瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓核呼吸因子1表达的变化

目的探讨切口痛大鼠经瑞芬太尼诱发痛觉过敏时脊髓核呼吸因子1表达的临床变化。方法临床纳入52例健康雄性SD大鼠,体重(182-224)g,根据诱发药物的不同分为四组,分别是对照组、切口痛组、瑞芬太尼组及(切口痛+瑞芬太尼)组,每组13只;对照组和切口痛组大鼠麻醉后皮下输注生理盐水,切口痛组和(切口痛+瑞芬太尼)组制定右后足切口痛模型,(切口痛+瑞芬太尼)组经皮开始同时皮下输注瑞芬太尼;于术前24h、术后2h、6h、24h、48h测定后足机械缩足阈(PWMT),同时采用免疫荧光染色法检测NRF-1的表达情况。结果切口痛组和(切口痛+瑞芬太尼)组术后个时点的PWMT明显低于对照组,脊髓NRF-1的表达水平冥想上升,P0.05;(切口痛+瑞芬太尼)组术后各时点PWMT明显低于切口痛组,且脊髓NRF-1的表达水平明显升高,P0.05。结论瑞芬太尼通过调节脊髓核呼吸因子1(NRF-1)的表达,可以诱发切口痛大鼠的痛觉过敏。     

瑞芬太尼对切口痛大鼠脊髓iNOS mRNA和FOS蛋白表达的影响

目的:观察瑞芬太尼对切口痛大鼠脊髓诱导型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA及FOS蛋白表达的影响,探讨瑞芬太尼诱发痛觉过敏的可能机制。方法:48只SD大鼠随机分为4组(n=12):对照组(C组),切口痛组(I组),瑞芬太尼1组(R1组),瑞芬太尼2组(R2组)。分别于术前24 h(基础值),术后24,48 h测定机械性痛阈。痛阈测定后,测定脊髓i NOS mRNA和FOS蛋白表达。结果:与术前24 h比较,术后I组、R1组和R2组机械痛阈降低;与C组比较,I组、R1组和R2组机械性痛阈降低;与I组比较,R1组和R2组机械性痛阈降低;与R1组比较,R2组机械性痛阈升高(P<0.05或P<0.01)。与C组比较,I组,R1组和R2组i NOS mRNA和FOS蛋白表达上调;与I组比较,R1和R2组i NOS mRNA和FOS蛋白表达上调;与R1组比较,R2组i NOS mRNA和FOS蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01)。结论:瑞芬太尼可能通过上调切口痛大鼠脊髓i NOS mRNA和FOS蛋白表达而诱导痛觉过敏。     

活性氧激活的脊髓星形胶质细胞参与瑞芬太尼诱发的痛觉过敏

【目的】观察活性氧能否通过激活脊髓星形胶质细胞从而介导瑞芬太尼诱发的痛觉过敏。【方法】72只SD大鼠随机分成6组,每组12只:对照组(C)、瑞芬太尼组(R)、瑞芬太尼+腹腔注射生理盐水组(R+Si.p)、瑞芬太尼+腹腔注射活性氧清除剂N-叔丁基-α-苯基硝酮(PBN)组(R+PBN)、瑞芬太尼+鞘内注射生理盐水组(R+Si.t)、瑞芬太尼+鞘内注射星形胶质细胞抑制剂L-α-氨基己二酸(L-α-AA)组(R+L-α-AA)。成年雄性SD大鼠静脉输注瑞芬太尼4μg/(kg·min)2 h建立痛敏模型,采用von Frey及Hargreaves法观察抑制活性氧生成或星形胶质细胞激活对瑞芬太尼诱发痛觉过敏的影响。鞘内注射线粒体荧光探针Mito SOX Red探测脊髓线粒体中活性氧产生水平及分布,免疫荧光以及免疫印迹方法观察脊髓背角星形胶质细胞的激活。【结果】静脉输注瑞芬太尼后24 h后引起大鼠机械阈值(R组:30±2.58;C组:50±1.80;P<0.05)和热痛阈值(R组:5.5±1.70;C组:10.0±1.21;P<0.05)显著下降。与对照组相比,瑞芬痛敏组大鼠脊髓GFAP于输注瑞芬后2h表达显著上调(R组:0.16±0.009;C组:0.10±0.008;P<0.01),且脊髓神经元活性氧水平显著增加(R组:0.14±0.008;C组:0.04±0.005;P<0.01)。预先腹腔内注射PBN后第1天不仅显著抑制大鼠脊髓星形胶质细胞激活(R组:0.16±0.009;R+PBN组:0.10±0.007;P<0.01),且减轻瑞芬太尼诱导的机械痛敏(R组:30.0±2.58;R+PBN组:45.0±2.81;P<0.05)和热痛敏(R组:5.5±1.70;R+PBN组:9.4±1.00;P<0.05)。【结论】活性氧激活的星形胶质细胞介导了瑞芬太尼诱发的痛觉过敏,抑制活性氧介导的星形胶质细胞激活可能是减轻瑞芬太尼诱发痛觉过敏的潜在靶点。     

咪唑安定复合瑞芬太尼在人流术中的应用

目的:评价咪唑安定复合瑞芬太尼在门诊人流术中运用的可行性与安全性。方法:选择自愿作无痛人流术患者60例,随机分为3组,即瑞芬太尼组(R组)、咪唑安定复合瑞芬太尼组(RM组)及对照组。术前2min RM组静注咪唑安定0.04mg/kg,其余两组予相应剂量的生理盐水;术前1min R组及RM组静注瑞芬太尼0.1μg/kg,对照组静注相应剂量的生理盐水。结果:术中血压、血氧、心率,R组、RM组与对照组比较存在显著性差异(P<0.05);R组、RM组术前、术中比较存在显著性差异(P<0.05);焦虑发生率RM组与其他两组存在显著性差异(P<0.05);术后各项指标无显著性差异(P>0.05)。结论:咪唑安定复合瑞芬太尼运用于无痛人流术中是安全可行的。     

细胞周期素依赖蛋白激酶-5抑制剂Roscovitine对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛行为的影响

目的 探讨预先鞘内注射细胞周期素依赖蛋白激酶-5(Cdk5)抑制剂Roscovitine对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛行为的影响.方法 SD雄性大鼠45只,随机数字表法分成5组(n=9):对照组(C)、切口痛组(Ⅰ)、瑞芬太尼组(R)、Roscovitine组(ROS)、Roscovitine+瑞芬太尼组(ROS+ R).ROS,ROS+R组术前30 min鞘内给予Roscovitine10μl(50μg),余组给予20％ DMSO10μl.除C组外均制作切口痛模型;R和ROS+R组切皮同时皮下泵注瑞芬太尼0.4ml (0.04mg/kg) 30 min.于术前24h、术后2h、6h、24h、48h检测大鼠术侧足底机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 与C组相比,Ⅰ组术后PWMT、PWTL明显降低(P＜0.01).与Ⅰ组相比,R组术后PWMT,PWTL明显降低(P＜0.01);而ROS组术后PWTL明显升高[2h:(20.26±1.33)s,(17.97±0.47) s;48h:(22.15±0.60)s,(19.89±1.27)s] (P＜0.05).ROS+R与R组相比,术后2h PWTL[ (19.13±1.72)s,(14.41±2.30)s]及PWMT[(10.4±1.95)g,(6.38±0.91)g]开始升高,分别持续至48h[(19.24±2.80)s,(14.87±1.95)s]和24h[ (8.88±1.41)g,(6.83 ±0.80)g] (P＜0.05).结论 Roscovitine能减轻大鼠切口引起的热痛敏,并能缓解瑞芬太尼诱发的切口痛大鼠痛觉过敏.     

大麻素受体2激动剂JWH015对瑞芬太尼诱发痛觉过敏的影响

目的 探讨大麻素受体2( cannabinoid receptor 2,CB2R)激动剂JWH015对瑞芬太尼诱发的切口痛模型大鼠痛觉过敏的影响.方法 60只雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分成2大组:鞘内给药组和腹腔给药组.每大组又随机分为5小组:鞘内给药组分为对照组1(C1组)、切口痛组1(I1组)、瑞芬太尼组1(R1组)、切口痛+JWH015组(QI组)、切口痛+瑞芬太尼+JWH015组(QR组);腹腔给药组分为对照组2(C2组)、切口痛组2(I2组)、瑞芬太尼组2(R2组)、切口痛+JWH015组(FI组),切口痛+瑞芬太尼+ JWH015组(FR组),每组6只.QI组与QR组在造模前30 min鞘内注射10μg JWH015,C1、I1、R1组均鞘内给予20％的二甲基亚砜(DMSO)溶液,容积均为10μl;而FI组与FR组在造模前30 min腹腔注射100 μg JWH015,C2、I2、R2组均腹腔给予4％的DMSO溶液,容积均为0.5ml.除C1/C2组外,其余各组均制作切口痛模型,R1/R2组、QR组和FR组在造模的同时皮下泵注瑞芬太尼0.04 mg/kg,其余组皮下泵注生理盐水,容积均为0.4ml,30 min泵完.测量术前24h及术后2,6,24,48 h大鼠手术切口同侧后爪的机械缩足反射阈值(PWMT)及热缩足潜伏期(PWTL).结果 与C1/C2组和基础值比较,I1/I2组术后PWMT和PWTL均降低(P＜0.01);与I1/I2组比较,R1/R2组术后PWMT和PWTL均明显降低(P＜0.05);与R1/R2组相比,QR组从术后6h的PWMT[ (7.78±1.09)g]和PWTL[( 17.28±1.58)s]开始明显升高(P＜0.05),与FR组在术后6h、24h和48 h的PWMT[ (7.79 ±0.72)g,(9.50±1.17)g,(7.86±1.16)g]和PWTL[ (16.23±1.50)s,(19.53±1.63)s,(18.10 ±0.93)s]升高的结果一致.结论 鞘内及腹腔注射JW H015均可以有效缓解由瑞芬太尼诱发的切口周围组织痛觉过敏.     

羟考酮对瑞芬太尼致切口痛大鼠痛觉敏化的干预机制研究

目的:观察羟考酮对瑞芬太尼致切口痛大鼠痛觉敏化的干预机制。方法:选择健康雄性SD大鼠40只,按照随机数字表法分为5组,每组各8只:切口痛+瑞芬太尼+羟考酮组[I+R+O组,切口痛模型建立前30 min皮下注射10 μg/kg羟考酮,建立切口痛模型同时经尾静脉输注瑞芬太尼1.2 μg/(kg·min)];切口痛+羟考酮组(I+O组,切口痛模型建立前30 min皮下注射10 μg/kg羟考酮);切口痛+瑞芬太尼(I+R组,建立切口痛模型同时经尾静脉输注瑞芬太尼1.2μg/(kg·min)]、切口痛(I组,建立切口痛模型)、空白对照组(C组,皮下注射等量生理盐水)。采用全自动热痛刺激仪和Von Frey纤毛机械刺激针测量各组大鼠术前24 h(T_0)、术后6 h(T_1)、术后24 h(T_2)、术后48 h(T_3)测定左后足的热缩足反射潜伏期(PWTL)和机械缩足反射阈值(PMW)。Western免疫印迹检测L_(4～5)脊髓背角磷酸化NR2B表达。结果:T_1～T_3时刻,与I组比较,I+R组大鼠PWTL值明显减小,差异均有统计学意义(P0.05);T_1～T_2时刻,与I+R组比较,I+R+O组大鼠PWTL值明显增大,差异均有统计学意义(P0.05);T_1～T_3时刻,与I组比较,I+R组大鼠PMW值明显减小,差异均有统计学意义(P0.05);T_1～T_3时刻,与I+R组比较,I+R+O组大鼠PMW值明显增大,差异均有统计学意义(P0.05)。Western免疫印迹检测显示,与I组比较,I+R组术后48 h L_(4～5)脊髓背角磷酸化NR2B表达增加,差异有统计学意义(P0.05);与I+R组比较,I+R+O组术后48 h L_(4～5)脊髓背角磷酸化NR2B表达减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论:瑞芬太尼可诱发切口痛大鼠痛觉敏化,而羟考酮可以有效缓解痛觉敏化,这一作用机制可能与抑制脊髓背角NMDA受体亚基NR2B磷酸化有关。     

氟比洛芬酯对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠疼痛过敏时脊髓p38MAPK表达的影响

目的:观察氟比洛芬酯对切口痛大鼠疼痛过敏时脊髓丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响。方法:取成功建立切口痛模型的SD大鼠40只,随机分为5组(n=8):基础组(K组)、瑞芬太尼组(R组)、氟比洛芬酯1mg/kg组(F1组)、氟比洛芬酯2mg/kg组(F2组)及氟比洛芬酯3mg/kg组(F3组)。实验开始时K组和R组大鼠分别在腹部皮下注射生理盐水0.2ml,F1、F2、F3组大鼠分别腹部皮下注射氟比洛芬酯1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg;5组大鼠均在戊巴比妥钠麻醉下行切口痛手术,K组大鼠切口痛手术后腹部皮下泵注生理盐水1μg/(kg·min)2h,其余4组大鼠腹部皮下泵注瑞芬太尼1μg/(kg·min)2h。所有大鼠均测定术前24h及术后6h、24h、48h左后爪的热缩足反射潜伏期(TWL);术后48h行为学检测后每组选取2只大鼠拉颈处死取L4~5脊髓处理后行Western blot检测。结果:5组大鼠切口侧跖底TWL基础值比较差异无统计学意义(P>0.05);与K组比较,R组大鼠在术后6h、24h、48h右后侧跖底TWL值降低(P<0.05)。与R组比较,F2组、F3组大鼠右后侧跖底TWL值增高(P<0.05);与K组比较,R组大鼠脊髓背角p38MAPK蛋白表达明显升高(P<0.05),与R组比较,F2、F3组大鼠脊髓背角p38MAPK蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:氟比洛芬酯能在一定程度上抑制由瑞芬太尼诱发的切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓p38MAPK蛋白的表达,这可能是氟比洛芬酯减轻瑞芬太尼诱发的疼痛过敏的机制之一。     

瑞芬太尼与利多卡因用于预防小儿丙泊酚注射痛的对比研究

目的 比较预先注射瑞芬太尼和混合注射利多卡因预防丙泊酚注射痛的效果.方法 150例拟行全身麻醉的手术患儿,ASAⅠ～Ⅱ级,年龄3～10岁,随机分为利多卡因、瑞芬太尼Ⅰ组(R0.25)和瑞芬太尼Ⅱ组(R0.5),每组50例.利多卡因组患儿注射丙泊酚(AstraZeneca)2.5 mg/kg,混合利多卡因浓度为丙泊酚100 mg混合利多卡因10 mg,瑞芬太尼组Ⅰ(R0.25)缓慢静注瑞芬太尼0.25 靏/kg,瑞芬太尼组Ⅱ(R0.5)缓慢静注瑞芬太尼0.5 靏/kg.60 s后静脉注射丙泊酚2.5 mg/kg.用Cameron 的疼痛评分方法 进行注射疼痛的评分.结果 利多卡因组、瑞芬太尼组Ⅰ、瑞芬太尼组Ⅱ分别有1例(2%)、5例(10%)、2例(4%)患儿重度疼痛.利多卡因组和瑞芬太尼组Ⅱ(R0.5)之间的疼痛评分无显著性差异.瑞芬太尼组Ⅰ(R0.25)的疼痛程度比利多卡因组和瑞芬太尼组Ⅱ(R0.5)高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 预注0.5 靏/kg的瑞芬太尼与丙泊酚混合利多卡因注射对预防小儿丙泊酚注射痛的效果较好,两者疗效相当,而预注0.25 靏/kg瑞芬太尼的效果较差.     

侧脑室内注射神经肽S对瑞芬太尼所致痛觉过敏小鼠镇痛效果的研究

目的 研究侧脑室内注射神经肽S 对瑞芬太尼痛觉过敏小鼠镇痛效果的影响。方法 将雌性SPF 级BALB/c 小鼠随机分为对照组、切口痛组、瑞芬太尼组和切口痛-瑞芬太尼组。待切口痛-瑞芬太尼组小鼠造模成功后侧脑室注射给药，分为NS（生理盐水）组和2 nmol/L NPS 组（神经肽S）、4 nmol/L NPS 组、6 nmol/L NPS 组、8 nmol/L NPS 组。通过侧脑室注射不同剂量NPS 及NS，检测小鼠机械痛缩足阈值和热辐射缩足潜伏期。结果 与同组基础值相比，术后切口痛组、瑞芬太尼组和切口痛-瑞芬太尼组的机械痛缩足阈值和热辐射缩足潜伏期明显减少；术后6 h、24 h、48 h 与对照组相比，切口痛组、瑞芬太尼组和切口痛-瑞芬太尼组的机械痛缩足阈值和热辐射缩足潜伏期明显减少；成功构建切口痛-瑞芬太尼组痛觉过敏小鼠模型并侧脑室注射给药后，与NS 组相比较，NPS 组给药后的小鼠机械痛缩足阈值和热辐射缩足潜伏期明显增加；与给药前相比，NPS 各浓度组的小鼠机械痛缩足阈值和热辐射缩足潜伏期在给药后30 min 内随着时间的延长而增加。结论 在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏小鼠疼痛模型中，侧脑室注射NPS 对瑞芬太尼引起的痛觉过敏有明显的镇痛效果。     

大鼠切口痛模型中氯化锂对瑞芬太尼诱发痛觉过敏的影响

目的:在大鼠切口痛模型中,观察氯化锂对瑞芬太尼引起的痛觉过敏的影响。方法:42只SD雄性大鼠,随机分成7组:对照组(C组);切口痛组(I组);瑞芬太尼组(R组);切口痛+氯化锂组(IL组);切口痛+瑞芬太尼+低浓度氯化锂组(RL1组);切口痛+瑞芬太尼+中等浓度氯化锂组(RL2组);切口痛+瑞芬太尼+高浓度氯化锂组(RL3组)。每组6只。IL组给予氯化锂36 mg/kg体重;RL1、RL2、RL3组分别给予氯化锂9、18、36 mg/kg体重,均在七氟醚吸入前10 min腹腔注射,体积均为0.4 ml,而C、I、R组给予生理盐水0.4 ml。R组和各RL组均在七氟醚吸入后15 min在皮下以0.8 ml/h的速度泵入瑞芬太尼40μg/kg体重,C、I、IL组泵生理盐水。除C组外均做切口痛模型。各组均测定并计算出术前24 h(T0)、术后6 h(T1)、24 h(T2)、48 h(T3)大鼠右后爪的机械缩足反射阈值(PMW)及热缩足反射潜伏期(PWTL)。结果:在T1、T2、T3时点,与I组相比,R组的PMW和PWTL明显降低(P<0.05)。与I组相比,IL组能缓解PMW和PWTL的降低(P<0.05)。与R...     

大鼠切口痛模型中右美托咪定对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响

目的 研究大鼠切口痛模型中右美托咪定(DEX)对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机均分成5组:对照组(C),切口痛组(I),切口痛+瑞芬太尼组(R),切口痛+DEX组(ID),切口痛+瑞芬太尼十DEX组(RD).ID、RD组于七氟醚麻醉前10min腹部皮下注射DEX50 μg/kg.除C组外均需制作切口痛模型.切口痛制作方法:右后爪跖肌位置纵行切开1 cm长的皮肤和筋膜,皮肤行褥式缝合.各组均测定并计算出术前24h(T0),术后6h(T),24h(T2),48h(T3)大鼠右后爪的机械缩足反射阈值(PMW)及热缩足反射阈值(PWTL).结果 在T1、T2、T3时点,与I组[(7.70±0.67)g,(10.79±1.83)g,(10.97±1.87)g]相比,R组[(3.72±0.71)g,(6.54±1.27)g,(7.27±1.53)g]的PMW明显降低(P＜0.05);与Ⅰ组[(20.74±2.72)s,(16.56±1.38)s,(22.55±2.01)s]相比,R组[(11.81±2.52)s,(11.27±2.30)s,(12.30±2.21)s]的PWTL明显降低(P＜0.05).与Ⅰ组相比,ID组只能缓解T1时点PMW的降低(P＜0.05).与R组相比,RD组可以缓解T1[(14.03±1.01)g]、12[(14.27±1.33)g]、T3(14.26±1.58)g]时点的PMW值的降低(P＜0.05)及T1[(23.56±1.53)s]、T2[(16.54±3.24)s]时点的PWTL值的降低(P＜0.05).结论 大鼠切口痛模型中,瑞芬太尼可以诱发切口周围组织的痛觉过敏;右美托咪定可以预防瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.     

脊髓CCL2在瑞芬太尼诱导的大鼠痛觉过敏中的作用机制

【目的】观察脊髓趋化因子配体2（CCL2）通过激活小胶质细胞介导瑞芬太尼诱导的痛觉过敏。【方法】36只成年雄性SD大鼠随机平均分为6组,每组6只,生理盐水组,瑞芬太尼组,生理盐水+鞘内注射磷酸盐缓冲液（PBS）组,瑞芬太尼+鞘内注射PBS组,生理盐水+鞘内注射CCL2中和抗体组,瑞芬太尼+鞘内注射CCL2中和抗体组。瑞芬太尼组大鼠通过尾静脉连续输注瑞芬太尼4μg（/kg·min）2h,建立瑞芬太尼诱导的痛觉过敏模型。采用免疫荧光组织化学和蛋白印迹法,观察瑞芬太尼痛敏大鼠脊髓CCL2的表达。另外,观察瑞芬太尼输注前30min预先鞘内注射CCL2中和抗体,对瑞芬太尼诱导的大鼠痛觉过敏以及脊髓小胶质细胞激活的影响。【结果】瑞芬太尼组与生理盐水组相比大鼠热痛和机械痛阈值明显下降（P<0.05）,建模后第1天大鼠脊髓CCL2蛋白表达水平（0.66±0.07vs.0.18±0.04;P<0.001）和平均荧光密度（0.170±0.009vs.0.047±0.006;P<0.001）显著升高;预先鞘内注射CCL2中和抗体不仅抑制瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓小胶质细胞的激活（P<0.001）,而且显著缓解瑞芬太尼引起的大鼠热痛过敏和机械痛过敏（P<0.05）。【结论】CCL2通过激活大鼠脊髓小胶质细胞介导瑞芬太尼诱发的痛觉过敏。     

钙蛋白酶1在瑞芬太尼诱发大鼠疼痛过敏中的作用

目的：探讨钙蛋白酶1（CANP1）及其相关信号通路在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏中的作用。方法：以尾静脉和鞘内置管合格的SD大鼠建立切口痛模型,设立对照组、瑞芬太尼组、瑞芬太尼+U0126组和瑞芬太尼+Calpeptin组;瑞芬太尼诱发模型切口疼痛,MEK激酶抑制剂U0126预处理抑制脊髓MEK活性,钙蛋白酶（CANP）特异性抑制剂Calpeptin预处理干预脊髓CANP活性;于静脉给药前24 h、静脉给药后2、6、24和48 h（T0～T4）时测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）,Western blot法检测ERK、CANP1及GSK-3β蛋白表达水平。结果：对照组大鼠T0～T4时间MWT和TWL无明显变化（P＞0.05）;与对照组比,T1～T4瑞芬太尼组大鼠MWT降低,TWL缩短（均P＜0.01）;与瑞芬太尼组比,T1～T4瑞芬太尼+U0126组和瑞芬太尼+Calpeptin组MWT和TWL均升高（P＜0.05或P＜0.01）;给药后48 h与对照组比,瑞芬太尼组p-ERK蛋白和CANP1大亚基自身水解蛋白（Cleaved-CANP1）表达明显上调（P＜0.01）;与瑞芬太尼组比,瑞芬太尼+U0126组p-ERK蛋白表达明显下调（P＜0.01）;与瑞芬太尼组比,瑞芬太尼+Calpeptin组p-ERK蛋白表达无明显变化（P＞0.05）;与瑞芬太尼组比,瑞芬太尼+U0126和瑞芬太尼+Calpeptin组Cleaved-CANP1明显减少（P＜0.01）。给药后48 h与对照组比,瑞芬太尼组大鼠GSK-3β和pGSK-3β/GSK-3β相对蛋白表达量均明显升高（P＜0.01）;而与瑞芬太尼组比,瑞芬太尼+U0126组和瑞芬太尼+Calpeptin组GSK-3β和pGSK-3β/GSK-3β相对蛋白表达量明显减少（P＜0.01）。结论：瑞芬太尼诱导的疼痛过敏作用可能与激活ERK/CANP1/GSK-3β信号通路有关。     

P2X4受体在瑞芬太尼诱发大鼠术后痛觉过敏中的作用

目的：探究P2X4受体在阿片类药物诱导的痛觉过敏中的作用。方法：成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随 机分为尾静脉泵注生理盐水组(N0组)、瑞芬太尼0.5 μg/(kg.min)组(R1组)、瑞芬太尼1.0 μg/(kg.min)组(R2组)、瑞芬太尼1.5 μg/(kg.min)组(R3组)、瑞芬太尼5.0 μg/(kg.min)组(R4组)。于处理前1 d(T1),尾静脉置管后30 min(T2),停药后30 min(T3),1 h(T4),2 h(T5),24 h(T6)测量大鼠机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL),获得诱导痛觉过敏最佳的瑞芬太尼输注速度;随后取成年雄性SD大 鼠,分为尾静脉置管后泵入生理盐水组(N组)、尾静脉置管后泵入瑞芬太尼1.0 μg/(kg.min)组(R组)。于上述处理时间 点T1,T2,T4测量大鼠PWMT和PWTL,并于停药后1 h选取大鼠脊髓腰膨大检测P2X4受体的mRNA和蛋白表达。另取 成年雄性SD大鼠,并将其分为切口痛模型并尾静脉置管后泵入生理盐水组(I+N组)和切口痛模型并尾静脉置管后泵入瑞 芬太尼1.0 μg/(kg.min)组(I+R组)。于上述处理时间点T1,T2,T3,T4,T5,T6以及8 h(T7)和72 h(T8)测量大鼠PWMT 和PWTL,于停药后1 h取大鼠脊髓腰膨大组织检测P2X4受体的mRNA和蛋白表达,免疫荧光检测小胶质细胞激活的 状态。结果：T3和T5时间点PWMT和PWTL的趋势均为R4组0.05)。与I+N组相比,I+R组大鼠在T4,T5,T6时间点的PWMT和PWTL明显降 低,差异均有统计学意义(均P<0.05),同时I+R组大鼠脊髓P2X4受体mRNA和蛋白表达水平均明显上调,差异均有统 计学意义(均P<0.05)。此外,I+R组大鼠脊髓背角的小胶质细胞的活化较I+N组明显增强。结论：静脉注射瑞芬太尼可致大鼠痛觉过敏,单纯静脉注射瑞芬太尼导致的痛觉过敏可能与P2X4受体无关;瑞芬太尼可导致切口痛大鼠出现更明显的痛觉过敏,其中小胶质细胞活化及P2X4受体可能参与瑞芬太尼诱发术后痛觉过敏的形成机制。     

瑞芬太尼诱导的SH-SY5Y细胞中PKCε与MOR相互作用的研究

目的 利用人神经母瘤细胞（SH-SY5Y）,探讨瑞芬太尼对蛋白激酶Cε(PKCε)和μ阿片受体（MOR）之间相互作用的影响以及PKCε对瑞芬太尼诱导MOR内化的调节作用。方法 设置对照组和瑞芬太尼处理组（R2 h组）,R2 h组采用10μmol/L瑞芬太尼处理SH-SY5Y细胞2 h。采用细胞免疫荧光观察MOR蛋白分布变化,免疫印迹检测MOR蛋白膜浆组分表达变化;细胞免疫荧光检测PKCε与MOR共定位情况,免疫共沉淀检测瑞芬太尼作用不同时间后PKCε与MOR相互作用变化;构建PKCε、MOR及PKCε截短蛋白的原核表达载体并诱导表达和纯化蛋白,采用pull-down实验检测两者直接相互作用情况。分别通过PKCε特异性激动剂和抑制剂预处理,观察激活或抑制PKCε后对瑞芬太尼诱导MOR内化的影响。结果 免疫荧光结果显示,与对照组比较,R2 h组MOR显著内化[（0.72±0.07）vs.(12.57±1.10)],差异有统计学意义（t=8.90,P<0.000 1）。免疫印迹结果显示,胞膜MOR蛋白显著减少,胞浆组分MOR蛋白增加。细胞免疫荧光共染显示,SH-SY5Y细胞中的PKCε...     

超前艾司氯胺酮抑制瑞芬太尼诱发腹腔镜妇科手术患者术后痛觉过敏

目的探讨超前艾司氯胺酮对瑞芬太尼诱发腹腔镜妇科手术患者术后痛觉过敏的影响。方法 ASA分级I或Ⅱ级,择期妇科腹腔镜手术患者60例按照随机数字表法随机分为2组(n=30):生理盐水+瑞芬太尼组(S+R组)、艾司氯胺酮+瑞芬太尼组(E+R组)。两组患者麻醉诱导前30 min时分别静脉注射艾司氯胺酮0.25 mg/kg或等容积生理盐水;两组静脉输注瑞芬太尼0.1～0.3μg/(kg·min);记录术后静态和动态VAS评分、机械痛敏阈值、机械痛敏面积、术后24 h内舒芬太尼使用、术后1 h内镇静评分及不良反应发生情况。结果与S+R组比较,E+R组患者术后2 h、18 h时静态和动态VAS评分降低,切口区域及臂内侧机械痛敏阈值升高,机械痛敏面积降低,首次使用舒芬太尼时间延长,PACU中以及离开PACU 0～6 h、6～12 h、12～18 h舒芬太尼用量降低(P<0.05,P<0.01)。结论超前艾司氯胺酮有效抑制瑞芬太尼诱发腹腔镜妇科手术患者术后痛觉过敏。     

不同神经肽S侧脑室注射剂量对瑞芬太尼痛觉敏感小鼠的镇痛效果观察

目的 探讨不同神经肽S侧脑室注射剂量对瑞芬太尼痛觉敏感小鼠的镇痛效果。方法 42只小鼠分为A组（对照组）、B组（切口痛）、C组（瑞芬太尼）、D组（切口痛-瑞芬太尼）,利用切口痛-瑞芬太尼模型成功小鼠进行实验,随机分为Saline组,0.1 nmol/L NPS侧脑室注射组、1 nmol/L NPS侧脑室注射组、10 nmol/L NPS侧脑室注射组,每组6只。采用小鼠热板实验、小鼠热甩尾实验、小鼠醋酸扭体实验检测不同剂量NPS侧脑室注射对瑞芬太尼所引起的痛觉过敏小鼠甩尾潜伏期、应答潜伏期、扭体反应次数的影响。结果 制作切口痛-瑞芬太尼小鼠术后痛觉过敏模型,在甩尾实验、热板实验和醋酸扭体实验中,侧脑室注射NPS后,小鼠的甩尾潜伏期和热板实验潜伏应答期明显延长,小鼠醋酸扭体反应的次数减少,其作用强度与给药剂量呈一定的量效关系,10 nmol/L NPS引起的镇痛作用强于0.1 nmol/L NPS。结论 侧脑室注射神经肽S对瑞芬太尼痛觉敏感小鼠能产生浓度依赖性的镇痛作用。     

瑞芬太尼与氯胺酮静吸复合麻醉的临床药效学研究

目的：研究瑞芬太尼和瑞芬太尼加氯胺酮用于静吸复合麻醉的用药规律;氯胺酮对瑞芬太尼镇痛效果的影响。方法：ASAⅡ-Ⅲ级择期手术病人70例,随机分为瑞芬太尼组(R组)35例和瑞芬太尼 氯胺酮组(R K)组35例。两组患者呼气末异氟醚浓度0．6MAC,依据患者对手术刺激的反应强度调节瑞芬太尼或瑞芬太尼 氯胺酮的注入量,观察两组的瑞芬太尼累计输注量和输注速率及患者对手术刺激的反应性。结果：两组患者异氟醚呼气末浓度范围是0．65％～0．70％。R组和R K组累计输注量分别为Y=0．28T 1．3(R2=0．9988)和Y=0．23T 2．1(R2=0．9981);输注速率趋势线斜率分别为-1．40和-3．250;手术中BIS值在60％～70％之间。结论：瑞芬太尼与氯胺酮联合用于异氟醚静吸复合麻醉可以减少瑞芬太尼的用量,麻醉操作简便,过程平稳,苏醒快捷。     

瑞芬太尼痛觉过敏小鼠中脑导水管周围灰质Mu 阿片受体和神经元限制性沉默因子表达水平的变化

目的：观察瑞芬太尼痛觉过敏小鼠中脑导水管周围灰质(periaquductal gray,PAG)中Mu阿片受体(Mu-opioid receptor,Mor)和神经元限制性沉默因子(neuron-restrictive silencer factor,NRSF)表达水平的变化。方法：32只小鼠采用 随机数字表法随机分入4组(n=8)：对照组(C组)、切口痛组(I组)、瑞芬太尼组(R组)和切口痛+瑞芬太尼组(IR组)。采 用Von Frey细丝和BME-410A型热痛刺激仪测量小鼠术前24 h和术后2,6,24,48 h的机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical thresholds,PWMT)和热缩足反射潜伏期((paw withdrawal thermal latency,PWTL)。Western印迹检测术后48 h 小鼠PAG中Mor和NRSF的表达水平。结果：与C组和术前基础值比较,I组、R组和IR组术后2~48 h PWMT和PWTL均 显著降低(P<0.01);术后2,6 h时R组较I组PWMT和PWTL略高(P<0.01),术后24,48 h时两组间差异无统计学意义(P> 0.05);与I组比较,IR组术后PWMT和PWTL显著降低,并持续到术后48 h(P<0.01)。与C组和I组比较,R组和IR组Mor 表达均显著降低(P<0.01),NRSF表达显著升高(P<0.01),C组和I组之间Mor和NRSF表达差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：术中短时程输注瑞芬太尼可诱导小鼠术后痛觉过敏,同时瑞芬太尼还诱导PAG中Mor水平降低及NRSF水平增 加,该变化可能参与瑞芬太尼诱导的痛觉过敏的形成。