真菌KS—1995产生的增加LDLR基因表达的活性物质的研究

用含有ＬＤＬＲ基因启动子和荧光素酶基因的重组细胞，快速筛选微生物来源的增加ＬＤＬＲ基因表达的活性物质。在筛选过程中，应用有机溶煤萃取、ＨＰＬＣ分离、ＯＤＳ和硅胶柱层析等方法，从真菌ＫＳ－１９９５的发酵液中分离到活性化合物Ｃ－１ｘ。该化合物具有很强的增加与ＬＤＬＲ基因启动子相连接的荧光素酶基因表达的活性，其诱导活性达２００％的浓度（ＳＣ２００）为０．０１μｍｏｌ／Ｌ。Ｃ－１ｘ经理化特性及ＭＳ、ＮＭＲ     

小鼠腹腔巨噬细胞内胆固醇酯再形成的选择性抑制剂—FO—6979—P9

ＦＯ－６９７９－Ｐ９是在从真菌培养液筛选巨噬细胞泡沫化抑制剂过程中获得的,其对小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯再形成的抑制ＩＣ５０为０．３８ｍｇ／Ｌ（０．７８μｍｏｌ／Ｌ）,而对甘油三酯和磷脂的再形成无显著抑制作用。真菌Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．ＦＯ－６９７９静置培养１４ｄ后,经有机溶媒提取,常压ＯＤＳ柱层析和制备ＨＰＬＣ柱层析分离得到ＦＯ－６９７９－Ｐ９纯品。又经过测定其ＦＡＢＭＳ、ＵＶ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、１Ｈ－１ＨＣＯＳＹ、ＤＥＰＴ、ＨＭＱＣ和ＨＭＢＣ等光谱数据。将其结构定为环肽内酯类ｂｅａｕｖｅｒｉｏｌｉｄｅⅠ     

人碱性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的表达

用ＮｃｏＩ、ＢａｍＨＩ酶切，获得人碱性成纤维细胞生长因子基因，将该基因插入原核高效表达载体ＰＢＶ２２０的ＰＬＰＲ启动子下游，获得重组质粒ＰＢＶ－ＦＧＦ，转化大肠杆菌ＤＨ５α，４２℃诱导使重组子表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ、ＭＴＴ活性检测结果表明，该重组菌能够表达具有生物活性的ｈｂＦＧＦ。     

复方氨苯蝶啶胶囊的HPLC测定

复方氨苯蝶啶胶囊的ＨＰＬＣ测定匡佩英（上海市药品检验所，上海２００２３３）冯晋（上海新亚药业公司研究所，上海２０００４１）ＨＰＬＣＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＣＯＭＰＯＵＮＤＴＲＩＡＭＴＥＲＥＮＥＣＡＰＳＵＬＥＳ￥ＫＵＡＮＧＰｅｉ－Ｙｉｎｇ；ＦＥＮ...     

血浆α1—酸性糖蛋白的分离与精制

应用ＤＥＡＥ和ＣＭ纤维素柱在ＨＰＬＣ上进行了多样本血浆中同时对α１－酸性糖蛋白分离和精制的研究，通过将血浆透析，上ＤＥＡＥ和ＣＭ纤维素柱，在ＵＶ检测下收集样品，并真空冷冻干燥使ＡＡＧ得到分离和精制，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检查，纯度呈单一区带。     

利巴韦林含片的HPLC测定

利巴韦林含片的ＨＰＬＣ测定ＨＰＬＣＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＲＩＢＡＶＩＲＩＮＩＮＴＲＯＣＨＥＳ杨宏伟（辽宁省药品检验所，沈阳１１００２３）ＹＡＮＧＨｏｎｇ－Ｗｅｉ（ＬｉａｏｎｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ...     

Menadione reduced doxorubicin resistance in Ehrlich ascites carcinoma cells in vitro

目的：研究维生素Ｋ３（Ｍｅｎ）降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞对阿霉素（Ｄｏｘ）的抗药性．方法：测定谷胱甘肽（ＧＳＨ），细胞膜流动性及谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性．细胞存活力以甲基四唑蓝法测定．结果：ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＧＳＨ，ＧＳＴ及膜流动性均较ＥＡＣ细胞增加（Ｐ＜００１）．Ｄｏｘ对ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＩＣ５０为２２３（１５８－２８８）ｍｇ·Ｌ－１．Ｍｅｎ５或１０ｍｇ·Ｌ－１可降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＧＳＨ（Ｐ＜００１），１ｍｇ·Ｌ－１对ＧＳＨ无影响（Ｐ＞００５），但可降低细胞膜流动性（Ｐ＜００５）．Ｍｅｎ１，５或１０ｍｇ·Ｌ－１可使ＤｏｘＩＣ５０降低到９．６（７８－１１３），６０（２８－９２），或５３（３９－６７）ｍｇ·Ｌ－１（Ｐ＜００１）．结论：Ｍｅｎ在体外降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞对Ｄｏｘ抗药性与对ＧＳＨ的耗竭有关．     

粉防己碱对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B,bFGF和相关癌基因表达的影响

用［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］ＴｄＲ）参入法，电镜，免疫组化，原位杂交方法，在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了粉防己碱（Ｔｅｔ，０．０３μｍｏｌ·ｋｇ－１·ｄ－１×８周ｉｇ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦ－Ｂ，ｂＦＧＦ的抗原表达及其相关癌基因ｃ－ｓｉｓ，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达的影响．结果发现：Ｔｅｔ在降低ＳＨＲ血压（Ｐ＜０．０１）同时，能减少ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网和［３Ｈ］ＴｄＲ参入量（Ｐ＜０．０１），并能逆转ＶＳＭＣ增殖时ＰＤＧＦ－Ｂ，ｂＦＧＦ抗原（Ｐ＜０．０５）及ｃ－ｓｉｓ，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的表达增强．提示：Ｔｅｔ抑制ＳＨＲ的ＶＳＭＣ增殖与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关     

三氧化二砷对慢性髓细胞性白血病VEGF表达的影响

目的 研究慢性髓细胞性白血病(ＣＭＬ)患者血管内皮生长因子(ＶＥＧＦ)的表达及三氧化二砷(Ａｓ２Ｏ３)对其表达的影响。方法 采用酶联免疫吸附法(ＥＬＩＳＡ)检测正常人和初治ＣＭＬ患者骨髓细胞及ＣＭＬ细胞系Ｋ５６２细胞培养上清液中ＶＥＧＦ的含量。结果ＣＭＬ患者(ｎ＝２０)骨髓细胞培养上清液ＶＥＧＦ浓度为 ６４９．１６ｐｇ/ｍｌ,明显高于正常对照组的 １５２．１６ｐｇ/ｍｌ(Ｐ＜０．００１),而 ５×１０－６ｍｏｌ/ＬＡｓ２Ｏ３可明显降低ＶＥＧＦ的表达水平(Ｐ＜０．０５);细胞系Ｋ５６２有ＶＥＧＦ的过高表达,Ｋ５６２经２．５×１０－６ｍｏｌ/Ｌ及５×１０－６ｍｏl/Ｌ浓度Ａｓ２Ｏ３处理７２小时后ＶＥＧＦ浓度分别下降６６．４%和 ７８．０%。结论 ＶＥＧＦ在 ＣＭＬ患者骨髓细胞存在高表达;Ａｓ２Ｏ３可能通过抑制 ＶＥＧＦ的表达而阻断血管形成。     

联产人尿激肽释放酶的纯化工艺

为解决联产工艺人尿激肽释放酶（ＨＵＫＮ）的纯化，用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ亲和层析柱纯化ＨＵＫＮ，可得到ＨＰＬＣ单峰，比活性２９３．９ＥＵ／ｍｇ的产品，收率为４８．６％，本工艺简单，容易放大，能适合大规模生产的需要。     

褪黑素抗自由基作用及其机制

目的研究褪黑素（ＭＥＬ）的抗自由基作用,并探讨其作用机制。方法以丙二醛（ＭＤＡ）为指标,考察ＭＥＬ对四氯化碳（ＣＣｌ４）或氰化钾（ＫＣＮ）处理小鼠肝或脑组织脂质的保护作用;考察ＭＥＬ对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核的影响;观察ＭＥＬ清除羟自由基（·ＯＨ）作用,及对醋氨酚处理小鼠肝谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量和大鼠红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和全血谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的影响。结果ＭＥＬ（２．０,１０．０ｍｇ·ｋｇ－１,ｉｐ）能显著对抗ＣＣｌ４或ＫＣＮ所致小鼠肝脏或脑组织丙二醛含量的增加。ＭＥＬ（１０．０ｍｇ·ｋｇ－１,ｉｐ）可明显抑制环磷酰胺引起的小鼠骨髓细胞微核增多。ＭＥＬ（０．０７８～５．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可直接清除·ＯＨ。ＭＥＬ（１．０,１０．０ｍｇ·ｋｇ－１,ｉｐ）可显著对抗醋氨酚（ＡＡＰ）所致小鼠ＧＳＨ的耗竭作用。ＭＥＬ（１．０,５．０ｍｇ·ｋｇ－１,ｉｐ）亦可显著提高大鼠红细胞内ＳＯＤ、ＣＡＴ、全血ＧＳＨ－Ｐｘ活性。结论ＭＥＬ可保护脂质和核酸免受过氧化损伤,这可能与其直接清除·ＯＨ,提高机体ＧＳＨ含量及增强ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ－Ｐｘ活力有关。     

银杏叶及其制剂中萜内酯含量测定方法研究进展

综述了国内外银杏叶及其制剂中萜内酯含量测定方法研究概况。主要采用ＲＰ－ＨＰＬＣ－ＵＶ,ＲＰ－ＨＰＬＣ－ＲＩ,ＲＰ－ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ,ＳＦＣ－ＥＬＳＤ和ＧＣ－ＦＩＤ,以及与ＭＳ联机的ＲＰ－ＨＰＬＣ－ＴＳＰ－Ｍ,ＧＣ－ＥＩ－ＭＳ色谱分析法,此外尚有ＮＭＲ,ＣＥ,ＴＬＣＳ及生物测定法。这些研究大都是在９０年代进行的,其中ＧＣ－ＦＩＤ与ＲＰ－ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法较为成熟,可行,前者作为生物样品测定具有够     

α—氯芳基乙酮的合成

α┐氯芳基乙酮的合成ＩＭＰＲＯＶＥＤＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦα┐ＣＨＬＯＲＯＡＲＹＬＭＥＴＨＹＬＫＥＴＯＮＥＳ曹松＊王蔚ａ樊爱龙ａ（滁州师专化学系，安徽２３９０１２；ａ南京大学化学系，江苏２１００９３）ＣＡＯＳｏｎｇ＊，ＷＡＮＧＷｅｉａ，ＦＡＮＡｉ－Ｌ...     

Inhibitory effect of antisense basic fibroblast growth factor oligonucleotides on proliferation of cultured aortic smooth muscle cells induced by angiotensin Ⅱ in SHR rats

目的：研究转染反义碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）寡核苷酸（ＯＤＮ）对培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）生长的影响．方法：用脂质体介导法将反义ｂＦＧＦＯＤＮ转入ＳＭＣ内，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ｂＦＧＦ基因表达，并测定［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入和细胞计数．结果：转染反义ｂＦＧＦＯＤＮ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）几乎完全抑制血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ，１μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导增高的ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达和明显抑制ＳＭＣ增殖，在基础状态和ＡｎｇⅡ刺激条件下，［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入分别被抑制２６５％（Ｐ＜００１）和４２０％（Ｐ＜００１），细胞数分别被抑制１７３％（Ｐ＜００１）和２２２％（Ｐ＜００１）．结论：反义ｂＦＧＦＯＤＮ能有效抑制ＡｎｇⅡ诱导的ｂＦＧＦ基因表达和ＳＭＣ增殖．     

柔红霉素-白蛋白交联物逆转多药耐药KB/VCR细胞株对柔红霉素的耐药性

将柔红霉素（Ｄａｕ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）交联，以克服耐长春新碱（ＶＣＲ）的ＫＢ细胞株（ＫＢ／ＶＣＲ）对Ｄａｕ的耐药性．Ｄａｕ抑制ＫＢ和ＫＢ／ＶＣＲ细胞生长的ＩＣ５０分别为３．３μｇＬ－１和０．２６ｍｇＬ－１．ＫＢ／ＶＣＲ细胞对Ｄａｕ的耐药性是ＫＢ细胞的７９倍．反转录聚合酶链式反应结果显示，ＫＢ／ＶＣＲ细胞有很高水平的ｍｄｒ－１基因表达．Ｄａｕ－ＢＳＡ交联物和Ｄａｕ杀伤ＫＢ／ＶＣＲ细胞的ＥＣ５０分别是１２μｇＬ－１（指其中Ｄａｕ含量）和０．２４ｍｇＬ－１，即Ｄａｕ－ＢＳＡ对ＫＢ／ＶＣＲ细胞的细胞毒作用是Ｄａｕ的２０倍．药物蓄积实验显示，使用Ｄａｕ－ＢＳＡ时，ＫＢ／ＶＣＲ细胞内Ｄａｕ蓄积量较使用Ｄａｕ者增加１．４倍（２４ｈ时）；药物外排实验显示，加入Ｄａｕ时，Ｄａｕ迅速从ＫＢ／ＶＣＲ细胞排出，而使用Ｄａｕ－ＢＳＡ时Ｄａｕ能在ＫＢ／ＶＣＲ细胞内长时间维持较高浓度．结果提示，Ｄａｕ与ＢＳＡ交联后，能克服多药耐药细胞对Ｄａｕ的耐药性．     

Tumor necrosis factor mediated release of platelet-derived growth factor from bovine cerebral microvascular endothelial cells

研究ＴＮＦ介导的ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ及药物对ＢＣＭＳＭＣ增殖的保护作用．方法：体外培养ＢＣＭＥＣ和ＢＣＭＳＭＣ，用结晶紫染色法观察ＴＮＦ引起的ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ继而促进ＢＣＭＳＭＣ增殖作用．结果：ＴＮＦ不能促进无血清培养的ＢＣＭＳＭＣ增殖，但ＴＮＦ（５－２０μｇ·Ｌ－１）剂量依赖地促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ．ＴＮＦ（２０μｇ·Ｌ－１）促进ＢＣＭＳＭＣ增殖的百分率为３４±４％．药物Ｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ，ｉｓｏｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ和ＰＭＤＰ不影响ＴＮＦ引起ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ，但能剂量依赖地（１－１００μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制ＰＤＧＦ促ＢＣＭＳＭＣ增殖的作用．结论：ＴＮＦ促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ继而引起ＢＣＭＳＭＣ的增殖．药物能抑制ＰＤＧＦ引起的ＢＣＭＳＭＣ增殖．     

氧氟沙星片剂的HPLC测定

氧氟沙星片剂的ＨＰＬＣ测定徐子硕，苗家生（沈阳克达制药厂，辽宁１１００４１）ＨＰＬＣＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＯＦＬＯＸＡＣＩＮＴＡＢＬＥＴＳ￥ＸＵＺｉ－Ｓｈｕｏ；ＭＩＡＯＪｉａ－Ｓｈｅｎｇ（ＳｈｅｎｙａｎｇＫｅｄａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＦ...     

茎点霉299产生的免疫抑制剂Ⅰ.SIPI—299—B,299—O的研究

应用筛选免疫抑制剂的酵母模型,从一真菌茎点霉２９９中分离得到两个活性化合物２９９－Ｂ和２９９－Ｏ。经波谱分析（ＵＶ,ＥＩ－ＭＳ,ＦＡＢ－ＭＳ,＾１Ｈ－ＮＭＲ,＾１３Ｃ－ＮＭＲ－ＤＥＰＴ,＾１Ｈ－＾１Ｈ ＣＯＳＹ,ＨＭＱＣ）,证实它们均为大环内酯化合物,分别与ＶｅｒｒｕｃｒｉｎＡ和Ｂ相同。两个化合物均有强的免疫抑制活性。     

缩宫素生物活性测定法的初步研究

缩宫素生物活性测定法的初步研究ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＡＳＳＡＹＭＥＴＨＯＤＯＦＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＡＣＴＩＶＩＴＹＯＦＯＸＹＴＯＣＩＮ王春林阚鸿顺（泰州生物化学制药厂，江苏２２５３００）ＷＡＮＧＣｈｕｎ－Ｌｉｎ，ＫＡＮＨｏｎｇ－Ｓｈｕｎ...     

哌仑西平及有关物质的反相HPLC测定

哌仑西平及有关物质的反相ＨＰＬＣ测定张顺妹，刘倩（上海市药品检验所，上海２００２３３）ＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＰＩＲＥＮＺＥＰＩＮＡＮＤＩＴＳＲＥＬＡＴＥＤＳＵＢＳＴＡＮＣＥＳＢＹＲＰ－ＨＰＬＣ￥ＺＨＡＮＧＳｈｕｎ－Ｍｅｉ，ＬＩＵＱｉａｎ（Ｓｈ...