耳蜗干细胞内耳移植对感音神经性耳聋大鼠听力恢复的实验研究

目的：探讨耳蜗干细胞内耳移植能否对感音神经性耳聋大鼠听力恢复产生影响。方法：从新生大鼠耳蜗分离的组织,经原代和传代培养,鉴定后移植入感音神经性耳聋模型大鼠内耳,将感音神经性耳聋大鼠模型分为两组：耳蜗干细胞移植组;PBS移植对照组;术后分别于1个月、18个月和24个月采用听觉脑干诱发电位方法检测模型大鼠的听力恢复情况,处死大鼠,通过免疫荧光染色方法,观察移植的耳蜗干细胞在内耳存活、分化和迁移情况。结果：分离新生大鼠耳蜗组织,细胞培养后,可获得大量Nestin阳性耳蜗干细胞。制作感音神经性耳聋模型,将耳蜗干细胞移植入感音神经性耳聋模型大鼠内耳,免疫荧光检测发现在耳蜗干细胞移植组移植针道两侧可见移植的Nestin阳性细胞和Myosin ⅦA阳性细胞。对照组呈较弱的荧光反应。听觉脑干诱发电位结果显示耳蜗干细胞移植组的感音神经性耳聋模型大鼠听力恢复情况较好,对照组无明显改善。结论：耳蜗干细胞移植入内耳可存活、迁移和分化为内耳毛细胞,可促进感音神经性耳聋模型大鼠的听力恢复。     

Wnt信号与神经干细胞分化

背景：研究表明，移植入宿主体内的神经干细胞可分化为神经元或神经胶质细胞。Wnt信号通路与神经干细胞的分化密切相关。通过调节Wnt信号通路可控制神经干细胞的定向分化。 目的：对神经干细胞分化及其与Wnt信号通路的关系进行综述. 方法：应用计算机检索2002-02/2010-03 Medline数据库、Ovid数据库、CNKI、EBSCO数据库与神经干细胞相关文献。检索词为“神经干细胞，神经再生，Wnt信号，神经元，分化”。纳入与神经干细胞分化及Wnt信号系统相关文献，排除重复性研究，保留30篇文献进行综述。 结果与结论：神经干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞，能分化形成机体中枢神经系统几乎所有类型的细胞。Wnt信号通路在神经干细胞的分化中起重要作用。文章从神经干细胞、Wnt信号通路、Wnt信号通路与神经干细胞的分化等方面分别进行了叙述。然而，Wnt信号通路控制神经干细胞分化的具体机制还不是很清楚。     

神经干细胞转基因移植治疗帕金森病的可能与可行*

背景：神经干细胞分化为何种类型的神经细胞,不仅取决于细胞自身基因调控,更受所处环境中外来信号的影响。 目的：就神经干细胞生物学特性、分化以及转基因移植治疗帕金森病的研究进展进行综述。 方法：由第一作者应用计算机检索PubMed数据库1992-01/2009-12及中国期刊网全文数据库2003-01/2010-12有关神经干细胞生物学特性、分化以及转基因移植治疗帕金森病的文章,英文检索词为“neural stem cell(NSCs), neural stem cell transplant, Parkinson’s disease(PD)”,中文检索词为“神经干细胞,干细胞移植,帕金森病”。排除重复性研究及Meta分析,共保留30篇文献进行综述。 结果与结论：转基因神经干细胞移植治疗帕金森病是目前公认的最有前景的治疗方案。在低氧条件下转基因培养的神经干细胞,能高效地诱导分化为多巴胺能神经元,为移植治疗帕金森病提供细胞源。但神经干细胞的生物学特性、诱导分化等还有待进一步分析。同时应用于人体治疗的生物安全性问题也逐渐引起人们的重视,如致瘤性等问题均在进一步探索中。     

神经干细胞与内耳听力损伤及修复

背景：神经干细胞不仅在大脑、脊髓及周围神经的临床应用有大量研究，在内耳的应用也日益受到重视。研究发现利用神经干细胞移植修复内耳毛细胞、螺旋神经节以及听神经损伤是可行的。 目的：复习相关文献，就神经干细胞的特性、培养、内耳听力损伤的应用等方面进行综述。 方法：由第一作者检索1990/2008 PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及万方数据库(http://www. wanfangdata.com.cn)有关神经干细胞培养、分化及在内耳应用等方面的文章。英文检索词为“neural stem cells，transplant，inner ear，peripheral nerve”，中文检索词为“神经干细胞，移植，内耳，周围神经”。检索文献量总计107篇，排除重复性研究，初检得到107篇文献，阅读标题和摘要进行初筛，共保留其中的36篇归纳总结。 结果与结论：虽然对神经干细胞的生物学特性有了进一步的了解，对神经干细胞的研究取得了重大的进步，在听觉研究中可以应用干细胞移植，再生或保护毛细胞和与之相连的螺旋神经元，给内耳疾病治疗带来广泛的前景；但实现毛细胞再生和重建听觉通路依然是充满希望的挑战。随着神经干细胞基础理论的不断更新和发展，其在临床的应用一定会取得突破性进展。     

神经干细胞在神经系统疾病中的应用

背景：神经干细胞的临床应用与基因治疗的有机结合可用于治疗多种神经系统遗传性和获得性疾病,但神经系统疾病多种多样,不同疾病神经组织内环境也不同,它们均影响神经干细胞的治疗效果。神经干细胞基因治疗中,如能同时转入多种外源性基因,让其相互作用及调节,就能更有效地促进神经组织不断再生。 目的：文章就神经干细胞在神经系统疾病方面的应用进行综述。 方法：应用计算机检索Medline数据库(2000-01/2009-08),以“Neural stem cells,Gene,Nervous system diseases”为检索词;应用计算机检索清华同方数据库(2000-01/2009-08),以“神经干细胞、基因、神经系统疾病”为检索词。 结果与结论：计算机初检得到88篇英文文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除因研究目的与此文无关的20篇,内容重复性的研究28篇,共保留40篇文献进行综述。神经干细胞作为一种新型的治疗手段,已用作供体细胞或转基因载体,对脑血管病、脑损伤性疾病、脊髓损伤、神经变性病、脑肿瘤、遗传代谢性疾病等治疗均取得了一定效果,但神经干细胞增殖、分化、迁移调控机制的基础性研究还有许多关键问题没有解决,不同疾病神经组织内的微环境亦影响着神经干细胞的治疗。     

肝干细胞向成熟肝细胞诱导分化的体内外特点☆

学术背景：肝干细胞能够被诱导分化为肝细胞，移植肝干细胞可以修复受损肝组织，代偿部分肝功能。 目的：介绍体内外诱导肝干细胞分化为成熟肝细胞的研究现状。 检索策略：应用计算机检索Pubmed 2000-01/2007-10期间相关文献，检索词“liver stem cell，differentiation”，并限定文献语种为“English”，同时计算机检索万方数据库2000-01/2007-10期间相关文献，检索词“肝干细胞，分化”，并限定文献语种为中文。纳入标准：文章内容与肝干细胞诱导分化相关。排除标准：重复研究或Meta分析类文章。 文献评价：就检索到的100余篇文献进行筛选，选择以肝干细胞诱导分化为主要研究内容的文献38篇，以近年发表在较权威杂志者优先，其中关于细胞分离培养及增殖的5篇，体外诱导分化的22篇，体内诱导分化的11篇。从筛选到的30余篇文献中进一步对关于向成熟肝细胞分化的文献进行归纳及整理，选择其中28篇作为参考文献进行综述。 资料综合：肝脏干细胞根据起源不同，可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞，前者包括卵圆细胞、分化的肝细胞、胎肝细胞和胆管上皮细胞，后者包括胚胎干细胞、骨髓造血干细胞、胰腺上皮祖细胞及肠上皮细胞等，均具有多向性演变的特性。肝干细胞的诱导分化：①体外诱导分化：可以是不同细胞因子或化学剂或病理微环境为主的细胞诱导培养体系，能使肝干细胞定向转化为肝细胞。②体内诱导分化：通过不同途径将肝干细胞植入体内，能够改善肝功能和受损肝脏的组织结构。 结论：肝干细胞研究仍处于理论和实验阶段，应进一步加强对干细胞诱导分化机制的研究，防止向肿瘤细胞分化，促进其分化为成熟肝细胞，推进肝干细胞的临床应用。     

骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定

背景：近年来骨髓间充质干细胞在组织工程、细胞移植、基因治疗等领域备受重视,得到广泛研究。 目的：对骨髓间充质干细胞的生物学特性、体外分离、培养及鉴定方法及其临床学的应用进行综述。 方法：应用计算机检索1995-01/2010-01 CNKI数据库相关文章,检索词为“骨髓间充质干细胞,分离,培养,鉴定”,并限定文章语言种类为中文。同时计算机检索1995-01/2010-01 PubMed数据库相关文章,检索词为“bone marrow mesenchymal stem cells,isolation,cultivation,identification”,并限定文章语言种类为“English”。共检索到文献68篇,最终纳入符合标准的文献30篇。 结果与结论：骨髓间充质干细胞是存在于骨髓中的一类非造血干细胞,易于获得和分离培养,且具有多向分化及高度增殖的能力。目前研究发现它具有分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、神经细胞以及肝细胞等多种类型细胞的潜能,已经成为重要的组织工程种子细胞。     

诱导骨髓间充质干细胞分化移植后的心脏电生理特性★

背景：随着生物技术的发展，使用骨髓间充质干细胞修复心肌梗死后或者心肌肥厚心肌组织的电生理学成为当今研究热点。 目的：概述骨髓间充质干细胞向心肌细胞诱导分化移植后的电生理特征的研究进展。 方法：应用计算机检索PubMed数据库，Springer Link数据库，Science Direct数据库，CNKI数据库2000-01/2010-10文献，检索词分别为“bone marrow mesenchymal stem cells, cardiac/heart, electrophysiology/ electrophysiological characteristics”和“骨髓间充质干细胞，心脏，电生理”。选择骨髓间充质干细胞向心肌细胞诱导分化移植后的电生理特征的文章，无论观察对象是人或者动物均纳入检索标准。排除重复研究或Meta分析类文章。 结果与结论：收集到208篇相关文献，排除162篇不符合标准的文献，共纳入46篇符合标准的文献。经分析得出以下结论：骨髓间充质干细胞诱导分化移植后，在动物试验模型中和心肌梗死或心肌肥厚的患者中均可有效的改善心功能，为心肌病的临床治疗提供了崭新的策略。而移植后所生成的心肌样细胞在改善心脏功能的同时，对心脏电生理也产生了一定的影响。     

干细胞移植治疗脊髓损伤研究进展

学术背景：目前治疗脊髓损伤应用比较多的方法是细胞移植治疗和神经营养因子的应用。移植的细胞可在损伤部位存活、整合入宿主组织中，分化出神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，并且和宿主细胞之间可形成突触样结构，使中枢神经系统的功能得到部分恢复。 目的：总结神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的研究进展。 检索策略：应用计算机检索Pubmed数据库1985-01/2007-10期间的相关文献，检索词为“Spinal Cord Injuries ,Neural,Stem Cell Transplantation”。并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中文科技期刊数据库1989-01/2007-06期间的相关文章，检索词为“脊髓损伤，神经干细胞，神经元，干细胞移植”，并限定文章语言种类为中文。对资料进行初审，并查看每篇文献后的引文。纳入标准：文章所述内容应与移植干细胞后脊髓损伤后神经轴突的再生与修复等研究进展中的应用相关。排除标准：重复研究或Meta分析类文章。共收集到66篇相关文献，31篇文献符合纳入标准，排除的35篇为内容陈旧或重复文献。 文献评价：符合纳入标准的31篇文献中，23篇涉及移植后损伤脊髓神经元和轴突、髓鞘的再生及功能修复的研究，8篇涉及存在的问题与展望。 资料综合：①在脊柱骨折中约有16%~40%并发脊髓损伤。脊髓损伤传统治疗仅限于脊柱骨折脱位的复位固定、解除脊髓压迫、对症及康复治疗，疗效较差。②近年来随着神经病理生理及神经发育学研究的不断深人，神经组织或非神经组织移植逐渐应用于脊髓损伤并取得了肯定的成绩。③干细胞具有自我更新能力，植入受损部位后，其释放的营养因子能促进神经元的再生，且再生轴突能快速穿越移植物与宿主组织的边界，重建轴突的连续性。④关于干细胞及营养因子在损伤脊髓修复方面的研究虽已取得较大进展，但仍存在对神经再生的不利因素，如髓鞘相关抑制分子和胶质瘢痕形成，免疫排斥等。 结论：干细胞移植是治疗脊髓损伤的理想方案，可恢复损伤大鼠脊髓的部分功能。     

中脑神经干细胞转基因治疗帕金森病：可能与可行？*

背景：中脑源性神经干细胞因具有向多巴胺能神经元分化的潜能,在低氧并转基因条件下体外培养易获得足够量的形态及功能成熟的多巴胺能神经元,已成为近几年来兴起并得到快速发展的干细胞移植治疗帕金森病的理想种子细胞。 目的：就中脑神经干细胞转基因治疗帕金森病的研究进展进行综述。 方法：应用计算机检索PubMed数据库(1992-01/2006-12),检索词为“Neural Stem Cell(NSC),Mesencephalic neural Stem Cell(M-NSC),neural Stem cell transplant,Parkinsons Disease(PD)”。同时应用计算机检索中国期刊网全文数据库(2003-01/2008-12),检索词为“神经干细胞、中脑神经干细胞、干细胞移植、帕金森病”。 结果与结论：选择有关神经干细胞、中脑神经干细胞的基础研究及中脑神经干细胞移植治疗帕金森病的相关文献,计算机初检得到83篇文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除因研究目的与此文无关的14篇,内容重复性的研究16篇,Meta分析53篇,共保留47篇文献进行综述。帕金森病的主要病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元变性坏死,用转基因的中脑源性神经干细胞治疗帕金森病是目前公认的最有前景的治疗方案。在低氧条件下并转基因培养的中脑源性神经干细胞,能高效地诱导分化为多巴胺能神经元,为体外获得足够量的多巴胺能神经元用于移植治疗帕金森病提供了实验依据。中脑神经干细胞的基础研究已取得了一定的成果,但中脑神经干细胞移植治疗帕金森病的临床实验还停留在实验室阶段,中脑神经干细胞生物学特性、分离培养、扩增和定向分化诱导等还有待进一步分析。同时中脑神经干细胞应用于人体治疗的生物安全性问题也逐渐引起人们的重视,如在体外多次传代的神经干细胞是否会发生转化,是否会带来一定的副作用,甚至致瘤性等均在进一步探索中。