Ascofuranone增加HepG2细胞LDLR报告基因表达的和物活性的研究

以控制LDLR基因表达的调控元件SRE为靶位点，使用含有荧光素酶报告基因的转染人肝细胞系HepG2筛选模型高通量筛选微生物来源的能够增加氏密度胆蛋白受体（LDLR）基因表达的具有潜在的降胆固醇作用的生物活性物质，在筛选过程中，通过对一株真菌产生的化合物Ascofuranone的研究发现该化合物对测活用细胞株的LDLR荧光素酶报告基因的表达有中等强度的激活作用，其SC150为40．4μmol/L。Ascofuranone激活LDLR基因表达这一新的生物活性的发现为深入研究该化合物的降血脂作用提供了新的重要启示。     

Ascofuranone增加HepG2细胞LDLR报告基因表达的生物活性的研究

以控制LDLR基因表达的调控元件SRE为靶位点 ,使用含有荧光素酶报告基因的转染人肝细胞系HepG2筛选模型高通量筛选微生物来源的能够增加低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因表达的具有潜在的降胆固醇作用的生物活性物质。在筛选过程中 ,通过对一株真菌产生的化合物ascofuranone的研究发现该化合物对测活用细胞株的LDLR荧光素酶报告基因的表达有中等强度的激活作用 ,其SC150 为 40 .4μmol/L。Ascofuranone激活LDLR基因表达这一新的生物活性的发现为深入研究该化合物的降血脂作用提供了新的重要启示     

放线菌KS—5555产生的抑制VCAM—1表达的活性物质的研究

使用一个含有人ＶＣＡＭ－１基因启动子和荧光素酶编码基因的转染细胞株，从微生物代谢产物中筛选能够抑制由ＴＮＦ－α诱导的ＶＣＡＭ－１表达的活性物质。在筛选过程中，应用有机溶媒萃取、ＯＤＳ柱层析及ＨＰＬＣ等方法，从一株放线菌ＫＳ－５５５５的发酵液中分离到了ＫＳ－５５５５－Ｅ、Ｆ、Ｇ３种生物活性物质。它们对与人ＶＣＡＭ－１基因的启动子相连接的荧光素酶基因的表达显示出较强的抑制活性，其ＩＣ５０值分别为０．３２、０．１４、０．１９μｍｏｌ／Ｌ。经各种理化特性及ＵＶ、ＭＳ、ＨＰＬＣ等分析，确定化合物ＫＳ－５５５５－Ｅ、Ｆ、Ｇ分别与脂酰ＣｏＡ合成抑制剂ｔｒｉａｃｓｉｎＣ、Ｄ、Ａ的结构相同。     

附子多糖对大鼠食诱性高胆固醇血症的预防作用及机制研究

目的探讨附子多糖预防大鼠食诱性高胆固醇血症的作用及其机制。方法 SPF级♂Wister大鼠50只,体质量100 g,随机分为正常组(N)、高胆固醇组(HC)和附子多糖(FPS)低、中、高3个剂量组,每组10只,分别给予正常、高胆固醇及高胆固醇加附子多糖(224、448和896 mg.kg-1.d-1)饮食,持续两周,检测各组的血脂水平,探讨FPS对大鼠高胆固醇血症的预防效应。并观察N组,HC组,FPS(224mg.kg-1.d-1)组大鼠的体重、进食量和粪便量的变化,实验结束后取3组大鼠的肝脏行HE染色;并分别测定3组大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDL-R)的mRNA水平、蛋白表达及受体活性的改变。结果附子多糖能抑制高胆固醇血症大鼠血清中总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平(P<0.05);FPS组大鼠肝细胞脂肪变性较HC组轻微;RT-PCR和Western blot结果显示附子多糖能上调高胆固醇大鼠肝脏LDL-R的mRNA水平和蛋白表达(P<0.05);放射配基结合分析法结果表明FPS组大鼠肝脏LDL-R的密度和亲和力均较HC组明显升高(P<0.01)。结论附子多糖具有明显的降血胆固醇作用,其机制与上调大鼠肝脏LDL-R的基因水平、蛋白表达以及受体的活性有关。     

阿托伐他汀对高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体功能影响的研究

目的观察高胆固醇血症患者在服用阿托伐他汀前后低密度脂蛋白受体功能的变化,并探讨其调节低密度脂蛋白代谢的机制。方法以临床诊断为高胆固醇血症的患者为研究对象,以阿托伐他汀为工具药,对患者服药前后进行常规体格检查,血脂等生化指标测定。分离培养高胆固醇血症患者外周血淋巴细胞,加入异硫氰酸荧光素标记低密度脂蛋白,分别于4℃和37℃孵育,流式细胞仪检测其细胞表面结合、摄取低密度脂蛋白的平均荧光强度,观察患者服药前后淋巴细胞结合与摄取低密度脂蛋白的变化。结果服用阿托伐他汀4周后,与服药前比较高胆固醇血症患者血浆低密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇水平明显降低[低密度脂蛋白胆固醇水平：（3.63±1.01）mmol.L-1vs（2.3±2.02）mmol.L-1,P〈0.001;总胆固醇水平：（5.69±1.28）mmol.L-1vs（4.2±2.06）mmol.L-1,P〈0.001],高密度脂蛋白胆固醇在血浆中的比例明显升高[（50%±16%）vs（59%±17%）,P=0.02],而且患者淋巴细胞表面低密度脂蛋白受体对低密度脂蛋白的结合与摄取活性在服药后也出现了明显提高[低密度脂蛋白受体表达量：（129.7±104.0）vs（236.2±108.7）,P〈0.05;低密度脂蛋白受体结合能力：（43.6±35.8）vs（86.4±126.8）,P〈0.05;低密度脂蛋白受体内化能力（53.4±63.2）vs（102.5±101.4）,P〈0.05]。结论本研究结果显示阿托伐他汀可显著降低高胆固醇血症患者血浆低密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇水平,提高高密度脂蛋白胆固醇在血浆中的比例;同时上调低密度脂蛋白受体的表达,提高低密度脂蛋白受体对低密度脂蛋白结合与内化能力;进而达到综合调整低密度脂蛋白代谢水平的药理作用。     

由一株真菌产生的抑制血管细胞粘附分子-1基因表达的活性物质的研究

以血管细胞粘附分子－1（VCAM－1）基因为靶位点，使用含有荧光素酶报告基因的转染细胞株筛选模型M－4细胞从微生物的代谢产物中高通量筛选能够抑制VCAM－1基因表达的生物活性物质，以期找到能够治疗诸如类风湿为等免疫性疾病的新型药物。在筛选过程中使用有机溶媒萃取、ODS反相柱层析、HPLC制备等方法，从真菌FO－5897的发酵液中分离到 了一个对侧活用细胞株的荧光素酶报告基因的表达有中等强度抑制 作用的化合物，其IC50为13．8μmol/L，经各种理化性质及^1H-NMR分析确定该化合物与文献报道的是具有降血脂和抗癌作用的化合物Ascofuranone的结构相同。     

高胆固醇血症患者LDL—R基因第4外显子XspI位点多态性与血清Hs-CRP的关系及意义

目的探讨高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体（LDL．R）基因第4外显子XspI住点多态性与血清超敏C反应蛋白（Hs-CRP）的关系及意义。方法用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术结合DNA测序技术检测1250例高胆固醇血症患者和1200例健康体检者LDL．R基因第4外显子的XspI酶切位点多态性;按基因型分组,用动态定时散射比浊法检测各基因型Hs—CRP的浓度,对两者关系进行分析;同时检测各组的血脂指标。结果与健康对照组比较,高胆固醇血症组血清Hs-CRP明显升高,HDL-C降低（P均〈0．05）;根据LDL—R第4外显子处是否有XspI酶切位点,分为X＋X＋、X＋X-、X-X-3种基因型,X-X-组、X＋X-组、X＋X＋组血清Hs—CRP水平依次升高（P均〈0．05）;多元线性回归分析显示,基因型和胆固醇水平是Hs—CRP水平的独立影响因素。结论高胆固醇血症患者血清Hs-CRP水平升高,LDL-R基因X＋X＋基因型Hs—CRP水平升高,LDL-R基因第4外显子的XspI位点多态性可能通过影响Hs-CRP水平促进高胆固醇血症。     

芒果苷单钠盐对高胆固醇血症大鼠肝脂质代谢及PCSK9/LDLR途径的影响

目的 观察芒果苷单钠盐对高胆固醇血症大鼠肝脂质代谢及前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)/低密度脂蛋白受体（LDLR）的作用。方法 选取SD大鼠40只,将其按体质量随机分为对照组、模型组、阿托伐他汀钙片组、芒果苷单钠盐组,每组10只。除对照组外,其余各组采用高脂饲料喂养法建立高胆固醇血症模型。造模成功后,阿托伐他汀钙片组ig阿托伐他汀钙片5 mg/kg,芒果苷单钠盐组ig 80 mg/kg芒果苷单钠盐,给药8周后,观察各组体质量及肝脏指数变化,生化法检测各组血脂指标[三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）],肾功能、血清酶指标[肌酐（CRE）、血清尿素（UREA）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）]及肝组织游离胆固醇（FC）、总胆汁酸（TBA）的含量,苏木精–伊红染色（HE）观察大鼠肝组织形态学变化,RT-PCR检测肝组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和CD68 mRNA表达,Western blotting及RT-PCR检测肝组织中PCSK9、LDLR的蛋白及m RNA表达。结果 与模型组相比,各给药组大鼠体质...     

多廿醇对人单核细胞低密度脂蛋白受体活性的影响

目的研究多廿醇对低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDL-R)活性的影响,探讨多廿醇降脂作用的机制。方法体外试验采用常规细胞培养方法,观察多廿醇对人单个核细胞LDL-R的直接作用。体内试验采用自身和组间两种对照设计,观察多廿醇对高胆固醇血症人群LDL-R活性的影响。LDL-R活性检测选用荧光标记配体法。结果体外试验表明多廿醇在5～20mg·L-1范围内可以增强人单个核细胞LDL-R的活性,并且具有明显的量-效关系。体内试验中高胆固醇患者服用多廿醇20mg·d-14wk后,外周血单个核细胞LDL-R活性升高95%。结论多廿醇能通过增加LDL-R的活性而起降血脂作用,多廿醇降血脂是多途径的。     

家族性高胆固醇血症合并早发冠心病患者低密度脂蛋白受体基因突变研究

目的 对家族性高胆固醇血症(FH)合并早发冠心病患者进行低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因突变研究.方法 对1例FH合并早发冠心病患者进行详细家系调查和临床体检并按照国内FH诊断标准明确临床诊断;酚氯仿法提取患者基因组DNA;应用聚合酶链反应结合核苷酸测序方法,检测LDL-R的全部18个外显子和启动子及载脂蛋白(apo)B100R3500Q位点;核苷酸序列分析结果 与GenBank比对寻找突变.结果 本例患者和其子TC分别为12.1、16.0 mmol/L,本例患者可诊断为"FH杂合子",其子因存在肌腱黄瘤可诊断为"FH".患者 apoB100基因3500片段经核苷酸序列分析未发现突变,可排除由于患apoB100缺陷症导致高胆固醇血症的可能性.该患者LDL-R第13外显子D601Y杂合突变.结论 对于高胆固醇血症合并早发冠心病患者应尽量明确诊断并给予治疗,控制病情进展.     

PCSK9对降低低密度脂蛋白水平的重要性

血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平与冠心病之间已建立明确的因果关系。各国之间比较发现,冠心病病死率与长期不同饮食引起的LDL-C水平差异有关。对遗传性疾病如杂合家族性高胆固醇血症的观察发现,LDL受体基因突变使LDL-C水平升高1倍,则心脏病发作危险度升高10倍以上,从而为上     

由一株放线菌产生的抑制VCAM-1表达的活性物质研究

以VCAM-1为靶位点,使用含有荧光素酶报告基因的转染细胞株筛选模型从微生物的代谢产物中高通量筛选能够抑制VCAM-1表达的生物活性物质,以期找到能够治疗诸如类风湿性关节炎等免疫性疾病的新型药物。在筛选过程中使用有机溶媒萃取、ODS反相柱层析、HPLC制备等方法,从一株放线菌来源的发酵液中分离到了一个对测活用细胞株的荧光素酶报告基因的表达有较强抑制作用的化合物,其IC50为10.8μmol/L,经理化性质及NMR分析确定该化合物与文献报道的glucopiericidin A同质。     

普伐他汀对高胆固醇血症患者纤溶活性的影响

目的:研究高胆固醇血症患者降脂治疗后体内纤溶活性的变化并探讨其作用机制。方法:正常对照组30例。120名高胆固醇血症患者随机分成两组,普伐他汀60例,10 mg,每晚顿服;辛伐他汀60例,20 mg,每晚顿服,疗程8周。观察治疗前后血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)活性、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和纤维蛋白原(Fib)等指标。结果:试验组治疗前后比较:①血清TC由6.58± 0.57,显著下降到4.86±1.36 mmol·L~(-1)(P<0.001);LDL-C由4.08±0.53显著下降到2.75±0.73 mmol·L~(-1)(P<0.01);②血浆PAI-1活性由0.91+0.14显著下降到0.69±0.13 AU·mL~(-1)(P<0.01);③t-PA活性由0.27±0.12显著增高到0.36±0.11 U·mL~(-1)(P<0.05);④Fib由3.91±0.22下降到3.13±0.16gL~(-1)(P<0.05)。试验组与对照组比较,治疗后各项指标的改变无显著差异(P>0.05);⑤血清TC与LDL-C水平及PAI-1活性显著正相关(P<0.001)。结论:普代他汀与辛伐他汀有相似的降脂和改善纤溶活性的作用。     

高胆固醇血症患者LDL-R基因ClaI位点多态性与血清瘦素和脂联素的关系及意义

目的探讨高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因第8外显子ClaI位点多态性与血清瘦素(leptin,LP)、脂联素(adiponectin,APN)的关系及意义。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术结合DNA测序检测2 555例高胆固醇血症患者和2 200例体检健康者LDL-R基因的ClaI酶切位点多态性;按基因型分组,用ELISA法检测各基因型瘦素、脂联素的浓度,对两者关系进行分析,同时检测2组血脂指标。结果与健康对照组比较,高胆固醇血症组血清瘦素明显升高,脂联素、HDL-C降低(P<0.05);根据LDL-R第8外显子处是否有ClaI酶切位点,分为C+C+、C+C-、C-C-3种基因型,在C+C+组、C+C-组、C-C-组中,血清瘦素水平依次升高,脂联素水平依次降低(P<0.05);多元线性回归分析显示,基因型和胆固醇水平是影响血清瘦素、脂联素水平的独立因素。结论高胆固醇血症患者血清瘦素水平升高,脂联素水平降低,LDL-R基因C-C-基因型可能通过影响血清瘦素、脂联素水平促进高胆固醇血症的发生。     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂的研究进展

低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)升高是心血管疾病危险因素之一。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)是一种人血清蛋白,通过促进低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)降解,导致LDL-C升高,因此PCSK9已经成为新的调节血脂药物作用靶点。在目前研究中的PCSK9抑制剂中,2种单克隆抗体类抑制剂已完成Ⅱ期临床试验,1种小分子干扰RNA抑制剂正在进行Ⅰ期临床试验,2种反义寡核苷酸类抑制剂Ⅰ期临床试验提前终止。本文对上述PCSK9抑制剂的研究情况作一综述。     

植物固醇的研究现状

植物固醇存在于几乎所有的植物细胞中,在人体肠道内吸收率很低,正常人群适量摄入可以降低血清胆固醇及LDL的浓度.植物固醇血症是一种常染色体隐性遗传病,主要表现为黄瘤、早发动脉粥样硬化及一些血液系统症状.固醇吸收抑制剂依折麦布可以有效降低植物固醇血症患者体内固醇水平,改善相关症状.本文对国内外有关植物固醇的研究现状作一综述.     

辛伐他丁对家族性高胆固醇血症降脂作用的研究

用辛伐他丁对家族性高胆固醇血症（FH）患者进行治疗。发现其具有明显降低血总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白-胆固醇（LDL－C）的作用，而高密度脂蛋白-胆固醇（HDL－C）在服药前后无明显变化。提示辛伐地丁可用于动脉粥样硬化的防治。