维生素D和维生素K对结石大鼠肾脏骨桥蛋白mRNA表达的影响

目的：进一步明确维生素Ｄ和维生素Ｋ与肾结石的关系。方法：健康成年雄性ＳＤ大鼠３６只随机分成６组,即对照组,单纯成石组,维生素Ｄ组,诱石剂＋维生素Ｄ组,维生素Ｋ和诱石剂＋维生素Ｋ组,测定肾脏骨桥蛋白（ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ,ＯＰＮ）ｍＲＮＡ的表达量和尿晶体成分的浓度,结果;维生素Ｄ和维生素Ｋ均可促进肾脏表达ＯＰＮｍＲＮＡ纱Ｄ可升高尿钙,维生素Ｋ则抑制尿草酸的分泌,诱石剂有降低尿镁和柠檬酸的作用。结论     

维生素D，维生素K，雌二醇和睾酮对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的：探讨骨桥蛋白的表达和调控与尿石症的关系。方法：分别用维生素D、维生素K、雌二醇和睾酮处理正常大鼠和结石模型大鼠,连续用药7d,免疫组化和Northern blot技术检测大鼠肾骨桥蛋白及其mRNA的表达,偏光显微镜观察大鼠肾晶体沉积情况,并测定尿晶体成分的含量。结果：维生素K、雌二醇和睾酮均可上调骨桥蛋白及其mRNA的表达,减少大鼠肾草酸钙晶体的沉积。维生素D增加尿钙的排泄量,促进晶体沉积。结论：维生素K、雌二醇和睾酮可上调肾骨桥蛋白的表达,抑制结石的形成,维生素D过量则可促进结石形成。     

维生素D，维生素K，雌二醇和睾酮对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的 :探讨骨桥蛋白的表达和调控与尿石症的关系。方法 :分别用维生素D、维生素K、雌二醇和睾酮处理正常大鼠和结石模型大鼠 ,连续用药 7d ,免疫组化和Northernblot技术检测大鼠肾骨桥蛋白及其mRNA的表达 ,偏光显微镜观察大鼠肾晶体沉积情况 ,并测定尿晶体成分的含量。结果 :维生素K、雌二醇和睾酮均可上调骨桥蛋白及其mRNA的表达 ,减少大鼠肾草酸钙晶体的沉积。维生素D增加尿钙的排泄量 ,促进晶体沉积。结论 :维生素K、雌二醇和睾酮可上调肾骨桥蛋白的表达 ,抑制结石的形成 ,维生素D过量则可促进结石形成     

维生素D和曲古菌素A对前列腺癌细胞骨桥蛋白表达及细胞生长的影响

目的:探讨维生素D[1,25(OH)2D3,VD3]联合曲古菌素A(TSA)对前列腺癌细胞中骨桥蛋白(OPN)表达及前列腺癌细胞生长的影响.方法:MTT和流式细胞术检测在不同浓度和时间下药物对前列腺癌细胞增殖和细胞周期的影响,并使用ELISA法检测在不同条件下前列腺癌细胞中OPN蛋白表达的变化.结果:VD3与TSA联合后对PC-3细胞生长抑制率高于单独用VD3和TSA;VD3与TSA联合对PC-3细胞周期的阻滞效果优于单独用VD3和TSA;VD3与TSA联合用药后,PC-3细胞OPN表达水平比各单独用药组高,而DU-145细胞未见明显变化.结论:TSA可增强VD3上调PC-3细胞OPN的表达.而TSA和VD3联合使用对DU-145细胞无论是上调OPN表达还是生长抑制作用都不太明显,说明PC-3和DU-145细胞对VD3不敏感的机制不同,这为临床治疗VD3不敏感肿瘤提供了新的选择.     

枸橼酸钾对大鼠肾草酸钙结石骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨枸橼酸钾对大鼠肾草酸钙结石骨桥蛋白(osteopontn,OPN)表达的影响.方法 32只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、枸橼酸钾组、结石组(乙二醇和氯化氨)、结石+枸橼酸钾组,每组8只.采用乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型进行试验研究.连续给药4周后处死大鼠取肾组织,采用HE染色和免疫组化法检测各组肾结石形成及OPN表达情况.结果 结石+枸橼酸钾组大鼠肾结石形成比结石组明显减少(P<0.05);结石+枸橼酸钾组大鼠的OPN表达比结石组明显降低(P<0.05);枸橼酸钾组OPN表达与对照组相比无明显变化(P>0.05).结论 枸橼酸钾可能通过减少草酸钙结晶的形成而减轻对肾小管上皮细胞的损伤,降低肾OPN的表达.     

维生素D对PCOS大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的 探讨维生素D（vitamin D,VD）对多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）大鼠卵巢颗粒细胞（granulosa cells,GCs）凋亡的影响。方法 选取3周龄SD雌性大鼠21只,采用随机数字表法分为对照组（n=6）和造模组（n=15）,建立PCOS大鼠模型。造模组采用来曲唑[1mg/（kg·d）,溶于0.5%羧甲纤维素钠溶液]灌胃联合高脂饲料喂养,对照组采用等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,给予普通饲料喂养,将12只造模成功的大鼠（3只造模失败）,采用随机数字表法分为PCOS组（n=6）和PCOS+VD组（n=6）,两组灌胃同等剂量玉米油,普通饲料喂养,连续21d。比较对照组、PCOS组和PCOS+VD组大鼠的动情周期、卵巢形态学变化,以及血清25羟维生素D[25 hydroxyvitam D,25-（OH）D]、睾酮（testosterone,T）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）水平。造模结束后,分离GCs进行体外培养,根据培养方式分为GCs对照组（n=6）、GCs-PCOS组（n=6）、GCs-（PCOS+VD）组（n=6）、GCs-（PCOS+ VD+LY294002）组（n=6）。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,透射电镜观察细胞凋亡小体,蛋白免疫印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果 与对照组比较,PCOS组大鼠血清中T、LH水平升高,FSH、25-（OH）D水平降低,动情周期紊乱,卵巢呈多囊样改变,差异均有统计学意义（P<0.05）;与PCOS组比较,PCOS+VD组大鼠血清T、LH降低,FSH及25-（OH）D水平升高,动情周期恢复正常,囊状卵泡数量减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。与GCs对照组比较,GCs-PCOS组GCs凋亡率及Bax蛋白表达增加,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）;与GCs-PCOS组比较,GCs-（PCOS+VD）组的GCs凋亡率及Bax蛋白表达降低,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达增加,差异均有统计学意义（P<0.05）;与GCs-（PCOS+VD）组比较,GCs-（PCOS+VD+LY294002）组的p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 VD可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制GCs凋亡。     

维生素D对老龄大鼠超负荷诱导的骨骼肌肥大及维生素D受体表达的影响

目的 采用腓肠肌远端腱切术方案建立老龄大鼠骨骼肌肥大模型,探讨维生素D补充对老龄大鼠骨骼肌肥大的影响及可能机制。方法 雄性大鼠（24个月龄）20只,手术切断左后肢单侧腓肠肌远端肌腱造成超负荷骨骼肌肥大模型（Overload,Ovld侧）,另一侧行假手术（Sham侧）。造模完成后将大鼠随机分为对照组和维生素D组,维生素D组每天灌胃1 000 IU/kg的维生素D,对照组灌胃等量大豆油（溶剂）,干预1周后处死。无菌条件下取腹主动脉血待检;取左、右后肢跖肌称量,并液氮速冻,置低温冰箱保存待测。采用ELISA法检测血清25（OH）D含量和骨骼肌中维生素D受体（VDR）的含量;采用蛋白质印迹法检测mTOR、rpS6蛋白及其磷酸化水平的表达。结果 在实验期间,2组大鼠摄食量和体质量差异无统计学意义。2组大鼠 Ovld侧跖肌质量均较Sham侧增加（P<0.05）,且维生素D Ovld侧跖肌的质量高于对照组（P<0.05）,而2组Sham侧跖肌质量差异无统计学意义。ELISA结果显示,补充维生素D提高了大鼠血清25（OH）D水平（与对照组比较P<0.05）,促进了Ovld侧肌组织VDR的表达（与Sham侧比较,P<0.05）,而对照组Ovld侧肌组织VDR的表达与Sham侧比较差异无统计学意义。蛋白质印迹结果显示,2组Ovld侧肌组织中p-mTOR/mTOR、p-rpS6/rpS6比值均比Sham侧增加,但仅在维生素D组差异有统计学意义（P<0.05）。结论 腓肠肌远端腱切术能够有效促进老龄大鼠骨骼肌肥大,而维生素D补充能进一步促进骨骼肌肥大,其机制可能与维生素D促进老龄大鼠骨骼肌中VDR的表达和蛋白质合成相关信号蛋白mTOR、rpS6的表达有关。     

硒和维生素E对大鼠心肌自由基代谢的影响

硒和维生素Ｅ对大鼠心肌自由基代谢的影响白求恩医科大学地方病研究所（１３００２１）苗春生孙波赵轶卓李才【关键词】硒维生素Ｅ自由基代谢大量研究表明，硒（Ｓｅ）和维生素Ｅ（ＶＥ）联合缺乏可能是克山病的基本病因。我们的工作表明，低Ｓｅ、低ＶＥ可纠正自由基代谢...     

高盐对SD大鼠肾脏骨调素mRNA表达的影响

目的观察高盐饮食对大鼠肾脏骨调素mRNA及其蛋白表达的影响,旨在研究高盐对大鼠肾脏的损伤作用。方法选取10周龄正常盐饮食雄性Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为高盐(4%NaCl)或正常盐(0.6%NaCl)饮食组,每组24只。每周测量大鼠鼠尾血压、体质量。于第4、8、12周末每组各处死6只大鼠,测量大鼠肾质量。采用免疫组化方法测定大鼠肾脏OPN表达;荧光定量PCR方法测定大鼠肾脏骨调素mRNA表达。结果两组大鼠血压、体质量及肾质量/体质量比无明显差异(P<0.05),12周后高盐饮食大鼠肾脏骨调素mRNA(0.27±0.16vs0.15±0.13,P<0.05)及其蛋白表达明显升高(0.78±0.15vs0.61±0.11,P<0.01),与正常盐饮食大鼠比较有显著统计学差异。结论高盐饮食摄入增加大鼠肾脏骨调素mRNA及其蛋白表达,表明高盐对大鼠肾脏有一定损伤作用,并且这种损伤作用不依赖于大鼠血压升高。     

高盐对SD大鼠肾脏骨调素mRNA表达的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of high-salt diet on the expression of osteopontin (OPN) mRNA and its protein in Sprague-Dawley rat kidney. METHODS: Forty-eight male SD rats aged 10 weeks receiving normal salt diet were enrolled in study, and were divided into two groups and fed with high salt diet (4%NaCl) or normal salt diet (0.6%NaCl) for 12 weeks respectively, with 24 rats in each group. Tail systolic blood pressure and bodyweight were measured in all rats every week. At the end of 4th, 8th and 12th week, 6 rats in each group were sacrificed for detection of the expression of OPN mRNA and its protein in the kidney with quantitatine real-time (QRT)-PCR and immunohistochemistry, respectively. RESULTS: No significant difference was found in blood pressure, bodyweight and kidney weight/bodyweight between high-salt diet group and normal salt diet group (P>0.05). The expression of OPN mRNA (0.27+/-0.16 vs 0.15+/-0.13, P<0.05) and its protein (0.78+/-0.15 vs 0.61+/-0.11, P<0.01) in SD rat kidney with high-salt diet were up-regulated at the end of 12th week compared with the rats with normal salt diet. CONCLUSIONS: High-salt diet increase the expression of OPN mRNA and its protein in SD rat kidney. Renal injury induced by high salt intake might be independent of blood pressure change.     

泽泻有效部位对肾草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的研究泽泻有效部位对大鼠肾草酸钙结石形成和肾组织骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨泽泻抑制尿结石形成的机制。方法采用现代植化和生物活性导向分离的方法分离、提取泽泻的有效部位。将30只大鼠随机分成3组对照组、模型组、泽泻组。以乙二醇和1α-羟基维生素D3ig制备大鼠肾草酸钙结石模型。检测各组大鼠血及尿生化、肾Ca2 水平、24h尿草酸分泌量和肾组织病理学改变,并采用免疫印迹(Western blotting)和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别观察各组大鼠肾组织OPN蛋白及其mRNA的表达水平。结果ig泽泻有效部位(主要以四环三萜类化合物为主)大鼠的血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾Ca2 水平、24h尿Ca2 分泌量、肾组织草酸钙晶体的分布、OPN蛋白及其mRNA的表达水平均显著低于模型组(P<0.01)。结论泽泻有效部位能抑制大鼠肾组织OPN的表达,减少肾组织草酸钙结晶的沉积,从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

阿伐他汀对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨阿伐他汀对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其调控的可能机制.方法 45只SD大鼠,随机分为4组:正常组、高脂对照组、糖尿病组和阿伐他汀组.除正常组外,其余3组均用高脂饲料喂养.8周后,糖尿病组与阿伐他汀组腹腔注射链尿佐菌素(STZ)35 mg/kg;阿伐他汀组注射STZ 1周后,灌胃给予20 mg/(kg·d)阿伐他汀8周,心脏取血并获肾脏组织.酶法分析血糖、甘油三酯、胆固醇水平.HE染色观察肾脏的病理学变化,PV法免疫组化观察OPN在肾脏中的表达及定位,Western blot法检测新鲜组织中OPN和pp38表达.结果 阿伐他汀可明显降低伴有高脂血症的糖尿病大鼠血清胆固醇浓度,HE、免疫组化和Western blot结果表明:与糖尿病组相比,阿伐他汀可明显减轻肾小管和肾小球的病理损伤程度,下调OPN的表达和p38磷酸化水平,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 阿伐他汀可能通过降低p38的磷酸化而下调OPN表达.     

夏枯草提取物对肾草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的研究夏枯草50％甲醇提取物对大鼠肾组织骨桥蛋白（osteopontin，OPN）表达的影响。方法采用乙二醇和氯化铵诱导建立大鼠肾草酸钙结石模型，将24只Wistar大鼠随机分成3组：对照组（A）、结石组（B）、夏枯草组（C）。C组则通过灌胃方式予一定剂量的夏枯草50％甲醇提取物。饲养4周后，检测各组大鼠肾组织病理学改变和草酸钙结晶沉积情况。采用原位杂交RT—PCR观察各组大鼠肾组织中OPN mRNA表达，免疫组织化学和Westem blot检测各组大鼠肾组织OPN蛋白的表达水平。结果A组肾小管正常，B组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在，管腔明显扩张；C组肾小管腔可见少许散在草酸钙结晶存在，管腔轻度扩张。原位杂交显示A组大鼠肾组织中仅肾脏髓质小部分亨利氏袢中检测到OPN mRNA的表达，与此相反在B组和C组大鼠肾组织中则明显检测到OPN mRNA的表达，只是C组中OPN mRNA的表达强度相对弱于成石对照组。RT-PCR检测结果与原位杂交一致。免疫组化显示A组中仅能检测到OPN蛋白的微弱表达，B组大鼠肾组织中OPN表达则明显增强，C组大鼠肾组织中OPN表达强度低于B组。Western blotting检测显示A组轻度表达OPN，而B组则显著表达，C组表达强度低于B组。结论夏枯草50％甲醇提取物能有效抑制大鼠肾组织OPN的表达，减少肾组织草酸钙结晶的沉积，从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

Regulation of osteopontin expression in a rat model of urolithiasis

目的　探讨骨桥蛋白 (OPN)的表达和调控与尿石症的关系。方法　分别用维生素D、维生素K、雌二醇和睾酮处理正常大鼠和结石模型大鼠 ,连续用药 7天 ,免疫组化和原位杂交技术检测大鼠肾脏OPN及其mRNA的表达 ,偏光显微镜观察鼠肾草酸钙晶体沉积情况 ,并测定尿晶体成分的浓度。结果　维生素K、雌二醇和睾酮均可上调OPN及其mRNA的表达 ,减少鼠肾草酸钙晶体的沉积。维生素D增加尿钙的排泄量 ,促进晶体在鼠肾的沉积。结论　结果提示 ,维生素K、雌二醇和睾酮可上调OPN的表达 ,抑制结石的形成 ,维生素D过量则可促进结石形成。     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX 补充雌激素组、OVX 补充孕激素组和OVX 补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX 补充雌激素组和OVX 补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX+补充雌激素组、OVX+补充孕激素组和OVX+补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX+补充雌激素组和OVX+补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.