LC/MS/MS法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的建立一种快速、灵敏地测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪(lamotrigine,LTG)的LC/MS/MS方法。方法采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Welch Materials XB-C18柱,流动相甲醇-水(95∶5,V/V,含5 mmol/L甲酸铵),流速0.3ml/min,柱温40℃,以碱化的醋酸乙酯:二氯甲烷(4∶1)为提取剂。提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对LTG(m/z 256.0→145.0)和内标阿普唑仑(m/z 309.3→281.1)进行测定。结果 LTG血药浓度在0.05~25μg/ml范围内线性关系良好(r=0.998 9),分析方法的最低检测限为5 ng/ml,其高、中、低(12.5、1.25、0.125μg/ml)3个浓度的平均提取回收率分别为82.97%、80.68%和83.33%,日内(n=5)、日间(n=15)RSD均<15%。结论本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于癫痫患儿LTG的临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用外标法,以甲醇沉淀法处理血样后进样测定,色谱柱为Intersil ODS-3,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为27℃。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.8～40μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),定量下限为0.5μg·mL-1;平均回收率为(99.35±3.93)%,日内、日间RSD均<5%。20例癫痫患儿拉莫三嗪血药浓度的范围为1.3～15.4μg·mL-1,中位数为4.7μg·mL-1。患儿血浆中拉莫三嗪的血药浓度随年龄的减小,波动范围明显增大。结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于拉莫三嗪的血药浓度监测及其药动学研究。年龄越小的患儿,越需要对拉莫三嗪进行血药浓度监测。     

UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度

目的采用高效液相色谱-质谱联用技术同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度。方法采用UPLC-MS/MS法,以西替利嗪为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为ACQUITY BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为甲醇-含0.1%甲酸的水溶液(70∶30,v/v),流速为0.2 ml/min,进样体积为10μl。质谱采用ESI离子源,正离子MRM模式扫描分析,拉莫三嗪、卡马西平和内标西替利嗪的离子对分别为m/z 256.0→211.2、m/z 237.0→194.1、m/z 389.2→201.2。结果拉莫三嗪和卡马西平线性范围分别为5～1 000 ng/ml (r=0.999 5)和5～1 000 ng/ml (r=0.997 5),定量下限均为5 ng/ml。批内、批间精密度RSD<15%;平均提取回收率分别为81.3%～84.9%和82.7%～87.3%。结论本方法样品前处理简便、快速,检测准确、灵敏度高,适用于临床治疗药物检测和药代动力学研究。     

拉莫三嗪治疗各种类型癫痫患儿的疗效分析

目的观察拉莫三嗪对各种类型癫痫患儿的疗效分析。方法对139例癫痫患儿进行拉莫三嗪治疗,观察其疗效以及安全性。结果拉莫三嗪对各种癫痫均有效,总有效率86.1%,控制率52.3%,不良反应发生率低。结论拉莫三嗪作为一种新型的抗癫痫药,对各类癫痫均取得了很好的效果。     

RP-HPLC法测定人血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立测定人血浆中抗癫痫药拉莫三嗪的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,以萘普生为内标,血浆样品以直接检蛋白测沉波淀长法为处28理0n。m色。谱结柱果为:拉X莫Te三rra嗪?R血P药18浓,流度动在相0.为5～甲3醇2.0-0m.0g1.mL-o1l.范L围-1磷内酸线二性关氢系钾良缓好冲(液r(=pH0.969.09)(9)6,6最:3低4)检,流测速浓为度为1.00m.2Lm.gm.iLn--11,,提取回收率为68.20%～82.35%,方法回收率为99.03%～103.21%,日内、日间RSD均<4.00%。结论:本方法操作简便,灵敏度高,重复性好,能快速准确测定人血浆拉莫三嗪浓度。     

拉莫三嗪治疗癫痫的临床研究

目的对癫痫患者应用拉莫三嗪进行治疗的临床效果展开观察与研究。方法随机将我院收治的118例癫痫患者分为两组,接受丙戊酸钠治疗的为对照组,应用拉莫三嗪进行治疗的为观察组。统计不同药物所获得的治疗效果,并展开对比与评价。结果在治疗后癫痫的发作次数及治疗总有效率方面,观察组与对照组的差异不大,P> 0.05。此外,观察组治疗后的生活质量为(82.5±7.6)分,对照组为(64.3±5.4)分,P <0.05;观察组不良反应发生率为6.8%(4/59),对照组为20.3%(12/59),P <0.05。结论通过应用拉莫三嗪治疗癫痫患者,可对癫痫发作进行有效控制,且不良反应相比于丙戊酸钠更少,可充分促进患者生活质量的提高,值得重视。     

应用人工神经网络法预测癫痫患者血浆中拉莫三嗪浓度

目的：探讨应用人工神经网络（artificial neural network，ANN）预测癫痫患者血浆中拉莫三嗪（lamotrigine，LTG）浓度的可行性和效果。方法：回顾性收集我院2015年11月—2018年5月300例长期服用LTG治疗癫痫患者信息，将患者性别，年龄，BMI，血红蛋白计数（HGB），红细胞计数（RBC），丙氨酸氨基转移酶（ALT），天冬氨酸氨基转移酶（AST），血尿素氮（BUN），肌酐清除率（CR），服药剂量，合并用药数据作为输入层，LTG血药浓度数据作为输出层，采用METLAB R2016a构建反向传播人工神经网络（back-propagation artificial neural network，BPANN）法预测LTG血药浓度，计算影响血药浓度各因素的平均影响值（mean impact value，MIV），并对2018年6月10例患者进行体内血药浓度预测。结果：本研究建立了预测LTG血药浓度的BPANN模型，性能验证结果MSE为0.004 28，梯度幅度为0.000 506 9，验证检查数为0，相关系数为0.957。对MIV进行分析，服药剂量、合并用药和肌酐清除率是影响LTG血药浓度的重要因素，将BPANN模型应用到患者血药浓度预测中，预测值与测量值相关系数为0.972，预测偏差在-13.26%~25.41%之间，预测准确度为90%。结论：本研究建立的LTG血药浓度预测模型能较为准确的预测血药浓度，为癫痫患者个体化给药提供了一种有效思路。     

LC-MS/MS法测定人血浆中拉莫三嗪浓度的不确定度评定

摘 要 目的：评定液质联用法(LC MS/MS)测定人血浆中拉莫三嗪(LTG)浓度的不确定度。方法: 分析LC-MS/MS法测定人血浆中LTG浓度过程中的不确定度来源,计算其大小并进行合成。结果: 人血浆中LTG低浓度(0.050 4 μg· mL^-1)和高浓度(1.27 μg· mL^-1)的扩展不确定度分别为0.005 18 μg· mL^-1和0.066 4 μg· mL^-1 (P = 95%,k = 2)。结论:LC-MS/MS法测定人血浆中LTG浓度的不确定度在低浓度时主要由蛋白沉淀回收率、基质效应和生物样品配制引入,在高浓度时主要由基质效应、生物样品配制和重复性引入。     

新疆癫痫患儿拉莫三嗪稳态血药浓度影响因素的研究

目的 探讨年龄、性别和合并用药对新疆癫痫患儿拉莫三嗪(LTG)稳态血药浓度的影响,并初步建立LTG稳态血药浓度参考范围,为其临床个体化用药提供理论依据.方法 收集并测定266例规律服用LTG并达到稳态血药浓度的0～18岁新疆癫痫患儿血清药物浓度,并记录患儿年龄、性别、给药剂量及合并用药等基本信息,分析年龄、性别及合并用...     

HPLC法测定癫痫患者血清中拉莫三嗪质量浓度

目的建立测定癫痫患者血清中拉莫三嗪质量浓度的HPLC法。方法色谱柱为Agilent TC-C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-10mmol·L~(-1)磷酸二氢钾(35∶65);流速为1.0mL·min~(-1);紫外检测波长为305nm;进样量为20μL;柱温为室温。内标物为非那西丁,血样采用甲醇沉淀蛋白法进行处理。结果拉莫三嗪血药质量浓度在0.5~40mg·L~(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),最低检测质量浓度为50μg·L~(-1);方法回收率为94.84%~102.17%;绝对回收率为85.87%~92.86%;日内、日间精密度RSD值均<8%;血清样品在-20℃冻存3个月稳定,储备液冷藏保存12个月稳定。结论该法简便、灵敏、准确、稳定,适用于拉莫三嗪治疗药物质量浓度监测及药动学研究。     

低剂量甲氨蝶呤给药类风湿性关节炎病人血浆浓度的测定

目的 建立一种快速、灵敏地测定类风湿性关节炎病人血浆中低浓度甲氨蝶呤(MTX)的方法.方法 采用高效液相色谱(HLPC)串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Ultimate XB-C18柱,流动相为乙腈(1%甲酸):甲酸铵水溶液(20 mmol/L)＝30 ︰ 70,流速为0.2 ml/min,柱温为25℃.样品提取采用液-液萃取的方法,即先用三氟乙酸沉淀蛋白,再用乙酸乙酯提取.提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测(MRM)对甲氨蝶呤(m/z 455.2→308.2)和内标多索茶碱(m/z 267.1→181.1)进行测定.结果 甲氨蝶呤血药浓度在1～100 ng/ml范围内线性关系良好(r =0.9998),分析方法的最低检测限为0.5 ng/ml,其高、中、低(50、10、2 ng/ml)3 个浓度的平均提取回收率分别为41.2%、49.2%和43.4%, 日内(n = 5)、日间(n = 3)相对标准偏差值(RSD)均<15 %.结论 本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于低剂量给药的类风湿性关节炎病人的临床血药浓度监测和药动学研究.     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中氨溴索浓度

目的：建立测定人血浆中氨溴索浓度的高效液相色谱串联质谱法,以用于氨溴索人体药动学研究。方法：以西替利嗪为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经HPLC—MS／MS分离-分析。采用Waters ODS C18柱（50mm×2．1mm,3．5μm）,以甲醇：5mmol·L^-1乙酸铵（72．5：27．5）为流动相,流速：0．20ml·min^-1,采用电喷雾离子源（ESI）,以多离子反应监测方式（MRM）进行正离子监测,氨溴索和内标西替利嗪的定量分析离子对分别为m／z 379．0→263．9和m／z 389．1→201．3。结果：氨溴索血浆浓度测定方法线性范围为1．99～398ng·ml^-1,r=0．9990。定量下限为1．99ng·ml^-1,方法回收率在85％～115％之间。日内和日间RSD〈15％。结论：本法灵敏、准确、可靠,适用于盐酸氨溴索人体药动学研究。     

UPLC-MS/MS法检测人血浆中莫西沙星浓度

目的 建立快速检测人血浆中莫西沙星浓度的UPLC-MS/MS方法。方法 用乙腈沉淀血浆蛋白的方法处理,运用Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪,色谱柱为ACQUITY UPLC? BEH C₁₈柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,柱温40 ℃,内标为左氧氟沙星,质谱条件：电喷雾离子化源(ESI),正离子检测模式;加入200 μL冰乙腈沉淀蛋白,13 000 r·min^-1离心10 min,取200 μL上清于进样瓶内,取2 μL上样。结果 莫西沙星的保留时间为1.58 min,线性范围为0.1~10 μg·mL^-1(r=0.999 6),最低定量限为0.01 μg·mL^-1,高、中、低浓度的相对回收率为(96.66±3.8)%,(102.0±1.76)%和(107.2±7.19)%。日内、日间RSD均<10%,血浆样品体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论 该方法准确可靠,操作简便,重复性好,适于检测人血浆中莫西沙星的血药浓度及其药动学研究。     

液相色谱串联质谱法测定人体血清中的类固醇激素

目的：建立一种能同时测定血清中6种类固醇激素［包括孕酮（P）、17-羟基孕酮（17-OHP）、皮质醇（COL）、去氢表雄酮（DHEA）、双氢睾酮（DHT）、硫酸去氢表雄酮（DHEAS）］的快速、灵敏的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）方法。方法：血清样本经甲基叔丁基醚液液萃取,高速离心后上清液氮气吹干,加入复溶液后上机检测。采用安捷伦C18（100 mm × 2.1 mm,1.8 μm）色谱柱进行分离,水相A为纯水,有机相B为纯甲醇,质谱采用电喷雾电离（ESI）模式进行离子化,多反应监测模式（MRM）扫描,同位素稀释法进行定量分析。结果：血清中6个类固醇激素检测限（LOD,以信噪比（S/N）≥3为标准）为0.03～1.25 ng·mL-1;定量限（LOQ,以信噪比（S/N）≥10为标准）为0.05～2.50 ng·mL-1;在0.05～4000 ng·mL-1范围内线性关系良好,相关系数（r）≥0.995 0;低浓度样本日内精密度为2.4%～6.2%;中浓度样本日内精密度为2.3%～5.7%;高浓度样本日内精密度为1.3%～5.4%。低浓度样本日间精密度为0.4%～2.6%;中浓度样本日间精密度为0.3%～3.9%;高浓度样本日间精密度为0.2%～4.7%。加标回收率为86%～106%。结论：建立一种能同时测定血清中6个类固醇激素的HPLC-MS/MS方法。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强,可在6.5 min之内完成分离和检测,适用于人体血清中多种类固醇激素含量的定量分析。     

液相色谱-串联质谱法测定血清中硫酸头孢噻利浓度

目的：建立一种灵敏、可靠的检测血清中硫酸头孢噻利含量的高效液相色谱-串联质谱法。方法：血清样品经酸化甲醇蛋白沉淀后,采用ExtendC18柱（250mm×4．6mm,5μm）0．02mol·L^-1乙酸铵-甲醇（65：35）为流动相,头孢唑啉为内标,应用高效液相色谱／大气压化学电离串联质谱法在多反应监测模式（MRM）下测定,硫酸头孢噻利和内标的定量离子对分别为m/z 523→396和m／z455→323。结果：硫酸头孢噻利的回收率在94．0％-101．9％之间,硫酸头孢噻利在2．0～1000．0μg·L^-1范围内呈良好线性,日内RSD〈9．2％,日间RSD〈10．6％,定量检出限为2．0μg·L^-1。结论：本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于硫酸头孢噻利的临床药动学研究及临床特殊人群的血药浓度测定。     

LC／MS／MS方法研究克林霉素对人髓核组织的渗透性

目的建立测定人血清和髓核中克林霉素的液相色谱-串联质谱联用法,并试用于临床受试者静脉滴注克林霉素磷酸酯后克林霉素在髓核的分布情况。方法血清和髓核样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-1%甲酸(70∶30,v/v)为流动相,林可霉素为内标,采用Hypersil BDS C18柱分离,通过液相色谱串联质谱仪,以选择反应监测(SRM)方式进行检测。结果血清中克林霉素线性范围为500~20000 ng/ml,定量下限为500 ng/ml;髓核中克林霉素线性范围为20~400 ng/g,定量下限为20ng/g;9例临床受试者血清中克林霉素浓度为2674±1114 ng/ml,髓核中克林霉素浓度为51.2±39.5 ng/g。结论静脉滴注克林霉素磷酸酯后能部分渗透到药理作用靶点髓核。     

A Novel and Rapid Method to Determine Doxycycline in Human Plasma by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry

A simple, rapid, specific and sensitive liquid chromatography tandem mass spectrometric method has been developed and validated for the determination of doxycycline from the human plasma. Doxycycline is extracted from human plasma by solid phase extraction. Demeclocycline was used as an internal standard. Detection was performed at transitions of 444.800→428.200 for doxycycline and 464.700→448.100 for demeclocycline using mass spectrometry. Chromatographic separation of analyte and internal standard were carried out using a reverse phase C18, column at 0.500 ml/min flow. The assay of doxycycline is linear over the range of 0.055-7.612 μg/ml, with a precision <14.83%, regression coefficient (r²)=0.9961 and the limit of quantification in plasma for doxycycline was 0.055 μg/ml. Mean extraction recovery obtained was 95.55%. Samples are stable at room temperature for 6 h, processed samples were stable at least for 30.20 h and also stable at three freeze-thaw cycles. The method has been used to perform pharmacokinetic and bioequivalence studies in human plasma.     

HPLC-MS／MS测定血浆中丁丙诺啡的浓度

目的建立人血浆中丁丙诺啡浓度的HPLC-MS/ MS 测定法。方法以曲马多为内标,将待测血浆样品经氢氧化钠碱化后,加正己烷提取,上清液经Agilent Eclipse plus C18 （4. 6 mm ×150 mm,3. 5 μm）色谱柱分离,甲醇- 水（80∶20,v∶v,含0. 005 mol/ L 甲酸铵和0.25%甲酸）为流动相,流速0. 5 mL/ min,进行洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/ z 468. 3→55. 2 和m/ z 264. 2→58. 1（内标）。结果血浆中丁丙诺啡的浓度与峰面积比在50-20 000 ng/ L 的范围内线性关系良好,定量下限为50 ng/ L;提取回收率大于67%,日内日间精密度小于11%。结论该法简单、灵敏、快速,分离效果良好,可用于人体血药浓度测定和药动学研究。     

LC-MS／MS法测定全血中他克莫司浓度的方法学研究

目的：建立测定人全血中他克莫司液相色谱-串联质谱联用（LC-MS／MS）方法,并与微粒子免疫分析（MEIA）方法测定的结果进行了比较。方法：运用LC-MS／MS方法,血样经乙腈沉淀蛋白,上清液氮气吹干流动相复溶进样。色谱柱：Zorbax Extend—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-20mmol·L^-1醋酸胺溶液（80：15：5）;流速：0．4ml·min^-1。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应检测方式测定样品的浓度。检测离子对分别为m／z821．7→m／z 768．4和m／z 821．7→m／z 786．5。结果：他克莫司在0．5～128ng·ml^-1浓度范围内,峰面积与浓度线性关系良好（r=0．9991,／2=5）,最低定量限为0．5ng·ml^-1,平均回收率为99．0％,日内精密度、日间精密度的RSD分别为3．38％和4．16％。MEIA分析采用标准IMX测定方法。两种方法比较,其标准差小于3．0,表明相关性好。结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性,可用于他克莫司血药浓度监测和人体药药动力学研究。