一测多评法测定山楂中7种成分含量

目的:建立一测多评法同时测定山楂中绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷、槲皮素7种成分的含量。方法:以山楂中所含的上述7种成分为指标,采用一测多评法分别建立各成分与金丝桃苷的相对校正因子及相对保留时间,计算各成分含量,同时采用外标法测定7种成分含量,比较一测多评法与外标法所测含量之间的差异。结果:一测多评法与外标法测定的含量之间没有显著性差异,RSD均3%。结论:建立的同步测定山楂中绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷、槲皮素7种成分的一测多评法,结果准确可靠,可用于山楂药材质量评价。     

RP-HPLC法测定山楂叶中牡荆素鼠李糖苷及牡荆素葡萄糖苷的含量

山楂叶为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bunge var．major N．E．Br．或山楂C．pinnatifida Bunge的干燥叶，具有调血脂、降血压的功效。山楂叶主要含有黄酮类化合物(槲皮素、金丝桃苷、牡荆素、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷)、有机酸类化合物及一些微量元素。其中黄酮类化合物具有调血脂、防止动脉硬化、增加冠脉流量、抗心肌缺氧及心律失常等活性。     

承德产山楂叶中总黄酮和5种黄酮类成分含量的动态分析

目的:对不同月份承德产山楂叶中总黄酮以及牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷5种黄酮类成分进行含量测定及动态分析,以确定山楂叶的最佳采收期.方法:采用紫外分光光度法测定不同月份山楂叶中总黄酮含量,同时用高效液相色谱法测定5种黄酮类成分含量,并分析其不同月份含量的动态变化.Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相0.1％甲酸水溶液-乙腈-四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长340 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:山楂叶总黄酮及牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷含量6月份最高,牡荆素、芦丁含量7月份最高.结论:若以提取山楂叶中黄酮类成分为目的,建议6月份采集.     

HPLC测定山楂精中牡荆苷、牡荆苷-2"-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁的含量

目的测定山楂精中牡荆苷、牡荆苷-2"-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁的含量.方法高效液相色谱法.结果该法简单、快速、准确度高、重现性好.     

山楂叶总黄酮的在体肠吸收研究

目的研究山楂叶总黄酮中牡荆素鼠李糖苷的肠吸收机制.方法运用大鼠在体肠单向灌流模型并采用高效液相色谱法测定灌流液中山楂叶总黄酮中的牡荆素鼠李糖苷浓度,计算其有效渗透系数.结果牡荆素鼠李糖苷在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠的有效渗透系数没有显著性差异(P＞0.05);山楂叶总黄酮的浓度为0.05～0.5 mg/mL时,牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均大于0.2×10-4cm/s,并且均无显著性差异(P＞0.05),而加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米和地高辛后,都能显著提高牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数.结论山楂叶总黄酮中的牡荆素鼠李糖苷属于高渗透性药物,其在大鼠小肠的转运机制为被动扩散,无特殊的吸收窗,P-糖蛋白介导了牡荆素鼠李糖苷的小肠吸收.     

山楂的化学成分、药理作用及质量标志物（Q-Marker）预测

山楂是我国传统的药材,具有健胃消食、行气散瘀、化浊调脂的功效。其主要化学成分类型为黄酮类、萜类、有机酸类、多糖类等。现代药理研究表明,山楂具有促进胃肠蠕动及软化心脑血管方面的作用。此外,还具有调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、抑菌等作用。因山楂具有多基原、多功效、多炮制品的特点,而《中国药典》中指标成分仅为枸橼酸,故对山楂的化学成分、药理作用进行了总结概括,并根据质量标志物(Q-Marker)的概念从植物化学成分专有性、化学成分与有效成分、化学成分可测性等方面进行了分析,有机酸类和黄酮类中的槲皮素、金丝桃苷、芦丁、山柰酚、牡荆素-4′-鼠李糖苷、牡荆素、牡荆素鼠李糖苷可作为Q-Marker成分,为山楂的质量评价研究提供依据。     

HPLC测定山楂叶中牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量

目的:用高效液相法同时测定山楂叶中牡荆素-4'-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量.方法:采用HPLC法,色谱柱:Sepax HP C18柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:A为乙腈-四氢呋喃(20:1),B为0.5%甲酸溶液,采用梯度洗脱;0-10min,A为14%-17%;10-26min,A为17%-18%;26-28min,A为18%～14%;检测波长:360nm,流速:1.0mL/min;柱温:320C.结果:该方法加样回收率牡荆素-4"-O-葡萄糖苷:99.59%(RSD=0.50%),牡荆素鼠李糖苷:99.57%(RSD=0.96%),牡荆素:98.70%(RSD=1.10%),芦丁:99.35%(RSD=1.16%),金丝桃苷:99.28%(RSD=0.88%).结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于山楂叶的质量控制.     

山楂叶HPLC指纹图谱研究

目的:建立山楂属植物叶的HPLC指纹图谱,对该属植物中所含的化学成分进行综合评价,并为该属植物叶鉴定提供依据。方法:对10个产地山楂叶进行分析,以绿原酸为内参照物,检测它们所含牡荆素,金丝桃苷,牡荆素鼠李糖苷,芦丁,鼠李糖芦丁,槲皮素,葡萄糖牡荆素的含量。结果:不同种山楂叶均显示了它们各自的指纹特征。结论:HPLC指纹谱可以用来鉴别山楂属的不同种植物叶,该属植物种间的化学成分差别较大,而且主要特征性成分的含量也存在明显差异。     

山楂叶指纹图谱研究

目的:研究不同产地山楂叶药材的HPLC指纹图谱并进行比较,同时建立绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷和槲皮素的HPLC分析方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长350 nm,柱温30℃。对13批山楂叶药材进行了指纹图谱及含量测定研究,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)软件进行分析。结果:绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷和槲皮素的线性范围分别为3.75～120,9.69～310,24.69～790,6.25～200,0.31～10 mg.L-1(r分别为0.999 6,0.999 8,0.999 9,0.999 9,0.999 9);平均加样回收率分别为99.2%(RSD 1.7%),100.3%(RSD 1.8%),99.0%(RSD 1.4%),99.8%(RSD 2.1%),100.5%(RSD 1.9%);13批药材的HPLC指纹图谱共标定了15个共有峰,并对其中5个成分进行了含量测定。结论:该分析方法准确可靠,重复性好,为更好地控制山楂叶内在质量提供科学依据。     

HPLC测定山楂叶中7种成分的含量

目的:建立同时测定山楂叶中绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素、金丝桃苷和槲皮素含量的高效液相色谱方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);甲醇-乙腈-四氢呋喃-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长370 nm,参比波长430 nm;柱温30℃。结果:绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素、金丝桃苷和槲皮素的线性范围分别为5.62～180、9.37～300、15.94～510、0.66～21、3.75～120、4.50～144、0.28～9.0μg/mL(r分别为0.9995、0.9999、0.9999、0.9998、0.9998、0.9998、0.9999);平均加样回收率分别为99.8%(RSD=1.2%)、99.0%(RSD=1.6%)、99.2%(RSD=1.4%)、100.2%(RSD=1.8%)、99.6%(RSD=1.5%)、99.4%(RSD=2.0%)、100.8%(RSD=1.5%)。结论:该分析方法准确可靠,重复性好,为更好地控制山楂叶内在质量提供科学依据。     

基于灰色关联-TOPSIS法评价不同产地山楂质量

目的 采用灰色关联-TOPSIS法对不同产地山楂质量进行评价。方法 建立高效液相色谱波长切换法同时测定山楂药材中绿原酸、表儿茶素、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁、槲皮素、牡荆素、牡荆素葡萄糖苷和牡荆素鼠李糖苷9种成分含量,并采用灰色关联-TOPSIS法进行分析,对收集的湖北、安徽、河北、山东、河南、山西、陕西7个产地山楂进行质量评价。结果 建立含量测定方法快速、灵敏、准确,通过灰色关联-TOPSIS分析表明,山东、河南、安徽产地的山楂质量较优。结论 该方法为山楂药材的质量控制和评价以及中药新药研究过程中山楂产地的选择提供依据。     

山楂叶提取物及其制剂对人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤中性粒细胞黏附的影响

目的 研究山楂叶提取物（牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷）及其制剂奥沙恩注射液对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）缺氧复氧损伤时中性粒细胞（PMN）黏附的影响及其分子机制。方法以HUVEC为实验对象,复制缺氧复氧损伤模型,用酶标仪检测山楂叶提取物牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及其制剂奥沙恩注射液对HUVEC缺氧60 min复氧30 min和复氧240 min时PMN黏附的影响;应用流式细胞学方法,观察牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及奥沙恩注射液对PMN表面黏附分子CD11/CD18表达的影响。结果 缺氧60 min后可见HUVEC皱缩,变形;复氧30 min,模型组PMN HUVEC之间有明显的细胞黏附现象,正常组细胞之间黏附较少,各用药组与模型组比较,PMN-HUVEC黏附较少。复氧240 min处理的细胞各组情况与复氧30 min相似。山楂叶提取物牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及其制剂奥沙恩注射液均可显著抑制复氧30 min和240 min时PMN-HUVEC之间的黏附,且呈现出一定的量效关系。牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷可显著抑制HUVEC缺氧复氧损伤导致的PMN表面CD11/CD18分子表达,且奥沙恩注射液和牡荆素葡萄糖苷均表现出良好的量效关系。结论 在静息状态下,PMN表面几乎不表达CD11/CD18分子,但缺氧复氧30 min和240 min处理的HUVEC上清液孵育中性粒细胞30 min,可增强PMN表面CD11/CD18分子表达的增加。且第1个时相即复氧后30 min时PMN HUVEC的黏附比第2个时相点更为明显。复氧时经牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及其制剂奥沙恩注射液处理的HUVEC上清液可抑制PMN表面CD11/CD18分子表达的增加,降低PMN HUVEC黏附,这可能是山楂叶提取物及其制剂奥沙恩注射液保护心脏免于缺血再灌注损伤的重要分子作用机制之一。     

山楂化学成分研究

目的：从山里红Crataegus pinnatifida var.major的成熟干燥果实寻找中药山楂中的专属性成分和降血脂的活性成分。方法：利用多种柱色 谱技术进行分离和纯化,根据UV,IR,EI－MS,FAB－MS,1HNMR,13CNMR,HMBC,HMQC和13CGASTE等波谱数据分析鉴定结构。结果：从山里红成熟果实中分离鉴定了6个化合物,分别为：5,7,4′－三羟基黄酮－8－C－α－L－吡喃鼠李糖基－（1→2）－β－D－吡喃葡萄糖苷（I）,即牡荆素鼠李糖苷（vitexin rhamnoside),金丝桃苷（hypeoside,Ⅱ),枸椽酸（citric acid,Ⅲ),牡荆素（vitexin,Ⅳ),槲皮素（quercetin,Ⅴ),熊果酸（ursolic acid,VI),结论：化合物I为中药山楂中的专属性成分,首次由山里红果实中分得,化合物Ⅱ为山楂中的降血脂主要黄酮成分。     

金丝草化学成分

目的:研究禾本科金发草属植物金丝草的抗乙型肝炎病毒(HBV)活性物质基础。方法:采用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱并结合重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定单体化合物的结构。结果:从金丝草干燥全草的60%乙醇提取物中分离得到6个单体化合物,分别鉴定为木犀草素-6-C-β-D-鸡纳糖苷(1)、牡荆素鼠李糖苷(2)、异牡荆素-4’-O-α-L-鼠李糖苷(3)、金丝桃苷(4)、槲皮素-3-甲醚(5)、D-甘露醇(6)。结论:所有化合物均为首次从金发草属植物中分离得到。     

HPLC测定脑得生固体分散体胶囊中山楂黄酮类成分的含量

目的:建立脑得生固体分散体胶囊中山楂黄酮类成分(牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷)的含量测定方法。方法:色谱柱Hyspersil ODS-2(5μm,250 mm×4.6 mm),柱温25℃,流动相乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.04%磷酸水(1∶1∶19.4∶78.6),流速0.9 mL·min~(-1),检测波长370 nm。结果:牡荆素鼠李糖苷在0.167 2~1.003 2μg(r=0.999 9)范围,牡荆素在0.124 8~0.748 8μg(r=0.999 9)范围,金丝桃苷在0.276 0~1.656 0μg(r=0.999 9)范围均呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.27%,99.12%,99.09%;RSD分别为1.57%,2.15%,2.71%。结论:所建立方法简便、准确、重复性好,可用于控制该制剂的质量。     

山楂中牡荆素鼠李糖苷含量测定

应用反相高效液相色谱法测定山楂中牡荆素鼠李糖苷含量,方法简便,分离重现性好,灵敏度高。     

单子山楂叶中多元酚类成分及其抗氧化活性研究

目的提取分离单子山楂Crataegus monogyna叶中多元酚类成分,并对其抗氧化活性进行比较。方法从干燥的单子山楂叶粗粉中提取分离其中的多元酚类成分,并比较它们体外对两种不同氧自由基(羟自由基.OH、过氧化氢H2O2)的清除活性。结果从单子山楂叶中分离得到10种多元酚类成分,分别为槲皮素(quercetin,Qu),金丝桃苷(hyperoside,HP),槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin3-O-β-D-glucoside,QG),芦丁(rutin,Rut),牡荆素(vitexin,Vit),6″-O-乙酰牡荆素(6″-O-acetyl-vitexin,AcV),牡荆素2″-O-鼠李糖苷(vitexin2″-O-rhamnoside,VRh),牡荆素4-O-乙酰-2″-O-鼠李糖苷(vitexin4-O-acetyl-2″-O-rhamnoside,VAR),表儿茶素[(-)-epicatechin,EP]和绿原酸(chlorogenic acid,ChA)。结果表明,所有样品对以上两种氧自由基的清除活性均呈明显的结构依赖性,然而在这些样品中Qu、HP、QG、Rut和EP对这两种氧自由基均有很强的清除活性。结论Qu、HP、QG、Rut和EP可能是单子山楂叶中最主要的抗氧化活性成分。     

HPLC同时测定山楂提取物中绿原酸和牡荆素鼠李糖苷的含量

目的:采用HPLC建立山楂提取物中绿原酸和牡荆素鼠李糖苷的含量测定方法。方法:SHISEIDO CAPCELLPAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)、四氢呋喃-乙酸-水(10∶2∶76,B),梯度洗脱,检测波长330 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温25℃。结果:绿原酸和牡荆素鼠李糖苷分别在1.34～164.8,1.18～148.7 mg.L-1线性关系良好;平均加样回收率分别为100.4%,98.83%,RSD 1.5%,1.3%。结论:该方法简单、准确、重复性好,可用于测定山楂提取物中绿原酸和牡荆素鼠李糖苷的含量,为山楂提取物及其制剂的质量控制有效的方法。     

山楂叶提取物分离纯化工艺的优化＊

目的 优化《中华人民共和国药典》2015年版山楂叶提取物工艺的分离纯化条件，提高山楂叶提取物制备的达标率。在现有的针对总黄酮研究的基础上，提高牡荆素鼠李糖苷的含量，符合山楂叶提取物用药要求。方法 以牡荆素鼠李糖苷含量为指标，考察了山楂叶提取参数、分离纯化过程中的树脂型号、洗脱体系等。结果 选用LX158树脂替代药典规定的D101树脂，采用3BV水洗除杂后，3BV 10%乙醇洗脱除杂，洗脱剂为6BV 30％乙醇。结论 优化后的工艺总黄酮含量≥80%，牡荆素鼠李糖苷含量≥8.8%，满足药典相关要求且较比药典工艺收率高7.07%，为中国药典山楂叶提取物制备工艺的补充和修订提供科学依据。     

同一色谱条件下测定黑龙江产山里红叶三种黄酮成分的实验研究

目的：建立山里红叶提取物中牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁含量测定的方法。方法：采用高效液相色谱法,用Hypersil ODS2 C18色谱柱（5μm,5mm×200mm）,以甲醇-0．1％磷酸溶液（40：60）为流动相,流速1．0mL·min^-1,检测波长359nm,柱温35℃。结果：该法线性关系良好,平均加样回收率为牡荆素鼠李糖苷101．2％（RSD=2．3％）,金丝桃苷96．9％（RSD=1．8％）,芦丁98．9％（RSD=2．6％）（n=6）。结论：该法操作简单,分离效果好,结果准确,专属性强,可作为有效的含量测定方法。