聚合酶链反应检测血清中HBVDNA的临床意义

应用聚合酶链反应检测临床中感染乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）者的带毒状况。将乙型肝炎病毒血清标志物（ＨＢＶＭ）与ＰＣＲ检测结果进行比较，探索血清中ＨＢＶＤＮＡ的临床意义。结果表明ＰＣＲ方法在ＨＢＶＤＮＡ的检出优于ＨＢＶＭ（Ｐ＜０．０１）。阐明即使血清中有保持性抗生体出现也可能有低水平的ＨＢＶ存在。有条件的医院应同时用ＨＢＶＭ及ＰＣＲ进行检测，可以更有效地阻断ＨＢＶ抟播途径，确保血源质量，减少输血后肝炎的发     

聚合酶链反应检测乙肝患者唾液腺组织中的HBV DNA

应用免疫组化技术对１５例乙型肝炎患者的唾液腺组织进行了检测，其中ＨＢｓＡｇ阳性６例，ＨＢｃＡｇ１例，继而采用原位杂交及聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对免疫组化的阳性病例作了进一步检测，其阳性率分别为２／６（３３．３％）及４／６（６６．７％）．结果表明：唾液中的ＨＢＶ源于受染的唾液腺组织，但唾液腺组织中不存在有ＨＢＶ的复制．     

聚合酶链反应定量检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义

乙型肝炎病毒(HBV)感染时,外周血中HBV-DNA是病毒复制最直接和可靠的标志。自1995年以来,我们用定量聚合酶链反应(PCR)法检测HBV-DNA含量共170例,现对其临床意义进行分析评价。     

荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA及临床意义评价

目的:新设计荧光定量聚合酶链反应方法可定量检测血清中乙型肝炎病毒(HBV),以指导临床对乙型肝炎诊疗。方法:采用AG9900 Robo Master PCR仪及相配套Amplisensor定量试剂,全封闭、全自动地定量检测了669例临床血清标本中HBV DNA。结果:224例HBeAg阳性者,其HBV DNA对数均值为8.64±0.88拷贝数/毫升、阳性率为99.12％,明显高于HBeAg阴性者6.95±1.13拷贝数/毫升、阳性率50.85％(p<0.05);401例HBsAg阳性者血清中HBV DNA7.94±1.21拷贝数/毫升、明显高于HBsAg阴性者5.74±0.70拷贝数/毫升(p<0.05)。结论:能对HBV DNA准确定量,真实地反映HBV感染状况及复制水平,有助于临床对乙型肝炎及时诊断,抗病毒药物选择、疗效考核及预后判断等均有较高应用价值。并能克服普通PCR易污染、易导致假阳性等缺点。     

聚合酶链反应技术检测血清乙肝病毒DNA的结果报告

应用ＰＣＲ技术和ＥＬＩＳＡ法同时检测了乙肝患者血清９７例。结果显示：ＨＢＶ－ＤＮＡ－ＰＣＲ阳性率６７．０％，乙肝五项一项以上阳性率９７．９％，ＨＢｅＡｇ阳性者ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率８９．７％，ＨＢｅＡｇ阴性仍有５１．７％ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，抗－ＨＢｓ阳性者ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率２５．０％，献血员有４．０％ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性。结果提示，在乙肝病毒感染检出率方面，乙肝五项高于ＰＣＲ，ＨＢＶ－ＤＮＡ－ＰＣＲ     

荧光PCR技术检测HBV—DNA的初步研究

目的：研究荧光PCR技术在临床的应用价值。方法：选择90份HBV－ELISA阳性标志物血清进行HBV－DNA的检测,从血清中提取DNA,运用iCycler-PCR软件进行荧光PCR扩增,对结果进行分析。结果：HBsAg-HBeAg-HBcAb组阳性率为96．7％,HBsAg-HBeAb-HBcAb组阳性率80％,HBeAg-HBcAb组阳性率55％。结论：荧光PCR技术是一种良好的检测HBV－DNA的技术,但尚不能作为乙型肝炎治愈与否的诊断标准。     

竞争性聚合酶链反应定量检测HBV DNA及对干扰素治疗的初步评价

目的：研究HBVDNA浓度与临床疾病关系及对干扰素治疗效果进行评价。方法：应用竞争性聚合酶链反应技术检测42例慢性乙型肝炎（慢乙肝）患者血清HBVDNA含量,并对26例患者进行了人白细胞干扰素治疗前后循环血中HBVDNA浓度的动态观察。结果:慢乙肝患者血清HBVDNA含量在5×100～5×108拷贝μl之间;血清HBVDNA含量与ALT活性相关关系不明显（r=0.2862,P＞0．05）;干扰素治疗前完全反应组HBVDNA浓度显著低于部分反应组（t=4.84,P＜0.01）和无反应组（t=6．26,P＜0．01）。结论：HBV感染后产生的各种临床疾病类型可能主要归于宿生免疫应答的不同,HBVDNA浓度较低的患者（小于10000拷贝／μl）干扰素治疗效果较好,定量检测HBVDNA浓度在抗病毒药物疗效预测和评价中是一个有重要意义的参考指标。     

定量聚合酶链反应检测乙型肝炎患者血清HBV—DNA及其临床应用

目的：探讨乙型肝炎患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与乙肝标志物和肝损害程度的关系,方法：采用信号引物能量转移定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）,检测１９３例各型乙肝患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量。结果：在慢性乙肝患者中,随着临床肝损害程度加重,血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量逐渐下降,血清ＨＢｅＡｇ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ含量明显高于抗－ＨＢｅ及抗－ＨＢｃ阳性组,而后两组中部分病例ＨＢＶ－ＤＮＡ水平仍很高,血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量     

聚合酶链反应在慢性乙型肝炎病毒感染者中的实用意义

应用聚合酶链反应检测51例慢性肝炎,19例慢性HBsAg携带者(ASC)和26例HBV感染后的健康者血清中的HBV DNA。结果14例HBeAg阳性患者HBV DNA全部阳性,37例HBeAg阴性者中24例阳性(64.9％)。其中HBV·M阴性9例,有6例阳性。5例抗-HBs阳性者3例阳性。ASC和健康者PCR-HBV DNA检出率分别为36.8％和26.9％,明显低于慢性肝炎的74.5％。结果提示,慢性肝炎患者HBeAg阴性甚至HBV·M阴性时,往往大部分仍有HBV复制,且可能与病变活动有关。ASC和健康者总体病毒复制水平较低,可能与无明显的肝脏病表现有关。     

基因扩增法检测军团杆菌DNA的研究

本研究采用聚合酶链式反应（PCR），建立检测军团菌DNA的实验诊断方法。结果显示：采用军团菌属5SrRNA编码区特异性引物进行扩增，11种军团菌（包括8种嗜肺军团菌）均可见104bp的阳性扩增带；采用嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强（mip）基因编码区特异性引物扩增，所有8种嗜肺军团菌均可见650bp的特异性扩增带，所有3种非嗜肺军团菌扩增结果为阴性。检测敏感性为60fg左右。该研究技术的建立，为军团病的早期诊断和环境监测及控制爆发流行提供了一种快速、敏感、特异的新方法。     

基因扩增法检测肺炎衣原体DNA的研究

采用聚合酶链式反应（PCR），建立检测肺炎衣原体DNA的实验诊断方法。结果显示：采用肺炎衣原体PstI编码区的两对特异性引物（HL－1-HR－1和HM－1-HR-1）进行扩增，两株肺炎在原体（TW－183和CM－1）均可见437bP和229bP的特异性扩增带，而沙眼衣裳原体和鹦鹉热在原体扩增结果为阴性。检测敏感性为100fg左右。该技术为肺炎衣原体的早期诊断和流行病学调查提供了一种快速、敏感、特异的新方法。     

聚合酶链反应检测HBV-DNA及临床意义的再认识

采用聚合酶链反应检测114例肝病患者血清HBV-DNA。结果:血清HBV-DNA阳性率为35.96％,其中AH,CPH、CAH、LC组HBV-DNA阳性率分别为41.67％、21.43％、53.66％和26.31％;HBeAg阳性组为39.02％;抗HBe阳性组为22.73％;HBsAg、抗HBc阳性组为47.37％;抗HBs阳性组为41.18％;HBVM阴性组为11.11％。结果提示:①CAH组阳性率较高(53.66％);③抗HBe阳性患者血清中有较高滴度HBV-DNA,仍有传染性;③抗HBe阳性、抗HBs阳性、HBVM阴性的患者HBV-DNA阳性可能为HBV的变异株感染。     

应用聚合酶链反应检测临床分离的产TSST—1金黄色葡萄球菌

中毒休克综合征（ＴＳＳ）是由产毒素金黄色葡萄球菌引起的累及多器官系统的严重临床综合征。中毒休克综合征毒素１（ＴＳＳＴ－１）在ＴＳＳ发病中起重要作用。本研究应用聚合酶链反应技术，对产毒素金黄色葡萄球菌染色体编码ＴＳＳＴ－１的ｔｓｔ基因进行体外扩增，建立了快速、特异、灵敏的检测产ＴＳＳＴ－１金葡菌的方法。本研究还对天津市１９８６￣１９９５年１０年间临床分离的金葡菌进行了ｔｓｔ基因检测，在１１２株受检菌     

PCR检测尖锐湿疣组织人乳头瘤病毒DNA研究

用聚合酶键反应检测12例尖锐湿疣(CA)组织的人乳头瘤病毒(HPV)DNA。结果12例CA的HPV DNA 全部阳性,其中HPV6和11型各6例,而未发现有HPV16,18和33型。10例作了组织病理观察,确诊CA 者有7例,可疑者3例。研究表明在中国CA 主要由HPV6和11型引起,且两型分布相等。在病理上未见凹空细胞时,也不能排除该病。聚合酶键反应检测HPV DNA 有助于CA 的诊断。     

140例小儿咽拭子肺炎支原体特异性DNA的PCR检测

应用聚合酶链反应(PCR)枝术对140例小儿咽拭子标本进行了肺炎支原体(MP)特异性DNA检测。结果显示:(1)患有呼吸道感染病儿中MP阳性检出率(33％)显著高于对照组(7.5％)(P<0.01),小儿肺炎及喘息性疾患与MP感染有密切相关性;(2)以4～6岁年龄组MP阳性检出率最高(41.67％),表明MP感染的好发年龄有提早趋势;(3)患呼吸道感染后病程在2～3周以上者MP阳性检出率显著高于病程小于1周者(P<0.01),显示其病程长短与MP的感染呈正相关。     

半巢式聚合酶链反应快速诊断单纯疱疹病毒性脑炎及病毒分型

目的：进一步提高ＰＣＲ诊断方法的特异性和敏感性。方法：在单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）ＴＫ基因区设计了一对外层公用此物和内层分型引物,建立了半巢式ＰＣＲ检测和分型ＨＳＶ的方法。用该方法检测了天津地区６４例病毒性脑炎患者（病脑组）,和４６例其他中枢神经系统疾病患者（对照组）的脑脊液（ＣＳＦ）标本。结果：病例组阳性率为１５．６３％（１０／６４）,其中９例为ＨＳＶ－１感染,１例为ＨＳＶ－２感染。对照组阳性率为２     

乙型肝炎病毒YMDD变异株的检测及临床意义

目的：建立乙型肝炎病毒P区基因直接测序方法，进一步了解口服拉米夫定的慢性乙型肝炎患者HBVP区发生YMDD变异的情况，并探讨其相关影响因素。方法：应用聚合酶链反应（PCR）扩增HBVDNAP基因区，通过直接测序方法与Genebank标准序列对比，对107例慢性乙肝（CHB）患者血清进行P区测序。结果：107例慢性乙肝患者YMDD变异率为32．7％，其中YIDD变异17例，YVDD变异15例，混合变异3例。YMDD未变异组治疗前谷丙转氨酶（ALT）水平显著高于变异者；而YMDD变异组治疗前HBVDNA含量显著高于未变异组；YMDD未变异组与变异组之间治疗前的患者性别、年龄和HBeAg状态等方面差异无统计学意义。结论：HBVYMDD变异可能与患者治疗前ALT水平和HBVDNA含量有一定关系．而与患者的性别、年龄和血清HBeAg状态无关。     

乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂性能评价要点

目的 阐述乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的分析性能评价要点.方法 结合体外诊断试剂现行法规和此类试剂自身的特点,对其标准品建立及分析性能评估中检测限、特异性、准确度、线性范围评估等方法进行了详细解析.结果与结论 乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的分析性能评估应从试剂本身的定量特点出发,重点针对试剂定量的检测限、准确性、特异性等性能进行科学合理的评估.