膜联蛋白A4在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的观察膜联蛋白A4（Annexin A4）在不同肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达情况,探讨其临床病理意义。方法先应用RT-PCR验证ANX A4在不同类型肝组织中mRNA的表达,再应用免疫组织化学方法检测在15例正常肝组织、15例乙肝后肝硬化组织和63例不同表型肝癌组织标本中的表达,探讨其差异表达与临床病理资料之间的联系及其意义。结果（1）ANX A4mRNA表达水平在肝硬化及肝癌组织中均比正常肝组织上调（P〈0．05）,但肝硬化组与肝癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;（2）ANXA4蛋白阳性表达率正常肝组织为20％,乙肝后肝硬化组织为26．67％;在63例HCC中阳性率为49．21％,癌旁组织为61．90％,其中小肝癌阳性率为50．00％,大肝癌为64．29％,多发癌为28．57％,相应癌旁组织阳性率分别为50．00％、64．29％、66．67％。随着肝细胞的恶性转化并进展,ANXA4蛋白呈逐渐上调趋势,但当肿瘤出现侵袭转移时反而下调。与临床病理指标的相关性研究表明Annexin A4与HCC进展及侵袭相关。结论（1）从正常肝一肝硬化一肝癌组织,Annexin A4的mRNA表达水平逐渐上调;（2）ANxA4蛋白在HCC组织中的表达明显失调,其变化可能与HCC进展及侵袭相关。     

p28GANK蛋白在肝细胞性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨p28GANK蛋白在肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法收集HCC组织及其相应癌旁组织60例（其中32例伴有肝硬化组织）、正常肝组织30例,采用免疫组化法检测HCC、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织组织中p28GANK蛋白的表达,分析p28GANK蛋白表达水平与HCC患者临床病理特征关系。结果 p28GANK蛋白在HCC、癌旁肝组织、肝硬化组织性、正常肝组织阳性表达率分别为71．7％、10．0％、12．5％、6．7％,HCC中p28GANK蛋白的阳性表达率高于其他组织（P＜0．05）。 HCC患者中,低分化（Ⅲ～Ⅳ级）、淋巴结和（或）远处转移及TNM分期Ⅲ＋Ⅳ者p28GANK蛋白表达阳性率分别高于高分化（Ⅰ～Ⅱ级）、无淋巴结和（或）远处转移、TNM分期Ⅰ＋Ⅱ者（P＜0．05）。结论 p28GANK蛋白表达可能与HCC的发生发展有关,p28GANK可作为HCC诊断的分子标志物。     

β-catenin在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）B—catenin的表达与HCC临床病理特征的关系。方法应用Envsion法检测333例HCC,168例癌旁肝组织及89例正常肝组织的β-catenin表达;RT—PCR检测37例HCC及癌旁组织,肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞株L02的β-cateninmRNA表达。结果β-catenin在HCC胞质、胞核的阳性表达率为79％／37％;在癌旁和正常肝组织中的表达率为72％／0％、70％／0％。差异均有统计学意义（P均〈0．05）。且分化好的癌细胞表达低,分化差的细胞表达高。同时,HCC和HepG2的β-cateninmRNA表达高于癌旁组织及LO2的表达。结论肝细胞癌的β-catenin过表达提示其在癌的发生过程中可能起着促癌的作用。     

Glypican-3在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的：探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3）在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达状况及其临床意义。方法: 应用免疫组化S-P法检测原发性肝细胞性肝癌150例、肝硬化50例、肝炎50例、正常肝组织10例中Glypican-3的表达。结果：Glypican-3主要表达于细胞浆,原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的Glypican-3蛋白阳性表达率分别是63.33％（95/150）、34.00％（17/50）、28.00％（14/50）、0%(0/10),四者之间的差异有统计学意义（χ2=35.36,P< 0.05）,且Glypican-3在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达明显高于在正常肝组织中的表达（χ2=13.07,P< 0.05）。结论: Glypican-3异常表达与原发性肝细胞性肝癌的发展密切相关,在原发性肝细胞性肝癌的发展过程中起非常重要的作用。     

EZH2在肝癌中的表达及其临床意义

目的：分析果蝇zeste基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2, EZH2） 在原发性肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化非生物素两步法检测HCC42例、癌旁组织42例、正常肝组织19例EZH2蛋白的表达。结果：HCC、癌旁组织和正常肝组织的EZH2蛋白阳性表达率分别是57．71％（24／42）、16．67％（7／42）、10％（1／10）,三者之间的差异有统计学意义（χ^2=8．13,P〈0．01）,且EZH2蛋自在HCC中的表达明显高于癌旁组织以及正常肝组织中的表达（χ^2=14．78,χ^2=7．19,P〈0．01）。EZH2表达与临床病理因素无关（P〉0．05）。结论：EZH2异常表达与HCC的发生密切相关。     

原发性肝癌组织中PTEN、p27的表达

目的探讨病理抑癌基因PTEN、p27在原发性肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达与病理学特征、预后的关系及两者的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测5例正常肝组织、10例肝硬化组织、45例原发性肝细胞性肝癌组织中PTEN、p27的表达状况。结果45例HCC中PTEN、p27蛋白的阳性表达率（51．1％和40．0％）和阳性强度明显低于肝硬化组织（90．0％和100．0％）和正常肝组织（100．0％和100．0％）,PTEN、p27蛋白的阳性表达率与组织分化、癌肿直径、有无癌栓密切相关。双变量相关分析,PTEN在肝癌组织中的表达与p27在肝癌组织中的表达呈显著的正相关。结论PTEN、p27在肝癌组织中的表达与其组织分化等病理学特征密切相关。     

GPC3与AFP在肝硬化异型增生结节及肝细胞癌中的表达及意义

目的观察GPC3、AFP在肝硬化高度异型增生结节及肝细胞癌中的表达,探讨其在肝细胞癌诊断及鉴别诊断中的作用及意义.方法应用免疫组织化学Envision法检测GPC3、AFP在肝硬化高度异型增生结节、肝细胞癌及正常肝组织中的表达.结果 GPC3在进展期HCC中的表达阳性率为86.36%（38/44）,在高分化HCC中的表达阳性率为68.18%（15/22）,在肝硬化伴高度异型增生结节中的表达阳性率为45%（9/20）,在正常肝组织中无阳性表达（0/20）.AFP在进展期HCC中的表达阳性率为47.72%（21/44）,在高分化HCC中的表达阳性率为27.27%（6/22）,在肝硬化伴高度异型增生结节中的表达阳性率为15%（3/20）,在正常肝组织中无阳性表达（0/20）.结论 GPC3是一个较敏感及特异的标记物,可以和AFP联合应用协助诊断肝细胞癌.     

bcl—2、P53和p21基因蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的：了解抑凋亡基因bcl-2、抑癌基因p53和癌基因p21基因蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达状况及意义。方法：用bcl-2、p53和p21基因蛋白抗体对55例肝细胞癌合并结节性肝硬变手术标本进行S－P免疫组化检测,分析基因蛋白表达率与病理分级和预后的关系。结果：bcl-2基因蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为72．7％（40／55）和36．4％（20／55）,两者存在差异（P＜0．05）;p53蛋白在HCC中表达率为54．5％（30／55）,而肝硬变组织均呈阴性表达,两者存在显著差异（P＜0．01）;p21蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为63．6％（35／55）和38．2％（21／55）,两者无差异（P＞0．05）;而bcl-2、p53和p21的表达率和表达强度均与HCC的病理分级无关（P＞0．05）。另外,在随访29例HCC患者中发现生存率短组（6个月至1年）的16例中,bcl-2、p53和p21的共同表达率为50％（8／16）。研究结果提示：HCC的发生、发展与bcl-2、p53和p21蛋白的异常表达或突变有关;bcl-2、p53和p21之间可能存在相互协同作用,对HCC的预后有一定的影响;bcl-2、p53和p21蛋白过度表达反应了HCC癌细胞的分化程度及增殖情况,因而可作为HCC诊断和预后的参考指标之一。     

膜蛋白DLK1在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨DLK1蛋白及甲胎蛋白（AFP）在肝细胞癌（HCC）组织中表达的临床意义。方法用免疫组织化学法检测88例HCC患者肝癌组织和癌旁肝组织中DLK1及AFP的表达。结果88例HCC患者肝癌组织中DLK1蛋白阳性50例（56．8％），AFP阳性39例（44．3％）。其中在AFP阴性组中仍有高达25．0％的DLK1蛋白呈明显的阳性表达。DLK1在肝癌组织中的阳性率明显高于AFP。所有患者癌旁肝组织DLK1蛋白及AFP均为阴性。结论DLK1蛋白检测对HCC有重要的诊断价值，肝组织DLK1蛋白和AFP联合检测可以明显提高HCC的病理诊断率。     

LAT在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨T细胞活化连接蛋白（LAT）在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达状况及其临床意义。方法 应用免疫组化S-P法检测原发性肝细胞性肝癌50例、肝硬化30例、肝炎30例、正常肝组织10例中LAT的表达。结果 LAT主要表达于细胞核,原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的LAT蛋白阳性表达率分别是54.00％（27/50）、33.33％（10/30）、33.33％（10/30）、10.00%(1/10), 4者之间的差异有显著性（χ2=8.90 , P< 0.05）,且LAT在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达明显高于在正常肝组织中的表达（χ2=6.31, P< 0.05）。结论 LAT异常表达与原发性肝细胞性肝癌的发展密切相关,在原发性肝细胞性肝癌的发展过程中起非常重要的作用。     

促凋亡基因bax在胆管癌中的表达与意义

目的：研究促凋亡基因ｂａｘ在胆管癌（ＣＨＣ）中的表达与意义。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及免疫组织化学ＳＡＢＣ法。结果：在７２例ＣＨＣ中，Ｂａｘ阳性４４例（６１．１％）；用于对照的２５例肝细胞肝癌的癌旁肝组织汇管区胆管上皮Ｂａｘ阳性８例（３２％）。ｂａｘ在ＣＨＣ中的表达强于正常对照组（Ｐ〈０．０１），在其中５３例高、中分化的ＣＨＣ的表达强于在１９例低分化ＣＨＣ的表达（Ｐ〈０．０１），在肝内胆管     

抑癌基因FHIT和PTEN在肝细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨FHIT和PTEN基因在肝细胞癌（HCC）中的表达及其意义。方法：采用免疫组化Envision二步法检测FHIT蛋白及PTEN蛋白在44例HCC组织及10例正常肝组织中的表达。结果：44例肝细胞癌组织中FHIT和PTEN蛋白的阴性表达率分别为38.6%（17/44）和47.7%（21/44）,10例正常肝组织中FHIT和PTEN蛋白的阴性表达率均为0,两种抑癌基因在肝细胞癌组织与正常肝组织中的阴性表达率之间差异有统计学意义（P＜0.05）。在HCC中FHIT基因的阴性表达率与HCC的病理分级、TNM临床分期和肿瘤直径有关（P＜0.05）,与AFP水平、HBsAg（＋）和有无包膜无关（P＞0.05）。PTEN蛋白的阴性表达率与病理分级显著相关（P＜0.05）,与TNM分期、肿瘤直径、AFP水平、HBsAg（＋）和有无包膜无关（P＞0.05）。相关性分析发现,FHIT和PTEN在HCC中的阴性表达呈正相关（rs=0.427,P＜0.01）。分别比较FHIT和PTEN在HCC中蛋白阳性和阴性表达者的术后1、3年生存率,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：FHIT和PTEN蛋白的异常表达与HCC的发生、发展有关,两者可能存在协同作用。FHIT可能是判断HCC恶性程度、侵袭能力和不良预后的重要指标,PTEN可能是判断HCC恶性程度和不良预后的指标。     

肝细胞不典型增生与肝硬化和HBV的关系

用组织学和免疫组化方法探讨116例肝组织中的肝细胞不典型增生(LCD)发生率和乙型肝炎病毒(HBV)抗原的表达情况.发现肝细胞癌(HCC)伴肝硬化的LCD发生率为21/30(70%),单纯肝硬化为2/10(20%),HCC不伴肝硬化1/12(8.33%),正常对照1/64(1.56%).试验组52例中有46例HBsAg阳性,其中24例有LCD(52.17%),而6例HBsAg阴性肝组织中无1例有LCD(P<0.05).52例中22例HBcAg阳性,其中14例有LCD(63.64%);30例HBcAg阴性,10例有LCD(33.33%),前者LCD发生率明显高于后者(P<0.05).结果还发现,HBsAg和HBcAg阳性肝硬化的LCD发生率(65.71%,77.78%)明显高于HBsAg和HBcAg阴性的肝硬化及HBsAg、HBcAg阳性的非肝硬化病例(P<0.01,P<0.05).表明LCD的发生与肝硬化和HBV都有关.     

Relationship between hepatitis C virus infection and expression of apoptosis-related gene bcl-2, bax and ICH-1 in hepatocellular carcinoma tissues]

OBJECTIVE: To study the association between hepatitis C virus (HCV) infection and expression of apoptosis-related gene bcl-2, bax and ICH-1, and explore the significance of HCV infection in the tumorigenesis of hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: The expression of HCV antigen (NS5) along with bcl-2, bax and ICH-1 proteins was investigated in 40 specimens of hepatocellular carcinomas by immunohistochemistry method, with 13 normal liver tissues serving as control. RESULTS: Eleven carcinoma specimens were positive for NS5 antigen, accounting for a positive rate of 27.5 %, and 5 tissue specimens adjacent to the carcinomas were identified as positive, with a rate of 12.5 %. Of the 11 carcinoma tissues positive for NS5, bcl-2 and bax were positive respectively in 1 case (showing a ratio of 1:1), and ICH-1L and ICH-1S were positive in 5 and 6 cases respectively (showing a ratio of 1:1.2). Among the 29 NS5-negative cases, bcl-2 and bax were positive in 6 and 7 cases respectively constituting a ratio of 1:1.4, while ICH-1L and ICH-1S were identified in 10 and 15 cases respectively, at the ratio of 1:1.5. No significant differences were found between NS5-positive and -negative groups (P>0.05). CONCLUSION: Aberrant expression of bcl-2, bax and ICH-1 may be related to HCC genesis, but HCV infection may not be the principal cause for their expression aberrance.     

肝细胞癌组织中ZEB-1的表达及意义

目的 探讨ZEB-1在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学SP法和蛋白质印迹分析法检测ZEB-1在62例HCC组织、48例相应癌旁肝硬化组织和10例正常肝组织中的表达,并分析其与HCC临床病理特征的关系.结果 免疫组化结果显示ZEB-1在HCC组织及癌旁肝硬化组织中呈阳性表达,阳性率分别为93.5％(58/62)和83.3(40/48).蛋白质印迹分析显示ZEB-1蛋白在HCC组织中的表达高于相应癌旁肝硬化组织和正常肝组织(P＜0.05).ZEB-1在HCC组织中的表达与临床分期、肿瘤分化程度、有无发生转移、有无门脉癌栓及有无术后复发等因素相关(P＜0.05),与肿瘤直径、肿瘤数目、血清AFP水平等因素无关(P＞0.05).结论 ZEB-1的高表达与肝癌的发生、发展密切相关,并且有可能参与HCC细胞的上皮间质转化而促进肝癌的侵袭和转移.     

Midkine (MDK)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义

 目的 探讨Midkine(MDK)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达以及检测血清MDK对于肝癌诊断的初步临床意义。方法 通过免疫组织化学染色和Western blot法检测50例临床样本(包含肝癌,肝硬化及正常肝组织)及7种不同肝癌细胞系中MDK表达情况;进一步通过酶联免疫吸附反应定量检测120例不同受试人群的血清样本,分析血清MDK在诊断肝癌中的初步临床意义。结果 肝癌组织中MDK表达阳性率显著高于肝硬化(77% vs. 30%,P＜0.01)及正常肝组织(77% vs. 0%,P＜0.001);Western blot 检测结果显示,MDK在多株肝癌细胞系中表达上调;此外,HCC患者血清MDK的中位数水平(1.195 ng/mL,0.84~1.71)较正常人(0.102 ng/mL,0.02~0.53;P＜0.01)、 HBV相关肝硬化(0.57 ng/mL,0.26~0.67;P＜0.05)和HCV相关肝硬化(0.34 ng/mL,0.09~0.56;P＜0.01)患者显著升高。 结论 MDK在HCC患者中的表达显著上调,血清检测MDK可作为临床诊断肝癌的重要方法。     

人肝硬化肝细胞生长激素受体及其mRNA的表达变化

目的　探讨人肝硬化肝组织和肝硬化肝细胞生长激素受体的表达变化。方法　采用放射配体法、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 32例癌旁肝硬化肝组织和 6例癌旁肝硬化肝细胞中生长激素受体及其mRNA的表达水平 ,并分别与 5例正常肝组织、3例正常肝细胞比较。结果　人肝硬化肝组织表达生长激素受体 ,其表达数量较正常肝组织明显减少 [RT,(2 2 4± 5 0 )fmol/mg蛋白 ,n =32vs (41 3± 5 3)fmol/mg蛋白 ,n =5 ;P <0 0 5 ],并且随着肝硬化程度的加重进一步减少 (P <0 0 5 ) ;人肝硬化肝细胞生长激素受体的位点数量较正常肝细胞明显减少 [位点 ,(2 4 0± 0 93)× 10 4/细胞 ,n =6vs (4 6 8± 1 14 )× 10 4/cell,n =3;P <0 0 5 ],人肝硬化肝组织生长激素受体mRNA的表达量也较正常肝组织明显减少 [riOD ,30 8%± 8 2 % ,n =32vs 4 4 9%± 6 3% ,n =5 ;P <0 0 5 ],并且随着肝硬化程度的加重进一步减少 (P <0 0 5 )。结论　肝硬化肝细胞表达生长激素受体 ,其表达水平降低 ;肝硬化越严重 ,该表达下调越明显。肝硬化肝组织生长激素受体表达下调的可能机制是肝硬化肝组织生长激素受体mRNA的表达明显减少     

肝细胞癌组织GRIM-19和STAT3蛋白的表达

目的 探讨干扰素/维甲酸联合应用诱导的细胞凋亡相关基因19(GRIM-19)和信号转到子与转录激活子3(STAT3)蛋白在肝细胞癌中的表达、相互关系及在肝细胞癌发生发展中的意义.方法 应用免疫组化方法检测GRIM-19和STAT3在31例肝细胞癌组织和癌周肝组织、20例肝硬化组织及10例正常肝组织的表达水平.结果 肝硬...     

Expression of autotaxin mRNA in human hepatocellular carcinoma

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｕｔｏｔａｘｉｎ（ＡＴＸ）ｍＲＮＡｅｘｉｓｔｅｄｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＨＣＣ）,ａｎｄｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅｒｅｉｓｒｅｌａｔｉｏｎ...     

肝癌细胞表达差异cDNA克隆的研究

目的：筛选肝细胞癌(HCC)相关基因，探讨其在HCC发病中的临床意义。方法：用差异显示技术对比研究正常肝组织，胎肝组织，HCC组织及癌旁肝组织之间mRNA的表达差异，以肝癌cDNA片段MRG8．2为探针，对10例HCC及癌旁肝组织进行斑点印渍分析，并通过逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测这些标本血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达水平。结果：获得55个HCC差示cDNA片段，其中24个cDNA片段同时表达于HCC和胎肝组织cHCC差示片段MRG98．2在7例HCC标本中表达阳性(7／10)，癌旁肝组织弱表达(2／10)或元表达。VEGFmRNA在7例MRG98．2阳性表达的HCC标本中6例表达上调。结论：胚胎期某些基因的激活与HCC发生有关，差示片段MRG98．2可能是HCC相关的基因片段，其表达与VEGFmRNA一致，并可能与肿瘤浸润转移及顶后不良有关。