原发性肝癌者外周血AFP mRNA的表达及其动态和意义

目的探讨AFP mRNA在原发性肝癌患者外周血的表达及其动态变化和临床意义.方法用巢式逆转录聚合酶链反应检测93例肝癌患者外周血AFP mRNA,并观察其中36例患者血AFP mRNA表达在治疗前后的动态变化.结果血AFP mRNA阳性率为52.7%(49/93),阳性率与肝癌临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、癌灶大小、HBV感染和肝硬化程度密切相关,并和癌组织中AFP mRNA的表达水平密切相关(P＜0.05).随访结果显示,外周血AFP mRNA呈阳性的病例发生肝内外转移率显著高于阴性病例,癌灶缓解期明显短于阴性病例(P均＜0.05).联合全身化疗和免疫治疗可显著降低肝癌患者外周血AFP mRNA的阳性率.结论外周血AFP mRNA阳性表达是预示肝癌发生肝内外转移的重要标志.联合全身化学免疫治疗可显著降低血AFP mRNA阳性率,对预防肝癌细胞的血行播散、降低肝内外转移率和提高患者预后可能有积极作用.     

巢式逆转录聚合酶链反应检测肝癌患者外周血AFP mRNA的临床意义

目的 评估肝细胞癌(HCC)患者外周血甲胎蛋白mRNA(AFP mRNA)检测的临床意义。方法 采用巢式逆转录聚合酶链反应技术，对肝癌患者外周血AFP mRNA进行检测。结果 37例肝癌患者中AFPmRNA阳性16例(43，2％)，25例肝硬变患者中AFPmRNA阳性2例(8.0％)，20例正常对照无1例阳性；AFP mRNA阳性的HCC患者肝外转移发生率(87．5％)显著高于AFP mRNA阴性的HCC患者(33．3％)，差异有显著性(x^2=10．856，P≤0.001，OR=14.00，95％可信区间CI=2．464～79.550)；不同临床分期的HCC患者其AFP mRNA检出率不同，Ⅲ期患者检出率(61．9％)明显高于I、Ⅱ期检出率(18．8％)；AFP mRNA的检出率与血清AFP水平不同无明显相关。结论 巢式RT—PCR方法是检测外周血残癌细胞AFP mRNA的一种灵敏可靠技术，检测外周血中的AFP mRNA可能对判断肝癌有无血行播散和病程的发展具有重要意义。     

原发性肝癌患者外周血AFP mRNA和MAGE-1mRNA水平的联合检测与术后复发转移的关系

目的寻找一种敏感的用于早期发现原发性肝癌患者术后复发与转移的检测方法.方法应用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)分别在术前、术后1周和术后两个月检测85例行根治性切除的原发性肝癌患者外周血中MAGE-1 mRNA和AFP mRNA的表达.结果外周血中MAGE-1 mRNA和(或)AFP mRNA的阳性率与肿瘤的病理分期呈正相关:肿瘤病期越晚,外周血中微转移灶的检出率越高(P<0.01).1年的随访中,有23例患者出现复发,MAGE-1和(或)AFP mRNA的阳性率为78.3%(18/23),而62例无复发患者阳性率为46.8%(29/62),二者比较差异有显著性(P<0.01).复发患者中,15例外周血中MAGE-1 mRNA和(或)AFP mRNA持续阳性,5例术前阴性者分别于术后5个月及8个月转为阳性,另外3例术前、术后均保持阴性.经术后1年随访,无肿瘤复发的62例患者中有24例MAGE-1 mRNA和(或)AFP mRNA由术前阳性转为术后阴性.AFP mRNA阳性率与血浆AFP水平呈正相关(P<0.01),MAGE-1 mRNA阳性率与血浆AFP水平无相关性(P>0.05).外周血AFP mRNA和MAGE-1 mRNA阳性率与肿瘤直径均无相关性(P>0.05).结论联合检测外周血MAGE-1和AFP mRNA的表达是早期发现肝癌术后复发、评估预后的一项敏感可信的指标.     

肝癌患者围手术期外周血甲胎蛋白mRNA表达与术后复发的关系

背景与目的:甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)mRNA是检测肝癌患者外周血中癌细胞常用的标志物。本研究探讨肝癌患者围手术期的外周血中AFPmRNA表达与术后复发的关系。方法:应用巢式PCR和Taq Man MGB探针法PCR定量技术,检测56例肝细胞癌患者术前和术后外周血、15例良性肝占位性病变合并肝硬化患者外周血以及30例健康志愿者外周血AFP mRNA的表达情况。结果:肝癌患者术前外周血AFP mRNA的阳性率为42.9%(24/56),高于良性肝占位合并肝硬化患者的13.3%(2/15)和健康对照的10.0%(3/30),其差异均有统计学意义(P=0.035,P=0.002)。术前AFP mRNA的表达与肿瘤有无肉眼及镜下血管侵犯的相关性有统计学意义(P=0.029,P<0.001)。AFP mRNA阴性患者1、2、3年生存率及无瘤生存率均比AFP mRNA阳性患者术后高(P=0.003,P=0.039)。Cox多因素分析结果显示术前外周血AFP mRNA阳性是预测术后复发的独立因素(P=0.018)。术后患者外周血AFP mRNA的阳性率为37.5%(21/56),术后AFP mRNA的表达与患者各项临床病理特征、预后以及术前AFP mRNA水平的相关性均无统计学意义。结论:肝癌患者术前外周血中AFP mRNA阳性者比AFP mRNA阳性者肿瘤侵袭性更强,术后可能更易复发。     

HBV DNA阳性肝癌患者血清HBeAg检测与肝细胞癌复发转移的关系

目的:研究HBV DNA阳性肝癌(HCC)患者血清HBeAg检测与肝细胞癌复发转移的关系.方法: HBV DNA阳性HCC肝切除术患者60例,HBV DNA阴性HCC肝切除术患者60例.60例HBV DNA阳性HCC患者中依据肿瘤病灶局限、肉眼以及镜下均无肝内播散和门静脉浸润的低侵袭组,共28例;肿瘤组织伴有多发性肝内播散和(或)门静脉主肝癌栓者为高侵袭组,共32例.检测患者术前及术后1周血清HBV DNA水平,观察肝功能变化并检测血清HBeAg水平.结果:HBV DNA阳性组与HBV DNA阴性组比较,60例HBV DNA阳性HCC患者中HBeAg阳性患者为48例,阳性率为80%,60例HBV DNA阴性HCC患者中HBeAg阳性患者为12例,阳性率为20%,(P<0.05).不同侵袭组HBeAg表达比较: 32例高侵袭组中29例HBeAg检测阳性,阳性率为90.62% ,28例低侵袭组中19例HBeAg检测阳性, 阳性率为67.86%,(P<0.05).结论:早期肝癌患者血清HBV DNA和HBeAg可作为肝细胞癌复发转移监测指标.     

肝组织和外周血中AFP mRNA定量分析及临床应用的研究

目的：通过检测AFP mRNA在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)患者肝组织和外周血中的基因表达，探讨AFP mRNA相对定量值作为HCC微转移指标的可能性，建立HCCAFP mRNA相对定量分析法。方法：建立敏感的巢式逆转录聚合酶链反应体系(Nested-RT-PCR)，对肝组织和外周血中的AFP mRNA进行相对定量值分析。结果：在49例HCC及其癌旁和远癌组织、12例非肝肿瘤组织和8例正常肝组织中AFP mRNA相对定量值阳性分别为35例(71．4％)、20例(40．8％)、3例(6．1％)、0例、0例；35例肝癌患者中有23例术前外周血AFP mRNA相对定量值为阳性(65．7％)，明显高于肝硬化、急性肝炎、慢性肝炎患者和正常人外周血；HCC患者外周血术后72hAFP mRNA相对定量值的阳性率22．9％(8／35)，与术前比较差异有统计学意义，P＜0．01。结论：肝组织和外周血中AFP mRNA相对定量分析可提高HCC阳性诊断率，并可作为HCC微转移的早期检测指标。治疗前后的变化对指导临床治疗及评价HCC治疗效果有重要参考价值。     

外周血GGTmRNA-H亚型表达与原发性肝癌转移的关系

目的:探索外周血GGTmRNA-H亚型表达与肝癌血源性播散的关系.方法:以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测原发性肝癌(HCC)、肝转移癌、良性肝病患者及健康者外周血γ-谷氨酰转移酶mRNA-H亚型(GGTmRNA-H).结果:38例HCC患者中有16例检出GGTmRNA-H,阳性率为42.1%.肝转移癌、良性肝病及健康者均为阴性.外周血GGTmRNA-H阳性率与临床分期、肝内转移、门静脉癌栓和远处转移密切相关.结论:外周血GGTmRNA-H是反映HCC患者有无血源性播散的重要标志,并对AFP阴性或低值的HCC患者有补充诊断的作用.     

原发性肝癌患者肿瘤组织生长抑素受体表达与血AFP水平的相关性

背景与目的:生长抑素类似物(somatostatin analogue,SSTA)对部分原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者具有一定疗效,但HCC患者肿瘤组织中生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)表达状况不详,其与血甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)的相关性也未见探讨.本研究拟了解肝癌组织中SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5亚型的表达状况及其与血AFP的相关性.方法:逆转录-聚合酶链反应及免疫组织化学法分别检测人肝癌及肝硬化组织(各40例)SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5亚型的mRNA及蛋白表达:酶联免疫吸附试验检测HCC患者肿瘤组织及外周血AFP水平.结果:肝癌组织中SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5蛋白阳性率(分别为47.5%、70.0%、50.0%、65.0%及67.5%)显著高于肝硬化组织(分别为55.0%、67.5%、52.5%、60.0%及47.5%).肝癌组织中SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5表达与患者血AFP水平呈二次曲线正相关(r依次为0.882、0.901、0.877、0.854、0.903,P＜0.05).血AFP水平在200～800 μg/L范围时,伴有肝癌组织SSTRs的高表达,过低或过高的血AFP水平伴有SSTR低表达.结论:约60%HCC患者的肿瘤组织表达了SSTRs,其表达量明显高于肝硬化组织;15 AFP水平在200-800μg/L的HCC患者伴有肝癌组织SSTRs的高表达,提示为SSTA治疗的适宜候选者.     

RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其表达的临床意义.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,分别检测非小细胞肺癌患者和对照组患者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:43例非小细胞肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达阳性率为56%,对照组阳性率为5%,两组外周血CK19 mRNA阳性率比较有显著性差异(P＜0.01);外周血CK19 mRNA阳性率与病理类型无相关性;淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19 mRNA阳性率分别为66%(21/32)和18%(2/11),二者差异显著(x2=6.65,P＜0.05).随TNM分期上升,CK19mRNA阳性率增加(x2=18.03,P＜0.01).结论:CK19 mRNA可作为RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的分子标志物,该方法敏感性高,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床分期和治疗.     

MAGE-1 MAGE-3及AFP基因在肝癌组织中的表达

目的：探讨MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA在肝癌组织中的表达及用于检测微小转移的可能性。方法：应用聚合酶链反应（PCR）检测86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的表达。结果：86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的阳性率分别为34.9%（30/86）、60.5%（52/86）和69.8%（60/86）;所有患者肝癌组织至少表达其中一种mRNA。结论：MAGE-1、MAGE-3结合AFP mRNA在肝癌组织中表达率较高,有可能用于联合检测肝癌血行微小转移。     

肝细胞癌高表达中期因子蛋白与肝内转移的关系

目的 探讨中期因子（midkine,MK)蛋白在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达特点、水平及其与肝内侵袭、转移的可能关系。方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹等方法,对33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MK蛋白定位表达及表达水平的研究,并结合肝内有无卫星灶形成进行分析。结果 免疫组织化学结果与Western印迹结果具有一致性（P＞0．05）。在正常肝组织及良性肝病变组织中,MK无表达;而在HCC组织中,MK高表达。在癌旁肝硬化组织中,MK微量表达;而在肿瘤侵袭前沿区域,MK表达则增强。HCC中MK表达率与其组织学类型、组织分级、瘤体大小、包膜状况、AFP值之间差异均无显著性（P＞0．05）,但在有卫星灶形成的HCC中,MK蛋白表达率显著高于无卫星灶形成者（P＜0．05）。结论 HCC在蛋白水平上表达MK增加,并可能与肝内侵袭、转移有关。     

Glypican-3基因在甲胎蛋白阴性肝癌中的表达

Objective: To investigate the expression of Glypican-3 gene in α-fetoprotein (AFP)-negative hepatocellular carcinoma (HCC) and clarify whether Glypican-3 expression is a useful parameter for the diagnosis of hepatocellular carcinoma (HCC), especially for AFP-negative ones. Methods: Forty-one specimens of AFP-negative hepatocellular carcinoma and para-carcimoma tissue were studied for the expression of Glypican-3 by Northern blot. The expression of Glypican-3 protein was detected immunohistochemically with specific polyclonal antibody. Results: Northern blot analysis indicated that the expression of Glypican-3 mRNA was intensively detected in 30 of 41 AFP-negative HCC (73.17%). In contrast, Glypican- 3 mRNA was only weakly detected in 4 of the surrounding non-tumor liver tissues. There was significant difference in the Glypican-3 mRNA expression in large tumors (>5 cm) (79.31%) and in small tumors (≤5 cm) (41.67%) (P<0.01). Glypican-3 mRNA was more frequently overexpressed in poorly differentiated HCC than in well differentiated ones (76.47% vs. 42.86%, P<0.05). The Glypican-3 expression was not correlated with age, sex, HbsAg seropositivity, fibrocapsule, portal venous embolus and intrahepatic metastasis. The overexpression of Glypican-3 protein in HCC was targeted in tumor cells, not in bile duct cells and other interstitial cells. Conclusion: Glypican-3 was specially overexpressed in AFP-negative HCC, and its expression was closely correlated with the tumor size and tumor grade. Glypican-3 gene may play important roles in hepatocarcinogenesis, and can be used as a new biochemical marker of HCC, especially for AFP-negative HCC.     

肝癌患者手术后外周血AFP mRNA的检测及其与术后复发的关系

目的探讨肝癌患者手术后外周血AFPmRNA的检测及其与术后复发的关系。方法原发性肝癌手术治疗患者29例,对照组为15例非原发性肝癌但须行肝部分切除手术者。分离术后第1,7和14天外周血单个核细胞,提取单个核细胞的总RNA,进行RT-PCR和Southern杂交,检测AFP mRNA,并对肝癌患者进行36个月的随访。结果全组有18例原发性肝癌患者复发。术后3次检测外周血AFP mRNA不全阴性者17例,其中14例复发,复发率为82.4%;3次检测均为阴性者12例,有4例复发,复发率为33.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组手术后外周血AFP mRNA检测均为阴性。结论原发性肝癌患者手术后外周血AFP mRNA的检测可以预测肝癌的复发情况。     

人肝癌、癌旁组织中AFPmRNA的差异性分析

本研究用RT-PCR方法检测52例原发性肝癌(HCC)病人手术标本中AFPmRNA转录水平,结果发现,AFPmRNA在肝癌组织中阳性率为76.9%;有慢性肝病(尤其是中重度肝硬化)的病人癌组织中AFP表达的阳性率可达88.8%,癌旁为69.4%;无慢性肝病(肝硬化)的病人中,其癌组织中AFPmRNA阳性率为50%,癌旁组织中无AFP表达.由此可见,AFP蛋白是由肝癌细胞特异表达的,或由正发生突变的肝细胞表达的.另外,本文还研究了AFRmRNA与肿瘤大小、包膜、肝内转移以及与血清AFP水平的关系.     

外周血AFP mRNA表达与原发性肝癌转移的关系

目的 通过检测手术或介入治疗前后的肝癌患者外周血甲胎蛋白信使核糖核酸（ＡＦＰ ｍＲＮＡ）的表达,了解原发生性肝癌的血行播散情况及肝癌综合治疗的病理生理基础。方法 采用巢式逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测技术,对５４例原发性吕患者外周血样本ＡＦＰｍＲＮＡ的表达进行了研究。结果 ５４例样本中,２６例（４８．１％）ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性,２０例正常人及１０例良性肝病患者分别只有１例阳性。１６例伴     

肝细胞癌临床病理学特征与p53蛋白表达的关系

应用免疫组织化学技术检测29例肝细胞癌（肝癌）和23例肝硬化标本中突变型p53蛋白的表达，并探讨后者与肝癌临床病理学特征之间的关系。结果：肝癌突变型p53蛋白表达阳性率为70％（20／29），癌旁组织阳性率为60％（18／29），肝硬化组织阳性率为30％（7／23），有血管侵犯的12例肝癌变变型p53蛋白表达均为阳性，而无血管侵犯的17例中仅8例为阳性（P＜0．05）；突变型p53蛋白阳性组血清甲胎蛋白（AFP）明显高于阴性组（8370±4764ng／ml比98．7±64．3ng／ml，P＜0．05）。提示：P53蛋白表达在肝硬化时即发生了异常；p53蛋白异常可能是AFP基因被激活的原因之一；p53蛋白异常有利于肝癌向门静脉转移。