反义技术及其抗病毒作用

反义技术(antisensetechnique)是指根据碱基互补的原理,用人工合成或生物体合成的特定互补的DNA或RNA片段(或其化学修饰产物)抑制或封闭基因表达的技术[1]。包括反义RNA(asRNA)、反义寡聚核苷酸(asON)和具有核酸特异性切割活性的核酶(ribozyme)等。近年来的研究表明,反义?..     

细胞核内反义RNA和反义ribozyme——基因表达抑制新途径

近年来,新采用的反义技术已有细胞核内反义RNA和Antizyme。前者是指将反义RNA限制于细胞核内抑制靶基因原始转录子,以避免在细胞浆需抑制极其巨大数量的靶RNA,而起到把问题解决在萌芽状态的独特作用,这种模拟真核生物天然存在反义RNA封闭基因表达机制的高效方法,无疑开辟了一条抑制基因表达的新途径。后者是反义ribozyme,即ribozyme基因与反义RNA基因相连接,转录成具有ribozyme和反义RAN双重功能的一类RNA分子,实际上是基因剪刀和基因表达封条的联合体。目前,它在转基因植物研究方面,应用比较广泛。从研究进展、存在问题、发展对策和应用前景四方面评述细胞核内反义RNA和反义ribozyme是抑制基因表达的新途径。     

反义RNA在植物基因工程领域的应用进展

反义RNA广泛存在于各类生物中.它通过与靶RNA进行碱基互补配对的结合方式参与基因表达的调控.目前利用反义RNA技术调控植物基因的表达取得了很大进展,反义RNA在植物基因工程领域主要应用于抑制果实成熟、抗病、作为反向筛选标记基因、控制花色、控制淀粉合成、控制油料种子中脂肪酸的合成、控制雄性不育等方面.此外,通常采用反义RNA技术抑制食物中原有的与所需去除的化学成分合成有关的基因表达,降低或去除食物中的有害化学成分.反义RNA技术的研究尚处于初级阶段,但它作为一门新兴的生物技术必将在今后的农业发展中发挥重要作用.     

反义策略研究造血基因调控及白血病基因治疗

绝大多数DNA由两条碱基互补的单链组成,生物信息以不同核苷酸排列顺序的形式编码在DNA链上。DNA双链中被转录为RNA的链称为正义链,与正义链互补的链为反义链。精心设计一段与正义链互补的寡核苷酸,会象“封条”一样阻断基因转录;将含有反义序列的载体导入细胞内,可以干扰特定基因的表达。反义核酸技术就是利用这一原理,在基因位点、前体mRNA、mRNA及蛋白水平上,直接研究特定基因在细胞增殖、分化和凋亡中的调控作用。 反义核酸策略中,反义寡核苷酸、反义RNA和核酶技术已经被广泛应用于抗病毒和抗恶性肿瘤研究。在利用反义技术研究造血细胞的基因调控方面,特别是某些癌基因在白血病细胞内的过度表达、突变方面,已经取得了一些进展。目前,人工合成的寡核苷酸已能特异、高效地抑制白血病细胞的增殖和裸鼠体内肿瘤结节的形成,在对白血病患者的系统治疗方面也进行了尝试。利用基因工程技术构建含反义RNA或核酶特征序列的载体,能够抑制白血病异常基因的表达,并特异性地干扰易位融合基因。 利用反义核酸技术治疗白血病和肿瘤,目前仍有许多不同的见解,争论的焦点集中在三个方面:互补寡核苷酸的作用机制、可靠性及实际效果。一般认为,人工合成的寡核苷酸要应用于临床,尚需进一步提高稳定性和生物利用度。尽管如此     

反义寡核苷酸治疗白血病的研究现状

反义核酸技术是近十年来肿瘤治疗研究的热点,它包括反义寡核苷酸(又称反义DNA,Antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)、反义RNA、核酶及RNA干扰等技术.其中反义寡核苷酸技术的主要作用原理是根据碱基互补配对原则,利用合成的寡核苷酸选择性地与靶基因mRNA互补结合,干扰或阻止其基因产物的形成,从而达到治疗肿瘤的目的.     

反义寡核苷酸在恶性肿瘤治疗中的作用及机制

反义（antisense）核酸技术的基本原理是根据Watson-Crick碱基互补配对规律和核酸杂交原理，设计出能与靶基因特定区域结合的互补寡核苷酸片段，与靶基因（DNA）或信使核糖核酸（mRN-A）的特定序列相结合，以影响靶基因的表达、抑制其功能，而其他基因的转录和表达则不受影响。封闭单个基因表达的反义的概念由Zamecnik和Stephenson首次描述，     

反义技术在心血管病方面的应用

反义（antisense）核酸是指与体内某些RNA或DNA序列具有互补顺序，并能通过碱基配对与互补链杂交，从而影响其转录或翻译过程的RNA或DNA片段。通过反斗核酸特异性抑制某些基因的表达，可能抑制由于癌基因的表达引起的血管平滑肌细胞增殖，抑制某些心血管病的发生与发展。近年来该领域的研究结果显示：应用反义核酸技术抑制血管平滑肌细胞的增殖将可能成为治疗心血管疾病的新途径之一。     

反义寡核苷酸技术的进展及应用

随着分子生物学和遗传工程的发展,基因治疗应运而生,得到广泛的肯定,其中包括反义核酸技术,简称反义技术。那些能与特定的ＤＮＡ或ＲＮＡ以碱基互补配对的方式结合,并阻止其转录和翻译的短核酸片段,称为反义寡核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）。研究反义寡核苷酸作用机理和应用的技术叫反义技术。 反义技术概述 早在１９８４年,Ｊｏｈｎａｔｈａｎ Ｇ就报道了用反义ＲＮＡ抑制ＴＫ基因的表达取得了良好的效果~［１］。反义寡核苷酸抑制靶基因的作用途经包括：１．反义寡核苷酸与ＤＮＡ双螺旋形成三螺旋,…     

反义核苷酸技术在胃癌中的应用研究进展

反义技术是1984年由Izant等首先提出的，根据碱基互补原理，用外来合成特定的互补的反义核苷酸与细胞内核酸相互作用以抑制或封闭该表达。目前反义技术在肿瘤治疗的研究中已成为热点之一，并且已取得了一些成绩。现将对其在胃癌中的研究重点介绍如下。     

反义药物在疾病治疗中的应用研究

所谓反义药物(Antisense Drug)目前包括反义DNA、反义RNA及Ribozyme。反义DNA的作用是用人工合成的与待封闭基因的某一区段互补的正常或化学修饰的DNA片段(8～28mer)抑制或     

反义RNA与肝癌的研究进展

反义RNA是一类能与特异性mRNA互补并从翻译、转录或转录后水平上高度特异地抑制靶基因表达的RNA分子.肝癌是全球最常见且致命的恶性肿瘤.肝癌组织的无限增殖、侵袭转移、放化疗耐受等能力成为其无法治愈并不断恶化的重要原因.反义RNA 在肝癌肿瘤中异常表达,肿瘤的恶性表型维持需要众多反义RNA的参与.近年来,利用反义RNA技术治疗恶性肿瘤已经成为了一个新的研究方向,本文对这一技术治疗肝癌进行了综述.     

反义技术治疗肿瘤的临床进展

反义技术是根据核酸间的碱基互补原理 ,用生物合成或人工合成的互补反义核酸或其化学修饰物与细胞内的特定核酸结合以抑制或封闭其表达。在肿瘤治疗方面 ,人们以癌变过程中的不同突变基因为靶位 ,设计了许多反义抗肿瘤药物 ,其中部分已进入临床试验阶段。作者对已进入临床试验阶段的反义抗肿瘤药物进行综述     

现代分子生物学技术系列讲座之四反义核酸技术

现代分子生物学技术系列讲座之四──反义核酸技术杜卫东（生物化学与分子生物学研究中心）反义核酸技术是利用人工合成的特异性反义寡核苷酸定向抑制或封闭同的基因（ＤＮＡ或ＲＮＡ）表达的技术。它包括三方面的内容：（１）反义及ＲＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ），...     

反义寡核苷酸技术研究进展

反义寡核酸技术，是应用反义寡核苷酸类药物通过Waston-Crick碱基配对与细胞内核酸（DNA或RNA）特异结合形成杂交分子，从而在转录和翻译水平抑制特定基因表达的基因治疗技术，是一种新的药物开发方法。其机制是：①反义寡核苷酸与靶mRNA结合形成DNA-RNA杂合分子，可以激活RNase H。该酶可以切割杂合分子中的RNA链，导致靶mRNA降解。②不能激活RNase H活性的反义寡核苷酸可以通过空间位阻效应阻止核糖体结合来抑制靶mRNA的翻译：另外还可以通过封闭剪接位点有选择的促进蛋白某个可变剪接体的表达，从而纠正错误的剪接。     

反义技术在心血管病方面的应用

反义核酸是指与体内某些ＲＮＡ或ＤＮＡ序列具有互补顺序，并能通过碱基配对与互补链杂交，从而影响其转录或翻译过程的ＲＮＡ或ＤＮＡ片段，通过反义核酸特异性抑制某些基因的表达，可能抑制由于癌基因的表达引起的血管平滑肌细胞增殖，抑制某些心血管病的发生与发展。近年来该领域的研究结果显示：应用反义核酸技术抑制血管平滑肌细胞的增殖将可能成为治疗心血管疾病的新途径之一。     

靶向微小RNA的病毒感染疾病治疗新策略

微小RNA(microRNA,miRNA)是真核生物细胞的一类长度约为19～25个核苷酸的非编码小RNA,在生物体发育和基因表达过程发挥重要的调控作用。miRNA分子通过与靶mRNA的互补配对,在转录后水平上对基因的表达进行负调控。近来研究表明miRNA在病毒感染宿主过程中发挥重要作用。通过设计抗miRNA反义寡核苷酸促进或阻断特定miRNA的表达可以实现抑制病毒复制的目标。本文综述了抗miRNA反义寡核苷酸研究现状和面临的挑战。     

反义核酸技术及其在卵巢恶性肿瘤治疗中的应用

随着分子生物学及基因工程的发展 ,基因治疗已成为研究热点。反义核酸技术的概念是根据碱基互补原理 ,使用与目标靶的遗传物质 (DNA或mRNA)特定互补的短核苷酸片段封闭基因表达的方法。由于反义核酸技术是从生命的最根本点核酸角度着眼 ,对疾病的治疗有突破性的进展。1　反义核     

反义寡核苷酸对K_(562)细胞增殖的作用

反义寡核苷酸可以特异地抑制基因表达 ,设计应用与 bcr-abl融合基因m RNA互补的反义寡核苷酸作用于 K562 细胞 ,结果显示 :反义寡核苷酸对 K562 细胞的生长有明显的抑制作用 ,硫代化与未修饰反义寡核苷酸相比有明显的稳定性 ;反义寡核苷酸与VP16联合应用 ,可明显提高对 K562 细胞的增殖抑制作用。反义寡核苷酸的应用将为慢性粒细胞白血病患者自体骨髓移植体外净化提供新的途径     

反义技术在体外净化中的应用

随着分子生物学的迅速发展 ,以基因治疗为主的新技术、新方法被广泛地引入自体造血干细胞移植物的体外净化。笔者介绍反义技术在体外净化中的一些研究进展。1　反义技术用于体外净化的作用原理大多数肿瘤是异常基因表达、正常基因表达下调或过度表达的结果。反义核酸的策略是将与癌基因或异常表达的正常基因互补的反义核苷酸 (DNA或 RNA)导入肿瘤细胞 ,与肿瘤细胞内相应的 DNA或 RNA结合 ,阻断癌基因转录和表达 ,从而阻止肿瘤细胞生长。例如 ,大多数慢性粒细胞白血病 (CML)患者存在有染色体易位 ,并表达为具有 CML 特异性的 bcr/abl…     

抗肿瘤反义寡核苷酸药物靶标的研究进展

肿瘤是一种多基因相关疾病,反义寡核苷酸药物可以特异性地与靶基因mRNA互补结合,封闭靶基因的表达,在肿瘤的基因治疗中独树一帜。现已发现许多基因在调节细胞增殖和衰老、细胞凋亡、细胞周期、血管生成及信号转导等方面起着重要作用,并证实它们在抗肿瘤反义治疗中可以作为有效的分子靶标。本文综述了近年来发现的抗肿瘤反义寡核苷酸的治疗靶点,并提出了多靶点反义寡核苷酸联合应用治疗肿瘤的新观念。