The effects of genistein on TGF-β1-induced the invasion and metastasis in human pancreatic cancer cell line Panc-1

Pancreatic cancer is a devastating disease with the worst mortality rate. Therefore, a rational strategy for future drug development is critical. Genistein is a small, biologically active flavonoid that is found in high amounts in soy. This important compound possesses a wide variety of biological activities, but it is best known for its ability to inhibit cancer progression. In the current study, we found that genistein can inhibit effectively TGF-β1-induced the invasion and metastasis in Panc-1 by Transwell assay, which is through regulating the mRNA and protein expression of uPA and MMP2, but not MMP9 by RT-PCR / Weston blot, and is positively correlated with the concentration of genistein. At the same time, genistein also could improve the progress of Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) via morphology observation using light microscope / TEM, which is mediated by the down-regulation of E-cadherin and the up-regulation of vimentin. TGF-β1 mediates EMT process via numerous intracellular signal transduction pathways. The potential molecular mechanisms are all or partly through Smad4-dependent and -independent pathways (p38 MAPK) to regulate the antitumor effect of genistein.     

胰管刷检标本K-ras基因突变检测在胰腺癌诊断中的作用

目的:探讨胰管刷检标本K-ras基因突变检测在胰腺癌诊断中的价值.方法:应用突变富集聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)法检测胰腺疾病胰管刷检标本K-ras基因第1外显子第12密码子点突变.结果:35例胰管刷检标本PCR扩增均获成功,成功率100％.20例胰腺癌中14例检测到K-ras突变,7例慢性胰腺炎1例K-ras突变,两组间差异显著(P<0.05).胰腺囊腺瘤、十二指肠乳头癌均未见K-ras突变.胰管刷检标本K-ras突变与胰腺癌部位无关.胰管刷检K-ras突变检测诊断胰腺癌的敏感性、特异性、准确性分别为70％、94％、83％.结论:检测胰管刷检标本中K-ras基因突变有助于提高胰腺癌的诊断,具有良好的临床应用前景.     

胰液K-ras 12密码子点突变检测对胰腺癌诊断的临床价值

目的:探讨胰液中K-ras 12密码子点突变对胰腺癌诊断的临床应用价值.方法:采用内镜下置鼻胰管方法收集20例胰腺疾病的胰液标本,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测胰液K-ras基因第12密码子点突变,与肿瘤标记物CA19-9及CEA检测结果比较.结果:12例胰腺癌患者胰液标本中K-ras突变率为58.3％(7/12);8例慢性胰腺炎患者标本K-ras突变率为12.5％(1/8),胰腺癌胰液K-ras基因突变检测的敏感性为58.3％,特异性为87.5％,阳性预示值为87.5％,阴性预示值为58.3％.同一组病例以血清CA19-9>37 U/ml、CEA>4.5 μg/ml为阳性界值.胰腺癌血清 CA19-9、CEA阳性率分别为58.3％(7/12)、41.7％(5/12).结论:K-ras基因突变与胰腺癌相关性好,胰液中K-ras 12密码子突变率高,特异性强,为胰腺癌早期诊断的初步筛选提供了手段.     

K-ras基因突变在胰腺癌诊断及发病高危因素中的研究现状

胰腺癌早期症状及诊断缺乏特异性,治疗效果不佳.手术切除是现阶段唯一能治愈胰腺癌的手段,但疑诊此病时,多数已处于进展期,肿瘤已转移或超出手术切除范围,所以预防胰腺癌的发生和提高早期诊断率尤为重要.胰腺癌的高危因素包括男性、高龄、长期吸烟、酗酒、饮咖啡、糖尿病、慢性胰腺炎、遗传因素、肥胖、非家族性高血脂、高热量饮食、职业暴露等.多项研究表明胰腺癌的发生与K-ras基因突变密切相关,且在具有高易感性患者中k ras突变率很高.本文就检测K-ras突变对胰腺癌的诊断价值、癌前病变中的K-ras突变情况及高危因素与K-ras突变发生的关系作一综述.     

荟萃分析：超声内镜引导下细针穿刺联合K-ras基因突变检测对胰腺实性肿块的诊断价值

背景：目前胰腺导管腺癌与胰腺炎性肿块的鉴别诊断仍存在较大困难。在超声内镜引导下细针穿刺的基础上,一些辅助技术加以应用,如K-ras基因突变检测。我们旨在通过对现有相关文献的分析回顾,评价超声内镜引导下细针穿刺联合K-ras基因突变检测对胰腺实性肿块的诊断价值。 方法：我们系统性回顾了国内外多个数据库的研究,采用固定效应模型和随机效应模型对其进行Meta分析。 结果：共8项研究（包括696例胰腺导管腺癌患者与138例胰腺炎性肿块患者）符合入选标准。结果表明,超声内镜引导下细针穿刺联合K-ras基因突变检测对胰腺导管腺癌与胰腺炎性肿块的诊断灵敏度、特异度、阳性及阴性似然比分别为 90%, 95%, 13.45 and 0.13。值得注意的是,在123例穿刺结果为阴性或不能作出诊断的患者中,其中59例患者发现K-ras基因突变,并最终确诊为胰腺导管腺癌 (48%, 59 / 123)。 结论：K-ras基因突变检测可提高超声内镜引导下细针穿刺对胰腺实性肿块的诊断价值,并且尤其适用于疑似胰腺导管腺癌而穿刺细胞学结果为阴性的患者。     

胰腺癌K—ras基因12密码子突变方式的研究

目的 阐明中国胰腺癌患者Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子突变方式。方法 采用３′碱基特异性引物ＰＣＲ技术分析３０例已证明存在突变的胰腺癌ＤＮＡ标本。结果 检测到４种突变方式即ＧＡＴ、ＧＴＴ、ＣＧＴ和ＧＣＴ，比例分别为５２．９％、３２．４％、８．８％和５．９％。结论 中国胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子存在４种突变方式，因地区不同可能存在差异。     

PCR-SSP法和基因测序检测人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因第12位密码子点突变及其方式

目的检测人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因点突变及其突变方式，明确基因治疗靶点的碱基序列。方法针对K—ras基因第12位密码子点突变方式（CGT、GTT、GAT）设计顺序特异性引物（SSP），对人胰腺癌细胞株Patu 8988进行聚合酶链反应（PCR），扩增产物经12％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后判断该细胞株有无K-ras基因点突变及其突变方式。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增人胰腺癌细胞株Patu 8988 K—ras基因，扩增产物直接进行基因序列测定。结果PCR—SSP法检测人胰腺癌细胞株Patu 8988存在K—ras基因点突变，突变方式为GGT→GTT，其结果与基因序列测定完全相符。结论明确了人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因第12位密码子点突变方式（GGP→GTT），为胰腺癌的下一步基因治疗研究打下了坚实的基础；PCR—SSP方法检测K-ras基因点突变简便、快速、经济且特异性高，有望在临床上成为早期诊断和鉴别诊断胰腺癌的实用检测方法。     

Performance of K-ras mutation analysis plus endoscopic ultrasound-guided fine-needle aspiration for differentiating diagnosis of pancreatic solid mass: a meta-analysis

Background Difficulties persist in differentiating pancreatic ductal adenocarcinomas （PDAC） from pancreatic inflammatory masses （PIM）. Auxiliary diagnostic techniques which enhance the endoscopic ultrasound-guided fine-needle aspiration （EUS-FNA） diagnostic yield have been attempted, for example, K-ras mutation analysis. We aimed to evaluate the accuracy of K-ras mutation analysis combined with EUS-FNA for the differential diagnosis of PDAC and PIM by pooling data of existing trials. Methods We systematically searched the Medline, PubMed, Web of Science, Embase, and Cochrane Central Trials databases for relevant published studies. Meta-analysis was performed. Pooling was conducted in fixed-effect model or random-effect model. Results In total eight studies, with 696 cases of PDAC and 138 cases of PIM, met our inclusion criteria. The pooled sensitivity, specificity, positive likely ratio and negative likely ratio of K-ras mutation analysis combined with cytopathology for diagnosis of PDAC versus PIM were 90%, 95%, 13.45, and 0.13, respectively. Especially, among total 123 patients whose EUS-FNA results were inconclusive or negative, fifty-nine had K-ras mutations and were finally diagnosed with PDAC （48%, 59/123）. Publication bias was not present. Conclusions Combining K-ras mutation analysis with routine cytology moderately improves the ability of EUS-FNA to differentially diagnose between PDAC and PIM, especially for patients with suspected PDAC yet inconclusive EUS-FNA findings, and may prove to be a valuable supplemental method to EUS-FNA.     

慢性胰腺炎K—ras基因突变的临床病理学意义

目的：探讨慢性胰腺炎K－ras基因突变的临床病理学意义。方法：9例手术切除的慢性胰腺炎的石蜡标本,用微解剖法分离慢性胰腺炎的胰导管上皮粘液细胞增生灶,提取,扩增DNA,用ASO斑点杂交检测K－ras基因第12密码子的碱基序列。对9例接受手术治疗的病人进行长期随访,结果：9例慢性胰腺炎中4例有明显的胰导管上皮粘液细胞增生,其中2例被检出GAT型突变,分别占全组和有胰管上皮粘液细胞增生的22％和505,两个突变病例分别是接受了胰体尾切除和胰头十二指肠切除手术,术后分别随访17年和10年,没有发现任何恶变迹象,结构：慢性胰腺为可以检出K－ras基因突变,发生了K－ras基因突变的慢性胰腺炎上皮粘液细胞增生灶,未必一定发生为胰腺癌,胰液、粪便、末梢血液和尿液的检测,以及胰腺组织细针刺液检出K－ras基因突变,对胰腺癌的诊断有重要参考价值,但不应视为胰腺癌的确诊依据。     

中国西部人群K-ras基因SNP位点多态性在胰腺癌中的表达及意义

目的通过对胰腺癌患者手术切除肿瘤组织K-ras基因突变位点进行分析,探讨检测K-ras基因突变对胰腺癌的诊断预测价值。方法选取170例健康良性对照与66例病理证实胰腺癌患者,提取石蜡组织基因组DNA,使用MassARRAY时间飞行质谱技术进行K-ras基因突变分析。采用Fisher’s精确检验进行统计学分析。结果正常对照胰腺组织未检出阳性;66例胰腺癌组织中,8例K-ras基因第12位密码子（位点位于K-ras 12c1G）突变,通过Fisher’s精确检验统计分析,χ2值为21.329（P〈0.001）,差异具有显著统计学意义;本实验检测的其余两个位点K-ras12c2、K-ras 13未见突变。结论 K-ras基因第12位密码子（K-ras 12c1G）突变可能是胰腺癌变发生发展过程中的一个重要过程和信号。     

RT-PCR检测外周血K-ras基因突变和CA-199、CA-50联合检测在胰腺癌诊断中的作用

目的：研究外周血K—ras基因突变和CA-199、CA-50联合检测在胰腺癌诊断中的作用。方法：选择同一时期住院的14例胰腺癌患者和16例非胰腺癌患者．同时应用反转录PCR检测外周血K—ras基因突变和CA-199、CA-50检测,统计分析检测结果。结果：外周血K-ras基因突变检测对胰腺癌诊断的敏感度和特异度分别为42．9％和93．8％,胰腺癌患者CA．199、CA一50二者检测结果差异无显著性．K—ras基因突变和CA-199联合检测系列试验诊断胰腺癌的敏感度和特异度分别为35．7％和93．8％．平行试验的敏感度和特异度分别为78．6％和62．5％。部分胰腺癌患者外周血K-ras基因的检测结果和CA—199、CA-50值与胰腺癌病期呈一定的相关性,结论：RT—PCR检测外周血K—ras基因突变和CA—199联合检测可以弥补单一检测的不足,部分结果与临床病期有一定相关．有助于胰腺癌的辅助诊断,但敏感度偏低,应用临床还需进一步研究。