黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2表达的影响

目的:观察黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤的抑瘤效果及瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白和基因表达的影响。方法:选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌原位癌动物模型,分为模型组,阳性对照组(顺铂),黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍(按照2∶1)高、中、低剂量组,监测抑瘤效果。用免疫组化和Real time-PCR检测移植瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白和基因的表达情况。结果:阳性对照组,黄芪组,黄芪、莪术配伍高剂量组,黄芪、莪术配伍低剂量组平均肿瘤质量明显小于模型组(P0.05);各组MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白表达与模型组相比无统计学差异(P0.05);黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍组高、中、低剂量组肿瘤组织中的MMP-2、FGF-2、BCL-2 mRNA表达明显低于模型组(P0.05)。结论:黄芪、莪术配伍使用在实验周期内对人卵巢癌HO-8910具有抑制作用(P0.05),其作用机制可能与下调移植瘤中MMP-2、FGF-2、BCL-2基因表达相关。     

补肾化瘀方对宫腔粘连子宫内膜细胞生长周期及MMP-9的影响

目的:研究家兔补肾化瘀方含药血清对宫腔粘连子宫内膜基质细胞的生长周期及MMP-9因子的影响,探讨其部分作用机制。方法:选取宫腔粘连患者子宫内膜组织,制备宫腔粘连子宫内膜基质细胞模型。将家兔分为中药高、中、低剂量组及西药补佳乐组、空白组5组,用不同浓度补肾化瘀中药以及西药补佳乐灌胃7d,心脏采血并取含药血清,用家兔含药血清干预细胞模型,应用流式细胞检测仪检测细胞周期,ELISA法检测MMP-9因子的表达。结果:各组家兔含药血清作用于宫腔粘连患者子宫内膜基质细胞模型24h后,与空白组比较,各给药组的增殖指数(PI)和MMP-9含量均增高,凋亡指数(API)均降低,S期细胞百分比均增高,差异有统计学意义(P0.01)。与西药组比较,中药各组PI增高,API降低,S期细胞百分比增高,中药中、低剂量组MMP-9表达减少,差异有统计学意义(P0.01);但中药高剂量组MMP-9表达与西药组差异无统计学意义(P0.05)。与中药中剂量组比较,中药高剂量组MMP-9表达增多,PI增高,API降低,S期细胞百分比增高,中药低剂量组PI降低,API增高,差异均有统计学意义(P0.01);中药中、低剂量组的S期细胞百分比差异无统计学意义(P0.05)。与中药低剂量组比较,中药高、中剂量组与西药组MMP-9表达增多,差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:含有补肾化瘀方的家兔含药血清可以提高宫腔粘连子宫内膜基质细胞中MMP-9因子的水平,促进宫腔粘连子宫内膜基质细胞的增殖,并降低其凋亡,不同浓度的补肾化瘀方对于宫腔粘连子宫内膜基质细胞的影响也有区别。     

中药补肾宁对肾阳虚模型大鼠卵巢MMP-9mRNA的影响

目的:探讨"补肾宁"对氢化可的松法复制肾阳虚模型大鼠卵巢MMP-9mRNA的影响。方法:成年雌性SD大鼠60只,随机分为6组。分别为空白对照组、模型对照组、克罗米芬组、补肾宁低、中、高剂量组。空白对照组每日肌注等容积生理盐水,其余5组,每日下肢肌注氢化可的松注射液,连续11天,制备肾阳虚模型大鼠。11天后按组别分别用药治疗,治疗期为15天。采用原位杂交技术观察各组卵巢局部MMP-9mRNA表达的变化。结果:模型组卵巢MMP-9mRNA的阳性表达明显低于其它各组,其中与补肾宁中、高剂量组比较差异显著(P<0.01);补肾宁中、高剂量组与空白对照组比较MMP-9mRNA表达强度无显著性差异(P>0.05);补肾宁高剂量组与克罗米芬组、补肾宁低剂量组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:肾阳虚模型大鼠卵巢MMP-9mRNA表达减弱,可能与卵泡发育异常及排卵障碍有关。补肾宁能够增强肾阳虚模型大鼠卵巢MMP-9mRNA的表达,起到促卵泡发育和促排卵的作用。     

姜黄素对卵巢癌细胞增殖和转移影响作用的研究

目的:探讨姜黄素对卵巢癌细胞株HO-8910生长抑制及对基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、9)mRNA表达的影响。方法:采用MTT计算细胞抑制率,采用半定量RT-PCR法检测姜黄素作用于HO-8910细胞时对MMP-2、9基因mRNA水平的影响。结果:姜黄素能显著抑制卵巢癌细胞株HO-8910的体外生长,呈时间与剂量信赖性;小浓度(1μmol/L)姜黄素就能抑制MMP-2、9mRNA的表达。随姜黄素剂量增加,HO-8910细胞株的MMP-2、9mRNA表达逐渐减弱。结论:姜黄素能显著抑制卵巢癌细胞体外生长,可能通过抑制MMP-2、9mRNA的表达来抑制肿瘤的侵袭和转移。     

黄芪莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤组织中FGF-2和BCL-2表达的影响

目的观察黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位癌抑瘤效果。方法选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌原位癌动物模型(7组),分为模型组,阳性对照组(顺铂),黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍(按照2∶1)高、中、低剂量组。用免疫组织化学法及Real time-PCR检测移植瘤组织中FGF-2、BCL-2蛋白及基因的表达。结果阳性对照组,黄芪组,莪术组,黄芪、莪术低剂量组,黄芪、莪术高剂量组肿瘤平均肿瘤重量较对照组皆明显减少,且有统计学差异(P0.05),而黄芪、莪术高剂量组与阳性对照组比较,统计学分析有显著性差异(P0.05);各给药组肿瘤组织中的FGF-2、BCL-2 mRNA表达明显低于阴性对照组,且有统计学差异(P0.05);各给药组肿瘤组织中FGF-2蛋白表达明显低于阴性对照组(P0.05);而各给药组肿瘤组织中BCL-2蛋白表达与阴性对照组相比较无统计学差异(P0.05)。结论黄芪、莪术配伍使用在实验周期内对人卵巢癌HO-8910抑瘤效果明显(P0.05),其作用机制可能与下调FGF-2、BCL-2的表达有关。     

丹参对子宫内膜异位症间质细胞 MMP-9 mRNA 及蛋白 表达的影响

目的:观察丹参对子宫内膜异位症间质细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)m RNA和蛋白表达的影响,探讨其可能的机制。方法:用混合酶消化法进行间质细胞培养,分别加入空白对照(空白组),不同浓度丹参(1 mg/L,5 mg/L,10 mg/L,15 mg/L)(丹参1组、丹参2组、丹参3组、丹参4组)。细胞常规培养48 h后,用CCK-8法观察不同浓度的丹参对间质细胞增殖的影响,RT-PCR法检测其对MMP-9 m RNA表达的影响,Western blotting检测其对MMP-9蛋白含量的影响。结果:CCK-8法结果显示,除丹参1组外,其余丹参组间质细胞增殖与空白组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。与空白组比较,除丹参1组外,各丹参组MMP-9m RNA表达降低、MMP-9蛋白表达量减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:丹参可以抑制异位内膜间质细胞增殖,同时可以抑制MMP-9m RNA和蛋白的表达,从而降低对细胞外基质的降解,最终抑制子宫异位内膜的种植、侵袭和转移。     

跌打通痹膏对兔膝骨关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响

目的:研究跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响,探讨跌打通痹膏干预软骨基质降解的作用机制。方法:新西兰兔60只随机分成空白组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组12只。空白组不做任何处理,模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,假手术组打开关节腔后不做处理,直接缝合。正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷治疗4周。术后第5周各组随机选择1只兔处死验证造模,进行膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察,检测关节软骨中MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达。结果:1)膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察:模型组与空白组有差异,跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较有差异,跌打通痹膏组与骨通贴组比较无差异。2)MMP-1,MMP-3,MMP-13和COL-Ⅱ的mRNA表达检测:模型组与空白组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著提高,差异有统计学意义(P0.01),COL-ⅡmRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01);跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01),COL-ⅡmRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05);跌打通痹膏组与骨通贴组比较,MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)跌打通痹膏和骨通贴对KOA均有治疗作用,可延缓KOA的病程,且两者间差异无统计学意义。2)跌打通痹膏通过抑制MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达,减缓COL-Ⅱ降解,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。     

凋膜止崩方对大鼠子宫内膜增生症子宫内膜组织中MMP-1及乏TIMP-1mRNA表达的影响

目的:探究凋膜止崩方治疗大鼠子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗无排卵型功血(ADUB)的新方法——中药靶向干预子宫内膜增生症提供理论依据.方法:采用RT-PCR检测法测定凋膜止崩方宫腔靶向干预对ADUB大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)基因表达水平的变化.结果:模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,MMP- lmRNA表达降低,TIMP-1mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而大小剂量组间比较无统计学意义.结论:凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的机制可能与下调MMP- 1mRNA表达有关.     

KISS-I/MMP-9对子宫内膜异位症的表达及意义研究

目的:通过检测KISS-I及MMP-9在EMs患者增生期与分泌期子宫内膜中的表达及对比研究,探讨其临床意义及两者相关性。方法:通过免疫组化和图像分析法对KISS-I、MMP-9蛋白在EMs患者的ECE组(48例)、匹配的EUE组(30例)以及CE组(27例)中的表达进行定位和半定量分析。结果:①KISS-I、MMP-9在ECE组、EUE组以及CE组子宫内膜组织中表达清楚;②MMP-9表达顺序为:ECE组>EUE组>CE组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。三组表达强度在不同的月经周期中无统计学差异(P>0.05);KISS-I表达顺序为:CE组>EUE组>ECE组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:KISS-I及MMP-9在EUE、ECE以及CE均有表达,且表达存在差异性,可能共同参与EMs患者发病过程中子宫内膜异位侵袭、种植的过程。     

芪蛭益肺药物血清对转化生长因子-β1刺激下肺成纤维细胞中基质金属蛋白酶及其抑制剂基因表达的影响

目的观察芪蛭益肺药物血清对肺成纤维细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9及其抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响,探讨其作用机制。方法采用胰酶消化法提取大鼠肺组织成纤维细胞,培养至第4代后随机分为空白血清组、模型组和药物血清组。模型组与药物血清组先滴加含0.0025μg/mL转化生长因子-β1(TGF-β1)的DMEM,空白血清组滴加新鲜无血清DMEM,随后空白血清组、模型组滴加含5%空白血清的DMEM,药物血清组加入5%含芪蛭益肺药物血清的DMEM。培养48、72 h后,采用行实时荧光定量PCR法检测各组细胞MMP-9、TIMP-1 mRNA表达。结果与空白血清组比较,培养48 h后模型组和药物血清组成纤维细胞中MMP-9、TIMP-1 mRNA表达上升,差异有统计学意义(P0.05),药物血清组和模型组之间比较差异无统计学意义。与空白血清组比较,培养72 h后模型组MMP-9 mRNA表达上升;与模型组比较,培养72 h后药物血清组MMP-9 mRNA表达下降,差异均有统计学意义(P0.05);TIMP-1 mRNA表达3组间比较差异无统计学意义。结论芪蛭益肺颗粒药物血清能够抑制TGF-β1刺激后肺成纤维细胞中MMP-9 mRNA高表达。     

凋膜止崩液宫腔靶向给药对ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1、TIMP-1、ER及亚型表达的影响

目的探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵性功血(ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法。方法卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR检测法测定各组大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达水平的变化;采用免疫组化技术检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体(estro-gen receptor,ER)、ERα、β亚型的表达变化。结果模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。实验大、小剂量组与模型对照组比较,MMP-1mRNA表达降低,TIMP-1mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),而大小剂量组间比较无显著性差异(P>0.05)。模型对照组与空白组比较,ER、ERα、β表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验大、小剂量组与模型对照组比较,ER、ERα、β表达下调,差异有统计学意义(P<0.05),而实验大、小剂量组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论凋膜止崩液宫腔靶向给药后ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1mRNA表达下降,TIMP-1mRNA表达升高,ER、ERα、β表达下调,可能是其治疗子宫内膜增生症的机制。     

六味地黄苷糖对高糖诱导的胎盘滋养层细胞增殖侵袭 及ERK/MMP-9信号通路的作用机制研究

目的:探究六味地黄苷糖(LW-AFC)通过调控ERK/MMP-9信号通路对高糖诱导的胎盘滋养层细胞增殖侵袭作用机制研究。方法:将在ATCC细胞库购买胎盘滋养层细胞分为空白对照组(空白组):胎盘滋养层细胞正常培养,不做任何处理;高糖诱导组(诱导组):采用高糖诱导的方式制作高糖胎盘滋养层细胞模型;六味地黄苷糖组(苷糖组):在高糖诱导胎盘滋养层细胞模型完成后给予LW-AFC培养。通过MTT法检测胎盘滋养层细胞增殖率,Western blot法检测胎盘滋养层细胞中ERK/MMP-9的蛋白含量,Transwell小室实验检测胎盘滋养层细胞侵袭情况,qRT-PCR法检测胎盘滋养层细胞中ERK/MMP-9mRNA的表达含量,克隆法检测胎盘滋养层细胞迁移情况的差异性,探究LW-AFC对高糖诱导的胎盘滋养层细胞增殖侵袭及ERK/MMP-9通路表达的影响。结果:随着时间的推移,诱导组胎盘滋养层细胞的增殖率降低,与诱导组比较,苷糖组细胞增殖率显著升高(P0.05)。苷糖组与诱导组比较,苷糖组滋养层细胞侵袭能力显著高于诱导组细胞(P0.05)。诱导组、苷糖组与空白组比较,空白组细胞克隆数量显著较多(P0.05);苷糖组与诱导组比较,诱导组胎盘滋养层细胞克隆数量显著低于苷糖组(P0.05)。诱导组胎盘滋养层细胞中ERK/MMP-9蛋白表达、ERK/MMP-9 mRNA表达量最高,空白组胎盘滋养层细胞蛋白表达、mRNA表达量低于苷糖组、诱导组(P0.05),苷糖组与诱导组比较,苷糖组胎盘滋养层细胞ERK/MMP-9蛋白表达、ERK/MMP-9 m RNA表达量显著低于诱导组(P0.05)。结论:LW-AFC能够提升高糖诱导的胎盘滋养层细胞的增殖速率,增加细胞迁移、侵袭的数量,LW-AFC的作用机制可能与下调ERK/MMP-9通路表达含量有关,这一试验结果可逐步应用于临床妊娠糖尿病患者的治疗中。     

逍遥散含药血清对人肝星形细胞分泌MMP-1和TIMP-1的影响

目的研究逍遥散含药血清对人肝星形细胞增殖及分泌MMP-1和TIMP-1的影响,探讨逍遥散抗肝纤维化的作用机制。方法 100μg·L-1的瘦素刺激体外培养的人肝星形细胞,将不同浓度逍遥散含药血清作用于活化后的细胞,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测MMP-1和TIMP-1 mRNA的表达,ELISA法检测上清液中MMP-1和TIMP-1的分泌量。结果瘦素刺激后,模型组OD值升高,MMP-1的mRNA和蛋白的表达量降低,TIMP-1的mRNA和蛋白的表达量升高,与正常组相比,差异具有统计学意义(P0.01);逍遥散中、高剂量组与秋水仙碱组降低细胞的OD值,提高MMP-1的mRNA和蛋白的表达,降低TIMP-1的mRNA和蛋白的表达,与模型对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论逍遥散具有很好的抗肝纤维化作用,其机制与抑制人肝星形细胞活化增殖,提高MMP-1活力,降低TIMP-1活力,促进ECM的降解有关。     

凋膜止崩液宫腔靶向给药对ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1、TIMP-1、ER及亚型表达的影响

目的 探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵功血( ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法.方法 卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR检测法测定各组大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达水平的变化;采用免疫组化技术检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体( estrogenreceptor,ER)、ERα、β亚型的表达变化.结果 ①模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,MMP-1 mRNA表达降低,TIMP-1 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而大小剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05).②模型对照组与空白组比较,ER、ERα、β表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,ER、ERα、β表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05),而实验大、小剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 凋膜止崩液宫腔靶向给药后ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1mRNA表达下降,TIMP-1 mRNA表达升高,ER、ERα、β表达下调,可能是其治疗子宫内膜增生症的机制.     

温针灸对不同时间点KOA模型兔关节软骨中MMP-1、MMP-13表达的影响

目的:观察温针灸(warming moxibustion)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨细胞中基质金属蛋白-1、13(matrix metalloproteinase-1、13,MMP-1、MMP-13)表达的影响,明确温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取70只新西兰大耳兔,其中10只作为空白对照组,剩余随机分为模型2周组、模型4周组、模型6周组、温针灸2周组、温针灸4周组、温针灸6周组。采用右后肢伸直位石膏固定制备KOA兔模型,模型2、4、6周组不予处理,温针灸2、4、6周组分别给予温针灸治疗2周,治疗结束后取材。采用免疫组化及RT-PCR检测各组治疗前后关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型2周组、模型4周组、模型6周组软骨中MMP-1、MMP-13表达明显升高(P0.05),且各组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。与相应模型组比较,温针灸治疗后,MMP-1、MMP-13的表达降低(P0.05),且各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:温针灸可降低KOA兔软骨中MMP-1、MMP-13的表达,说明温针灸治疗KOA可能与其抑制MMP-1、MMP-13的表达有关。     

清胰化积方在晚期胰腺癌治疗中可抑制MMP-2表达

目的:研究清胰化积方干预后MMPs的表达变化对胰腺癌肝转移的影响。方法:通过脾脏注射法建立裸鼠人胰腺癌SW1990HM肝转移模型,观察清胰化积方干预后对胰腺癌肝转移灶增殖的影响,通过检测MMPs mRNA表达的变化观察其与肝转移灶之间的关系,并通过免疫组化和western blot进一步验证。结果:①与NS组相比,QYHJ各组均可抑制肝转移灶的增殖生长(P<0.05);②与NS组比较,QYHJ干预后,大、中、小剂量组的肝转移灶肿瘤组织中MMP-1、MMP-7、MMP-9的mRNA表达无明显差异(VS NS,P>0.05);MMP-2的mRNA表达下调(VS NS,P<0.05)。结论:清胰化积方可能通过诱导MMP-2的表达下调抑制胰腺癌肝转移的发展。     

黄芪、莪术单药及配伍通过影响上皮间质转化抑制Lewis荷瘤小鼠肺转移的研究

目的通过观察黄芪、莪术及其配伍应用对Lewis荷瘤小鼠肺转移灶数目及肿瘤上皮间质转化的影响,研究其基于上皮间质转化机制抑制肿瘤转移的作用,并分析黄芪、莪术配伍应用的意义。方法将50只C57 Lewis荷瘤小鼠模型随机分为模型组、顺铂组、黄芪单药组、莪术单药组及黄芪-莪术配伍组,接种后次日开始连续15 d,分别给予相应药物干预,处死后解剖取出肺脏,解剖显微镜下观察双肺表面超过2 mm结节数目;剥离腋下种植瘤体,EnVision法检测肿瘤组织中E-cad、MMP-2、MMP-9表达。结果顺铂组和配伍组肺转移结节数量少于模型组(均P0.05),单药组肺转移灶数量虽均少于模型组但差异无统计学意义(P0.05);各中药组均不及顺铂组(P0.05),配伍组少于黄芪、莪术单药组,但差异无统计学意义(P0.05)。E-cad表达,与模型组相比,顺铂组、配伍组升高(均P0.05),单药组与模型组比差异均无统计学意义(P0.05);各中药组低于顺铂组(均P0.05),配伍组高于莪术组(P0.05),与黄芪组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-2表达,各组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-9表达,顺铂组、配伍组、莪术单药组低于模型组(均P0.05),黄芪组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);各中药组高于顺铂组(均P0.05),配伍组低于黄芪组(P0.05),与莪术单药组接近,差异无统计学意义(P0.05)。结论黄芪-莪术配伍抑制肿瘤转移的效果优于单用黄芪、莪术,其作用机制为提高E-cad蛋白表达、降低MMP-9表达;黄芪、莪术配伍使用在提高E-cad表达上优于单用黄芪、莪术,在降低MMP-9表达上与莪术相近、优于单用黄芪。     

前列宁胶囊调控MMP-2影响细胞外基质对良性前列腺增生治疗的影响

目的:观察前列宁胶囊(QC)对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)介导的细胞外基质(ECM)的影响,探讨QC对BPH的治疗机制。方法:SD大鼠随机分为空白组,BPH模型组,QC低、中、高观察组,建立BPH模型,QC干预,ELISA法检测大鼠血清MMP-2、FN、Collagen IV、LN; BPH-1细胞培养,分别加入MMP-2和未加MMP-2刺激因子,QC干预,MTT法观察细胞活性,Q-PCR及Western-Blot分别检测MMP-2、FN、Collagen IV、LN基因及蛋白表达(未加MMP-2),加入MMP-2组检测FN、Collagen IV、LN。结果:QC各剂量组大鼠血清中的FN、LN、Collagen IV含量降低,MMP-2升高(P 0. 05 or P 0. 01);BPH-1细胞培养QC干预,加入及未加入MMP-2刺激因子细胞活力均有下降,以48 h后最明显;加入MMP-2刺激因子FN、Collagen IV、LN基因及蛋白表达明显低于未加MMP-2刺激因子,差异有统计学意义。结论:QC对BPH具有治疗作用,QC调控MMP-2介导细胞外基质FN、Collagen IV、LN基因和蛋白表达可能是其治疗BPH机制之一。     

补阳还五汤含药鼠血清对血管平滑肌细胞Rho激酶及TFmRNA、基质金属蛋白酶MMP-2mRNA、MMP-9mRNA表达的影响

目的通过运用益气活血法的代表方剂补阳还五汤对血管平滑肌细胞的干预,观察各组血管平滑肌细胞Rho激酶及TFmRNA、基质金属蛋白酶MMP-2mRNA、MMP-9mRNA的表达等指标的变化。方法将30只SD大鼠随机分为3组,一组为正常对照组,另两组为补阳还五汤低剂量对照组(10 g·kg^-1)和补阳还五汤高剂量对照组(20 g·kg^-1);AS模型大鼠30只随机分为模型组,补阳还五汤低剂量治疗组(10 g·kg^-1)和补阳还五汤高剂量治疗组(20 g·kg^-1)。给SD正常大鼠和AS模型大鼠口服不同浓度的补阳还五汤以制备含药大鼠血清,并在用含药大鼠血清保护体外培养的血管平滑肌细胞之后,检测血管平滑肌细胞Rho激酶mRNA、TFmRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA的表达。结果与模型对照组相比,各组补阳还五汤高剂量治疗组血管平滑肌细胞Rho激酶、TFmRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA的表达均降低。差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论补阳还五汤含药鼠血清可以通过抑制Rho激酶的活性,下调ROCK1、TF、MMP-2、MMP-9的mRNA的表达水平抑制血管平滑肌细胞增殖,从而抑制AS病变的形成和发展。     

胃热消炎合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖影响的机制研究

目的研究胃热消炎合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法取对数生长期的人胃癌细胞SGC-7901进行体外实验,其中空白血清组加入含10%正常血清培养,低剂量含药血清组加入含2.5%药物血清+7.5%正常血清培养,中剂量含药血清组加入含5%药物血清+5%正常血清培养,高剂量含药血清组加入含10%药物血清培养,胃热消炎合剂含药血清通过给大鼠灌胃的方式获得。分别采用CCK-8法、EdU染色法和免疫荧光法检测各组细胞增殖情况,采用RT-PCR法检测各组细胞增殖信号通路p53-p21的相关基因p21、p53、CyclinD1、CDX2、CDK7mRNA的表达情况,采用Western blot法检测各组细胞中p21、p53、CyclinD1、CDX2蛋白表达水平。结果各含药血清组SGC-7901细胞增殖受到明显抑制,且呈浓度依赖性。各含药血清组p21、p53 mRNA表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),CyclinD1 mRNA表达水平均明显低于空白血清组(P均<0.05),且呈浓度依赖性;各组CDX2、CDK7mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。各含药血清组p21蛋白表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),且呈浓度依赖性;低剂量含药血清组和中剂量含药血清组p53蛋白表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),而高剂量含药血清组p53蛋白表达水平明显低于空白血清组(P<0.05);各组CyclinD1、CDX2蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论胃热消炎合剂可能通过作用于细胞周期来抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,其可能具有预防和治疗早期胃癌的作用。