食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因改变的研究

目的：探讨食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化ABC法及逆转录－聚合酶链反应的方法。对50例食管癌和37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果：p53基因蛋白在食管癌中有显表达70％（35／50），癌旁组织中有表达62％（23／37）；其中在正常组织中占36％（5／14），在非典型增生中占78％（18／23），MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显意义。癌与正常组织中有极显意义。有不同年龄，性别、肿瘤大小上p53、MDR基因的表达无显意义，结论：p53、MDR基因在食管中均呈高水平表达，癌旁组织中MDR有表达，p53基因突变早于组织形态学改变。     

P53、MDR基因在食管癌、癌旁组织及化疗检测对比表达的临床研究

目的：探讨食道癌和癌旁组织中P53、MDR基因的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化ABC法及逆转录酶一聚合酶链反应的方法,对50例食管癌和37例癌旁组织中P53、MDR基因的表达情况进行检测。结果：P53基因蛋白在食管癌中有显著表达68％(34／50),癌旁组织中有表达59％(22／37);其中在正常组织中占54％(13／24),在非典型增生中占69％(9／13)。MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显著意义。癌与正常组织有极显著意义。在不同年龄、性别、肿瘤大小上P53、MDR基因的表达无显著意义。结论：P53、MDR基因在食管癌中均呈高水平表达,癌旁组织中MDR有表达,P53基因突变旱于组织形态学改变。     

家族性食管癌组织中FHIT、p53蛋白的表达

目的:探讨家族性食管癌组织中脆性组氨酸三联体基因(FHIT)和p53蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学ABC法对74例河南省林州市食管癌患者(其中33例家族性食管癌,4l例非家族性食管癌)手术切除标本癌及癌旁正常组织中FHIT及p53蛋白进行检测.结果:食管癌组织中FHIT蛋白异常表达率(39%,29/74)高于癌旁正常组织(3%,1/31),家族性食管癌组织中FHIT蛋白异常表达率(56%,18/33)高于非家族性食管癌组织(27%,11/41)(P均＜0.05).家族与非家族性食管癌组织p53蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:FHIT异常表达可能与食管癌家族高易感性密切相关;p53可能与其他易感因素协同作用,影响食管癌的发生.     

食管癌组织p53基因杂合性缺失的检测

目的探讨食管癌p53基因杂合性缺失(LOH)与食管癌发生和发展的关系.方法应用荧光原位杂交技术对食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生组织及正常食管上皮各30例进行p53基因LOH检测.结果p53基因LOH检出率在正常食管上皮、不典型增生组织及鳞癌组织中分别为0,16.7%(5/30)和63.3%(19/30),逐渐增高(P＜0.05).结论p53基因杂合性缺失是食管癌发生、发展过程中的重要分子学事件.     

人食管癌及其癌旁组织p53基因外显子4—8的突变分析

目的：了解抑癌基因p53在人食管癌及其癌旁组织中的突变,尤其是p53外显子4的变异。方法：采用PCR-SSCP和DNA测序等方法对24例人食管鳞状细胞癌术后标本进行了p53基因外显子4-8的突变分析。结果：在食管癌组织及癌旁组织幸免被检测的15列标本中,分别有40.0%(6/15)和46.7%(7/15)发生了突变,两者差异无显著性,食管癌组织标本中有50%（9/18）的突变发生在外显子4。另外,有4例在食管癌组织及癌旁组织中同时检测出p53基因突变,年龄,性别,术前治疗（放射治疗,化学药物治疗）,肿瘤的部位等对癌组织的突变率并不产生影响。结论：在人食管癌及其癌旁组织中,p53基因的突变几率差异无显著性,年龄,性子4的突变可能产生了尤为重要的作用。     

应用RT-PCR和SSCP分析食管癌组织中p73基因的表达

目的：观察p73基因在食管癌中的表达与突变状况，探讨p73基因在食管癌发生、发展中的意义。方法：采用RT－PCR和SSCP检测37例食管鳞状细胞癌肿瘤组织、癌旁组织、区域淋巴结和相应正常食管组织中p73mRNA的表达和基因的突变情况。结果：37例食管肿瘤组织中有21例（51．8％）p73 mRNA检测到过度表达，其阳性表达率显著高于相应的癌旁组织、区域淋巴结和正常组织（P＜0．05），与食管癌临床病理分期、细胞分化程度和病理类型均无显著性差异（P＞0．05）；未发现食管癌组织中p73基因有任何突变。结论：p73 mRNA在食管癌组织中有较高的表达率和表达水平，本研究未发现p73在食管癌中有突变。p73基因在食管癌中的过表达和正常基因型没有能够阻止癌症的发生及恶化，可能没有主要的抑癌作用。     

食管癌组织中p53基因蛋白过度表达及其临床意义

目的 研究食管癌及癌周组织中p53基因蛋白表达情况及其临床意义。方法 采用免疫组织化学ABC法，检测了60例食管癌组织及癌旁非典型增生组织和正常食管粘膜组织中p53基因蛋白表达情况，并结合肿瘤的分化程度等病理特点进行了分析。结果 p53基因蛋白过度表达的阳性率高分化组(73．3％)与中分化组(95．0％)、低分化组(100．0％)之间有极显著性差异(P＜0．01)，而在食管癌组织(85．0％)与非典型增生组织(76．7％)之间无显著性差异(P＞0．05)。结论 p53蛋白的检测可为食管癌的早期诊断及判断食管癌恶性程度提供参考，对食管癌的诊治具有临床指导意义。     

COX-2和P53基因在食管癌组织中的表达及其意义

目的研究环氧合酶-2(COX-2)、P53基因在食管癌组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化染色法检测COX-2、p53在82例食管鳞状细胞癌组织中的表达,并与16例正常食管粘膜组织比较.结果COX-2和P53在食管癌组织中的阳性表达率分别为87.8%(72/82)和82.9%(68/82),而正常食管组织中均为阴性.COX-2在高分化和中分化食管癌中的表达率显著高于低分化癌(P＜0.01);无淋巴结转移者的表达率明显高于有淋巴结转移病例(P＜0.05).p3高表达与食管癌浸润深度和淋巴结转移呈正相关(P＜0.01).结论 COX-2和P53的表达可能均参与了食管癌的发生 发展过程.     

原发性肝细胞癌癌组织中p33ING1b与p53基因的表达

目的研究p33ING1b与p53蛋白在原发性肝细胞癌中表达的相关性及ING1b基因在原发性肝细胞癌中的突变率.方法应用免疫组织化学SP方法检测了57例原发性肝细胞癌癌组织、51例癌旁肝组织及12例正常肝组织中p33ING1b和p53蛋白的表达,并分析了原发性肝细胞癌癌组织中乙肝病毒(HBV)的感染率;应用聚合酶链式反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测了28例配对癌及癌旁肝组织中ING1b基因两个外显子的突变情况,对有异常泳动条带的DNA片段分别克隆测序.结果在57例原发性肝细胞癌癌组织中,p33ING1b、p53蛋白的阳性率分别为42.1%和57.9%,p33ING1b、p53表达均呈阳性者有19例(33.3%),且两者在癌组织中阳性分布区域相同;p33ING1b蛋白表达与p53蛋白表达在癌组织中呈显著正相关(r=0.783, P<0.01);配对癌旁肝组织及正常肝组织中p53蛋白表达均为阴性,p33ING1b蛋白在13例癌旁肝组织及2例正常肝组织中呈弱阳性表达;在57例原发性肝癌组织中有35例(61.4%)HBV X蛋白呈阳性,其病理类型均为肝细胞肝癌,在51例癌旁肝组织中检出HBV X蛋白阳性者39例(76.47%),癌组织中HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关(P<0.01);PCR-SSCP结果表明,ING1b基因在原发性肝细胞癌中突变率较低为7.1%(2/28).结论 p33ING1b、p53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达呈显著正相关,p33ING1b的存在可能还有其他不依赖p53蛋白的途径;HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关;基因突变不是p33ING1b丧失抑癌功能的主要因素.     

胃癌患者p53基因突变的检测及其临床意义

目的:探讨胃癌患者癌组织及外周血p53基因突变表达情况,评价p53基因作为胃癌患者术后预后判定、转移监测及指导临床治疗的应用价值。方法:利用聚合酶链反应单链构像多态性分析法(PCRSSCP)和银染技术检测32例胃癌患者外周血、癌旁正常组织、癌组织中p53基因外显子5、6、7、8位点及20例健康人外周血p53基因的突变情况,并比较不同组织类型、不同分期、有无淋巴结转移胃癌患者p53基因的突变率。结果:32例胃癌患者癌旁正常组织和20例正常人外周血中未检出p53基因突变;胃癌患者癌组织中的p53基因突变率为37.5%(12/32),与癌旁正常组织无相比差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者的胃癌组织p53基因突变高于无淋巴结转移患者(P<0.05);胃癌患者外周血p53基因突变率为15.6%(5/32),外周血中p53基因突变阳性者其相应癌组织p53基因突变均为阳性,经过3个月随访,其中有1例确诊为肝转移。不同组织类型不同分期胃癌患者p53基因突变率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:p53基因突变对胃癌患者术后预后判定、转移监测及指导临床治疗有一定的意义。     

肺癌组织中FHIT蛋白的表达及其与MDR1的关系

目的:观察肺癌组织中FHIT的表达及其与MDR1蛋白的关系,探讨其表达变化的临床意义.方法:免疫组化S-P法检测肺癌组织及其癌旁组织(n=60)中FHIT蛋白以及肺癌组织中MDR1蛋白的表达,分析在肺癌不同临床病理指标下FHIT蛋白的表达情况,并分析其在肺癌组织中与MDR1表达的关系.结果:FHIT在癌旁组织中的阳性表达率明显高于癌组织(76.7% vs 50%,P＜0.01);癌组织中FHIT阳性表达率与患者性别、年龄、吸烟状况、大体分型、TNM分期、组织学分类、淋巴结转移与否等指标均无显著相关性(P＞0.05);FHIT蛋白阳性表达的癌组织中MDR1的阳性率明显高于阴性表达者(83.3% vs 60%,P＜0.01).结论:肺癌组织中FHIT蛋白表达明显下调;FHIT蛋白表达与MDR1表达有一定的相关性,在应用FHIT基因作为基因治疗手段时应考虑到其可能具有的耐药潜能.     

结肠癌组织中Cyclin G与p53表达相关性研究

目的:探讨Cyclin G和p53在结肠癌中表达及其相关性。方法:应用免疫组化SP法检测70例结肠癌组织及其31例癌旁组织中的Cyclin G及p53的表达情况。结果:Cyclin G高表达于结肠癌细胞核,结肠癌组织中Cyclin G和p53表达率分别为62.9%(44/70)和77.1%(54/70);癌旁组织中Cyclin G和p53表达阳性率分别为9.7%(3/31)和3.2%(1/31);Cy-clin G在结肠癌中的表达与肿瘤的Dukes分期相关,两者的表达呈明显相关性。结论:结肠癌组织中Cyclin G和p53高表达可能与结肠癌发生与发展有关。检测结肠癌组织中Cyclin G可能成为结肠癌癌基因治疗的新靶点。     

MDR1、GST-π、p53、bcl-2在上皮性卵巢癌的表达及意义

目的 探讨ＭＤＲ１、ＧＳＴ－π、ｐ５３、ｂｃｌ－２与上皮性卵巢癌临床病理学特性的关系。方法 采用免疫组化ＳＰ法检测８９例不同性质卵巢组织中ＭＤＲ１、ＧＳＴ－π、ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达情况。结果 ①上皮性卵巢癌,交界性肿瘤,良性上皮性肿瘤,正常卵巢组织中四种指标的表达情况：ＭＤＲ１依次为２２／５２（４２．３％）、３／９（３３．３％）、０／２１、０／７、ＧＳＴ－π依次为４３／５２（８２．７％）、５／     

人原发性肝癌中p16基因表达及CpG岛甲基化状态的研究

目的　进一步探讨人原发性肝癌中 p16基因 m RNA转录水平变化与其基因启动子区 Cp G岛甲基化的关系 ,及其在肝癌发生中的意义。方法　采用狭缝印迹杂交检测 2 0例人原发性肝癌及相应的癌旁、远癌组织及 2例正常人肝组织中 p16基因 m RNA表达水平 ,以甲基化特异性 PCR分析各组织中 p16基因启动子区 Cp G岛的甲基化状况 ,并进行统计分析。结果　 2 0例人原发性肝癌中 14例 (70 % ) p16 m RNA水平比远癌组织显著降低 ;13例 (6 5 % )显示 p16基因启动子区 Cp G岛甲基化 ,其中 84 .6 % (11例 )伴 p16 m RNA转录水平降低。结论　人原发性肝癌中存在高频率的 p16基因表达失活 ,其主要机制可能是启动子区 Cp G岛甲基化抑制了基因的转录 ,在人原发性肝癌的发生发展中有重要作用。其临床诊断和治疗意义有待进一步深入研究。     

肺癌放疗或化疗后的病理形态及PCNA,p53表达的观察

应用抗增殖细胞核抗原和抑癌基因ｐ５３蛋白的单克隆抗体对３７例放疗或化疗后的肺癌进行了检测，并与未经术前治疗的肺癌组织进行对照，部分组织进行了超微结构观察。结果发现：（１）放疗或化疗对肺癌组织细胞浆及胞核有不同程度的破坏。（２）放、化疗后组织（除分化型腺癌外）ＰＣＮＡ指数下降明显（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。（３）放疗后肺癌组织ｐ５３表达率减低，但化疗后变化不明显。     

乳腺癌

目的探讨肿瘤多药抗性（ｍｄｒ１）的基因调控及其特异的凋亡机制。方法在建立的ｍｄｒ１肿瘤裸鼠的瘤组织中,采用ＡＢＣ免疫组化法,检测Ｐ－１７０、ｃ－ｍｙｃ、野生型ｐ５３、ｐ１６、Ｆａｓ和Ｂｃ１－２等蛋白的表达。结果发现ｍｄｒ１肿瘤细胞的ｃ－ｍｙｃ表达增强;经抗ｍｄｒ１－ｒｉｂｏｚｙｍｅ部分逆转ＭＤＲ表型后,ｍｄｒ１肿瘤细胞的ｐ５３表达有所升高。结论ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３可能参与了对ｍｄｒ１基因表达的调控,其中ｃ－ｍｙｃ可能起着激活ｍｄｒ１基因转录的作用。实验还发现ｍｄｒ１肿瘤细胞的Ｆａｓ蛋白缺失、Ｂｃ１－２表达升高,提示ｍｄｒ１肿瘤可能拥有自己特异的凋亡调节机制。     

肾盂输尿管癌p53、nm23表达的临床意义

目的：揭示p53、nm23基因表达与肾盂输尿管癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化SABC法和原位杂交技术检测p53、nm23的表达。结果：肾盂输尿管癌p53、nm23阳性表达分别为51．1％（23／45）和46．7％（21／45）。p53阳性表达T2－T3为60％（21／35）,T1为20％（2／10）,P＜0．05;G2－G3为59．0％（23／39）,G1为0％（0／6）。nm23阳性表达T2－T3为48．6％（17／35）,T1为40％（4／10）,P＞0．05,G2－G3为48．7％（19／39）,G1为33．3％（2／6）,P＞0．05。p53阳性表达术后再发膀胱癌与阴性表达相比较P＞0．05。nm23阳性表达术后膀胱癌再发为61．9％（13／21）,阴性表达为20．9％（5／24）,P＜0．05。p53、nm23阳性表达生存率明显低于阴性表达,P＜0．05。结论：p53阳性表达与肾盂输尿管癌病理分期、分级有关,nm23阳性表达与术后再发膀胱癌有关。p53和nm23可能是判断肾盂输尿管癌预后的指标之一。     

p53及耐药相关基因的表达与非小细胞肺癌化疗耐药性的研究

目的探讨p53突变与耐药相关基因表达的相关性及其与肺癌化疗耐药的关系。方法免疫组化检测60例非小细胞肺癌组织的p53和耐药相关蛋白P-gp、MRP、LRP、GST-π的表达并分析其相关性及其与肺癌化疗耐药的关系。结果 P-gp、MRP、LRP、GST-π、p53阳性率分别为53.3%、50.0%、75.0%、73.3%、68.3%。LRP在腺癌中表达最高,p53在鳞癌中表达最高。p53的表达与肿瘤细胞分化程度、有无淋巴结转移和TNM分期密切相关,其余4种耐药相关蛋白表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。p53和一种或一种以上耐药相关蛋白共表达率达94.8%,且p53与P-gp、GST-π的表达存在正相关性（P均〈0.05）。p53蛋白的表达与化疗疗效显著相关,p53阴性化疗有效率（60.5%）明显高于p53阳性者（28.3%,P〈0.05）。结论肺癌组织p53突变与耐药相关蛋白的表达有相关性,p53结合耐药相关蛋白检测可以预示患者的化疗耐药性,对个体化化疗方案的制定具有指导意义。     

PCR-SSCP检测胃癌中p53基因突变

目的　研究p5 3基因表达及突变在胃癌发生中的地位。方法　采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (S -P)法与聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)分析技术分别检测胃癌p5 3基因表达及突变。结果　p5 3蛋白表达在正常胃粘膜均为阴性 (0 / 2 0 ) ,在不典型增生为 18% (11/ 6 0 ) ,其中轻度全为阴性(0 / 2 0 ) ,中度 2 5 % (5 / 2 0 ) ,重度 30 % (6 / 2 0 ) ,明显低于胃癌的 5 8% (70 / 12 0 ) (P <0 .0 5 ) ,而中度、重度不典型增生高于正常胃粘膜及轻度不典型增生 (P <0 .0 5 )。胃癌中p5 3基因第 5外显子突变率高达 2 5 % (5 / 2 0 ) ,显著高于无突变的正常胃粘膜 0 % (0 / 2 0 ) (P <0 .0 5 )。结论　p5 3基因突变可出现于中度、重度不典型增生 ,是胃癌发生的一个早期事件。在胃癌发生中p5 3基因第 5外显子突变频繁