海南省小型兽类巴尔通体的分离培养和序列分析

目的调查海南省小型兽类巴尔通体感染状况以及携带巴尔通体的种类,为巴尔通体感染的预防控制提供科学依据。方法用鼠笼法捕获小型兽类,取心脏血,抗凝,取100μl抗凝血用胰酶大豆肉汤按1∶4稀释后接种于含5%去纤维羊血的胰酶大豆琼脂培养基上,置含5%CO2的培养箱中37℃培养45d。挑选疑似菌落涂片,革兰染色、Gimanez染色后做镜检进行初筛,将革兰阴性杆菌用巴尔通体属特异性引物进行聚合酶链反应（PCR）。然后对其PCR产物测序,将所测核酸序列提交到GenBank,做相似性比较及序列分析。结果从65份样本中分离培养出疑似菌落6株,革兰染色镜检均见阴性小杆菌,Gimanez染色为红色杆菌,经PCR证实6株均为巴尔通体,其中分离自黄毛鼠和屋顶鼠各2株,针毛鼠和臭鼩鼱各1株。经过序列分析证实,所分离到的巴尔通体与Bartonella rattimassiliensis、B.tribocorum和B.queenslandensis3种巴尔通体相似度最高。结论海南省小型兽类中有巴尔通体感染,存在人群感染的风险。     

中俄边境黑瞎子岛鼠群中巴尔通体调查

目的 明确中俄边境黑瞎子岛鼠群中巴尔通体(Bartonella)的分布和分子流行特征.方法 2017年4-10月,在黑瞎子岛用夹夜法捕鼠,解剖取鼠肝和脾脏样本,用兔血脑心浸液琼脂培养基分离培养巴尔通体,用PCR法扩增巴尔通体柠檬酸合成基因(gltA)片段,阳性者经基因测序,进行系统发育分析.结果 共捕鼠354只,分属于...     

浙江省啮齿动物巴尔通体感染状况调查

目的调查浙江省啮齿动物巴尔通体携带状况,为巴尔通体人群感染的预防控制提供科学依据。方法用夹夜法在浙江省不同地区、不同季节捕获啮齿动物,无菌操作取啮齿动物的肝和脾,用聚合酶链反应（PCR）检测巴尔通体,然后对部分阳性产物测序,将所测核酸序列提交到GenBank,做相似性比较及序列分析。结果从黑线姬鼠、褐家鼠、小家鼠、东方田鼠、北社鼠和黄毛鼠中检测到巴尔通体特异DNA片段,阳性率分别为5．76％（17／295）、2．86％（1／35）、10．00％（1／10）、5．26％（1／19）、3．91％（7／179）和3．03％（1／33）,浙江省首次从小家鼠中检测到巴尔通体DNA片段;岱山、海宁、建德、丽水、仙居、龙游地区的阳性率分别为2．63％（3／114）、10．84％（9／83）、2．88％（3／104）、11．11％（12／108）、0（0／46）和0．57％（1／175）;4个季度阳性率分别为3．39％（4／118）、6．08％（9／148）、2．95％（7／237）、6．30％（8／127）,平均阳性率为4．44％（28／630）;遗传进化分析提示检测到的巴尔通体与Bartonellahenselae遗传关系最接近。结论浙江省啮齿动物中广泛存在巴尔通体感染,存在对人群致病的风险,应采取措施加以控制。     

云南省西部地区鼠群中巴尔通体感染的调查

目的了解云南省西部地区鼠类中巴尔通体（Bartonella species）的感染情况。方法2004年在景东、南华、盈江、龙陵等县捕捉活鼠，采集捕获鼠全血标本，用含5％兔心血的脑心浸液琼脂培养基分离巴尔通体，可疑标本用聚合酶链反应扩增枸橼酸合酶基因（gltA）的特异片段（379bp）加以证实。结果4个县共捕获鼠类397只，为1个属4个种，分属大足鼠、黄胸鼠、褐家鼠以及斑胸鼠。从397份标本中分离到巴尔通体54株，分离率为13．6％（54／397）。菌株分布于各调查点的鼠种中，大足鼠的分离率为22．0％（22／100）、黄胸鼠14．8％、（31／210）、褐家鼠为1．2％（1／87）、斑胸鼠阴性。结论云南省西部地区的鼠类中存在着较为广泛的巴尔通体的感染，还需要对相关疾病传播关系做进一步的研究。     

浙江省鼠中巴尔通体rpoB基因系统进化分析

目的初步了解巴尔通体在浙江省鼠群中携带状况及流行特征,为制定预防措施提供依据。方法 2009年8月于浙江省磐安县捕鼠101只,提取其肝、脾DNA后,选择巴尔通体属rpoB基因进行PCR扩增,并对所得产物进行测序及进一步的系统进化分析。结果 2009年在磐安县捕获的101只鼠中肝脾标本检出巴尔通体rpoB基因阳性1例,其中黄胸鼠中巴尔通体分离率为4.3%;此分离株与格雷汉巴尔通体（GenBank序列号：AB426694.1）处于同一进化分支上（自展值为96%）。结论在浙江省鼠群中存在巴尔通体感染,分离株种属为格雷汉巴尔通体。     

云南省不同环境鼠形动物巴尔通体感染情况的研究

目的 了解云南省不同地区、环境和气候条件下鼠形动物巴尔通体感染状况。方法 对2003年6～7月在云南省3种不同气候类型共5个县、市不同生境中捕获的鼠形动物采集股动脉血,用含5％去纤维兔血脑心浸液琼脂培养基置于35℃含5％CO_2培养箱中分离培养巴尔通体,疑似菌落用巴尔通体属特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增特异基因片段,电泳图中出现目标带即判断为阳性菌株。结果 捕获鼠形动物278只,接种鼠血标本176份,共检获巴尔通体疑似菌株79份,经PCR证实69份为巴尔通体。6种被检动物中有4种动物检出巴尔通体,感染鼠分属于家鼠属、绒鼠属、小鼠属。总检动物巴尔通体分离率为39.2％;其中以黄胸鼠分离率最高为42.0％。除大理市外,剑川、祥云、云龙和云县等县捕获的鼠类标本均分离到巴尔通体,鼠类生境涉及室内、庭院、溪场灌木丛、山地灌木丛,跨越暖温带季风气候、北亚热带季风气候、南亚热带河谷少雨气候三种气候类型。结论 研究再次证实云南鼠类宿主,特别是与人类关系密切的家栖鼠类巴尔通体感染率较高;巴尔通体在多种鼠类、不同地区、不同气候环境中均有分布,呈现出对不同地理和气候环境具有广泛适应性及宿主多样性特征。     

福州海港口岸鼠形动物巴尔通体感染调查

目的了解福州海港口岸鼠形动物巴尔通体感染状况,并掌握其菌种基因类型、遗传特征和变异关系,为该菌种的溯源及鼠传疾病防治工作提供科学依据。方法 2013年2月—2014年1月,随机抽取福州海港口岸4个监测点,采用鼠笼法捕获鼠形动物,解剖取其肝、肾,研磨后提取核酸,进行PCR扩增,并对所得产物进行测序及系统进化分析。结果共捕获212只鼠形动物,经分类鉴定,隶属于2目2科3属4种,以黄胸鼠为优势种群,占39.62%,臭鼩鼱和褐家鼠分别占33.96%和23.59%。鼠密度2.31%。2只雄性黄胸鼠检出巴尔通体,感染率为0.94%。遗传进化分析显示本次检测到的巴尔通体与B.taylorii以及对人类有致病性的B.tribocorum的遗传关系最近。结论福州海港口岸鼠形动物中存在巴尔通体感染,而且携带人类致病性巴尔通体,存在人群感染的风险。     

用分子生物学技术诊断巴尔通体感染

目的 应用聚合酶链反应(PCR)技术建立巴尔通体的检测鉴定方法并用于诊断临床疑似猫抓病合并双侧支气管肺炎患者。方法 根据16S～23S rRNA ITS基因序列较其他属细菌长,而且位于这段基因序列中的tRNA~(Ile)-tRNA~(Ala)基因间隔区具有高度变异性,tRNA~(Ile)和tRNA~(Ala)基因序列在巴尔通体属中完全保守,设计引物;同时应用文献发表的2对引物直接扩增1例临床可疑猫抓病患者全血基因组DNA。将研究设计引物的PCR产物直接测序,并进行序列分析。结果 3对引物扩增全血基因组DNA均获得巴尔通体特异基因片段,根据其中2对引物扩增产物大小与阳性对照不同,可初步确定样本与阳性对照菌株是不同巴尔通体;序列分析结果显示,研究设计引物TIle.455p-TAla.885n扩增产物核苷酸序列与中国云南省巴尔通体-分离株对应位置的序列相一致,同源性100％。结论 应用PCR技术从血液中直接扩增特异基因片段,可以快速检测巴尔通体感染;测序及序列分析结果进一步提供了此种致病巴尔通体在中国南北方均存在的线索。     

北京市宠物猫和流浪猫巴尔通体感染状况调查

目的调查北京市宠物猫和流浪猫巴尔通体感染状况。方法采集猫的抗凝血和血清并收集相关流行病学信息。将抗凝血用灭菌胰酶大豆肉汤按1∶4稀释后,取100μl接种于含5%去纤维羊血的脑心浸液培养基上,置于37℃、含5%CO2培养箱中分离培养至45 d。选择glt A、fts Z、rib C引物对分离到的疑似菌落进行PCR并测序,所测核酸序列进行同源性比较及系统发育分析,确定巴尔通体种。利用间接免疫荧光法检测血清样本汉赛巴尔通体抗体水平。利用SPSS 13.0软件分析实验室数据与现场采集的流行病学数据。结果北京市猫的巴尔通体血培养分离率为13.8%,获得的22株分离株全部为汉赛巴尔通体。血清抗体阳性率为39.4%。流浪猫(30.4%)、染蚤猫(36.6%)、幼猫(27.9%)的血培养阳性率较高,差异有统计学意义。染蚤猫的血清抗体阳性率(61.0%)也显著高于未染蚤猫(31.9%)。结论北京市宠物猫和流浪猫中巴尔通体感染率较高,且均为对人致病的汉赛巴尔通体,需做好宠物猫的防蚤除蚤、流浪猫的管理来预防人类巴尔通体感染。     

不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体感染调查

目的了解不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体的感染状况。方法用显微镜凝集实验方法检测不明原因发热病人血清的钩端螺旋体抗体,用间接免疫荧光法检测血清的汉塞巴尔通体和五日热巴尔通体IgG抗体水平。结果共检测232份不明原因发热病人血清。感染率:汉塞巴尔通体(30.17%)五日热巴尔通体(18.10%)钩端螺旋体(4.74%),混合感染率:汉塞巴尔通体和五日热巴尔通体(14.22%)钩端螺旋体和汉塞巴尔通体(2.16%)钩端螺旋体和五日热巴尔通体(0.86%),1例病例三项抗体阳性。结论不明原因发热病人中有一定比率的病例是因为感染钩端螺旋体,和/或汉塞巴尔通体、五日热巴尔通体而引起的发热,感染率各不相同,混合感染较为普遍。在不明原因发热的诊断中,有必要进行钩端螺旋体病和巴尔通体病的诊断筛查。     

黑龙江省黑瞎子岛地区小型哺乳动物的调查研究

目的 了解黑龙江省黑瞎子岛地区小型哺乳动物的物种多样性及其与其他地区相应物种间的关系,为可能存在于该岛的自然疫源性疾病的病原体筛查工作奠定基础,为疾病的预防与控制提供科学依据.方法 用夹夜法捕捉小型哺乳动物,首先进行形态学鉴定,然后用PCR方法扩增线粒体细胞色素b(mt-cytb)基因并测序,所得序列与GenBank中该物种的不同地区相应序列进行同源性比较和系统发育分析.结果 共捕获374只小型哺乳动物,分属于2目4科6属9种,其中黑线姬鼠和红背鼠平为优势鼠种.形态学和分子生物学方法鉴定结果相一致.结论 黑瞎子岛上小型哺乳动物物种复杂,具有多样性,并且mt-cytb基因未发生明显变异.岛上多个物种可以携带自然疫源性疾病的病原体,因此该研究对当地的疾病预防与控制具有重要的指导意义.     

我国小兽与自然疫源性疾病关系研究概况

小型兽类可保存或传播自然疫源性疾病有数十种,主要有鼠疫、鼠型斑疹伤寒、肾综合征出血热、钩端螺旋体病、恙虫病等。其体外寄生虫如蜱、螨、跳蚤、虱等是传播多种疾病的媒介昆虫。由于种类多,分布广,迁移性较小,不同种类的组成及空间分布特征又多与地理环境、气候条件、生态适应性能力和多种疾病的关系密切,因此对小型兽类与疾病关系的调查研究具有重要意义。该文介绍了我国目前小型兽类与重要或常见自然疫源性疾病关系的研究概况,为人畜共患传染病的研究和防治工作提供参考。     

分子生物学技术检测鼠形动物巴尔通体

目的查明鼠形动物巴尔通体感染情况。方法在天台县采用夹夜法捕捉鼠形动物，采集该动物的肝脏，用PCR方法检测DNA，并对阳性产物克隆测序，计算感染情况。结果采集的55份鼠类肝脏阳性25份，其中黑线姬鼠阳性率为48．84％，黄毛鼠为33．33％，所检测到的巴尔通体与B．doshiae最接近。结论天台县鼠形动物有很高的巴尔通体DNA阳性率，存在传播给人的风险，必须采取措施加以控制。     

云南省小型哺乳动物寄生恙螨群落种多度分布

目的了解云南省小型哺乳动物寄生恙螨种类和数量分布情况。方法选取云南省16个县（市）为调查点，现场用鼠笼加食饵诱捕小型哺乳动物（小兽），收集其耳廓和外耳道全部恙螨，用Hoyer’s液封片，制成玻片标本后，常规分类、鉴定。种多度分布采用Preston对数正态分布拟合。结果共捕获小兽6888只，其双耳部检获恙螨87416只，属3亚科21属192种。小板纤恙螨（Leptotrombidium scutellare）和中华纤恙螨（Leptotrombidium sinicum）为主要优势螨种。种多度分布趋势用Preston对数正态分布模型拟合较好，拟合优度为0．7975。结论云南省小型哺乳动物寄生恙螨群落的种多度关系呈对数正态分布，中等个体数量的恙螨种类占多数，个体数量很少的稀有种次之，个体数量很大的优势种类在群落内只是少数。     

云南省横断山区小型兽类的组成及空间分布

目的 了解和阐述我国西南横断山区小型兽类的组成及其空间分布状况.方法 在既往系列区系调查研究的基础上,就云南省西部横断山区北纬21°～29°(计8个纬度梯度带,分别以Ⅰ～Ⅷ表示),海拔100～5000m(分9个海拔梯度带,分别以A～I表示)之间所知分布小型兽类的组成及其空间分布的资料进行综合整理、统计.结果 发现云南省横断山区小型兽类由5目11科58属187种(亚种)组成.小型兽类科、属、种丰富度沿纬度梯度带分布的主要情况是:Ⅰ带9科30属44种;Ⅱ带9科33属57种;Ⅲ带9科38属74种;Ⅳ带9科43属93种;Ⅴ带10科43属101种;Ⅵ带9科39属91种;Ⅶ带11科40属102种;Ⅷ带11科35属67种;种和属丰富度基本呈现随纬度增加逐步增高后降低的分布格局,高峰值主要出现在中纬度高度24°N～27°N区间;它们沿海拔梯度带分布的主要情况是:A带8科28属54种;B带9科41属90种;C带9科37属102种;D带10科41属101种;E带9科35属94种;F带9科33属76种;G带9科29属58种;H带8科15属28种;1带4科属7种,种和属丰富度总体上呈现中间高、两头低的空间分布格局,高峰值主要出现在中海拔高度1500～3000m区间.结论 横断山区小型兽类沿各纬度和海拔梯度的组成和分布情况不同,但总体呈现出以中海拔和中纬度梯度带物种丰富度都相对较高的空间分布特征.     

Bartonella infection in sylvatic small mammals of central Sweden

Sylvatic small mammals were captured in rural habitats near Uppsala, Sweden, to measure the prevalence of bartonella infections, characterize bacterial isolates and identify their host range, and increase our understanding of host-pathogen ecology. During 7 nights of trapping at 3 localities, 236 small mammals were captured (trap success 30%). Bartonella were isolated from bloods of Apodemus flavicollis (19 of 110 tested), Apodemus sylvaticus (6/25), Clethrionomys glareolus (9/60), Microtus agrestis (1/3), Mus musculus (1/18), and Sorex araneus (3/20). Nucleotide sequencing (a 338 bp fragment of the gltA gene) of 40 isolates yielded 6 unique genotypes. Five of the 6 genotypes were most similar to other known bartonella isolated from Old World small-mammal hosts. The most frequent genotype (83%) was isolated from A. flavicollis and M. musculus and was identical to Bartonella grahamii, a recently demonstrated human pathogen. These two hosts were most frequently captured in and around human structures and work places, thus providing conditions that could potentially lead to frequent human infections.