氧化型染发剂的遗传毒作用分析

为了探讨染发剂对ＤＮＡ可能产生的损伤效应，采用ＳＯＳ／Ｕｍｕ试验对氧化型染发剂的主要成分对苯二胺（ＰＰＤ）和过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的遗传毒性进行了观察，结果表明，在无Ｓ９存在的条件下，ＰＰＤ在３７５～６０００μｇ／管的剂量范围内与酶诱导率之间无剂量反应关系，Ｈ２Ｏ２在４～１２５μｇ／管的剂量范围内与酶诱导率之间有剂量反应关系（ｒ＝０．９９５，Ｐ〈０．０１），ＰＰＤ被Ｈ２Ｏ２氧化后则显示出遗传毒作用（     

氧化型染发剂主要成分对大鼠皮肤角朊细胞DNA损伤作用的研究

应用大鼠皮肤角朊细胞的原代培养技术并结合单细胞凝胶电泳法检测氧化型染发剂的两种主要成分双氧水（Ｈ２Ｏ２）、对苯二胺（ＰＰＤ）及二者混合物致大鼠皮肤角朊细胞ＤＮＡ的单甸继裂作用。结果表明，染发剂及其组分均能使大鼠角朊细胞ＤＮＡ发生单链断裂，染毒剂量与慧尾长度呈剂量－反应关系（ｒＨ２Ｏ２＝０．９７８，ｒｐｐＤ＝０．９９３，ｒＨ２Ｏ２－ｐｐＤ＝０．９９６），说明ＤＮＡ单链断裂是氧化型染发剂对皮肤细胞产生     

氧化型染发剂对皮肤角朊细胞的毒性试验

应用大鼠皮肤原代细胞培养并结合ＭＴＴ法检测氧化型染发剂对皮肤细胞的毒性和增殖能力的影响，结果表明，对苯二胺经双氧水氧化后形成的化合物以及Ｇ牌染发剂均对大鼠角朊细胞的生长有抑制作用，随着染毒浓度的增高，ＯＤ值逐渐降低，即细胞线粒体代谢ＭＴＴ成ＭＴＴ甲月赞的能力降低，且具有剂量反应关系（ｒ对苯二胺和双氧水混合物＝－０６８７，ｒＧ牌染发剂＝－０９１３，ｎ＝３０，Ｐ＜００１）。除最低剂量组以外，其它４个浓度组的ＯＤ值均数与对照组相比均显著降低（ｔ检验，Ｐ＜００１）。对苯二胺和双氧水混合物及Ｇ牌染发剂的ＩＣ５０分别为０００３３％和００３９２ｍｇ／ｍｌ（９５％可信区间分别为０００２１％～０００５２％及００２０９～００７３５ｍｇ／ｍｌ）。结果显示对苯二胺与双氧水混合物以及Ｇ牌染发剂均具有较强的细胞毒性作用，能够抑制细胞增殖。氧化型染发剂的细胞毒性可能与其引起皮肤损伤的机制有关。     

食用油烟DNA交联作用的实验研究

采用溴化乙锭荧光法测定食用油烟颗粒物对小牛胸腺ＤＮＡ的交联生成作用。结果：菜油和豆油两种油烟颗粒提取物对小牛胸腺ＤＮＡ均具有交联生成作用，两种油烟颗粒物与小牛胸腺ＤＮＡ交联率间存在剂量反应关系（菜油ｒ＝０９３６６，Ｐ＜０００１；豆油ｒ＝０８９７８，Ｐ＜０００１）。     

3种醛类化合物对DNA的交联生成作用

采用溴化乙锭荧光法测定３种醛类污染物对小牛胸腺ＤＮＡ的交联生成作用,结果,甲醛、乙醛均可引起小牛胸腺ＤＮＡ发生交联,甲醛交联率间存在明显的剂量反应关系（甲醛ｒ＝０９３８４,Ｐ＜０００１）,乙醛的剂量反应关系不显著（ｒ＝０２９４７,Ｐ＜００５）,没有检测到丙烯醛对小牛胸腺ＤＮＡ的交联作用,分析与丙烯醛的空间位阻最大可能存在一定关系     

镍和镉对人外周血淋巴细胞的DNA损伤作用

目的了解不同类型ＤＮＡ损伤在镍、镉遗传毒理中的不同意义。方法分别用ＮｉＣｌ２和ＣｄＣｌ２对人外周血淋巴细胞进行体外染毒,再用单细胞凝胶电泳法,测定其ＤＮＡ单链、双链断裂和ＤＮＡ蛋白质交联水平,同时用［３Ｈ］ＮＡＤ参入法测定了这些细胞的聚（腺苷二磷酸核糖）聚合酶（ＰＡＲＰ）活性。结果尽管在两种金属处理过的细胞中ＤＮＡ单链、双链断裂和ＤＮＡ蛋白质交联水平与对照相比均有明显增高,但只有０．１０～１０．００μｍｏｌ／Ｌ的ＮｉＣｌ２和０．１６～２０．００μｍｏｌ／Ｌ的ＣｄＣｌ２诱导的ＤＮＡ双链断裂呈剂量反应关系。两种金属在低浓度时（ＮｉＣｌ２０．１０～０．４０μｍｏｌ／Ｌ,ＣｄＣｌ２０．１６μｍｏｌ／Ｌ）还能通过诱导ＤＮＡ断裂而激活ＰＡＲＰ,高浓度时（ＮｉＣｌ２２．００～１０．００μｍｏｌ／Ｌ,ＣｄＣｌ２０．８０～２０．００μｍｏｌ／Ｌ）反而不激活该酶。结论ＤＮＡ双链断裂的形成和ＰＡＲＰ激活的受阻可能在镍和镉的致癌和致突变机制中起着重要的作用。     

核蛋白在镍引起穿梭质粒pZ189 DNA氧化和致突变中的作用

目的 探讨核蛋白在镍对ＤＮＡ氧化和致突变中的作用机制。方法 分别用高效液相色谱－电化学（ＨＬＰＣ－ＥＣ）方法和穿梭质粒pＺ１８９突变检测系统,观察二价镍（ＮiＣ１２）与叙利亚地鼠胚（ＳＨＦ）细胞核蛋白相互作用对质粒ＤＮＡ氧化「８－羟基脱氧鸟苷（８－ＯＨdＧ）形成」和突变频率的影响。结果 ⑴ＳＨＥ细胞核蛋白的存在明显加剧由 ＮiＣ１２和Ｈ２Ｏ２引起的pＺ１８９ ＤＮＡ氧化（８－ＯＨdＧ/１０＾５dＧ量从０．     

单细胞凝胶电泳法测定镍化物对人血细胞的DNA损伤

为研究镍化物对人血细胞ＤＮＡ的损伤情况，用单细胞凝胶电泳法测定了不同剂量的Ｎｉ３Ｓ２、ＮｉＣｌ２在２、４、２４小时诱导人全血细胞ＤＮＡ单链断裂的作用。结果表明：当Ｎｉ３Ｓ２染毒剂量为２．５、５．０、１０．０μｇ／ｃｍ２、３７℃作用２小时，即可引起血细胞“慧星”尾长、ＤＮＡ断裂分级较对照有显著改变（Ｐ＜０．０１）。血细胞分别与５００～２０００μｍｏｌ／Ｌ的ＮｉＣｌ２、４０～８０μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２一起孵育２４小时，除了ＤＮＡ断裂分级有显著改变外，慧星尾长与对照差异无显著性。提示：在实验条件下，ＮｉＣｌ２致ＤＮＡ单链断裂作用较Ｎｉ３Ｓ２弱。血液中的某些抗氧化物质可能减弱了镍化物的ＤＮＡ氧化损伤。     

广西吸毒成瘾者丙型肝炎病毒的感染及其分子生物学研究

选择２８３名静脉吸毒者（ＩＶＤＡｓ）和１２１名献血员（ＢＤｓ）进行Ａｎｔｉ－ＨＣＶ、ＨＣＶ血清基因型、ＨＣＶ基因型和ＨＣＶｃＤＮＡ序列的检测。结果表明，ＩＶＤＡｓ和ＢＤｓ的Ａｎｔｉ－ＨＣＶ检出率分别为９１．１７％和０．８３％；ＩＶＤＡｓ的ＨＣＶ血清基因型为１型８１．８５％（２２１／２７０），２型１．４８％（４／２７０），ｌ＋２型０．３７％（１／２７０），不能定为１和／或２型１６．３０％（４４／２７０）；ＨＣＶ基因型为１ａ型：２８．６％（３４／１１９）；ｌｂ型：３８．７％（４６／１１９）；２ａ型１０．９％（１３／ｌ１９）；２ｂ型１４．３％（１７／ｌ１９）；３ａ型２６．９％（３２／１１９）；３ｂ型４０．３％（４８／１１９）；６ａ型８．４％（１０／１１９）；６ｂ型２６．７％（３１／１１９）；其中１４．３％的病例有４～５种不同基因亚型的混合感染现象。     

硒、锌对链脲佐菌素所致胰岛氧化损伤的保护作用

用离体培养的新生大鼠胰岛，观察链脲佐菌素（ＳＴＺ）对胰岛过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）释放和葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响以及硒、锌的保护作用。结果显示：０．５～４ｍｍｏｌ／ＬＳＴＺ增加胰岛Ｈ２Ｏ２释放和抑制胰岛素分泌，均呈剂量依赖关系，且两者有负相关关系。硒可明显减少ＳＴＺ诱导的Ｈ２Ｏ２释放，而锌则无该效应，但硒和锌均能明显减轻ＳＴＺ和外源性Ｈ２Ｏ２抑制胰岛素分泌的作用。结果表明：Ｈ２Ｏ２在ＳＴＺ所致胰岛损伤中起重要作用，硒和锌对ＳＴＺ所致胰岛氧化损伤具有一定的防护作用。     

煤烟导致非细胞体系DNA氧化应激损伤的机制

目的 探讨煤烟导致非细胞体系氧应激损伤的机理。方法 以N－乙酰半胱氨酸（NAC）和甘露醇等不同作用位点的抗氧化剂作为实验干预手段,采用溴乙锭荧光法观察煤烟所致非细胞体系的DNA交联形成作用。结果 甘露醇可以有效地降低煤烟经DNA染毒所致的小牛胸腺DNA和肺细胞NDA的交联作用;而NAC却没有观察到相类似的作用。结论 煤烟在不需要经过细胞酶代谢条件下,可以通过产生羟自由基的途径而导致DNA氧应激损伤。     

芥子气对人皮肤细胞DNA交联形成与细胞毒性的关系

用不同剂量芥子气对单层人表皮基底细胞和人拟表皮染毒，观察诱发双链间ＤＮＡ交联的形成。结果表明在相同染毒剂量时，芥子气致人拟表皮ＤＮＡ交联形成率仅为单层人角朊细胞的１／４。染毒后１ｈ人角朊细胞ＤＮＡ交联形成率与染毒２４ｈ后比较明显降低。芥子气对皮肤细胞的ＤＮＡ交联作用与其细胞毒性作用之间存在有明显的剂量反应和时间反应关系。该种交联作用可能是芥子气导致皮肤细胞死亡的原因之一。芥子气对具有完整屏障结构的人拟表皮同样显示有致ＤＮＡ交联形成作用，这与芥子气能迅速直接穿过表皮的屏障结构作用于表皮基底细胞的报道相吻合     

丙烯腈对DNA交联作用研究

目的　应用牛胸腺DNA和染毒丙烯腈 (AN)小鼠精细胞研究AN对DNA的交联作用 ,研究AN毒作用的分子机制。方法　应用溴化乙锭荧光法测定加或不加S9条件下AN对牛胸腺DNA交联作用。雄性小鼠随机分为阴性对照 ,3、 6、 9、 12、 18和 2 4mg/kgAN染毒组 ,每组 2只。腹腔注射染毒 1次 ,于染毒第 2 4h处死小鼠 ,分离精细胞 ,观察细胞存活率 ,测定精细胞DNA交联率。结果　加与不加S9条件下 ,AN对牛胸腺DNA均未产生交联作用。小鼠精细胞DNA交联率在 3、 6、 9mg/kgAN剂量范围内随剂量增加而升高 ,呈明确的剂量 反应关系 (r =0 93 5 ,P <0 0 5 )。结论　在体外实验中AN对牛胸腺DNA未产生交联作用 ,对小鼠精细胞DNA在较低剂量时产生了交联作用 ,高剂量产生断裂作用和交联作用。AN对精细胞的DNA交联作用可能是产生生殖毒作用的分子机制之一     

用紫外光谱法检测三种醛类化合物与DNA的结合

为探讨甲醛,乙醛和丙烯酸对ＤＮＡ损伤机制。应用紫外光谱对甲醛,乙醛,丙烯三种醛类化合物引起的ＤＮＡ的加合反应,及与四种单核苷酸作用的情况进行了研究。结果表明：甲醛、乙醛的引起小牛胸膜ＤＮＡ的第二个最大吸收峰长波方向位移;同时也被步确定了甲醛,乙醛和四种单核苷酸结合的优势反应核苷酸。     

Synthesis, DNA binding and cytotoxicity of new pyrazole emodin derivatives

A series of new anthrapyrazoles were derived from emodin by attaching various cationic alkyl amino side chains onto a pyrazole ring which had been incorporated into the anthraquinone chromophore. Compared with emodin, the derivatives had significantly higher DNA binding affinity based on interaction with calf thymus DNA, and much more potent cytotoxicity against different tumor cells. The derivatives with a mono-cationic alkyl side chain exhibited the highest DNA binding affinity and cytotoxicity.     

Oxoisoaporphine alkaloid derivatives: synthesis, DNA binding affinity and cytotoxicity

A series of novel oxoisoaporphine alkaloid derivatives, 9-aminoalkanamido-1-azabenzanthrone (general formula Ar-NHCO(CH(2))(n)NR(2), Ar=1-azabenzanthrone, n=1, 2 or 3), had been synthesized. Compared with 1-azabenzanthrone, the derivatives had significantly higher DNA binding affinity with calf thymus DNA, and higher potent cytotoxicity against different tumor cell lines. The cytotoxicity and the structure-activity relationship of the prepared compounds were studied. The derivatives with two methylene groups (n=2), and piperidine or ethanolamine functional group in the side chain exhibited highest DNA binding affinity and cytotoxicity.     

Quantitative detection of apoptotic thymocytes in low-dose X-irradiated mice by an anti-single-stranded DNA antibody

The quantitative detection of apoptotic cells in low frequency in the thymus of mice irradiated with X-rays using an anti-single-stranded DNA antibody was explored. The antibody against single-stranded DNA (anti-ssDNA) was obtained with rabbits hyperimmunized with complexes of alkaline-denatured calf thymus DNA. AKR female mice were irradiated with 10 to 100 cGy or 4 Gy X-rays; thereafter, thymus sections were prepared at various times after irradiation. The detection and counting of apoptotic cells in the section were performed after histochemical staining using an anti-ssDNA antibody. The results demonstrate that, although sensitive and quantitative detection of apoptotic cells in irradiated thymus using the anti-ssDNA antibody is possible, the sensitivity is lower compared to that of in situ end-labeling methods, such as TUNEL or ISEL. The antibodies could also be used for rat thymus and spleen. In addition, an increase in positively stained cells by both methods was detected as early as 6 min after the irradiation of mice.     

体外甲基丙烯酸环氧丙酯-DNA加合物的研究

目的 探讨新诱变剂甲基丙烯酸环氧丙酯（ＧＭＡ）与ＤＮＡ形成加合物的类型和特性。方法 在体外条件下,dＡＭＰ、dＣＭＰ、dＧＭＰ、dＴＭＰ及小牛胸腺ＤＮＡ与ＧＭＡ发生反应,反应产物经紫外光谱、反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）和质谱先进方法分析。结果 ＧＭＡ能与dＡＭＰ、dＣＭＰ、dＧＭＰ及小牛胸腺ＤＮＡ形成专一性共价结合。已 被证实１捉ＧＭＡ－ＤＮＡ加合物为Ｎ３－甲基丙烯酸－２羟丙－基－脱氧胞嘧啶核苷一磷     

烹调烟雾冷凝物对DNA完整性影响的研究

采用体外作用的方式探讨烹调烟雾致遗传损伤的机制。通过细胞毒性试验得出 :油烟冷凝物与大鼠肺Ⅱ型细胞生长抑制率之间存在剂量 -效应关系 (r=0 943,P <0 0 1) ,剂量在 2 0 μg ml及以上对细胞有明显毒性作用。在不产生细胞毒性作用的剂量范围内 ,单细胞凝胶电泳试验表明 :大鼠肺Ⅱ型细胞经油烟冷凝物染毒 2小时可引起细胞DNA链断裂 ,在 0～ 5 μg ml剂量范围内 ,损伤程度与剂量存在直线相关关系 (r=0 918,P <0 0 5 ) ;在 10 μg ml剂量下 ,DNA损伤已达最大程度。发生DNA损伤的细胞经修复培养 2小时后受损伤的DNA能被修复。油烟冷凝物对 30 μg小牛胸腺DNA交联试验显示 :在 5 0～ 80 0 μg剂量范围 ,DNA交联率与受试物间存在剂量 -效应关系 (r=0 96 3,P <0 0 1)。提示烹调烟雾冷凝物在较低作用剂量下就可导致大鼠肺Ⅱ型细胞DNA损伤 ,在一定剂量下可以导致DNA交联率的增加     

对苯二胺氧化产物对小鼠经皮肤染毒的亚慢性毒性

[目的 ]研究氧化型染发剂主要成分对苯二胺 (PPD)氧化产物经皮吸收后对小鼠的亚慢性毒作用。 [方法 ]对苯二胺经双氧水氧化后的氧化产物为受试物 ,每隔 3d在小鼠背部皮肤染毒 1次 ,周期 1个月。整个过程中观察小鼠的一般生长情况 ,并于染毒 1个月后观察受试动物血生化指标、血常规、肝肾脾组织病理学改变和遗传毒性。 [结果 ]PPD氧化产物可影响小鼠的肝肾功能 ,随着PPD染毒剂量增加 ,ALT和BUN值逐渐增高 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 0 5或P <0 0 1)。PPD具有遗传毒性 ,能造成骨髓细胞染色体和DNA的损伤 ,并在受试剂量范围内存在剂量 效应关系。 [结论 ]频繁使用氧化型染发剂可能对机体具有潜在的危害