β-细辛醚对小鼠急性毒性作用的初步研究

目的探索β-细辛醚对小鼠的急性毒性作用,为其临床应用提供依据。方法将60只小鼠随机分为六组各10只。均采用灌胃给药：对照组给予大豆油,β-细辛醚800、700、600、500、400mg／kg组分别给予800、700、600、500、400mg／kg的β-细辛醚;灌胃容积均为40mL／kg。观察小鼠灌胃后和毒性反应及死亡情况,Bliss法计算半数致死量（LD50）。对各组死亡小鼠及时解剖、给药后14d处死存活小鼠解剖,取心、脑、肝、肾行病理检查。结果给药后15min各药物组相继出现眼睑闭合、运动失调、震颤、抽搐等症状;随药物剂量增加,症状加重;给药后48h,400mg／kg组无死亡者;500mg／kg组死亡1例,600mg／kg组死亡7例,700mg／kg组死亡9例,800mg／kg组全部死亡。β-细辛醚LD50为577．0mg／kg,95％CI上限是619．9mg／kg,下限是529．4mg／kg。400mg／kg组1只病理检查示肝细胞水肿、门管区炎细胞浸润;500mg／kg组1只左肾表面呈轻度凹凸不平,病理检查未见异常。600mg／kg、700mg／kg及800mg／kg组死亡小鼠病理检查未发现明显异常。结论小鼠β-细辛醚灌胃后出现急性毒性反应可能涉及中枢神经系统、神经肌肉及自主神经;其毒性靶器官尚待进一步研究证实。     

β-细辛醚对ox-LDL损伤ECV304细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的观察石菖蒲有效成分β-细辛醚对氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）损伤的人血管脐静脉内皮细胞株（ECV304）凋亡和线粒体膜电位（MMP）的影响。方法将ECV304细胞分为正常对照组、模型组及β-细辛醚高、中、低剂量组，采用流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡百分率和MMP平均荧光强度。结果ox-LDL损伤模型组细胞凋亡率增高，MMP明显降低，与正常对照纽比较有统计学意义（P〈0．001）；8一细辛醚能不同程度降低细胞凋亡率、稳定MMP，与模型纽比较有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论β-细辛醚能有效抑制ox-LDL对ECV304细胞线粒体的损伤，稳定MMP，抑制细胞凋亡。     

β-细辛醚对ox-LDL诱导的内皮细胞黏附分子表达的干预作用

目的 通过研究石菖蒲有效成份β-细辛醚对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的内皮细胞表面黏附分子表达的干预作用，探讨β-细辛醚抗动脉粥样硬化（AS）的作用及其机制。方法 采用流式细胞术和特异性标记单克隆抗体，测定内皮细胞表面细胞间黏附分子-1（ICAM-1，CD54）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1，CD106）、E-选择素（CD62E）和P-选择素（CD62P）的表达率。结果 ox-LDL诱导模型组VCAM-1、ICAM-1、CD62P、CD62E表达明显增高，与正常组比较有显著差异（P〈0.001）,β-细辛醚及维生素C能降低内皮细胞表面黏附分子的表达，与模型组比较有统计意义（P 〈0.05-0.001）。结论 ox-LDL促进内皮细胞表面黏附分子表达，β-细辛醚对ox-LDL有明显的干预作用，能抑制ox-LDL诱导的内皮细胞表面黏附分子表达，有效地保护人内皮细胞免受ox-LDL所致毒性损伤。     

β-细辛醚对皮质酮诱导原代培养星形胶质细胞凋亡的干预作用

目的探讨石菖蒲有效成分β-细辛醚对皮质酮(CORT)诱导星形胶质细胞(AS)凋亡的干预作用。方法原代培养AS,经不同浓度β-细辛醚预处理后,加入CORT诱导AS损伤模型,采用MTT法检测AS的细胞活力,利用流式细胞术Annexin-V/PI法检测AS凋亡率,用实时定量RT-PCR技术检测Bax和Bcl-2表达水平。结果 CORT处理后,CORT组较空白对照组细胞活力低,凋亡率显著增加,Bax表达上调,而Bcl-2表达下调(P0.05)。与CORT组比较,β-细辛醚组细胞活力高,凋亡率低,Bax的表达下调,Bcl-2表达上调(P0.05)。结论β-细辛醚对CORT诱导的CORT凋亡具有抑制作用,下调Bax表达和上调Bcl-2表达可能是其作用的机制之一。     

β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马和血清神经元特异性烯醇化酶变化的干预作用

目的探讨抑郁模型大鼠海马和血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)变化及石菖蒲有效成分β-细辛醚的干预作用。方法采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)结合孤笼饲养建立稳定、可行的大鼠抑郁症模型;运用旷场实验进行行为学检测;采用免疫组织化学检测对大鼠海马NSE表达量,应用ELISA方法测定血清NSE水平变化。结果与空白对照组大鼠比较,给予28 d的CUMS大鼠的自主活动得分减少,海马区神经元NSE表达量减少(P0.05),但血清中NSE水平无显著差异;给予阳性药氟西汀(10 mg·kg~(~(-1))·d~(-1))及β-细辛醚(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))均能显著提高CUMS大鼠的自主活动得分,海马CA3区神经元NSE表达量增多(P0.05),但对血清中NSE水平无影响。结论β-细辛醚具有明显的抗抑郁作用,可能是通过提高神经元活性,减少神经元损伤,从而实现对CUMS大鼠神经的保护作用。     

莪术油对小鼠血液SOD、GSH-Px和MDA的影响

目的探讨莪术油对小鼠血液超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)和丙二醛(MDA)含量的影响。方法通过给小鼠口服莪术油后与对照组比较观察小鼠血液中SOD、GSH—Px和MDA的变化情况。结果莪术油可明显提高小鼠血液SOD、GSH—Px活性，同时降低MDA含量。结论莪术油是一种较强的抗氧化药物。     

刺五加提取液对小鼠学习记忆障碍和淀粉样前体蛋白酶解通路影响及作用机制

目的研究刺五加提取液对衰老模型小鼠学习记忆障碍和淀粉样前体蛋白(APP)酶解通路的影响及作用机制。方法 70只2月龄雄性昆明种小鼠随机分为正常对照、衰老模型、衰老+刺五加低剂量、衰老+刺五加中剂量、衰老+刺五加高剂量、刺五加高剂量、衰老+维生素E组,共7组。连续55 d颈后皮下注射D-半乳糖(200 mg/kg)建立衰老模型,运用Morris水迷宫及行为学测量方法,观察小鼠学习记忆能力。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脑组织中α、β、γ-分泌酶、β淀粉样蛋白(Aβ)_(1～42)及可溶性APP(sAPP)α含量;Western印迹法检测脑组织中去整合素-金属蛋白酶(ADAM)10、β-分泌酶(BACE)1、衰老蛋白(PS)1、糖原合成酶激酶(GSK)-3β、磷酸化(Phospho)-GSK-3β(Ser9)表达水平。结果行为学显示,随着刺五加提取液浓度的提高,小鼠的学习记忆能力得到一定的巩固和强化,衰老小鼠的记忆障碍得到了一定改善。生化学显示,与衰老组比较,刺五加提取液可以增强α-分泌酶活性,抑制β、γ-分泌酶的活性,增加组织内的sAPPα含量及有效抑制Aβ_(1～42)产生。Western印迹法检测显示,与正常对照组比较,衰老模型组GSK-3β、BACE1蛋白表达水平上调;ADAM10、Phospho-GSK-3β(Ser9)蛋白表达水平下降;与衰老模型组比较,刺五加组ADAM10、Phospho-GSK-3β(Ser9)蛋白表达水平明显升高,GSK-3β、BACE1、PS1蛋白表达水平明显降低(均P0.05)。结论刺五加通过增加α-分泌酶活性,抑制β、γ-分泌酶活性,增加sAPPα生成,减少Aβ_(1～42)产生,降低BACE1蛋白表达水平,可能对APP酶解通路起到一定作用,改善小鼠学习记忆障碍,对阿尔茨海默病的发病及进展有一定预防保护作用。     

电针智三针对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及β-淀粉样蛋白表达的影响

目的探讨电针智三针对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和血浆β-淀粉样蛋白(Aβ)的影响。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、电针组、尼莫地平组,采用改良Pulsinelli四血管闭塞法(4-VO)建立VD大鼠模型,两个治疗组分别施行电针智三针和尼莫地平治疗,连续20 d。Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,放射免疫法测定血浆Aβ含量,制作海马组织病理切片并进行HE染色,观察并比较各组大鼠学习能力、血浆Aβ含量、海马和大脑皮质神经元损伤的变化。结果与VD模型组比较,电针智三针治疗后VD大鼠学习记忆能力显著提高(P<0.05,P<0.01),血浆Aβ含量降低(P<0.01),脑组织神经元的损伤和变性减轻且数量增加。结论电针智三针可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与降低血浆Aβ含量、调节脑血流量,改善局部微循环,继而增加海马CA1区和大脑皮质神经元数量有关。     

核桃叶水提取液对小鼠空间学习记忆能力的影响

将70只小鼠随机分为空白对照组、模型组及核桃叶水提取液大、中、小剂量治疗组各14只.除空白对照组外,余组小鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,治疗组同时以12、6、3 g/(kg·d)核桃叶水提取液灌胃30 d,利用Morris水迷宫观察各组小鼠定位航行能力和空间探索能力的变化.结果与模型组比较,治疗组小鼠搜索站台的潜伏期明显缩短,穿越站台次数明显增加,原站台所在象限停留时间明显延长;且呈剂量依赖性.认为核桃叶水提取液能改善衰老模型小鼠的空间学习记忆能力,与其抗氧化作用有关.     

硒碘缺乏对大鼠空间学习记忆能力的影响

目的探讨硒、碘缺乏对连续繁殖的三代生长发育期的SD大鼠空间学习记忆能力的影响。方法实验分为对照组、低硒组、低碘组、低硒低碘组,通过测定大鼠在Morris水迷宫中的各种参数来反映其空间学习记忆能力。结果仔一代和仔二代大鼠在定位航行实验和空间探索实验各参数差异均无统计学意义,仔三代大鼠在定位航行实验中,低硒低碘组雌鼠9个时段的平均潜伏期比对照组明显延长。在空间探索实验中,雌鼠在各象限停留时间各组之间差异无统计学意义,但对照组在目标象限停留时间较其他3个组长,在远离目标象限停留时间短。低硒低碘组雌鼠穿过原平台所在位置的次数较对照组明显减少。结论硒、碘缺乏对仔一代和仔二代生长发育期大鼠的空间学习记忆能力没有明显影响;单纯的膳食性低硒、低碘对仔三代大鼠空间学习记忆能力没有明显影响,但硒、碘水平同时降低却可以明显降低空间学习记忆能力,而且硒、碘水平同时降低对雌性大鼠学习记忆的影响更为显著。     

刺五加对痴呆模型小鼠记忆障碍及MDA含量、SOD和乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的 观察刺五加提取液对老年性痴呆(AD)模型小鼠学习记忆障碍及脑组织生化学改变的保护作用.方法 50只健康昆明种小鼠雌雄各半,随机分为5组,对照组、AD模型组、刺五加低剂量组、刺五加高剂量组、脑复康组.50 d隔日腹腔注射三氯化铝100 mg/kg小鼠,建立拟AD模型,采用跳台实验和水迷宫测试方法和生化学检测方法,观察刺五加提取液对AD模型小鼠学习记忆障碍的影响以及脑组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、乙酰胆碱酯酶(TChE)活性改变的影响.结果 模型组跳台实验潜伏期缩短、错误反应率增加(P＜0.05);水迷宫实验中小鼠全程游泳时间延长、无误率减少,脑组织MDA含量增高、SOD活性降低、TChE活性增加(P＜0.05).同时给予低、高剂量刺五加提取液不同程度地缓解学习记忆能力障碍及脑组织生化学改变(P＜0.05,P＜0.01).结论 刺五加提取液通过提高小鼠脑组织中SOD活性和抑制脑中TChE活性,明显改善AD模型小鼠的学习记忆障碍及脑组织生化学改变,对AD有一定的改善和保护作用.     

音乐疗法对阿尔茨海默病小鼠空间学习记忆能力及神经免疫炎性因子的影响

目的通过Morris水迷宫测试阿尔茨海默病(AD)小鼠空间学习记忆能力,检测AD小鼠脑海马中神经免疫炎性因子的蛋白阳性表达强度及脑组织中神经免疫炎性因子的mRNA水平,探讨音乐疗法对AD小鼠的免疫治疗作用机制。方法选取野生C57BL/6和转基因APP/V717雌性小鼠作为研究对象,实验分为对照组(C57BL/6野生雌性小鼠,n=10)、AD模型组(APP/V717转基因雌性小鼠,n=10)和音乐治疗组(APP/V717转基因雌性小鼠,n=10)。三组均给予正常饮食,音乐治疗组每天早、中、晚各一次给予音量40～65 dB舒缓、轻柔性的音乐30 min,共治疗12 w。采用Morris水迷宫检测各组小鼠空间学习记忆能力;苏木精-伊红(HE)染色在普通光学显微镜下观察各组小鼠脑海马神经细胞损伤程度;免疫组织化学染色检测各组小鼠脑海马中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度;实时荧光定量PCR法检测各组小鼠脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、5-羟色胺(HT)和去甲肾上腺素(NE)的mRNA水平。结果 (1)Morris水迷宫检测结果:与模型组比较,音乐治疗组空间学习记忆能力明显提高(P0.05)。(2)HE染色可见音乐治疗组小鼠脑海马神经细胞固缩坏死较模型组明显减轻。(3)免疫组织化学染色可见音乐治疗组小鼠脑海马中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度均较模型组明显降低(P0.05)。(4)实时荧光定量PCR检测可见音乐治疗组小鼠脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平均较模型组明显降低(P0.05),5-HT和NE mRNA水平均较模型组明显升高(P0.05)。结论音乐治疗能够提高AD小鼠的空间学习记忆能力,同时通过下调AD小鼠脑海马及脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度和mRNA水平,上调神经免疫炎性因子5-HT和NE mRNA水平,在提高机体神经免疫治疗方面作用显著。     

健脑口服液对血管性痴呆大鼠学习记忆及脑组织SOD、MDA和AchE活性的影响

目的观察健脑口服液对双侧颈总动脉结扎致痴呆大鼠学习记忆能力及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乙酰胆碱酯酶(AchE)含量的影响。方法大鼠双侧颈总动脉反复夹闭再灌注同时腹腔注射硝普钠降压法建立血管痴呆(VD)大鼠模型,考察痴呆大鼠在水迷宫中学习、记忆成绩,测定脑组织SOD、MDA和AchE活性。结果与假手术组比较,痴呆模型组大鼠记忆成绩明显下降(P0.01),脑组织SOD含量下降(P0.01),MDA、AchE含量增加(P0.05);与痴呆模型组大鼠比较,健脑口服液中、高剂量组学习记忆成绩明显上升,脑组织SOD含量升高,MDA、AchE含量下降(P0.01)。结论健脑口服液升高VD大鼠脑组织SOD和AchE含量,降低MDA活性,增强VD大鼠学习记忆能力。     

穴位埋线对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及血清白介素-1β、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的观察穴位埋线对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和血清白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量的影响。方法将大鼠随机分成假手术组、VD模型组、穴位埋线组、尼莫地平组,采用改良Pulsinelli四血管闭塞法(4-VO)建立VD大鼠模型,两个治疗组分别施行穴位埋线和尼莫地平治疗,连续15 d。Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,酶联免疫吸附法测定血清IL-1β、TNF-α含量,制作海马组织病理切片并进行HE染色,观察并比较各组大鼠学习能力、血清IL-1β、TNF-α含量及海马神经元损伤的变化。结果模型组表现出明显的学习记忆障碍,定位航行试验、空间探索试验与假手术组相比有显著差异(P<0.01);与VD模型组比较,穴位埋线治疗后VD大鼠学习记忆能力显著提高(P<0.05,P<0.01),血清IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05)。结论穴位埋线可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与埋线后降低血清IL-1β、TNF-α含量,缓解脑缺血后炎症反应,减轻神经元的损伤有关。     

β-淀粉样蛋白对大鼠海马S100β表达及学习记忆的影响

目的　探讨 β-淀粉样蛋白 (Aβ)沉积与大鼠海马 S1 0 0 β表达的相关性及其在大鼠学习记忆中的作用。方法　采用不同浓度的 Aβ2 5-35选择大鼠海马 CA1区进行定位注射 ,通过行为学测试、光镜形态学观察 ,免疫组化染色的方法 ,观测大鼠学习记忆、海马 CA1区神经元和 S1 0 0β阳性细胞形态、数目的变化。结果　术后 7d,随着 Aβ2 5- 35脑内注射浓度的增加 ,实验组较对照组大鼠的学习记忆能力明显下降 (P<0 .0 5) ,海马CA1区神经元数目明显减少 (P<0 .0 5) ,而 S1 0 0β阳性细胞数则显著增多 (P<0 .0 5)。结论　 Aβ2 5- 35可以明显上调 S1 0 0β的表达 ,两者之间存在剂量效应关系 ;Aβ2 5- 35具有神经毒性作用 ,可以引起海马神经元丢失 ,造成大鼠学习记忆下降 ;S1 0 0 β的高水平表达可能与海马 CA1区神经元丢失以及大鼠的学习记忆下降有密切关系。     

抑肝散对血管性痴呆大鼠学习记忆及脑组织SOD、MDA含量的影响

目的研究抑肝散对血管性痴呆模型大鼠的治疗作用及其作用机制。方法双侧颈总动脉结扎再灌合并硝普钠降压法造大鼠血管性痴呆模型，采用大鼠跳台法、穿梭箱法和Morrls水迷宫法检测各组大鼠学习记忆能力，并测定大鼠脑组织巾SOD活性、MDA的含量。结果与模型组相比，抑肝散可明显提高模型大鼠学习记忆能力，降低MDA含量，提高SOD的活性。结论抑肝散可明显改善模型大鼠学习记忆能力，其作用机制之一可能与其抗氧自由基的作用有关。     

六味地黄方对慢性铝暴露痴呆大鼠记忆功能保护作用的研究

目的 研究六味地黄方对慢性铝暴露痴呆大鼠记忆功能的保护作用及其机制.方法 采用胃肠道慢性染铝的方法制备记忆功能障碍大鼠模型,用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,并通过对血浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的测定,研究慢性铝暴露导致大鼠记忆功能损害及六味地黄方的干预机制.结果 与正常对照组相比,模型组大鼠学习记忆能力降低(P<0.01,P<0.05),血浆MDA水平增加而SOD活性减低(P<0.01,P<0.05).与慢性铝暴露模型组相比,六味地黄方能提高大鼠血浆中SOD活性,降低MDA含量,改善了慢性铝暴露大鼠学习记忆功能(P<0.01,P<0.05).结论 六味地黄方通过增加体内抗氧化酶的活性,降低慢性铝暴露导致的神经脂质过氧化反应,从而干预慢性铝暴露对大鼠记忆功能的损伤.     

Morris水迷宫训练对老年痴呆大鼠模型学习记忆能力及海马组织肿瘤坏死因子-α、超氧化物歧化酶、丙二醛水平的影响

目的观察Morris水迷宫训练对老年痴呆(AD)大鼠学习记忆能力及海马组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法随机将32只SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、Morris水迷宫短期训练组和Morris水迷宫长期训练组;以穹隆-海马伞切断建立痴呆大鼠模型;运用Morris水迷宫进行训练;采用跳台实验以及水迷宫实验测试大鼠的学习和记忆能力;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠海马组织TNF-α的水平,比色法检测大鼠海马组织SOD活性和MDA含量。结果 Morris水迷宫训练后AD大鼠学习记忆能力显著提高(P<0.01);大鼠海马区TNF-α、MDA含量明显降低(P<0.05)、SOD含量明显升高(P<0.05)。结论 Morris水迷宫训练能明显改善大鼠的学习记忆能力,其机制可能与提高海马区SOD含量、降低TNF-α和MDA水平有关,而且水迷宫训练时间越长,恢复越明显。     

黄芩茎叶总黄酮对AD模型大鼠学习、记忆能力及神经元损伤的影响

目的探讨黄芩茎叶总黄酮（SSTF）对AD的防治作用。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为三组各10只,观察组予SSTF100mg／（kg&#183;d）灌胃1次／d,第8天双侧海马注射凝胶态淀粉样蛋白（Aβ）25-35 5μl（10μg）,继续SSTF灌胃;对照组及模型组予蒸馏水灌胃1次／d,第8天双侧海马分别注射生理盐水及Aβ23-35,5μl（10μg）,继续灌胃。三组均于第15天采用Morris水迷宫试验观察大鼠学习记忆能力（逃避潜伏期时间）,连续观察5d后处死,硫堇Nissl染色观察海马神经元变化。结果模型组及观察组大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长,观察组明显短于模型组;模型组海马CAI区神经细胞带脱失、不完整,脱失处胶质细胞增多,观察组细胞损伤较轻。结论SSTF可明显改善Aβ25-35所致AD大鼠学习、记忆能力,可能机制为减少Aβ所产生的氧自由基,减轻胶质细胞增殖所致损害。