中枢神经元烟碱型乙酰胆碱受体的显示方法

目的 用重症肌无力（MG）患的乙酰胆碱受体抗体（AChRab)选择性地显示神经元烟碱型乙酰胆碱受体。方法 用Elisa法测定MG患血中的AChRab滴度,然后用硫酸铵盐析和免疫亲和层析法提取纯化AChRab,再用免疫组化法探讨AChRab与大量CNS神经元－nAChR之间的免疫结合反应。结果 首次表明AChRab与神经-nAChR之间的阳性免疫结合反应广泛分布于鼠CNS许多部位,如大脑皮层、脑干各颅神经运动核团、脊髓运动神经元等部位,与用其他方法显示其分布一致或类同。结论MG患AChRab可与大鼠和猴CNS神经－nAChR交叉结合,可用于选择性地显示CNS神经－nAChR。     

重症肌无力患者烟碱型乙酰胆碱受体抗体致鼠脑干听觉诱发电位

目的：神经肌接头（NMJ）处乙酰胆碱（ACh）传递障碍，是重症肌无力（MG）发病机制．然而，近年有研究表明部分MG患者有中枢神经系统（CNS）受损的症状和神经电生理方面的异常表现，本研究为探讨其机制．方法：从烟碱型乙酰胆碱受体抗体（nAChR－ab）阳性的全身型MG患者血清中提取IgG，将其注入SD大鼠脑室系统，观察其对脑干听觉诱发电位（BAEP）的影响．结果：nAChR－ab使脑干听觉传导功能异常，表现为Ⅰ波后各波消失，Ⅰ-Ⅱ,Ⅰ－ⅤIPLs延长，Ⅴ／Ⅰ波幅比值降低．表明MG患者nAChR－ab可能与CNS中的神经-烟碱型乙酰碱受体…     

乙酰胆碱受体抗体脑室内注射影响大鼠EEG的机制探讨

目的：观察乙酰胆碱受体抗体(AChRab)脑室内注射对大鼠脑电图的影响，并探讨其发生机制。方法：将从确诊的AChRab阳性的重症肌无力(MG)患者血清提纯的IgG(AChRab)及健康人IgG，分别注射到大鼠侧脑室，观察大鼠行为学、EEG的改变，采用HE染色、TUNEL染色检测大鼠脑神经元凋亡。结果：与对照组比较，注射后实验组大鼠出现类似实验性重症肌无力的行为学改变，部分大鼠出现癫痢发作；EEG异常：慢波成分增多，痫性活动增加；脑内神经元凋亡增加。结论：重症肌无力AChRab可致大鼠EEG异常，AChRab与大鼠CNS神经型nAChR结合，诱导神经元凋亡可能是其中枢神经系统损害的机制之一。     

重症肌无力中枢神经系统受损模型下肢体感诱发电位

目的 本研究旨在进一步探索重症肌无力（MG）患的乙酰胆碱受体抗体（AChRab)是否对大鼠中枢神经系统（CNS）躯体感觉传导通路产生影响。方法 从AChRab阳性的全身型MG患血清中提取IgG，对其注入大鼠侧脑室，观察其对下肢体感诱发电位（SEP）的影响。结果 注入大鼠侧脑室内的AChRab可导致大鼠本体觉传导障碍，引起SEP异常，表现为N20波消失或潜伏期延长。结论 MG患的AChRa不仅可以作用于NMJ处的AChR，而且还可以作用于CNS并引起本体觉传导障碍，进一步证明了AChRab在CNS中的病理作用。     

大鼠重症肌无力中枢损害时c-fos基因表达

目的 探讨重症肌无力（MG）中枢神经系统（CNS）损害机制。方法 从AChRab阳性的全身型MG患血清中提取纯化IgG，然后注入大鼠侧脑室，应用免疫组织化学方法，观察即早基因c-fos的表达。结果 脑室内注入AChRab后，大鼠皮层、海马、下丘脑等部位出现显的Fos表达。结论 c-fos基因参与MG中枢损害过程。研究表明皮层、海马、下丘脑等部的神经元极可能涉及MG中枢损害时的病理生理过程。     

α7烟碱型乙酰胆碱受体在老年痴呆疾病中的作用

目前, 在众多烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)中,α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)逐渐成为老年痴呆(AD)发病机制研究热点,主要是因为:1)α7nAChR 对钙离子有相当高的通透性,调节钙的活化及递质乙酰胆碱的释放,能直接影响认知和记忆功能;2)α7nAChR 主要分布在海马和相关皮层,与老年斑的沉积部位一致;3)人们试图通过研究受体的结构、功能及生物学效应,来研发一些选择性的受体激动剂,这些受体激动剂很有可能成为新一代的AD治疗药.     

重症肌无力的发病机制与治疗措施

重症肌无力(MG)是一种神经肌接头传递功能障碍性疾病,临床以骨骼肌异常无力为特征,眼、面部肌肉受累最明显,病情变化波动性很大,无神经损伤体征,抗胆碱酯酶剂能迅速缓解症状。近年对MG发病机制的研究进展较快,目前认为MG的发病可能是由于患者血浆中的乙酰胆碱受体抗体(AChRab)与神经肌接头后膜上的乙酰胆碱受体(AChR)结合,使后膜上有效AChR数目下降,引起神经肌接头传递功能障碍而致。其机理可能为:AChRab在补体的介导下,使AChR受损;AChRab加速AChR的降解代谢、直接阻断乙酰胆碱(ACh)对AChR的作用,有     

血清乙酰胆碱受体抗体阳性重症肌无力患者外周血BLyS mRNA的表达及其与乙酰胆碱受体抗体的关系

重症肌无力（Myasthenia Gravis,MG）是一种神经-肌肉接头处传递障碍的自身免疫性疾病,乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor,AChR）抗体是MG最主要的自身抗体。B淋巴细胞刺激因子（B lymphocyte stimulator,BLyS）是新近发现的关于B细胞存活、活化的重要细胞因子,与免疫反应密切相关,我们观察了BLyS mRNA在血清AChR抗体阳性MG患者的表达并分析了其与血清AChR抗体水平的关系,以探讨BLyS在MG发病中的地位和作用。     

烟碱型乙酰胆碱受体亚型的表达调控及其生理意义

位于哺乳动物神经肌肉接头突触后膜上的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)直接参与神经肌肉之间兴奋传递,对肌肉完成正常收缩功能具有十分重要的意义.nAChR是一种杂合五聚体蛋白,按亚单位组成的不同分为成熟型受体ε-AChR(α2βεδ)和胚胎型受体γ-AChR (α2βγδ).本文主要对两者在表达时期、分布范围、调控机制和生理意义方面的差异进行综述.     

鼻腔给予乙酰胆碱受体治疗实验性自身免疫性重症肌无力

实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)是由乙酰胆碱受体(AChR)加弗氏完全佐剂(CFA)免疫动物后制成的人类重症肌无力(MG)动物模型。业已证明EAMG和MG都是针对神经肌肉接头后膜烟碱型AChR的自身免疫性疾病,AChR抗体的产生受AChR特异性CD4~+T辅助细胞调节。 MG临床上至今尚无特异性治疗方法。     

电鳐乙酰胆碱受体的分离和纯化

[目的 ]分离和纯化具有活性的电鳐乙酰胆碱受体 .[方法 ]将电鳐电器官肌肉制成匀浆 ,细胞经裂解制备电鳐乙酰胆碱受体粗提液 .经眼镜蛇毒素偶联的Sepharose 4B层析柱亲和吸附 ,得到纯化的电鳐乙酰胆碱受体 .应用酶联免疫吸附试验检查纯化的电鳐乙酰胆碱受体与抗乙酰胆碱受体抗体的结合活性 .[结果 ]分离和纯化的电鳐乙酰胆碱受体能与抗乙酰胆碱受体抗体结合 ,且结合活性高 .[结论 ]从电鳐电器官中分离和纯化的乙酰胆碱受体活性高、特异性强 ,可作为抗原在酶联免疫吸附试验中用于检查抗乙酰胆碱受体抗体 .     

乙酰胆碱受体单克隆抗体对大鼠的致病性

[ 目的 ]筛选能引起重症肌无力的抗乙酰胆碱受体自身抗体 ,为探讨抗体的分子结构与致病性的关系准备材料 .[方法 ]将一株抗乙酰胆碱受体上主要免疫区的单克隆抗体A7被动地转移至健康大鼠 ,根据动物发病后的临床体征、体重丧失率和全身肌肉乙酰胆碱受体损失率判定致病性 .[结果 ]大鼠在接受A7注射后 48h即已出现严重的实验性自身免疫性重症肌无力 ,体重丧失率和全身肌肉乙酰胆碱受体损失率分别为 (6 .8± 1.7) %和 (38.4±7.2 ) % .[结论 ]A7是一株致病性很强的抗乙酰胆碱受体自身抗体     

从TE 671细胞株提取人乙酰胆碱受体

目的 ]分离提取具有活性的人乙酰胆碱受体 .[方法 ]用摇动培养瓶大量培养表达人乙酰胆碱受体的TE 671细胞株 ,细胞经裂解制备人乙酰胆碱受体提取液 .应用放射免疫测定法检测提取的人乙酰胆碱受体与抗人乙酰胆碱受体抗体的结合活性 .[结果 ]提取的人乙酰胆碱受体能与抗人乙酰胆碱受体抗体结合 ,且结合活性很高 ,含量为 1 8× 10 10 个乙酰胆碱受体分子 / 10 0 μL提取液 .[结论 ]从TE 671细胞株提取的人乙酰胆碱受体具有与相应抗体结合的功能 ,可以作为抗原应用于重症肌无力的研究     

乙酰胆碱受体单克隆抗体A49的序列分析

[ 目的 ]探讨重症肌无力自身抗体分子结构及其在发病机理中的作用 .[方法 ]利用聚合酶链反应从分泌乙酰胆碱受体单克隆抗体A49的杂交瘤细胞株扩增抗体的可变区基因 ,经转化受体菌大肠杆菌DH 5α克隆后 ,进行核苷酸序列分析 .[结果 ]A49的重链可变区基因由小鼠VHNP族基因编码 ,轻链可变区基因由小鼠Vk2组基因编码 ,与致病性乙酰胆碱受体抗体可变区核苷酸序列比较 ,其同源性均在 70 %以下 .[结论 ]A49分子结构与致病性乙酰胆碱受体抗体不同 ,A49诱导大鼠实验性自身免疫性重症肌无力的测定将有助于揭示抗体分子结构与致病性的关系     

小鼠全身骨骼肌乙酰胆碱受体含量的测定

[目的 ]建立测定小鼠全身肌肉乙酰胆碱受体含量的方法 ,应用于实验性自身免疫性重症肌无力病情的判定 .[方法 ]从实验性自身免疫性重症肌无力小鼠全身肌肉中提取乙酰胆碱受体 ,应用放射免疫测定法测定小鼠全身肌肉乙酰胆碱受体的含量 .[结果 ]经计算得出 ,实验性自身免疫性重症肌无力小鼠全身肌肉中的乙酰胆碱受体含量为 19 8fmol,每克肌肉的乙酰胆碱受体含量为 4 4fmol.[结论 ]此方法具有简单、省时、耗材少的特点 ,适用于重症肌无力及实验性自身免疫性重症肌无力的研究 .     

烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21对鼠实验性结肠炎的影响

目的：通过建立葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的鼠结肠炎模型,探讨alpha7烟碱型乙酰胆碱受体(alpha7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)激动剂GTS-21改善模型鼠结肠炎症的效果及可能机制。方法：8～10 周龄 SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照(CON)组、DSS模型组、GTS-21治疗组(每组8只)。DSS模型组采用自由饮用含3.5％DSS水造模,治疗组自由饮用3.5%DSS水,同时给予GTS-21［10 mg/(kg·d),腹腔注射］,共7 d,对照组予生理盐水,每天予各组鼠疾病活动性评分(DAI评分)。第8天处死小鼠,观察结肠黏膜组织大体改变并测其长度、湿重,HE染色后行肠组织学炎症(HI)评分;细胞因子芯片筛选变化的细胞因子;ELISA法进一步检测芯片筛选出的变化明显的细胞因子。结果：①DSS组鼠结肠长度变短［(8.22± 0.37)cm vs.(11.65±0.30)cm,n=8,P＜0.001］,DAI评分较正常组增高［(1.51±0.10)分 vs.0分,n=8,P＜0.001］,HI评分升高［(20.5± 3.9)分 vs.(0.9± 0.4)分,n=8,P＜0.001］,表明造模成功;②给予烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21的DSS模型鼠,DAI评分下降［(0.25±0.10)分 vs.(1.51±0.10)分,n=8,P＜0.001］;结肠长度较DSS组改善［(9.42± 0.32)cm vs.(8.22± 0.37)cm,n=8,P＜0.05］;HI评分减低［(7.5± 2.0)分 vs(20.5± 3.9)分,n=8,P＜0.01］,提示GTS-21能改善DSS诱导的鼠结肠炎症;③细胞因子芯片筛选实验结果表明,DSS组γ干扰素诱导单核细胞因子(monokine induced by IFN-γ,CXCL9/Mig)升高最明显,此外肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、γ-干扰素(interferon γ,IFN-γ)也明显升高;④进一步ELISA检测芯片变化最明显的CXCL9/Mig,发现DSS组鼠血清CXCL9/Mig明显升高(P＜0.05),给予GTS-21后,血清CXCL9/Mig降低(P＜0.05)。结论：GTS-21能减轻实验结肠炎鼠肠道炎症,该作用可能与减低趋化因子CXCL9/Mig水平,进而减少炎症细胞的肠道聚集有关。     

HLA antigens and acetylcholine receptor antibodies in penicillamine induced myasthenia gravis

Antibodies to the acetylcholine receptor and HLA antigens have been studied in patients with myasthenia gravis occurring in association with penicillamine treatment. The properties of the antiacetylcholine receptor in these patients differed from those in patients with idiopathic myasthenia gravis in terms of specificity and affinity. These patients had an increased prevalence of HLA Bw35 and DR1 compared to controls and a decreased frequency of B8 and DR3 compared to patients with idiopathic myasthenia gravis. Likewise, they had a decreased frequency of DR4 compared to patients with rheumatoid arthritis. These data provide supportive evidence for a role for penicillamine in the induction of myasthenia gravis in genetically predisposed individuals.