联合促血管生成素-1及血管内皮细胞生长因子基因治疗对大鼠新生血管通透性的影响

目的　探讨联合转染促血管生成素 1(angoipoietin 1,Ang 1)及血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因对大鼠下肢新生血管通透性的影响 ,并观察不同基因剂量配比的差异。方法　制造大鼠下肢血管闭塞病理模型 ,按不同剂量配比肌肉内电转pcD2 Ang 1和 或pcD2 VEGF基因。应用逆转录聚合酶链反应、免疫组化染色检测外源基因在骨骼肌中的表达 ,通过伊文思蓝灌注观察其对新生血管通透性的影响。结果　逆转录聚合酶链反应及免疫组化染色均能检测到外源基因的表达。随着转入pcD2 VEGF剂量的增加 ,血管通透性逐渐增加 ;而随着转入pcD2 Ang 1剂量的增加 ,血管通透性逐渐下降。其中pcD2 VEGF 10 0 μg pcD2 Ang 12 0 0 μg组通透性与正常对照最为接近 [( 8 5 7± 0 74 )ng mlvs ( 8 4 2± 0 82 )ng ml,P >0 0 5 ]。结论　联合转pcD2 Ang 1基因可逆转pcD2 VEGF基因增加血管通透性的副作用 ,其中pcD2 VEGF与pcD2 Ang 1比例为 1 2时血管通透性最接近生理状态。与单基因治疗相比 ,适当配比的联合转基因可能成为治疗闭塞性血管病更安全、更有效的新方法。     

胃癌细胞血管内皮生长因子RNA干扰对血管内皮细胞生长的影响

目前抗肿瘤血管生成的研究多在动物模型中进行，这样虽然可以模拟肿瘤生长的微环境，但由于受到体内环境诸多因素的影响，促血管生成因子人为表达降低后，血管内皮细胞的生物学行为发生了哪些变化难以明确。采用分泌促血管生成因子的肿瘤细胞与血管内皮细胞共培养可以初步明确这一问题。本研究采用RNA干扰（RNAi）技术观察其抑制肿瘤细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达后对血管内皮细胞生长的影响。     

血管内皮生长因子和血管生成与大肠癌发展的关系

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）和血管生成与大肠癌发展的关系。方法：应用免疫组化法,检测102例大肠癌组织VEGF蛋白表达和微血管密度（MVD）,分析VEGF和MVD及其与大肠癌组织学分级、浸润深度、Dukes分期、淋巴结转移、肝转移和预后的关系。结果：VEGF阳性者MVD值显著高于阴性者（P＜0．01）,VEGF表达和MVD与大肠癌Dukds分期、淋巴结转移和肝转移密切相关（P均＜0．01）,VEGF表达阳性或高MVD的大肠癌患者5年生存率较低（P＜0．01）。结论：VEGF与大肠癌的血管生成密切相关,对大肠癌的生长和浸润转移有促进作用,VEGF和MVD可作为反映大肠癌生物学行为的客观指标。     

血管内皮细胞生长因子在心脏的表达特点及衰老对血管生成的影响

血管生成及其相关因子表达随生长发育或创伤、缺血/缺氧及炎症反应而有不同的反应,促血管生成治疗是目前治疗血管阻塞导致的肢体和心肌缺血的研究热点,进一步研究血管内皮细胞生长因子及其受体在老年心脏中的表达规律以及老年常见疾病对心脏血管生成的影响,可为促血管生成治疗心肌缺血提供理论基础。     

血管内皮生长因子及其受体对缺血性脑血管病脑微血管生成作用机制研究进展

血管内皮生长因子及其受体具有促进内皮细胞增殖,加速新生血管形成,增加血管通透性等特点,它与缺血性脑血管病的发生发展密切相关。本文将从血管内皮生长因子及其受体的概况、诱导途径、在脑缺血损伤后血管生成中的利弊影响几方面对血管内皮生长因子／血管内皮生长因子受体系统作一综述,详述其在血管生成方面的调控机制、时空表达、细胞分布及剂量关系等特点,并对血管内皮生长因子在目前应用中遇到的问题及在未来临床中的应用前景予以分析。     

鼠血管内皮生长因子及其抗体对内皮细胞增生影响的研究

目的 研究探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其抗体对内皮细胞增生的影响。方法 采用体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,用^3H－TaR掺入检测技术分别检测鼠血管内皮生长因子（mVEGF）及其抗体和Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）小鼠关节组织提取液对HUVEC增生影响。结果 抗VEGF中和抗体抑制在mVEGF刺激下引起的HUVEC增生及在CIA小鼠关节组织提取液作用下引起的HUVEC增生,抑制率分别为72．2％和69．9％。结论 mVEGF特异性作用于血管内皮增生;CIA形成的早期关节组织内可能产生大量的VEGF,并以较强的生物活性形式存在,能被抗VEGF中和抗体抑制。     

p53、血管内皮生长因子蛋白表达与结肠癌血管生成的关系

实体肿瘤的持续性生长和转移依赖于血管生成。我们既往研究提示 ,血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＶＥＧＦ)与结肠癌血管生成、转移密切相关[1] 。研究认为 ,抑癌基因 ｐ5 3可能参与血管生成的调节。突变型ｐ5 3可通过激活蛋白激酶Ｃ ,特异地将胚胎肾细胞ＶＥＧＦｍＲＮＡ的表达上调 5 0 % [2 ] 。本研究分析 ,ｐ5 3、ＶＥＧＦ蛋白表达与结肠癌血管生成之间的关系 ,旨在探讨 ｐ5 3突变对结肠癌血管生成的调节作用。材料与方法一、临床资料收集我院外科 1996年 12月～ 2 0 0 0年 3月原…     

从微血管生成到肌性动脉生成探讨血管内皮细胞生长因子的成血管作用

血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)促心肌血管再生是国内外研究的热点 ,其过程包括先前存在的毛细血管出芽 ,最终形成毛细血管水平 (直径 5～ 8μｍ)的微血管。值得注意的是 ,这些新生毛细血管没有血管平滑肌或壁细胞包绕 ,脆弱而容易破裂 ,因此 ,从微血管生成到肌性动脉生成是心肌再血管化治疗的关键。我们试图从微血管生成到肌性动脉生成探讨血管内皮细胞生长因子的成血管作用。1　ＶＥＧＦ介导的微血管生成成人血管系统由富含内皮细胞层、平滑肌层的大动脉逐级分支为几乎仅由内皮细胞构成的毛细血管 ,这些毛细血管只有在某些情况下偶然被…     

胰腺癌组织中p53、血管内皮生长因子的表达与血管生成的关系及其临床意义

目的 探讨胰腺癌组织中p53、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成的关系。方法 用免疫组织化学方法检测48例胰腺癌组织及癌旁组织、6例正常胰腺组织中p53、VEGF表达和微血管密度(MVD)。结果 胰腺癌组织中VEGF、p53的阳性表达率分别为54.17％和50％,显著高于癌旁组织及正常组织的表达率(P<0.01),胰腺癌组织中MVD显著高于癌旁组织及正常组织。VEGF表达与肿瘤大小和分期有关(P=0.038,P=0.045),VEGF表达与MVD有相关性(r=0.294 P=0.043)。p53与淋巴结转移及预后相关(P<0.05)而与VEGF、MVD之间无关。MVD与胰腺癌临床病理特征无关,MVD与生存期存在负相关(r=0.371 P=0.011)。多元回归分析显示p53、VEGF和MVD都不是影响胰腺癌预后的独立因素。结论 p53基因突变为胰腺癌分子事件的晚期事件,可作为评价胰腺癌预后的一项指标,抗血管生成可能有利于胰腺癌的治疗。     

血管内皮生长因子对培养内皮细胞合成一氧化氮的影响

目的 :探讨血管内皮生长因子 （VEGF） /血管渗透因子 （VPF）对内皮细胞 （EC）分泌一氧化氮 （NO）的影响。方法 :将培养的人脐静脉内皮细胞 （HUVEC）随机分为 6组 （n=6 /组 ） :1正常对照组 ;2 VEGF 1ng/ m l;3VEGF 10ng/ m l;4VEGF 10 0 ng/ m l;5低氧组 ;6低氧组 +VEGF 10 0 ng/ m l。采用硝酸还原酶法测定培养液中的 NO2 - ,NO3 -的含量以反映 NO水平。结果 :VEGF促进正常 EC分泌 NO,在一定浓度范围内呈剂量依赖性 ;低氧损伤 EC,使其分泌 NO减少 ;VEGF 10 0 ng/ ml预处理可保护 EC免受低氧损害 ,保持正常分泌 NO的功能。结论 :VEGF能够调节 EC的功能 ,为其促血管形成作用中 EC分裂、增殖、迁移奠定物质基础     

血管内皮生长因子受体与肝细胞癌血管生成关系的研究进展

新生血管是肿瘤生长和转移的基础.肝细胞肝癌是典型的多血管肿瘤,其发生、发展、转移、侵袭都和血管生成密切相关.血管的生成主要依靠血管生长因子和血管生长抑制因子的调控,其中研究最多也是最重要的是血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR).VEGFR在机体内作用不同,参与肝癌血管生长的主要是VEGFR-1(flt-1)和VEGFR-2(flk-1).针对VEGFR的抗肿瘤血管治疗在实验室取得了不错的疗效,部分已经进入了临床试验.     

重组血管内皮生长因子165对大鼠肝纤维化的影响

目的:探讨经门静脉导入重组血管内皮生长因子165对大鼠肝纤维化的影响.方法:♂SD大鼠50只,体质量180-220 g,完全随机分成正常组10只、诱导模型组40只.采用硫代乙酰胺诱导模型方法,10 wk后成模25只,随机分为模型实验组15只和模型对照组10只,实验组经门静脉插管并植入Alzet微渗泵灌注血管内皮生长因子...     

血管内皮生长因子基因对人工血管内皮细胞生长的影响

目的构建携带血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因腺病毒的人工血管模型。方法测定ad5-EGFP转染EAhy926转染率,观察人工血管携带腺病毒在静水中的释放情况及人工血管上内皮细胞的黏附情况,构建ad5-VEGF165-IRES-EGFP转染EAhy926,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测VEGF基因水平表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测VEGF蛋白水平表达,噻唑蓝(MTT)法检测内皮细胞活性。结果ad5转染EAhy926的最适感染复数(MOI)为200。人工血管上携带的病毒静水中能在人工血管上保留1 h左右,逐渐释放。扫描电镜显示内皮细胞在人工血管上吸附。聚合酶链反应半定量电泳图中,ad5-hVEGF165转染组均可见564 bp条带,而ad5-Null组和空白组均未见此条带。ad5-hVEGF165组培养液中hVEGF165蛋白浓度在各时间点均高于ad5-Null组和空白组,差异有统计学意义(P<0.01)。ad5-hVEGF165组噻唑蓝试验后第3、5、7天测得的OD值高于ad5-Null组和空白组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论本实验成功构建携带VEGF基因腺病毒的人工血管。     

血管内皮生长因子在治疗性血管生成中的应用

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是特异的有丝分裂素,除有促进内皮细胞增生、转移、增加血管通透性和血管生成的作用外,微血管造影证实ＶＥＧＦ可促进侧枝血管的形成。人重组ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ转基因治疗促进缺血模型的治疗性血管生成。ＶＥＧＦ基因还成功地用于严重下肢缺血病人的转基因治疗。     

血管内皮生长因子基因修饰对内皮细胞前列腺环素合成影响的研究

目的 :观察血管内皮生长因子 (VEGF)基因转染对内皮细胞前列腺环素 (PGI2 )合成的影响 ,了解VEGF基因修饰对内皮细胞抗凝作用的影响。方法 :用脂质体转染的方法 ,将含有人VEGF基因的真核表达质粒pCD -hVEGF16 5体外转染人脐静脉内皮细胞。原位杂交、免疫组化法检测VEGF基因的表达 ,Elisa法检测培养上清液中VEGF及 6 -keto -PGF1α的含量。应用细胞计数法观察VEGF基因对内皮细胞生长的影响。结果 :外源性VEGF基因能被脂质体有效的导入内皮细胞并呈稳定表达。在高表达VEGF的同时 ,对PGI2 的合成和分泌较对照组明显增高 (p <0 .0 5 )。导入VEGF基因明显促进内皮细胞的分裂增殖。结论 :VEGF的高表达可显著提高内皮细胞对PGI2 的释放 ,可能增强内皮细胞的抗凝功能。     

血管内皮生长因子与中枢神经系统疾病

血管内皮生长因子具有增加血管通透性，促进内皮细胞增殖和血管生成以及保护神经组织等重要作用，与多种中枢神经系统疾病，如脑缺血、脑出血和脑肿瘤的发生发展密切相关，其基因治疗有望为相关疾病的治疗提供新的途径和方法。     

血管内皮生长因子与甲状腺癌

血管内皮生长因子 (VEGF)是强有力的促血管生成因子 ,在甲状腺癌的生长和转移中占重要地位。VEGF在甲状腺癌中有高水平的表达 ,以旁分泌的方式刺激甲状腺癌的血管生成 ,从而间接地促进甲状腺癌发展。VEGF的高水平表达不是恶性肿瘤的标志 ,而是疾病活跃的标志。甲状腺癌VEGF水平越高 ,恶性程度越高。甲状腺癌VEGF的分泌受促甲状腺激素促进 ,受醋酸苯酯抑制。针对VEGF的抗甲状腺癌治疗具有很好的临床前景。     

瘦素对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨瘦素对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:用不同浓度的瘦素刺激原代培养的HUVECs,检测HUVECs表达VEGF的情况。结果:在相同作用时间下,随着瘦素浓度的升高,VEGF蛋白及VEGF mRNA的表达也随之升高,经统计学检验有相关性;在相同瘦素浓度下, 随着作用时间的延长,VEGF蛋白及VEGFmRNA的表达也随之升高,且有相关性。结论:瘦素可以刺激HU- VECs表达VEGF而且呈时间和剂量相关性。     

表皮角质细胞与血管内皮细胞共培养对血管内皮生长因子水平的影响

目的探讨人表皮角质细胞与血管内皮细胞共同培养对血管内皮生长因子(VEGF)作用的机制。方法购制人表皮角质细胞和血管内皮细胞进行体外培养,采用双腔通透性测定试剂盒建立细胞共培养模型,应用浓度为15 ng/ml的重组人血管内皮生长因子(VEGF)121和VEGF165作为对照组。利用荧光酶标仪测定不同时间段FITC-dextran量变化,观察血管内皮细胞单层通透性的改变。采用Griess法测定血管内皮细胞产生氧化氮(NO)的变化。结果共培养模型中,血管内皮细胞、表皮角质细胞生长良好,以连续单层形式存在;内池中VEGF121水平在5、30 min、1、2、3、4、5、6 h显著高于VEGF165(P0.05);在0、1、5、10 min,共培养模型内池中NO的含量低于VEGF121刺激组(P0.05),但高于VEGF165刺激组(P0.05)。结论 (1)表皮角质细胞分泌VEGF有时间依赖性,其中VEGF121含量较VEGF偏多。(2)表皮角质细胞分泌物可诱导NO产生,其能力介于VEGF121和VEGF165,因此考虑表皮角质细胞分泌物中引起NO产生增加的主要成分为VEGF。(3)表皮角质细胞分泌物可引起血管内皮通透性增加,其能力介于VEGF121和VEGF165,且数值接近于VEGF121,因此考虑表皮角质细胞分泌物中VEGF121较VEGF165含量高,且VEGF121较VEGF165引起血管通透性能力强。     

血管内皮生长因子和肺癌

肿瘤血管生成在肺癌的生长和转移中发挥着重要的作用,众多肿瘤血管生成因子和抑制因子参与了肿瘤血管生成的调控,其中,血管内皮生长因子(VEGF)是己知最重要的血管内皮细胞有丝分裂素.本文就肺癌血管生成中血管内皮生长因子的作用机制、诱导因素及其抗血管生成治疗作一简要综述.