塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29增殖和凋亡的影响

目的体外观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制.方法采用噻唑蓝(MTT)比色法,流式细胞(FCM)、吖啶橙/溴化乙啶染色结合荧光显微镜、Western印迹法等技术,研究塞来昔布对HT-29细胞增殖的抑制和可能的机制.结果塞来昔布抑制HT-29细胞生长,呈浓度和时间依赖性.流式术检测出典型的亚二倍体"凋亡峰",凋亡率(7.31±2.37)%～(48.30±2.86)%;使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等.凋亡比例呈剂量和时间依赖.塞来昔布降低细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2和CDK4的表达、上调细胞周期素依赖蛋白激酶抑制因子p21WAF1/CIP1n蛋白表达.结论体外塞来昔布抑制HT-29细胞增殖,并诱导细胞凋亡;下调CDK2和CDK4蛋白表达,上调P21WAF1/CIPln蛋白表达.塞来昔布抑制HT-29细胞增殖、诱导凋亡可能与阻止细胞周期进展有关.     

塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29增殖和凋亡的影响

目的：体外观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）比色法,流式细胞仪（FCM）、吖啶橙/溴化乙啶染色结合荧光显微镜、Western印迹法等技术,研究塞来昔布对HT-29细胞增殖抑制的影响。结果：体外塞来昔布抑制HT-29细胞生长,呈浓度和时间依赖性。DNA直方图示典型的亚二倍体“凋亡峰”,凋亡率在（7.31±2.37）%～（48.30±2.86）%;塞来昔布使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例下降,呈一定剂量效应关系。典型的凋亡形态学改变：细胞体积缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等。凋亡比例呈剂量和时间依赖。塞来昔布下调细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2,CDK4蛋白表达、上调细胞周期素依赖蛋白激酶抑制因子P21WAF1/CIP1蛋白表达。结论：塞来昔布抑制HT-29细胞增殖、诱导凋亡可能与阻止细胞周期进展有关。     

尼美舒利对人肺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响

目的 体外研究选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对人肺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪(FCM)、吖啶橙染色结合荧光显微镜观察细胞形态等技术,研究尼美舒利对人肺癌细胞株A549细胞增殖的抑制和促进凋亡的影响.结果 MTT比色法显示塞来昔布对A549细胞有较强的抑制作用,呈时间和浓度依赖性;FCM显示有凋亡峰出现,凋亡率在(12.69±0.87)%～(43.87±1.53)%;尼美舒利使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例下降,呈一定效应关系;荧光显微镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征:细胞体积缩小、细胞核固缩,凋亡小体形成等.凋亡比例呈剂量和时间依赖.结论 尼美舒利体外能够显著抑制A549细胞增殖,诱导凋亡,可能与诱导凋亡和阻止细胞周期进展有关.     

尼美舒利对人肺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响

目的体外研究选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂尼美舒利对人肺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法、流式细胞仪（FCM）、吖啶橙染色结合荧光显微镜观察细胞形态等技术,研究尼美舒利对人肺癌细胞株A549细胞增殖的抑制和促进凋亡的影响。结果MTT比色法显示塞来昔布对A549细胞有较强的抑制作用,呈时间和浓度依赖性;FCM显示有凋亡峰出现,凋亡率在（12.69±0.87）%～（43.87±1.53）%;尼美舒利使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例下降,呈一定效应关系;荧光显微镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征：细胞体积缩小、细胞核固缩,凋亡小体形成等。凋亡比例呈剂量和时间依赖。结论尼美舒利体外能够显著抑制A549细胞增殖,诱导凋亡,可能与诱导凋亡和阻止细胞周期进展有关。     

塞来昔布对卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡影响的研究

目的探讨选择性COX-2抑制剂塞来昔布对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的作用。方法MTT法测定细胞增殖情况;Hoechst33258染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡。结果塞来昔布对HO-8910细胞有增殖抑制作用,呈时间、剂量依赖性;光镜可观察到细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测结果分析,实验组G1／G0期上升,S期和G2／M期下降,细胞凋亡率上升。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布在体外能诱导卵巢癌HO-8910细胞发生凋亡,抑制细胞增殖。     

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人食管癌细胞的抗增殖研究

目的探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人食管癌细胞Eca-109和TE-1的增殖及其细胞周期的影响.方法采用体外细胞培养,通过MTT比色分析法观察不同浓度COPADG对Eca-109及TE-1细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测药物对细胞周期的影响;透射电镜下观察细胞的形态学变化.结果COPADG能有效的抑制人食管癌细胞Eca-109及TE-1的增殖,且存在时间及剂量依赖性(P＜0.01);不同浓度的COPADG作用48 h之后,流式细胞仪检测均显示G0/G1期细胞比例增加(P＜0.01),而S期细胞比例减少(P＜0.01),在Eca-109细胞中出现了典型的凋亡峰;电镜下可观察到凋亡的典型形态学变化.结论COPADG能有效抑制人食管癌细胞Eca-109及TE-1的增殖,改变其细胞周期分布,导致明显的G0/G1期阻滞,并在一定浓度下诱导肿瘤细胞凋亡.     

塞来昔布对高表达Her-2/neu的人乳腺癌SKBr3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人乳腺癌细胞SKB r3的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法4种不同浓度的塞来昔布处理乳腺癌细胞系SKB r3细胞24、48 h,MTT法测定24、48 h后SKB r3细胞的增殖活性,流式细胞仪（FCM）检测48 h后各浓度塞来昔布诱导细胞凋亡情况及对细胞周期的影响。结果与对照组相比,塞来昔布以时间、剂量依赖性方式抑制SKB r3细胞增殖（P〈0.05）。作用48 h后,塞来昔布诱导SKB r3细胞凋亡并阻断了细胞周期进展,凋亡率随塞来昔布浓度的增加而增加（P〈0.05）,且随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞比例逐渐增加、S期及G2/M期细胞比例逐渐下降（P（0.05）。结论塞来昔布抑制高表达Her-2/neu的SKB r3细胞的增殖,诱导其凋亡。     

选择性环氧合酶-2抑制剂对胃癌细胞Bgc-823增殖的影响

目的探讨选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂——美洛昔康、塞来昔布对胃癌细胞Bgc-823增殖与凋亡的影响。方法四唑盐比色实验法（MTT法）检测Bgc-823细胞的生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果美洛昔康、塞来昔布呈剂量和时间依赖性抑制Bgc-823细胞的增殖;塞来昔布的作用强于美洛昔康。塞来昔布可诱导Bgc-823细胞凋亡,将细胞阻滞在G0/G1期;随着药物浓度的增加,凋亡率增加,G0/G1期细胞比例增加。结论选择性COX-2抑制剂呈剂量和时间依赖性抑制胃癌细胞生长,这种作用可能依赖于对COX-2表达的抑制。选择性COX-2抑制剂呈剂量依赖性影响细胞周期,诱导胃癌细胞凋亡。     

塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖和凋亡的影响

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞后细胞增殖的变化;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;RT-PCR检测细胞中COX-2 mRNA的表达.结果 MTT结果显示,塞来昔布对HEC-1B细胞的增殖抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增加,S期和G2/M细胞减少,细胞凋亡率增加,各药物组与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR结果显示,在50 ～ 200 μmol/L塞来昔布组,随着药物浓度的增加COX-2 mRNA的表达逐渐减弱(P＜0.05).结论 塞来昔布能抑制HEC-1B细胞的增殖,并能改变细胞周期和诱导凋亡,其机制可能与下调细胞中COX-2 mRNA的表达有关.     

塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖和凋亡的影响

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞后细胞增殖的变化;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;RT-PCR检测细胞中COX-2 mRNA的表达。结果MTT结果显示,塞来昔布对HEC-1B细胞的增殖抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增加,S期和G2/M细胞减少,细胞凋亡率增加,各药物组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,在50~200μmol/L塞来昔布组,随着药物浓度的增加COX-2 mRNA的表达逐渐减弱(P<0.05)。结论塞来昔布能抑制HEC-1B细胞的增殖,并能改变细胞周期和诱导凋亡,其机制可能与下调细胞中COX-2 mRNA的表达有关。     

放射治疗在广泛期小细胞肺癌治疗中的影响

目的 探讨放射治疗在广泛期小细胞肺癌中的影响。方法 与材料广泛期小细胞肺癌180例。原发病灶伴有对侧纵隔和（或）锁骨上淋巴结转移者48例,伴有远处转移132例。化疗＋放疗142例,单纯化疗32例,单纯放疗6例。胸部放疗剂量：〈50Gy 33例,≥50Gy 105例。脑部放疗剂量：30Gy／10次28例,40Gy／20次22例。结果 全组近期疗效：CER13．3％（24／180）,PR61．7％（111／180）。生存率：1年47．8％,2年17．2％,中位生存期10个月。化放疗组142例,化疗后疗效评价：CR4．9％,PR69．7％。放疗后症状缓解率及疗效评价：70％以上的病人呼吸道症状、上腔静脉压迫综合征、骨转移疼痛及脑转移症状和体征有不同程度缓解甚至消失。CR17．6％,PR65．5％。1年生存率52．8％,2年19．7％。中位生存期11个月。单纯化疗32例近期疗效评价：CR1例,PR19例,1年生存28．9％,2年7．8％,中位生存期6个月。结论 放射治疗在广泛期小细胞肺癌治疗中起到了较好的缓解症状和体征、延长生存的作用。     

GDNF对大鼠多巴胺能神经元CB表达的影响

目的研究胶质细胞系源性神经营养因子（glial cell line—derived neurotrophic factor，GDNF）对损伤的多巴胺（dopamine，DA）能神经元的保护作用和神经细胞黏附分子（neural cell adhesion molecule，NCAM）在这一保护过程中的影响。方法以培养的新生大鼠中脑脑片损伤模型和在体帕金森病（Parkinson disease，PD）模型作为观察对象。实验分3组：对照组（在无血清培养基内加入PBS或在体黑质内注射PBS）、GDNF组（在无血清培养基内加入GDNF或在体黑质内注射GDNF）、NCAM阻断组（在无血清培养基内于加入GDNF 30min前加anti—NCAM或在体黑质内注射GDNF 30min前注射anti—NCAM阻断NCAM）。采用免疫组织化学染色技术和Western blot技术，观察各组钙结合蛋白D28K（calbindin D28K，CB）表达的变化。结果GDNF组黑质中CB阳性神经元数目及表达的量明显多于对照组，差别有统计学意义。NCAM阻断组上述指标与GDNF组相比无显著性差异。结论GDNF可能通过增加CB的表达而保护受损的DA能神经元，但NCAM可能未参与这一作用。     

SCLC与NSCLC中P-gp、CD44表达的差异

目的 探讨小细胞肺癌(SCLC)与非小细胞肺癌(NSCLC)多药耐药基因表达产物P-gp及细胞表面黏附分子CD44V6的表达差异。方法免疫组化SP法检测78例NSCLC与8例SCLC肿瘤组织中P-gp和CD44V6的表达,并分析其与临床病理指标的关系。结果SCLC中P-gp阳性率为50.00％,CD44V6阳性率为0,NSCLC中P-gp阳性率为79.49％,CD44V6阳性率为62.82％,P-gp及CD44V6在SCLC与NSCLC中表达率均有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。NSCLC中CD44阳性组淋巴结转移率为53.85％,CD44V6阴性组淋巴结转移率为20.51％,差异有显著性(P<0.05)。结论P-gp和CD44V6的表达率在SCLC与NSCLC间存在显著差异,CD44V6的表达与NSCLC淋巴结转移有关,提示SCLC与NSCLC在化疗耐药和浸润转移机制上存在差异。     

两种化疗方案治疗非小细胞肺癌临床评价及药物经济学分析

目的比较多西他赛加顺铂（DP方案）与长春瑞滨加顺铂（NP方案）两种联合方案治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效，毒副反应及药物经济学评价。方法用DP方案治疗晚期NSCLC30例（DP组）与NP方案治疗晚期NSCLC32例（NP组），统计分析临床资料。结果DP组有效率43．3％，NP组有效率37．5％，两组疗效差异无统计学意义（P〉0．05）。毒副反应主要为恶心呕吐、骨髓抑制，NP组的静脉炎较DP组多发（P〈0．05），DP组肌肉关节酸胀及脱发发生率高于NP组（P〈0．05），DP组的疾病进展时间较NP延长（P〈0．05）。两周期平均药物费用（人民币）DP组（12045．6±324．7）元，NP组（7519．9±169．1）元，费用疗效比DP组278．2元，NP组200．5元，1年生存率与所需费用之比DP组328．3元，NP组218．6元。药物费用NP组明显低于DP组，费用疗效比NP组优于DP组。结论两种方案均为治疗晚期NSCLC的有效方案，在治疗晚期NSCLC时可选用。     

GDNF促进体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞增殖的时效及量效关系的研究

目的观察外源性胶质细胞系源性神经营养因子（GDNF）促进大鼠C6胶质瘤细胞增殖的时效及量效关系,为深入研究GDNF对C6细胞的促增殖机制提供最佳的时效及量效作用点。方法将体外培养的C6细胞分为空白对照组、溶剂对照组和实验组（GDNF浓度分别为10、30、50、70、90μg／L,作用时间分别为12、24、48、72h）,用MTT比色法检测不同浓度GDNF通过不同作用时间对C6细胞增殖情况的影响。结果浓度在50μg/L以上的GDNF作用24h后,C6细胞增殖水平升高,在48h时达到高峰而后趋于平稳或呈下降趋势,与对照组比差异有统计学意义。其中,70μg/LGDNF作用48h后,C6细胞的增殖率明显高于其他实验组。结论外源性GDNF促进体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞增殖的最佳时效及量效作用点为浓度70μg/L、时间48h。     

经纹状体注射胶质细胞系源性神经营养因子对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的实验研究

目的 研究经纹状体注射胶质细胞系源性神经营养因子（glial cell line-derived neumtrophic factor，GDNF）对帕金森病（Parklnson disease，PD）模型小鼠中脑黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法 利用1-甲基-4-苯基1，2，3，6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP）制备成年小鼠PD模型，通过单侧纹状体定位注射GDNF，取中脑黑质节段，做连续冠状石蜡切片，结合免疫组织化学染色方法，观察各组酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、钙结合蛋白（calbindin D28k，CB）的表达，光镜观察并细胞计数，统计学分析。结果 在模型制备的第4,6天，单侧纹状体定位注射GDNF后，小鼠黑质致密部TH与CB阳性神经元数量显著多于注射PBS组。结论 经纹状体注射GDNF对成年PD小鼠黑质多巴胺能神经元具有保护作用，且这种保护作用可能与细胞内CB表达增加有关。     

治疗获益的晚期非小细胞肺癌患者生活质量相关影响因素分析

目的探讨临床治疗获益的晚期非小细胞肺癌患者的生活质量（quality of life,QOL）与年龄、性别、临床分期以及病理类型的相关性。方法采用QLICP-LU量表,对50例经放化疗获益的晚期非小细胞肺癌患者进行QOL测定,按年龄、性别、临床分期以及病理类型分组,运用SPSS17,0软件分别对亚组生活质量进行t检验,分析QOL总评分及各领域评分是否存在差异。结果年龄≤60岁较年龄〉60岁的患者,在基本生理功能、性功能、癌症共性症状等方面评分较高;女性较男性患者的基本生理功能、咳喘评分较高,心理功能评分较低;mb期较Ⅳ期患者在胸闷痛、KPS等方面评分较高。结论临床治疗获益的晚期非小细胞肺癌患者的生活质量评分与年龄、性别、临床分期等具有相关性,与病理类型无明显相关性。     

索拉非尼对肾癌786-O细胞株体外培养的增殖抑制作用

目的探讨索拉非尼对体外培养的肾癌786-O细胞株细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法体外培养人肾癌786-O细胞株,给予不同浓度（10．0、50、25、1．0、0．5μmol／L）的索拉非尼混合处理,采用MTT法检测细胞增殖的变化,并采用流式细胞仪检测索拉非尼对786-O细胞凋亡和细胞周期变化的作用。结果经索拉非尼处理后,镜下可见786—O细胞株细胞结构消失,各孔内可见大量紫黑色针状结晶物,但随着药物浓度的升高,针状结晶物逐渐减少。与对照组比较,10．0、5．0和2．5μmol／L组吸光度值均显著下降（均P〈0．01）、细胞抑制率均显著升高（均P〈001）,100和5．0umol／L组细胞存活率均显著下降（均P〈0．01）。与对照组比较,5．0、2．5、1．0μmol／L组G0／G1期细胞所占比例均显著升高（均P〈0．01）、S期细胞所占比例均显著下降（均P〈0．01）;而GJM期细胞所占比例仅5．0μmol／L组显著升高（P〈0．01）。结论索拉非尼可以抑制人肾癌786-O细胞株的增殖,诱导肾癌细胞凋亡。     

Survivin COX-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:观察Survivin、COX-2在NSCLC及非肿瘤性病变肺组织中的表达,探讨它们在NSCLC发生发展中的作用及相互关系.方法:制作71例NSCLC和21例非肿瘤性病变肺组织共92例的组织芯片,采用免疫组化技术检测Survivin、COX-2的表达.结果:①Survivin、COX-2在NSCLC组织中的阳性表达率分别为71.83%、77.47%,均显著高于非肿瘤性病变肺组织(19.05%、14.29%).Survivin 的阳性表达仅与TNM分期有关;COX-2的表达与肺癌组织的病理类型有关.②NSCLC组织中Survivin与COX-2表达呈正相关.结论:Survivin、COX-2相互协同,共同参与NSCLC的发生、发展.     

失荅剌知丸对脑缺血大鼠再灌注后神经功能缺损及脑组织PI3-K和AKT表达的影响

目的探讨失荅剌知丸对脑缺血大鼠再灌注后神经功能缺损恢复程度以及皮质缺血周围区磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3-K）和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）表达的影响。方法 169只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、金纳多组（阳性药物对照组）和失荅剌知丸组,后3组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,缺血2h后再灌注,术后分12h、24h、72h、7d组,共13组,每组13只。采用Zea Longa评分法分别观察神经功能缺损恢复程度;TUNEL法检测24h脑细胞凋亡情况;免疫组化法观察各组大鼠脑内PI3-K和AKT的表达情况。结果与假手术组比较,模型及各药物组神经功能评分均降低（P〈0.05）;与模型组比较,各用药组24h、72h和7d神经功能恢复明显,神经功能评分上调,以72h和7d点改善尤为明显（P〈0.01）;失荅剌知丸72h、7d组神经功能评分较金纳多组显著提高（P〈0.01）。24h脑细胞凋亡情况显示：失荅剌知丸组在24h组凋亡阳性细胞数明显低于金纳多组和模型组（P〈0.01）。与假手术组比较,模型组、各药物组PI3-K和AKT的表达增高（P〈0.01）;与模型组比较,各药物组PI3-K和AKT的表达增高（P〈0.01）;与金纳多组比较,失荅剌知丸组PI3-K和AKT的表达增高,其中24h、72h、7d表达明显（P〈0.01）。结论失荅剌知丸可明显改善脑缺血/再灌注损伤大鼠的神经功能,抑制神经细胞凋亡;上调PI3-K和AKT的表达,激活PI3-K/AKT信号通路,可能是其发挥神经保护作用的机制之一。