大鼠栓塞肺组织的比较蛋白质组学研究

目的研究大鼠血栓栓塞肺组织和正常肺组织的蛋白差异表达。方法采用血栓颈静脉注入法制备大鼠急性肺栓塞模型，采用双向电泳技术（2-DE）找出差异蛋白，用MALDI-TOF技术和生物信息学技术鉴定差异蛋白，并对部分差异表达蛋白采用Westernblot技术作进一步验证。结果肺组织蛋白的2-DE胶银染可分离出2800多个点，考染可达到2400个点以上。经图像分析得到的46个差异表达蛋白中有32个蛋白得到鉴定。对部分差异蛋白采用Westernblot方法在蛋白水平的验证结果与2-DE结果基本相符。结论采用比较蛋白质组学的方法可以发现大量栓塞肺组织的差异表达蛋白，这些差异表达蛋白将为研究肺栓塞发病的分子机制和病理生理学研究提供重要的线索和依据。     

奇异变形杆菌蛋白质双向电泳条件的优化及评价

目的：优化针对奇异变形杆菌蛋白质组学研究的双向电泳(2-DE)条件及其相关技术体系,阐明样品处理过程中超声功率、振摇时间和上样量对2-DE图谱的影响。方法：选取1株奇异变形杆菌,分别采用超声功率为130 W和80 W超声法裂解菌体提取总蛋白,将2种方法提取的蛋白在同一条件下进行等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE);超声功率为80 W提取的奇异变形杆菌总蛋白,分别取上样量1和2 mg,在同一条件下17 cm胶条上进行双向电泳。结果：超声功率为130 W处理的样本得到的2-DE图谱中蛋白斑点较少,而超声功率为80W处理的样本蛋白点多、清晰且重复性好。上样量为2 mg得到的图谱中横纵条纹明显,蛋白斑点分离度较差,而上样量为1 mg时横纵条纹较少,蛋白斑点分离度较好。结论：采用低功率超声且较少上样量处理样品能得到较好的2-DE图谱。
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胃癌及慢性浅表性胃炎幽门螺杆菌临床株的分离及2-D E图谱的建立

目的 从临床标中分离HP,建立分别来源于胃癌及慢性浅表性胃炎Hp临床株的2-DE图谱,为分析鉴定差异蛋白质奠定基础.方法 胃镜下钳取标本后分离、培养,并应用革兰染色及PCK鉴定所分离菌株.机械匀浆法将细菌破碎后加裂解液提取总蛋白,应用分步抽提法分离细菌蛋白,凝胶经银染显色后,用PDQuest图像分析软件进行凝胶图像分析.结果 所分离菌株均为HP,获得背景清晰,分辨率高,重复性好的胃癌及慢性浅表性胃炎Hp临床株总蛋白2-DE图谱各3块,每张图谱约200个蛋白质点,大多数蛋白质点在位置和丰度上一致.结论 成功建立了胃癌及慢性浅表性胃炎Hp临床株的2-DE图谱,并发现了14个差异表达的蛋白质点.     

两种大肠癌转移性细胞株双向电泳图谱的初步分析

目的 初步分析大肠癌转移过程中差异表达的蛋白质,为阐述大肠癌转移的分子机制提供线索。方法 以一对来自同一亲本、转移能力不同的人大肠癌细胞株SW620和SW480为实验对象,利用双向电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE),建立并优化两种细胞株的蛋白表达图谱;之后利用Melanieш软件分析与大肠癌转移相关的差异表达蛋白点。结果 两种细胞株的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性;采用了非线性pH3-10及重叠窄范围的固相pH梯度胶条,提高了2-DE图谱的分辨率;初步选择11个差异表达蛋白点。结论 非线性及重叠窄范围的固相pH梯度胶条可改善2-DE中蛋白分离的效果,初步分离的差异蛋白点为进一步鉴定大肠癌转移相关蛋白及建立大肠癌转移性细胞株的2-DE数据库奠定了基础。     

两种大肠癌转移性细胞株双向电泳图谱的初步分析

目的初步分析大肠癌转移过程中差异表达的蛋白质．为阐述大肠癌转移的分子机制提供线索。方法以一对来自同一亲本．转移能力不同的人大肠癌细胞株SW620和SW480为实验对象．利用双向电泳技术(two—dimensional gel electrophoresis，2-DE)，建立并优化两种细胞株的蛋白表达图谱；之后利用Melanie ш软件分析与大肠癌转移相关的差异表达蛋白点。结果两种细胞株的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性；采用了非线性pH3—10及重叠窄范围的固相pH梯度胶条，提高了2-DE图谱的分辨率；初步选择11个差异表达蛋白点。结论非线性及重叠窄范围的固相pH梯度胶条可改善2-DE中蛋白分离的效果，初步分离的差异蛋白点为进一步鉴定大肠癌转移相关蛋白及建立大肠癌转移性细朐株的2-DE数据库奠定了基础．     

专业型医学研究生的科研创新精神培养

在我国现行医学研究生培养模式中,专业型医学研究生培养目标是要求学生掌握本学科坚实的基础理论和系统的专业知识,具有科研创新精神和从事临床科学研究、教学、管理等工作能力,具有较强解决实际问题的能力、能够承担专业技术或管理工作、具有良好职业素养的高层次应用型专门人才。然而在现实的专业型医学研究生培养中,片面强调专业型医学研究生的临床工作能力,而忽略了对研究生本该具有的科研创新能力的培养。本文就培养专业型医学研究生科研创新精神的重要性以及如何树立专业型医学研究生的科研创新精神进行了探讨。     

紫杉醇耐药与敏感细胞的差异表达蛋白分析

目的 比较人肺腺癌细胞系A549与肺腺癌紫杉醇耐药细胞系A549-Taxol的差异表达蛋白.方法 提取A549和A549-Taxol总蛋白,应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离,ImageMaster 5.0软件分析并筛选出两者间差异表达的蛋白点,质谱分析加以鉴定.结果 获得分辨率高且重复性好的肺腺癌耐紫杉醇细胞系及亲代细胞系2-DE图谱.ImageMaster软件分析差异大于2倍的蛋白质点共有80个,其中33个在耐药细胞系中上调,47个下调.质谱分析鉴定出19种差异表达蛋白,其中A549-Taxol中上调蛋白11种,涉及细胞骨架蛋白、代谢酶类、分子伴侣和信号转导相关蛋白质.结论 应用2-DE技术整体展示了紫杉醇耐药细胞系及敏感细胞系的蛋白表达谱,质谱法鉴定的差异蛋白为进一步从多因素角度研究紫杉醇耐药机制提供了新线索.     

血清双向凝胶电泳体系的建立

目的:建立血清双向凝胶电泳(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE)技术体系.方法:用Proteoprep blue albumin depletion kit将血清中高峰度蛋白去除.预冷丙酮沉淀蛋白质后,加入样品溶解液充分溶解,进行等电聚焦电泳(isoelectric focusing,IEF)和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel elecrophoresis,SDS-PAGE),行硝酸银染色后,运用ImageMaster软件行初步分析.结果:通过调整,优化2-DE技术条件,建立了稳定的2-DE技术.结论:建立了相对稳定的人血清蛋白质2-DE技术,其稳定性、重复性好,为开展疾病蛋白质组学的研究奠定了基础.     

紫杉醇耐药与敏感细胞的差异表达蛋白分析

目的 比较人肺腺癌细胞系A549与肺腺癌紫杉醇耐药细胞系A549-Taxol的差异表达蛋白.方法 提取A549和A549-Taxol总蛋白,应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离,ImageMaster 5.0软件分析并筛选出两者间差异表达的蛋白点,质谱分析加以鉴定.结果 获得分辨率高且重复性好的肺腺癌耐紫杉醇细胞系及亲代细胞系2-DE图谱.ImageMaster软件分析差异大于2倍的蛋白质点共有80个,其中33个在耐药细胞系中上调,47个下调.质谱分析鉴定出19种差异表达蛋白,其中A549-Taxol中上调蛋白11种,涉及细胞骨架蛋白、代谢酶类、分子伴侣和信号转导相关蛋白质.结论 应用2-DE技术整体展示了紫杉醇耐药细胞系及敏感细胞系的蛋白表达谱,质谱法鉴定的差异蛋白为进一步从多因素角度研究紫杉醇耐药机制提供了新线索.     

双向电泳分离技术的比较和优化

目的:比较优化人血清蛋白双向电泳(2-DE)分离技术,提高2-DE对血清蛋白的分辨能力.方法:收集健康人群标本,分别进行多次双向电泳,比较高丰度蛋白的去除前后及传统的考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色两种不同的染色方法等因素对双向电泳图谱质量的影响.结果:考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色相比,血清2-DE图谱检测到平均蛋白质点数分别是(324±25)(n=3)和(785±30)(n=3);去除高丰度蛋白前后比较,未做处理的血清、去除蛋白和IgG血清的2-DE图谱检测到平均蛋白点数分别是(501±25)(n=3)和(813±22)(n=3).结论:去除高丰度蛋白并结合SYPRO-ruby荧光染色可以大大提高血清低丰度蛋白的解析能力.此方法优化了血清蛋白质2-DE技术,为进一步开展疾病血清蛋白质组研究奠定了基础.     

病理学专业学位研究生病理技术教学的探索

本研究结合教学实践,对病理学专业学位研究生病理技术教学内容、方式及效果评价进行总结。根据研究生基础条件制定病理技术培训方案,采用翻转课堂等多元化教学方法开展以学生为中心的启发式教学,利用智能化教学平台开展互动式理论教学,以问题导向学习模式开展实践教学,旨在提高病理学专业学位研究生的病理技术理论素养和实践水平,提升临床科研思维,为其将来开展临床病理诊断和科研工作奠定基础。     

医学研究生《生物医学软件应用》课程设置的探讨

正确运用生物医学软件可以培养医学研究生科学缜密的思维方式,提高其科研和创新能力。按需定位课程目标和内容,结合现代化的教学手段和实用性的考核形式,对《生物医学软件应用》课程设置进行探索。使研究生更全面掌握生物医学软件的相关知识与技能,为其顺利开展科研工作奠定良好基础。     

促进医学研究生专业英语教学改革的思考

为了促进医学研究生专业英语教学的改革,根据医学研究生目前专业英语教学的现状,对医学研究生专业英语教学中的相关问题进行了探讨。目前教学中存在的主要问题是：（1）教学大纲与目前社会需求不相适应;（2）医学研究生专业英语优秀教材匮乏;（3）专业英语教学方法手段单一;（4）医学专业英语教学师资力量有待加强。针对上述情况,课题组认为：（1）明确医学研究生专业英语教学目标;（2）加强其专业英语教材建设;（3）改革教学方法,创新教学模式;（4）适应新形势,加强专业英语师资队伍建设是促进医学研究生专业英语教学改革的有效途径。     

中医师承制专业学位课程体系的构建

深入分析本校第四批师承制专业学位课程设置特点,从强化中医临床思维、技能、科研能力三方面提出构建课程体系的基本思路。学位课程与继承教学有机结合设置课程;以中医经典理论与临床技能方法课程为主体优化教学内容;遵循师承制学员在职、异地学习等特点创新教学方法,逐步建立较为完善、科学的中医师承制专业学位课程体系。     

硕士生医学统计学实验课改革初探

医学统计学是医学硕士生的一门必修课,是医学科研必不可少的工具,然而硕士生的统计应用能力与教学目标期望值有较大差距。该文分析了当前实验课教学的现状与不足,深入思考了当前医学统计学教学改革的方向,提出了PBL与统计软件SPSS紧密结合的教学模式,并详细阐述了实施及考核方案。该教学模式以解决医学实际问题为出发点,着重培养学生正确利用统计理论和统计分析软件为科研服务的能力。该模式将极大地激发学生的学习热情,有助于形成系统的统计知识体系和科研思路以及增强医学硕士生的统计实践能力。     

循证医学在医学研究生科研能力培养中的作用

根据医学研究生的培养特点,作者及所在团队在医学研究生中开设了循证医学理论与实践课。通过教学团队指导教师的指导,结合学生的临床实践及其导师的研究方向,学生运用循证医学方法针对具体临床问题,开展资料检索、文献评价、分析文献、提取数据、综合分析、系统评价撰写等实践与训练。学生学习和掌握了循证思维与相关的科研方法,科研能力得到了提高。     

医学科研机构培养情报学研究生创新能力的目标和路径

在借鉴国内外情报学研究生培养的成功经验和医学科研机构研究生培养现状的基础上,明确创新能力在医学科研机构情报学研究生培养目标中的地位,并从改革课程设置、改进教学方法、导师队伍建设、完善创新环境、提供实践平台和研究生自我教育方面提出改革医学科研机构培养情报学研究生创新能力的路径.     

围绕医院科研需求改进病理生理学研究生教学

建设一流研究型医院的关键在于高素质的医学人才。本文总结“科研式”病理生理学教学体系在研究生教学中的应用情况,该体系的实施可以启迪学员创造性的思维,训练学员的科研思路与技能,提高学员的科研素质,是研究型医院研究生病理生理学教学的一种新探索。     

PBL教学法在口腔颌面外科研究生教学中的应用

目的提高临床医学研究生临床思维和综合应用知识的能力。方法以研究生为对象,采用PBL教学法,从临床具体病例出发,以小组讨论形式,在导师的引导下综合运用所学知识解决问题,以探讨口腔颌面外科学教学改革的途径。结果所有参与者都认为PBL教学法是一种高效率的教学模式。这种教学方法增强了学生学习的主动性和分析、解决问题的能力,并培养了良好的团队精神。结论PBL教学法可以提高临床医学研究生临床思维和综合应用知识的能力,为培养合格临床医师奠定基础。     

基于PBL的硕士研究生实验教学方法改革尝试

研究生教育是高层次人才培养?培养研究生独立自主的科研能力和创新思维是我国研究生教育的核心?创新能力的培养是一项系统工程,其中创新实验教学是培养研究生创新能力的基础?针对传统的研究生实验教学模式,作者将PBL教学法理念引入硕士研究生实验教学课程中,显示学生在创新思维能力?分析问题和解决问题能力?自主学习能力?实验操作能力和团队合作精神等方面都有提高,是基础医学人才培养模式改革的有益尝试?