益赛普对脂多糖引起大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 探讨注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普,rhu TNFR:Fc)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致大鼠急性肝损伤的保护作用及作用机制.方法健康成年SD大鼠48只,随机分为4组:对照组,益赛普组,LPS模型组(急性肝损伤组)和益赛普+LPS组(益赛普治疗组),每组12只.大鼠禁食12 h后麻醉并行颈动脉插管,颈动脉插管后连接到ALC-MPA多道牛物信号分析系统监测血压,对照组注射等体积生理盐水;益赛普组24 h前皮下注射益赛普0.4mg/kg,插管稳定后舌下静脉注射等体积生理盐水;LPS模型组舌下静脉注射LPS 10mg/kg;益赛普+LPS组24 h前皮下注射益赛普0.4 mg/kg,然后舌下静脉注射LPS 10 mg/kg,此过程每组6只采用多道生物信号分析系统监测各组大鼠血压变化和大鼠死亡情况,并计算各组存活率,平均血压低于10 mmHg时记为大鼠死亡并即刻取肝,右叶同一部位肝组织10%中性福尔马林固定,部分保存于-80℃.观察6 h仍未死亡即处死.每组的另外6只大鼠在LPS或生理盐水注射后0.5 h采血2 mL,离心后取其上清液,保存于-80℃,用于测定TNF-α含量和活性,3 h再采血用于测定ALT、AST的含量.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量和用流式细胞术测其活性;生化法测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)含量;同时测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)含量及观察肝脏的形态学变化.应用单因素方差分析TNF-α含量及其活性、ALT、ASY含量以及MPO和MDA含量,X~2检验分析大鼠存活率.结果 对照组和益赛普组大鼠在观察期间(6 h)全部存活;益赛普+LPS组较LPS组:大鼠存活率提高(67%vs.17%,P<0.05),TNF-α活性低[(7.3±2.8)%vs.(51.3±6.4)%,P<0.05],肝组织的SOD活性增高[(188.4±20.2)U/mg prot vs.(142.5±18.3)U/mg prot,P<0.05];肝组织MPO活性降低[(0.38±0.04)U/g vs.(0.54±0.02)U/g,P<0.05]肝组织MDA含量降低[(1.40±0.10)nmol/mg prot vs.(2.81±0.11)nmol/mgprot,P<0.05],同时益赛普可降低血清AST、ALT,减轻肝组织的病理损伤.结论益赛普对LPS所致急性肝损伤有保护作用,其机制主要是与抑制TNF-α活性和抗氧化作用有关.     

血清肿瘤坏死因子α和肝细胞生长因子水平的变化在急性胰腺炎患者中的临床意义

目的了解血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肝细胞生长因子(HGF)的水平变化情况对急性胰腺炎(AP)患者的临床意义。方法选取2009年1月至2011年12月在本院就诊的51例AP患者作为观察组,另选取50例健康体检者作为健康对照组,分别采用酶联免疫吸附试验测定血清TNF-α和HGF水平,比较2组之间的差异。结果观察组血清TNF-α和HGF水平均明显高于健康对照组(P<0.01),在发病第1天,重症AP患者TNF-α水平明显高于轻症AP患者,而HGF则轻症AP患者较高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 TNF-α和HGF参与了AP的发生发展过程,可作为AP早期诊断的参考指标。     

肝细胞生长因子在急性肺损伤中的修复作用

关于急性肺损伤(acute lung injuru，ALI)后肺组织的修复过程目前还知之甚少。有研究认为，许多生长因子均参与了这一过程，肝细胞生长因子作为肺上皮细胞最强的促有丝分裂剂，它能通过促进上皮细胞分化增生、抑制纤维化反应、保护内皮细胞、调节其他炎性因子的分泌来帮助修复受损伤的肺组织，在ALI的治疗中有巨大潜力。1984年，Nakamura等从部分肝切除大鼠的血清中分离到一种能刺激原代培养的肝细胞生长的因子，并首次将它命名为肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)。     

促肝细胞生长因子对ConA致小鼠肝损伤保护机制探讨

目的探讨促肝细胞生长因子（pHCF）对ConA所致肝损伤的保护机制。方法将80只小鼠随机分成对照组、模型组和保护组。对照组经尾静脉注射生理盐水0．3ml／只，模型组和保护组刀豆蛋白A（ConA）注射等体积的ConA（20mg／kg），但保护组在实验前24h和1h经腹腔注射pHGF（300μg/kg／次）。观察各组小鼠的血清IL-18、NO浓度及ALT活性。结果模型组IL-18、NO浓度及ALT活性均显著高于对照组，模型组NO浓度及ALT活性均显著高于保护组，保护组IL-18浓度显著高于对照组；模型组IL-18、NO浓度与ALT活性呈显著正相关，IL-18与NO浓度也呈显著正相关。结论IL-18在ConA诱发肝损伤过程中具有重要作用但不是唯一途径，pHGF对ConA诱发肝损伤的保护作用是复杂的，可能是经过其它未知的途径降低NO以及对肝脏发挥保护作用的。     

川芎嗪对急性肺损伤的保护作用

目的：研究川芎嗪对急性肺损伤的保护作用。方法：家兔24只，随机分为3组。A组为假手术组，只进行相应的手术操作；B组和C组制作失血性休克模型，造成急性肺损伤，然后在20min内复苏，C组复苏时应用用芎嗪。测定动脉血浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量、支气管肺泡灌洗液（BALF）中巨噬细胞（PAM）和中性粒细胞（PMN）总数．BALF中蛋白含量和肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）含量；计算肺组织含水率；光镜下观察肺组织形态学改变。结果：与A组比较，复苏后B、C组TNF-α含量、BALF中的蛋白含量和PMN总数、肺组织含水率明显升高，SOD含量明显降低。但C组上述指标的变化程度均低于B组。光镜下见B组肺组织间质水肿、细胞浸润明显，与之相比C组肺组织以上改变明显减轻。结论：川芎嗪时急性肺损伤具有保护作用。     

内毒素致急性肝损伤机制的实验研究

目的 研究内毒素肝损伤时，枯否氏细胞（Kupffer cells,KC）逐步由免疫防御型转变为效应型致肝损伤的机理。方法 昆明种小鼠72只，一次性尾静脉内注射不同剂量（1mg/kg、10mg/kg）大肠杆菌内毒素（LPS），复制内毒素肝损伤模型。采用免疫组化方法观察小鼠肝脏清道夫受体（scavenger receptor,SR），CD14表达变化；酶联免疫吸附法（ELISA）测定肝组织肿瘤坏死因子（TNF－α）、白介素－6（IL－6）的水平，光镜观察肝组织学变化。结果 内毒素肝损伤过程中，KC表面SR进行性下调，且与内毒素呈明显的量效关系；KC表面CD14表达呈进行性上调，但加大内毒素剂量并未使其进一步增加。SR表达的平均光密度值（OD值）与肝组织TNF－α、IL－6及血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）呈显著的负相关，CD14表达的平均OD值与肝组织TNF－α、IL－6及血浆ALT、TBIL水平呈显著的正相关。结论 内毒素肝损伤过程中，枯否氏细胞SR表达下调，CD14表达上调可能是枯否氏细胞由免疫防御细胞转化为致炎效应细胞导致肝损伤的机制之一。     

肝细胞生长因子与急性肾损伤

肝细胞生长因子（HGF）属于可溶性细胞因子家族，是一种多效性因子，肾脏是HGF表达水平最高的器官。近年来研究发现在急性肾损伤（AKI）时，血清及肾脏局部HGF浓度有显著变化，提示HGF与AKI之间有着紧密联系。     

黄芪对内毒素性急性肺损伤大鼠肝细胞生长因子表达的影响

目的：探讨黄芪在急性肺损伤（ALI）时对肝细胞生长因子（HGF）表达的影响，评价黄芪在ALI中的治疗机制。方法：制备内毒素（LPS）性ALI模型。设正常对照组（生理盐水1ml／kg）、模型组（LPS5mg／kg）、黄芪治疗组（黄芪8mg／kg）。用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组大鼠肺组织匀浆中HGFmRNA表达的变化；用免疫组化法检测各组大鼠肺组织中HGF阳性细胞数的变化。结果：RT—PCR检测结果显示，ALl时HGF mRNA表达明显增加（P〈0．05），黄芪能促使HGFmRNA表达进一步升高（P〈0．05）。免疫组化显示，ALI时HGF阳性细胞表达产物增加（P〈0．01），黄芪能促进HGF的表达（P〈0．05）。结论：黄芪通过促进HGF的表达来促进ALI的修复。     

丹参磷脂浸膏对急性四氯化碳肝损伤小鼠肝组织的保护作用

目的探讨丹参磷脂浸膏(DSLZ)对实验小鼠肝损伤的保护作用。方法 ICR小鼠60只,随机分为空白对照组、模型组及丹参磷脂浸膏高、中、低剂量组和阳性对照丹参酮IIA(SalviolⅡA IIA)组,采用四氯化碳(CCl4)法建立急性肝损伤实验动物模型,观察丹参磷脂浸膏对实验小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)以及肝组织病理改变的影响。结果与空白对照组比较,模型组小鼠血清ALT、AST及MDA均显著增高(P0.01),GSH明显降低(P0.01)。丹参磷脂浸膏高、中剂量组ALT、AST及MDA明显降低(P0.05或P0.01),GSH明显升高(P0.05或P0.01)。HE染色显示丹参磷脂浸膏组小鼠肝组织病理损伤减轻。结论丹参磷脂浸膏对小鼠急性四氯化碳性肝损伤具有明显的抑制作用,其机制可能与抗氧化有关。     

铁调素在小鼠急性肝损伤过程中的保护作用研究

目的明确铁调素(hepcidin)在小鼠急性肝损伤过程中对于肝细胞的保护作用。方法首先在野生型C57BL/6小鼠(WT小鼠)与hepcidin敲除小鼠(HAMP~(-/-)小鼠)分别建立四氯化碳(CCl_4)诱导的急性肝损伤模型,分别以橄榄油处理组作为对照组。然后检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的差异;通过苏木精-伊红染色法检测2种小鼠肝组织形态的变化;采用免疫组化的方法检测2种小鼠肝组织内肿瘤抑制基因P53与凋亡抑制基因Bcl-xl表达的差异;采用Real-time PCR(qPCR)检测2种小鼠肝组织内Fasl及Bcl-xl基因的表达情况;最后,采用流式细胞术检测hepcidin蛋白对于肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与放线菌素D(Act D)诱导的肝细胞系NCTC 1469凋亡的抑制作用。结果 CCl_4暴露的HAMP~(-/-)小鼠血清中AST和ALT含量较CCl_4暴露的WT小鼠更高(升高倍数分别为2. 7倍和3. 7倍),并且两组差异具有统计学意义(分别为P 0. 05和P 0. 01);苏木精-伊红染色结果显示,在CCl_4暴露的HAMP~(-/-)小鼠中炎症细胞浸润较WT小鼠严重;免疫组化显示,肿瘤抑制基因P53含量在CCl_4暴露的HAMP~(-/-)小鼠较WT小鼠升高,而凋亡抑制基因Bcl-xl含量在CCl_4暴露的HAMP~(-/-)小鼠较WT小鼠降低; q PCR结果显示,Fasl在WT小鼠和HAMP~(-/-)小鼠的CCl_4组较其对照组(Olive组)升高,但HAMP~(-/-)小鼠经CCl_4刺激后,Fasl表达量较WT小鼠CCl_4组升高了1. 2倍,而凋亡抑制基因Bcl-xl的表达量在HAMP~(-/-)小鼠的CCl_4组为WT小鼠的CCl_4组的0. 9倍;体外实验中流式细胞术结果显示,hepcidin蛋白可以有效抑制TNF-α与Act D诱导的肝细胞凋亡。结论Hepcidin可以通过调控凋亡相关基因的表达,抑制肝细胞凋亡,进而发挥对急性肝损伤的保护作用。     

己酮可可碱对大鼠内毒素性急性肺损伤iNOS和NO的影响

目的 :探讨己酮可可碱 (PTX)对大鼠内毒素性急性肺损伤 (ALI)iNOS和NO的影响。方法 :采用大鼠内毒素ALI模型。 2 4只SD大鼠随机分为生理盐水对照组 (CON)、内毒素组 (LPS)和PTX组 ,每组 8只。观察PTX对氧合指数 (PaO2 /FiO2 )、支气管肺泡灌洗液 (BAL)中蛋白含量、肺组织iNOS、NO3- /NO2 - 、髓过氧化物酶 (MPO)活性的影响 ,计算肺湿 /干比值(W /D)并行肺组织病理学检查。结果 :PTX组自 2h起各时间点PaO2 /FiO2 均高于LPS组 (P <0 0 5 ) ,W /D、BAL中蛋白含量、肺组织iNOS、NO含量和MPO活性均较LPS组显著降低 (P <0 0 5 )。病理学检查显示PTX组肺组织损伤程度较LPS组减轻。结论 :PTX对内毒素性ALI的保护作用可能与其抑制肺组织iNOS活性和减少NO生成有关。     

内毒素性急性肺损伤大鼠肺HO-1的表达及其意义

目的观察内毒素(LPS)性急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,探讨其意义。方法18只SD大鼠随机均分为ALI、锌原卟啉(ZnPP)预处理和正常对照3组,尾静脉注射给药。ALI组注入LPS 5 mg/kg,对照组注入生理盐水,ZnPP预处理组注入ZnPP 10μmol/kg 10 min后再注入LPS 5 mg/kg,各组注入液体总量相同。3 h后腹主动脉放血处死大鼠,生理盐水肺灌洗,取左肺制作组织匀浆,TRIZOL法提取总RNA后,用半定量逆转录聚合酶链反应(SqRT-PCR)测定HO-1 mRNA;另取右下肺制作病理切片,光镜观察并盲法评分比较肺组织学变化。结果静脉注入LPS后大鼠肺组织HO-1 mRNA的表达明显上调(P<0.05),肺损伤严重,评分显著增加;ZnPP预处理组ALI大鼠肺组织HO-1 mRNA的表达明显受抑,肺损伤更严重,评分更高(P<0.05);直线相关分析显示,HO-1 mRNA的受抑程度与损伤评分呈显著负相关(P<0.05)。结论内毒素性ALI肺组织表达上调的HO-1对肺损伤有一定的保护作用。     

缺血预处理对离体大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响

目的 :研究缺血预处理 (IP)对离体大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响。方法 :建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。 18只SD大鼠随机分为 3组 ,每组 6只。对照组 (Con)持续平衡灌注通气 60min ,无缺血 ;缺血再灌注组 (IR)缺血 45min ,再灌注 3 0min ;缺血预处理组 (IP)先给予连续 2次的 5min缺血、5min再灌注的预处理 ,再行缺血 45min和再灌注 3 0min。测定缺血前和再灌注末灌注液中丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)和白细胞数量 ,测定再灌注末肺组织髓过氧化物酶 (MPO)活性、黄嘌呤氧化酶 (XOD)活性和湿 /干比 (W /D)。结果 :IR组再灌末MDA含量、MPO活性、XOD活性和W /D较Con组明显升高 (P <0 0 1) ,而SOD活性则显著下降 (P <0 0 1)。IP能明显减少再灌后MDA、MPO、XOD和W /D的增加 ,提高SOD的活性 (P <0 0 1)。结论 :IP能明显抑制离体大鼠肺缺血再灌注导致的氧化损伤。     

皮内注射对急性内脏炎症痛大鼠的抗伤害效应和对脊髓Fos表达的影响

目的:观察皮内注射对福尔马林诱导的急性内脏炎症痛大鼠是否具有抗伤害效应和对脊髓Fos蛋白表达的影响. 方法:实验选用SD大鼠随机分为7组:单纯福尔马林致炎组(F);0.25%利多卡因实验区皮内注射组(F-0.25%L-IN);0.25%利多卡因实验区外皮内注射组(F-0.25%L-OUT);0.125%利多卡因实验区皮内注射组(F-0.125%L-IN);0.125%利多卡因实验区外皮内注射组(F-0.125%L-OUT);生理盐水实验区皮内注射组(F-S-IN);生理盐水实验区外皮内注射组(F-S-OUT).对各组大鼠分别进行疼痛学评分,每15min为一个时间段,共4次,1h后取出S1脊髓节段以免疫组化法检测FLI阳性神经元. 结果:各组在第一个时间段内疼痛学评分差异无显著性(P＞0.05);在第三、第四个时间段内F组和F-0.25%L-IN、F-0.25%L-OUT、F-S-IN组相比疼痛学评分差异有显著性(P＜0.01)而和F-0.125%L-IN、F-0.125%L-OUT、F-S-OUT相比疼痛学评分差异无显著性(P＞0.05);脊髓Fos阳性神经元数量在F-0.25%L-IN、F-0.25%L-OUT、F-S-IN组均显著减少(P＜0.01). 结论:Fos阳性神经元可能参与了化学性致痛信息的传导和调控.     

中性粒细胞趋化因子在大鼠早期急性肺损伤肺组织中的动态变化

目的建立大鼠急性肺损伤(ALI)模型,检测肺组织中性粒细胞趋化因子(CINC)的动态变化,探讨CINC与急性肺损伤发病的关系。方法48只SD大鼠随机分为急性肺损伤组(ALI组)和正常对照组(NC组)。通过腹腔注射脂多糖(LPS,3 mg/kg)建立急性肺损伤模型。用免疫组织化学法和半定量RT-PCR分别检测CINC蛋白及其mRNA在造模后1、2和6 h肺组织中的表达变化。结果CINC在急性肺损伤组肺组织中表达明显高于正常对照组;正常肺组织中有微量CINC mR-NA表达,给药2 h后迅速上升,至6 h时其表达进一步增强(P<0.001)。而在正常组CINC的蛋白和基因水平表达均不明显。结论CINC在急性肺损伤中扮演重要的角色,参与急性肺损伤早期发病过程。     

促肝细胞生长素联合复方丹参注射液治疗慢性重型肝炎临床疗效观察

目的：探讨慢性重型肝炎的治疗方法,降低其病死率。方法：在综合治疗的基础上,采用促肝细胞生长素（HGF）联合复方丹参注射液治疗慢性重型肝炎。结果：HGF与丹参合用,能降低血清胆红素（SB）,缩短凝血酶原时间（PT）复常时间,降低病死率,与对照组相比有显著性差异（P＜0.01）。结论：慢性重型肝炎治疗的疗程较长,二者联合使用能有效缩短疗程,且二者的使用环节不同,可能有协同或相加作用。     

低温对大鼠急性肺损伤肺脂质过氧化的影响

目的 :探讨 3 2 5℃～ 3 3℃低温对大鼠内毒素性急性肺损伤 (ALI)肺脂质过氧化的影响。方法 :采用大鼠腹腔注射内毒素 ,16h后再行气管内滴注内毒素的方法建立ALI模型。 2 4只雄性SD大鼠随机分为 3组 :正常对照组、内毒素组、低温组。ALI后 4h ,检测肺组织丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :3组各时间点MAP、CVP相比无统计学意义 ( P>0 0 5)。内毒素组大鼠肺组织MDA含量显著高于正常对照组 ,SOD活性显著下降 ( P <0 0 5)。低温组SOD活性显著高于内毒素组 ,MDA含量也显著下降 (P <0 0 5) ,但与对照组相比无统计学意义 (P >0 0 5)。结论 :低温可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤肺组织脂质过氧化。     

EFFECTS OF BLOOD TRANSFUSION ON BONE MARROW TRANSPLANTATION IN RATS WITH RADIATION-BURN COMBINED INJURY

The effects of pre-irradiation blood transfusion(BT)on survival rateof radiation-burn combinedly injured rats receiving bone marrow transplantation(BMT) were studied. It was found that after 9-11 Gy of radiation was given, the 90-daysurvival rate of the rats receiving BT(72%) and BMT was significantly higher than thatof those receiving BMT only(42%)(P<0.01).In those rats surviving over 100 days,cells of donor type could be found. In the first 30 days of surviving, the number of Tcells was significantly higher in the BMT alone group than in the group of BMT plusBT, but no difference In restoration of B cell was revealed. The findings suggest that BTcould promote the recipient's tolerance to BMT. The effects of BT on BMT are similarto those on skin grafting.     

大鼠急性脊髓损伤后GFAP和VEGF表达及相关性

目的观察大鼠急性脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化,并分析其相关性。方法 SD大鼠36只,随机分为损伤后6 h、12 h、1 d、3 d、7 d组及假手术组共6组,每组6只,其中假手术组只做椎板切除。采用免疫组化SABC法检测GFAP和VEGF的动态表达情况,并进行相关性分析。结果脊髓损伤后GFAP和VEGF水平均增高,两者有显著相关性（r=0.676,P〈0.01）。其中GFAP在损伤后的表达呈进行性增加,而VEGF的表达则在3 d左右达到高峰。结论 GFAP和VEGF在大鼠急性脊髓损伤后存在协同表达机制。     

阿魏酸对过氧化氢损伤内皮细胞的保护作用

[目的]通过考察信号转导途径MAPK家族研究阿魏酸对氧化损伤的内皮细胞的保护作用机理。[方法]噻唑兰（MTY）比色法检测细胞活力，免疫印迹分析（western-blot）方法检测蛋白磷酸化。[结果]发现用过氧化氢刺激内皮细胞会使将近50％左右细胞死亡，而阿魏酸的加入可以使细胞活力恢复到正常水平的90％左右。并发现过氧化氢可以激活MAPK家族（ERK、p38、JNK），而阿魏酸的加入可以抑制这种作用。[结论]推测阿魏酸可能通过抑制外源性H2O2介导的MAPK途径的激活，从而起到对氧化损伤内皮细胞的保护作用。