频率MSI（仅为1个位点）9例和MSI阴性51例3组。结果8例高频率MSI中检出TGF-βR Ⅱ移码突变6例,BAX移码突变3例,hMSH6移码突变2例,而低频率MSI和MSI阴性组示见有移码突变者。35例胃癌行TRF分析,其中端粒缩短20例（57.1%）,基本不变12例（34.3%）,延长3例（8.6%）。端粒长度与临床病理参数无关。DCC基因LOH与TRF缩短有关。APC和MCC基因亦有随TRF缩短而LOH率增高的倾向。TRF长度与MSI和移码突变无相关性。结论 胃癌发生涉及二条不同的分子途径。高频率MSI胃癌由于错配修复基因缺陷导致单核苷酸水平突变的积聚和高频率MSI表型,而低频率MSI和MSI阴性胃癌可能涉及LOH病理途径。端粒丢失可能参与了LOH病理途径,而与MSI途径无关。     

肝内胆管癌多基因变异表型分析

目的：探讨参与肝内胆管癌发生的多基因变异谱系,为了肝内胆管癌的发生机理提供基因水平上的依据。方法：采用显微切割术从石蜡组织切片中提取DNA、聚合酶链式反应（PCR）扩增基础上DNA测序的方法,对22例手术切除的肝内胆管癌标本进行了6种肿瘤抑制基因（APC、MCC、DCC、OGG1、p53和RB1）的杂合性缺失（LOH）和Ki-ras-2癌基因点突变的发生率检测。结果7种肿瘤基因的变异率为APC（68．8％）、DCC（46．2％）、OGG1（41．7%）、p53(37.5%)、Ki-ras-2(27．3％）、RB1（22．2％）和MCC（14．3％）。结论多基因变异的协同作用在肝内胆管癌的多阶段发展发生过程中起着重要作用,其中尤以APC、DCC、OGG1、p53和Ki-ras-2构成了肝内胆管癌相关的基本基因谱系。     

食管癌APC/MCC基因杂合缺失的研究

目的 研究ＡＰＣ／ＭＣＣ基因杂合性缺失（ＬＯＨ）与食管癌发生发展的关系。方法 多聚酶锭反应技术及限制性片段长度多态现象对４６例食管癌ＡＰＣ和ＭＣＣ基因的ＬＯＨ进行了分析。结果 食管癌ＡＰＣ和ＭＣＣ基因ＬＯＨ阳性表达分别为２９．０％和３３．３％。结论ＡＰＣ、ＭＣＣ基因的ＬＯＨ是食管癌的常见改变,可能参与了食管癌的发生。     

Abnormal Change of p53 Gene in Gastric and PrecancerousLesions and APC Gene Deletion in Gastric Carcinoma and Near Tissues

Hypothesisoftumorsuppressorgenehadbeenproposedtwentyyearsag0['],butthefirstsuppressorgeneRb(retinoblas-toma)wasseparatedandcloneduntill986[z].Suppressorgene,includingp53andAPCgenes,n0whasbecomenew"hot"subjectintheareaoftumorresearch.p53genemutation,deleti0nandAPCgenedele-tionoccurredinsomehumantumorsandtheremaybesomerelationbetweenAPCgeneandp53genedeletion[3-7]-Inthispa-per,PCR-RFLP,PCR-SSCPmeth0dswereusedtoanalyzep53,APCgenealterationsingastriccancerandprecancerouslesi0nsinordertoin…     

肝细胞癌与肝内胆管癌间基因表型差异分析

目的：通过对肝细胞癌（HCC）和肝内胆管癌（ICC）之间抑癌基因（tumor suppressor gene,TSG）和微卫星（ni-crosatellite,MS）变异谱特点进行对比分析，了解这两种肝脏最常见恶性肿瘤在基因发生路径上的差异。方法：采用微组织切割法，从石蜡包埋的组织切片中提取基因组DNA进行直接测序，对33例信息处（杂合性）HCC和22例ICC进行了6种TSG杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH）的检测，并对其中10例HCC和全部22例ICC做7个MS的LOH分析。结果：6种TSG的变异情况在HCC依次为：p53(4/5,80.0%)、OGG1(2/4,50.0%）、（5/12，41.7%）、RB1(1/5,20.0%）、DCC（0/4，0%）、MCC（0/3，0%）；在ICC为：APC（11/16，68.8%）、DCC（6/13，46.2%）、OGG1（5/12，41.7%）、p53(6/16,37.5%)、RB1（2/9，22.2%）、MCC（1/7，14.3%）。HCC和ICC中7个MS的LOH发生率分别为30.0%(3/10)和59.1%（13/22）。7个MS在HCC中仅有2个发生LOH，而在ICC中则全部出现LOH，其中与p16/MTS-1和MXI-1基因连锁的4个MS仅在ICC中出现LOH。结论：HCC和ICC之间TSG和MS存在着明显不同的LOH谱，推测两者在发生过程中可能沿循各自不同的分子路径。对LOH基因谱成员的分析，有助于进一步认识HCC和ICC发生的分子机制。     

胃癌组织p16基因微卫星DNA的不稳定性

目的 :检测胃癌组织中p16基因D9s171、D9s16 0 4微卫星位点杂合性缺失 (LOH) ,探讨p16基因微卫星不稳定性 (MI)与胃癌发生发展的关系。方法 :采用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染技术对 2 0例胃癌和癌旁组织LOH进行分析。结果 :癌组织D9s171和D9s16 0 4的LOH分别为 3例和 10例 ,癌旁组织分别为 2例和 4例。两位点LOH发生率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。胃癌组织较癌旁组织LOH发生率明显增高 (P <0 .0 5 ) ;早期胃癌与进展期胃癌两个微卫星位点LOH的发生率分别为 5 0 % (4/ 8)和 5 8.3% (7/ 12 ) (P >0 0 5 ) ;两位点LOH发生存在相关性(P <0 0 5 )。结论 :D9s171,D9s16 0 4微卫星位点的LOH与胃癌的发生发展有关 ,而与癌细胞的分化程度或胃癌的临床分期无显著相关性     

原发性肝癌结肠癌缺失基因杂合缺失研究

目的：了解结肠癌缺失基因（ＤＣＣ基因）在原发性肝癌发生发展中作用，方法：采用多聚酶链延伸反应－限制性片生长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法对３０例外科手术切除原肝癌标本ＤＣＣ基因杂合缺失（ＬＯＨ）进行分析，结果：２８例信息个体中检出ＬＯＨ７例，占２５．０％，ＤＣＣ基因ＬＯＨ与临床病理参数和ＨＢＶ感染无显著相关，结论：ＤＣＣ基因ＬＯＨ可能参与了原发肝癌的发生发展。     

新疆哈萨克族食管癌APC抑癌基因等位基因杂合缺失和点突变研究

目的：探讨抑癌基因在哈萨克族（简称哈族）食管癌发生、发展中的作用,阐明哈族食管癌高发的机理,从分子水平提供依据。方法：应用ＰＣＲ技术并配合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析和银染的单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析法对４１ 例新疆地区原发性食管癌及正常组织中家族性结肠腺瘤样息肉易感基因（ＡＰＣ）第１１ 外显子杂合缺失（ＬＯＨ）及点突变进行检测。结果：３１ 例信息个体中１３ 例显示杂合缺失,杂合缺失率为４１．９％ ,其中哈族的杂合缺失率为５０．０％ （７／１４）,而汉族的杂合缺失率为３５．３％ （６／１７）。点突变率为２４．４％ （１０／４１）,其中哈族食管癌的点突变率为３０．０％ （６／２０）,汉族食管癌的点突变率为１９．０％ （４／２１）。结论：ＡＰＣ抑癌基因第１１ 外显子的ＬＯＨ 存在于食管癌的各个临床分期,ＬＯＨ不是癌症发生的结果,可能是癌症发生的早期因素,且与食管癌的恶性程度有关。     

Study of mutations of p53, APC and K-ras genes in 47 cases of intestinalmetaplasia of gastric mucosa

ih order to stUdy the role of the mutations of P53,W and K-ras benes in intestine ~la(IM) of metric muare and caxcin~s, the InUtationS of the gene~onto ~ in 3 mp of m were ~nab withPCR-bumP and PCR~~. ..~ ~ SUbjch Folty~five foryhalin-fad and ~ em.~ s~ of ~ and severe iM were colleded in the - ho I%8 to lOp and 15 f- swear fxnm the stallly ~ cases. ~ the co.spe~, 10 were for the ~ of the ~ents with~ ~c diseases and 50 ho the gb~ tissues of~c carcinoma. Serial SectionS were done for the…     

DOWN-REGULATED EXPRESSION OF PTEN GENE AND LOH OF ITS EPIGENETIC MICROSATELLITES IN GASTRIC CARCINOMA

TherecentlyidentifiedPTEN/MMAC1/TEP1(phosphataseandtensinhomologuedeletedonchro-mosome10/mutatedinmultipleadvancedcancers/TGF-βregulatedandepithelialcellenrichedphos-phatase1)geneisanoveltumorsuppressorgenelo-catedtochromosome10q23.3(1).PTENencodingproductisadualspecificityphosphatasewithhomolo-gytotensinandauxillin.PTENdephosphorylatesphosphatidylinositol?triphosphated(PIP3),whichacti-vatesserine/threoninekinase,Akt.(2,3).Thephos-phataseactivityofPTENdown?regulatestheAktsig-nalin…     

PCR-RFLP分析人结直肠癌DCC基因杂合性缺失

目的：探讨DCC基因在结直肠癌中杂合性缺失情况及其意义。方法：应用PCR技术检测了25例中国人散发型结直肠癌病人正常粘膜及癌组织和3个直肠癌细胞系DCC基因M2位点限制性片断长度多态性。结果：16例（64％）病人具有杂合性，其中4例（25％）癌组织表现出等位基因杂合性缺失。此4例均有淋巴结或肝转移。细胞系HCT，HR8348表现杂合性，HT29表现纯合性。结论：DCC基因是一个在结直肠肿瘤发生发展中起重要作用的抑癌基因，该基因的异常与结直肠癌发生发展有关。     

胃癌组织中琥珀酸脱氢酶基因周围微卫星杂合性丢失的研究

①目的研究胃癌组织中由核DNA编码的琥珀酸脱氢酶（SDHD）基因位点的改变情况。②方法选取与SDHD基因紧密连锁的3个微卫星D11S5017、D11S1347和D11S1328,通过PCR—SSLP的方法检测了35例新鲜胃癌组织中3个微卫星位点的杂合性丢失（LOH）情况。③结果胃癌组织中,D11S5017位点LOH检出率为12．0％,D11S1347位点LOH检出率为10.0％,D11S1328位点LOH检出率为14．3％。3个位点LOH总检出率为19．4％。④结论在胃癌组织中存在着在SDHD基因LOH的现象,说明了它可能是胃癌中的一种特殊类型的肿瘤抑制因子。     

胃癌中p53基因杂合性丢失的研究

目的：了解ｐ５３基因杂合性丢失与胃癌发生、发展的关系。方法：应用位于１７ｐ１３区域的ｐ５３ｃＤＮＡ探针和ｐＹＮＺ２２ＶＮＴＲ探针，对胃癌及癌旁正常组织基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。结果：在２２例胃癌中，１２例正常组织被检出有杂合性，其中６例标本癌组织发生了杂合性丢失，检出率为５０％。结论：ｐ５３基因杂合性丢失是胃癌发生过程中一种常发事件     

FGFR4基因单核苷酸多态性和杂合性丢失在胃癌发病中的作用

目的 研究成纤维细胞生长因子受体4（FGFR4）基因在胃癌患者中的单核苷酸多态性（SNP）情况和杂合性丢失（LOH）的发生频率,探讨其在肿瘤发生发展和患者预后判断中的意义。方法 检测50例胃癌标本中FGFR4基因5个外显子区域6、9、13、16、18的SNP情况,并以SNP技术检测FGFR4基因外显子9区域内密码子388位点rs351855的LOH,分析FGFR4基因SNP和LOH与胃癌临床病理特征及患者生存率的关系。结果 FGFR4基因的外显子9区域第401密码子发生1例体细胞突变（R401C,C>T）,34例胃癌发生编码区非同义SNP,GG、AG、AA三种基因型比例分别为32%、52%和16%。26例AG型杂合子胃癌患者中,rs351855位置LOH的发生频率为92.31%。LOH发生频率和Arg388等位基因的表达在不同肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、pTNM分期及患者生存率中的差异均无统计学意义（P>005）。结论 胃癌患者FGFR4第388密码子rs351855位点发生高频LOH,提示在其附近存在抑癌基因的缺失或失活。Arg388等位基因的表达和FGFR4基因rs351855位点LOH不直接影响胃癌的发展及患者的预后。     

抑癌基因DCC在肺癌中的表达及杂合性丢失

为探讨结肠癌制失基因与肺癌发病的关系，利用半定量的逆转录聚合酶链反应结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析了７例肺癌患者癌组织及正常肺组织中ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ的表达，发现４例肿瘤组织中ＤＣＣ基因表达明显低于对照肺组织。     

Induction of intestinal metaplasia in stomach of dogs and expression of tumor -related proteins in animal gastric mucosa lesions

Ｉｔｉｓｖｅｒｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｏｆｇａｓｔｒｉｃｍｕｃｏｓａｆｏｒｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒ(ＧＣ)ＷｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄｏｒｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｔｙｐｅＧＣｈａｓｂｅｅｎｓｕｐｐｏｓｅｄｔｏｄｅｖｅｌｏｐｆｒｏｍｇａｓｔｒｉｃｍｕｃｏｓａｖｉａｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｅｔａｐｌａｓｉａ(ＩＭ)Ａｓｔｏｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｌｙｏｂｓｅｒｖｉｎｇｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎ…     

胃癌及癌前病变组织中MUC6核粘蛋白的表达及其意义

目的　探讨正常胃粘膜、癌前病变组织以及胃癌组织中MUC6核粘蛋白的表达规律 ,及其与患者临床病理因素之间的联系。方法　应用兔抗人MUC6核粘蛋白的抗体和免疫组织化学SP法检测人正常胃粘膜 (n =10 )、癌前病变肠上皮化生粘膜 (n =2 9)和胃癌组织 (n =47)中MUC6核粘蛋白的表达。结果　人正常胃粘膜中胃腺的基底部广泛分布MUC6核粘蛋白 (10 0 % ) ,而肠上皮化生、不典型增生和胃癌组织中的表达阳性率分别为 13 .8%、70 %、44.7%。胃癌组织中MUC6核粘蛋白的表达与胃癌患者的性别、肿瘤的部位和大小、淋巴结转移、肿瘤的分化与浸润、临床分期和Lauren氏分型之间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　MUC6基因是组成胃粘膜的粘蛋白基因之一 ,在胃癌前病变和胃癌组织中的表达呈下调趋势 ,但与患者的一些临床病理指标之间不存在关联。     

中国人胃癌染色体11p15.5处杂合性缺失分析

目的　通过对中国人胃癌染色体 11p15 .5处杂合性缺失的研究 ,了解中国人群中胃癌病人在此区域杂合性缺失的情况。方法　从 66例胃癌病人的石蜡包埋的手术病理标本中 ,提取肿瘤及相应正常组织的DNA ,用荧光标记的方法选取 11p15 .5处的微卫星DNA标记进行PCR扩增 ,再将PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,电泳后行杂合性缺失分析。结果　 11/ 3 6( 3 0 .6% )的病人在D11S13 18处存在杂合性缺失 ;而D11S40 46位点处 ,13 / 60 ( 2 1.7% )的病例存在杂合性缺失 ;2 4/ 61( 3 9.3 % )的病例在 11p15 .5处至少有 1个位点存在杂合性缺失。杂合性缺失的频率与肿瘤病人的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位及淋巴结是否转移均无关。结论　高频杂合性缺失的区域可能有抑癌基因的存在。这将有助于阐明胃癌发生发展的分子机制 ,进而为对胃癌进行风险预测、基因诊断以及基因治疗提供可能     

肺癌组织3号染色体短臂上抑癌基因异常改变的初步分析

目的 探讨3号染色体短臂上的抑制基因Fhit,hMLH1及VHL在肺癌发展中的可能作用。方法 选取上述基因内含子或附近的微卫星多态位点对45例肺癌组织进行杂合性缺失（LOH）分析,并对其中17例进行了Fhit蛋白的免疫组化染色。结果 Fhit基因内含子3个位点D3S1234、D3S1300及D3S4103的杂合率分别为77．8％（35／45）、73．3％（33／45）和82．2％（37／45）,LOH阳性率分别为62．9％（22／35）、63．6％（21／33）和59．5％（22／37）。与hMLH1基因连锁的两个位点D3S1561、D3S1612杂合率分别为48．9％（22／45）、42．2％（19／45）,LOH阳性率分别为54．5％（12／22）和63．2％（12／19）。与VHL基因连锁的两个位点D3S1038、D3S1283的杂合率分别为62．2％（28／45）和80．0％（36／45）,LOH阳性率分别为64．3％（18／28）和41．7％（15／36）。17例肺癌组织有64．7％（11／17）Fhit蛋白表达缺失。在Fhit蛋白缺失的11个病例中,有10例存在一个或多个Fhit基因位点的LOH。结论 上述3个抑癌基因存在的高频率LOH可为肺癌的早期诊断提供新的途径和依据。Fhit基因的杂合性缺失可能是Fhit蛋白表达下调的机理之一。