雌二醇对溴氰菊酯染毒胶质细胞EAAs释放影响

目的　以原代培养的神经胶质细胞为研究对象 ,观察溴氰菊酯对胶质细胞兴奋性氨基酸 (EAAs)释放的影响 ,并探讨内分泌激素雌二醇对溴氰菊酯作用的影响。方法　高效液相色谱 (HPLC)检测不同水平 17β -雌二醇(10 -5、10 -8、10 -11mol/L)对 2× 10 -5mol/L溴氰菊酯染毒大鼠原代神经胶质细胞兴奋性氨基酸释放的影响 ,并观察雌激素受体拮抗剂Tamoxifen对雌激素有无拮抗作用。结果　 2× 10 -5mol/L溴氰菊酯可增加大鼠原代胶质细胞谷氨酸 (Glu)释放 ,释放增加率为 82 0 3% ;10 -8mol/L17β -雌二醇可部分抑制溴氰菊酯所致Glu释放增加 ,抑制率为37 77% ;Tamoxifen对雌二醇的作用并无干扰。结论　 17β -雌二醇对溴氰菊酯所致Glu释放增加表现出一定保护作用     

溴氰菊酯对大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合的影响

为研究溴氰菊酯对大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合功能的影响，应用放射配基受体结合法进行了观察。结果显示，在１×１０－８～１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ剂量下，溴氰菊酯明显增加突触膜与３Ｈ－谷氨酸的结合量，而且具有剂量效应关系。与二甲基亚砜溶剂对照比较，谷氨酸结合率增加３．２％～１３．５％。受体－配基结合动力学分析呈现正协同作用，表明溴氰菊酯神经兴奋毒作用可能与中枢谷氨酸递质系统紊乱有关。     

白细胞介素-1β在溴氰菊酯神经毒性中的作用

目的 探讨白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)在溴氰菊酯(deltamethrin,DM)神经毒性中的作用.方法 取大鼠皮层、海马和下丘脑组织分别制成单细胞悬液,各分为对照组和7个处理组.对照组加体积分数为0.1%的二甲亚砜,DM组加2×10-6mol/L DM.IL-1β组加100 U/ml IL-1β、I113+DM组加DM作用15 min后再给予IL-1β,IL-1ra+DM组加0.1μg/ml白介素受体抑制剂白介素1ra(interleukin 1ra,IL-1ra)30 min后加DM.Ac-YVAD-CHO组加15 μmol/IL-1β转化酶(interleukin 1βconverting enzyme,ICE)抑制剂 Ac-YVAD-CHO,Ac-YVAD-CHO+DM组和DM+Ac-YVAD-CHO分别在DM作用同时和作用15 min后加Ac-YVAD-CHO,DM作用1 h后,离心终止反应,取细胞培养液上清测NO含量,取沉淀细胞测Na+-K+-ATP酶(ATPase)活力.结果 与对照组相比,DM组皮层与海马细胞以及IL-1β组皮层细胞NO释放分别增加69.9%、68.2%和26.7%,ATPase活力分别下降64.6%、46.3%和27.3%,差异有统计学意义(P<0.01);而与DM组比较,DM+IL-1β组皮层、海马和下丘脑细胞的NO释放分别增加12.4%、26.2%和26.4%.Illra+DM组、Ac.YVAD.CHO+DM组和DM+Ae.YVAD.CHO组皮层和海马细胞NO释放则分别减少31.6%、36.1%、48.0%和26.5%、25.8%、64.1%.IL-1ra+DM组和Ac-YVDA-CHO+DM组皮层细胞ATPase活力升高134.9%、60.2%,而DM+Ac-YVAD-CHO组下丘脑细胞却出现NO释放增加48.3%.同时ATPase活力升高87.1%,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 IL-1β可通过诱导NO的释放增加而加重DM对皮层和海马细胞Na+-K+-ATPase活力的损伤,但IL-1β在DM对下丘脑细胞的损伤作用中与NO的关系并不明确.     

溴氰菊酯对大鼠脑神经细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的 研究Caspase-3在溴氰菊酯(deltamethrin,DM)诱导大鼠脑神经细胞凋亡机制中的作用。方法 成年雄性Wistar大鼠腹腔注射12.5 mg/kg的DM染毒,并分成不同时间观察组;以FACS420型流式细胞仪测定大鼠海马和皮层细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达;以四肽化合物Ac-DEVD-pNa为底物测其神经细胞Caspase-3活力。结果 DM染毒后24 h、48 h、5 d组大鼠海马、皮层神经细胞凋亡率[海马:(8.45±1.02)％、(9.44±1.14)％、(7.58±0.75)％,皮层:(7.90±0.49)％、(8.01±0.87)％、(7.97±0.41)％]均高于对照组[海马:(2.97±0.36)％,皮层:(3.50±0.48)％],差异有统计学意义(P<0.01),而5 h组未见明显变化;DM染毒后5、24、48 h,大鼠海马、皮层神经细胞Caspase-3活力(A405nm吸光度值,海马:0.389±0.038、0.472±0.041、0.295±0.049,皮层:0.321±0.068、0.429±0.077、0.344±0.047)与5 d组大鼠海马Caspase-3活力(0.246±0.065)均明显高于对照组(海马:0.184±0.054,皮层:0.198±0.049),差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);DM染毒后5、24、48h,大鼠脑组织Caspase-3蛋白表达亦明显高于对照组,5 d组未见明显变化。结论DM可影响大鼠脑海马和皮层神经细胞凋亡率、Caspase-3活力及蛋白表达;Caspase-3活力及蛋白表达升高发生在神经细胞     

溴氰菊酯对大鼠脑组织自由基生成和转录因子Nrf2表达的影响

目的 研究溴氰菊酯(DM)诱导大鼠脑组织中自由基生成和对转录因子Nrf2的影响.方法 (1)8只大鼠随机分成4组,即橄榄油对照组、DM染毒组、叔丁基对苯二酚(tBHQ)组和tBHQ+DM组.在预先喂饲雄性大鼠tBHQ 3 d后,用12.50mg/kg DM染毒大鼠5 d,用电子自旋共振(ESR)直接法测定海马组织中的自由基.(2)18只雄性大鼠分为3组,分别给予橄榄油及3.13、12.50 mg/kg DM连续染毒5 d,用Western blot方法测定大脑皮层和海马细胞质或细胞核中Nrf2蛋白水平.结果 (1)DM染毒组大鼠与tBHQ+DM组大鼠海马中自由基水平增高,分别是对照组的2.45倍和2.97倍,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)低、高剂量DM染毒大鼠大脑皮层的细胞质中Nrf2蛋白表达水平增高,分别是对照组的1.68倍和1.34倍;细胞核中的Nrf2蛋白表达呈剂量-效应关系性增高,分别是对照组的1.51倍和2.29倍,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).(3)低、高剂量DM染毒大鼠海马组织的细胞质Nrf2蛋白表达呈剂量-效应关系性增高,分别是对照组韵2.26倍和3.58倍;细胞核中的Nrf2蛋白表达也增高,分别是对照组的2.42倍和2.45倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DM染毒能诱导大鼠海马组织中自由基生成,DM能诱导大脑皮层和海马组织中的Nrf2蛋白表达.     

MG-132对溴氰菊酯致大鼠海马细胞凋亡的保护作用

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG-132对拟除虫菊酯类农药溴氰菊酯(deltamethfin,DM)致大鼠海马细胞凋亡的保护作用.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,每组10只.对照组(1 ml/kg橄榄油),DM组(12.5 mg/kg DM),MG-132+DM组(0.5 mg/kg MG-132处理2 h后再以DM 12.5mg/kg染毒),MG-132(0.5 mg/kg MG-132)组,以腹腔注射方式分别给予染毒处理.DM染毒24 h后大鼠断头取海马,流式细胞术检测细胞凋亡率.免疫印迹(Western bloting)法检测bcl-2蛋白的含量及酶标仪检测casptme-3活力.结果 MG-132+DM组海马细胞凋亡率(27.29%+2.41%)明显低于DM组(19.94%±2.07%),差异有统计学意义(P<0.05).DM组bcl-2蛋白表达的灰度值为0.43±0.06,MG-132+DM组bcl-2表达的灰度值为2.01±0.23,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).DM组海马细胞cas-pase-3活力为5.26±0.43,MG-132+DM组为4.55±0.46,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在该实验条件下,MG-132对DM引起的大鼠海马细胞凋亡有一定保护作用,泛素-蛋白酶体途径可能参与DM诱发大鼠海马细胞凋亡的过程.     

乙体氯氰菊酯对大鼠脑皮质Gln及GSH含量影响

拟除虫菊酯类农药可引起哺乳动物兴奋性神经毒性，可能与谷氨酸（Glu）递质传递紊乱有关，但作用机制尚不清楚。Glu不能透过血脑屏障，脑内Glu主要由谷氨酰胺（Gln）合成，GSH是体内重要的抗氧化物质之一。其含量的变化直接受Glu及Gln水平的影响。为此，我们通过对乙体氯氰菊酯染毒雄性大鼠脑皮质Gln和GSH含量的检测，探讨该类农药致哺乳动物兴奋性神经毒作用机制。     

拟除虫菊酯类杀虫剂对大鼠脑突触体ATPase活性的影响

In vitro Effect of several pyrethroids on rat brain synaptosomal ATPase activities was investigated. No significant changes in Na+, K+-ATPase and oligomycin-insensitive Mg2+-ATPase activities were observed under present experimental conditions, but all pyrethroids tested caused significant inhibition of oligomycin-sensitive Mg2+-ATPase activity with certain concentration dependence. The results suggest a possibility that pyrethroids may alter the cellular energy metabolism of the nervous system.     

生产性溴氰菊酯急性中毒173例的调查报告

本文报告了生产性溴氰菊酯急性中毒173例的调查结果。患者中毒表现均以消化和神经系统症状为主。中毒原因主要是由于在配药和喷洒时违反操作规程。治疗以安定剂和支持疗法为主,疗效较明显,所有中毒患者均于2～3天内治愈。     

褪黑素对溴氰菊酯致大鼠海马神经细胞Bcl-2和细胞色素C表达及细胞凋亡率的影响

目的 观察褪黑素(MT)对溴氰菊酯(DM)引起的大鼠大脑海马脑神经细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达水平及细胞色素C表达的影响.方法 40只Wistar雌性大鼠随机分为5组:橄榄油对照组(1 ml/kg橄榄油)、单纯DM组(12.5 mg/kg DM)、DM+MT25组(25.0 mg/kg MT+12.5mg/kg DM)、DM+MT50组(50 mg/kg MT+12.5 mg/kg DM)、DM+MT100组(100 mg/kg MT+12.5 mg/kg DM),每组8只,一次性给药24 h后,每组大鼠分别断头处死.应用流式细胞术测大鼠海马细胞凋亡率;应用免疫组化和计算机显微图像分析技术测大鼠海马神经细胞中Bcl-2蛋白表达水平和细胞色素C的表达.结果 DM+MT25、DM+MT50、DM+MT100各组Bcl-2蛋白表达水平分别为(45.26±3.84)、(39.40±4.04)、(34.40±4.52),明显低于对照组(59.33±4.03),但明显高于单纯DM组(20.73±3.34),差异均有统计学意义(P＜0.05);DM+MT25、DM+MT50、DM+MT100组的细胞色素C表达水平分别为(20.53±3.17)、(28.73±2.61)、(28.66±4.82),DM+MT50、DM+MT100组细胞色素C表达水平明显高于对照组,3个MT剂量组均明显低于对单纯DM组,且差异均有统计学意义(P＜0.05).3个MT剂量组神经细胞凋亡率分别为(15.00±1.77)%、(14.88±1.84)%、(11.75±1.93)%,明显低于单纯DM组(23.06±3.63)%,但高于对照组(5.69±1.37)%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MT能够抑制DM引起的大鼠海马神经细胞中Bcl-2蛋白水平的降低和细胞色素C的升高,抑制细胞凋亡率,MT可能通过改变蛋白的表达水平和抗凋亡能力发挥脑保护作用.     

拟除虫菊酯对大鼠脑组织γ-氨基丁酸转氨酶活力的影响

目的　研究拟除虫菊酯对大鼠脑组织γ 氨基丁酸转氨酶 (GABAT)活力的影响。方法　应用偶联酶学紫外分光光度法 ,在体外和整体实验中 ,观察溴氰菊酯 (DM)和氯菊酯 (PM)对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑GABAT活力的影响。结果　在体外 ,终浓度为 10 -9～ 10 -4mol/L的DM或PM对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑的GABAT活力无明显影响 ;一次性经口给予 37.5mg/kg的DM组大鼠大脑皮层、海马和小脑的GABAT活力分别为 (2 .96± 0 .4 3)、(2 .13± 0 .4 4 )、(5 .12± 1.36 )nmol·mgpro-1·min-1,低于对照组 [(3.4 3± 0 .4 1)、(2 .6 8± 0 .4 7)、(6 .74± 1.6 4 )nmol·mgpro-1·min-1],差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,6 0 0mg/kgPM一次性染毒组大鼠大脑皮层和海马的GABAT活力分别为(4.5 7± 0 .30 )、(4.18± 0 .6 3)nmol·mgpro-1·min-1,高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;连续 5d每天 1次经口给予 12 .5mg/kg的DM或 2 0 0mg/kg的PM ,均对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑的GABAT活力无明显影响。结论　在体外 ,DM和PM均对大鼠脑组织GABAT活力无明显影响 ;在整体实验中 ,DM和PM对大鼠脑组织GABAT活力的影响可能存在差异。     

铝对大鼠海马氨基酸类神经递质含量的影响

目的 从海马氨基酸类神经递质的角度,探讨铝的神经毒作用机制。方法 选择雄性SD大鼠,按体重随机分4组,在基础饲料中添加氧化铝,Al^3 剂量分别为0、11.2、55.9和111.9mg/kg体重,连续染毒90d。采用旷场行为和被动回避实验观察神经行为学改变,高效液相色谱法测定海马氨基酸类神经递质含量,原子吸收法测海马铝含量。结果 与给铝盐前比较,大鼠自发活动能力下降,被动回避潜伏期缩短。与对照组比较,Al^3 111.9mg/kg体重组海马天门冬氨酸、谷氨酰胺含量显升高,Al^3 55.9和111.9mg/kg体重组牛磺酸含量显升高,并均与染毒剂量呈明显正相关;各剂量组铝含量均显升高,并与染毒剂量呈明显正相关。结论 海马氨基酸类神经递质含量的改变可能是铝神经毒性的重要机制之一。     

溴氰菊酯对大鼠神经细胞胞内游离钙浓度及凋亡的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM )对神经细胞游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及凋亡的影响。方法　Wistar大鼠随机分为对照组与 3个染毒组 ,染毒组腹腔注射 1 2 .5mg/kg的DM ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 530 1PC荧光分光光度计测定染毒后 5、2 4、48h后大鼠神经细胞 [Ca2 + ]i浓度的变化 ;FACS42 0型流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果　PM染毒 5、2 4、48h组大鼠海马及皮层细胞 [Ca2 + ]i分别为 :5h组海马 :(389.94± 43 .64)nmol/L、皮层 :(449.33± 2 3 .2 3)nmol/L ;2 4h组海马 :(340 .47±32 .36)nmol/L、皮层 :(31 1 .62± 2 5 .48)nmol/L ;48h组海马 (2 87.1 3± 2 4 .2 9)nmol/L、皮层 :(346 .55±36 .87)nmol/L ,均高于对照组 [海马 :(2 0 3 .2 4± 1 8.53)nmol/L、皮层 :(2 2 6 .85± 1 4 .81 )nmol/L] ,差异有显著性 (P <0 .0 1 )。染毒 48h组大鼠此二项指标值较 5h组明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。染毒 2 4、48h组大鼠神经细胞凋亡率 [海马 :(8.45± 1 .0 2 ) %、(9.44± 1 .1 4 ) % ,皮层 :(7.90± 0 .49) %、(8.0 1± 0 .87) % ]均明显高于对照组 [海马 :(2 .97± 0 .36) %、皮层 :(3 .50± 0 .48) % ] ,差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ,且有时间 反应关系 (r=0 .940、0 .893)。结论　DM可影响大鼠神     

镧对大鼠大脑皮质兴奋性氨基酸和钙稳态的影响

目的 观察镧对大鼠学习记忆的影响,并从大脑皮质兴奋性氨基酸水平和钙稳态的角度探讨镧影响学习记忆的机制.方法 将40只雌性Wistar大鼠随机分为对照组和低、中、高剂量LaCl_3(0.25%,0.50%,1.0%)染毒组,每组10只.LaCl_3,染毒组仔鼠在出生至断乳后1个啁期间染镧,然后进行跳台测试,并测定大脑皮质中兴奋性氨基酸含量、细胞内钙离子浓度以及尼氏体表达水平.结果 跳台测试结果表明,LaCl_3,染毒组仔鼠的学习记忆能力明显低于对照水平,具有一定的剂量.效应关系;低、中剂量LaCl_3染毒组大脑皮质谷氨酸含量和细胞内Ca~(2+)浓度明显高于对照组,高剂量LaCl_3染毒组大脑皮质谷氨酸、天冬氨酸含量和细胞内Ca~(2+)浓度显著高于对照组和低、中剂量LaCl_3,染毒组.此外,低剂量LaCl_3染毒组大脑皮质神经细胞中尼氏体表达水平明显低于对照组,中和高剂量LaCl_3,染毒组大脑皮质神经细胞中尼氏体表达水平进一步降低.结论 本实验结果表明镧可能是通过使兴奋性氨基酸水平异常升高和钙稳态失衡的机制引起大脑皮质神经细胞损伤,造成学习记忆能力低下.     

电磁脉冲对大鼠海马氨基酸类神经递质水平的影响

目的　观察电磁脉冲 (electromagneticpulses,EMP)辐射对大鼠海马组织中氨基酸类神经递质的影响。方法　EMP辐射场强为 6× 10 4 V m ,脉冲上升时间 2 0ns,脉宽 30 μs,频率 2 .5脉冲 min ,作用 2min。二级雄性Wistar大鼠 32只 ,随机分为EMP组 (n =2 6 )和对照组 (n =6 ) ,EMP组大鼠接受辐射后分别于即刻及 3、6、2 4、4 8h断头取脑 ,制备海马组织上清液 ,用高效液相色谱法测定游离氨基酸含量。结果　EMP辐射后即刻及 3、6h ,大鼠海马组织天冬氨酸 (Asp)含量明显升高 [峰值 ( 17.2 5± 1.6 3)pmol μl],与对照组 [( 10 .5 6± 1.5 0 )pmol μl]相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,谷氨酸 (Glu)含量也于上述 3个时间点升高 [峰值 ( 13.6 7± 0 .95 )pmol μl],明显高于对照组 [( 6 .94± 1.10 )pmol μl],差异亦有显著性 (P <0 .0 5 ) ,两者含量均于辐射后 2 4h渐趋恢复 ,4 8h接近正常水平。大鼠海马组织 3种抑制性氨基酸 [甘氨酸 (Gly)、牛磺酸 (Tau)、γ 氨基丁酸 (GABA) ]的含量也于EMP辐射后不同时间点升高 ,最高水平分别为 ( 4 .5 1± 0 .6 0 )、( 2 9.85± 2 .70 )、( 5 .14± 0 .73)pmol μl,与对照组 [分别为 ( 2 .18±0 .31)、( 9.88± 1.4 7)、( 2 .84± 0 .6 7)pmol μl]比较 ,差异均有显著性     

MC-LR对小鼠卵巢颗粒细胞活性及雌孕激素分泌的影响

目的研究微囊藻毒素LR(MC-LR)对小鼠卵巢颗粒细胞活性及雌孕激素分泌的影响。方法所制备21日龄雌性小鼠卵巢颗粒细胞,以0、5、10和20μg/mL MC-LR染毒,分别于24、48和72h检测其增殖活性及雌孕激素分泌情况。结果染毒24h,随着剂量增加其增殖活性上升,20μg/mL剂量组高于对照组;染毒48和72h,其增殖活性下降,20μg/mL剂量组低于对照组。染毒24h,各剂量组的雌二醇分泌量增加,均高于与对照组,随着染毒时间延长分泌量下降;至72h,各剂量组的分泌量均明显低于对照组。随着染毒剂量增加和时间延长,孕酮分泌有不同程度的上升。结论 MC-LR对小鼠卵巢颗粒细胞具有细胞毒性并影响雌二醇和孕酮的分泌。     

氰戊菊酯和辛硫磷对大鼠背根节细胞钠通道的影响

目的　观察氰戊菊酯、辛硫磷农药单用和混用对成年大鼠背根神经节 (DRG)神经元钠通道的毒性作用。方法　应用膜片钳技术研究氰戊菊酯和辛硫磷对DRG河豚毒素敏感 (TTX S)和不敏感 (TTX R)型钠通道的作用。结果　氰戊菊酯明显延迟去极化时TTX R型钠通道的关闭时间 ,氰戊菊酯 10、5 0、10 0 μmol/L组和对照组钠通道峰电流失活时间常数分别为 (8 10± 2 41)ms、(11 78±2 76 )ms、(8 76± 1 94)ms和 (6 41± 1 32 )ms。氰戊菊酯还具有延长TTX R型钠通道尾电流的关闭时间 ,氰戊菊酯 10、5 0、10 0 μmol/L组和对照组尾电流失活时间常数分别为 (6 11± 0 5 2 )ms、(7 82±0 82 )ms、(7 2 3± 1 0 9)ms和 (4 91± 0 97)ms。氰戊菊酯对TTX S型钠通道的作用小于TTX R型 ,仅表现为对尾电流的关闭有延迟作用。辛硫磷对这两种亚型钠通道无明显影响 ,将氰戊菊酯和辛硫磷混配使用后 ,仅见氰戊菊酯作用的表现 ,未见氰戊菊酯和辛硫磷的联合作用。结论　氰戊菊酯影响DRG钠通道峰电流和尾电流 ,对TTX R型钠通道的作用大于TTX S型 ,未见氰戊菊酯和辛硫磷混配对钠通道的联合作用