复方五仁醇胶囊入血成分鉴定及含量测定

目的鉴定复方五仁醇胶囊入血成分并进行含量测定,为该制剂血清药理学研究结果验证积累数据.方法灌胃给药制备含药血清,高效液相法测定含药血清的色谱图,与体外制剂及对照品色谱图进行比较,分析、鉴定入血成分,并对鉴定出的主要成分进行含量测定.结果灌胃给药后血清中产生了13个与药物因素有关的成分,其中8个为制剂原形成分,包括五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素,其余5个为制剂成分的代谢产物.血清中五味子醇甲、五味子乙素的平均含量分别为11.063 2,7.490 9 mg·L-1.结论五味子醇甲、五味子乙素在血清中含量较高,可能为复方五仁醇胶囊重要的药效成分.     

安神宁口服液中五味子的血清药物化学初步研究

目的：对安神宁口服液中五味子的血清药物化学进行研究。方法：建立安神宁口服液及灌胃给予安神宁口服液后大鼠血清的HPLC指纹色谱分析方法;分析比较安神宁口服液、五味子单味液以及给药后所得血清样品,鉴定灌胃给予安神宁口服液后大鼠血中五味子化学成分变化,确定来源生药及其代谢产物。结果：大鼠灌胃给予安神宁口服液后从血中发现了15个入血成分,其中有两成分为五味子中所含的原型成分。结论：血中移行成分及代谢产物将成为安神宁口服液的体内直接作用物质,其来源生药为安神宁口服液的主要药物,对其进行深入的研究,将有助于阐明安神宁口服液的有效成分及作用机制。     

UPLC-MS/MS法鉴定五味子酯甲在大鼠体内的代谢产物

目的:鉴定大鼠给予五味子酯甲后尿样中的代谢产物,阐明五味子酯甲在大鼠体内的代谢途径。方法:采用超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)法与Metabolite Pilot 1.5代谢物分析软件进行分析鉴定。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为50℃,流速为0.4 ml/min,进样体积为5μl。一级全扫描范围100~1 000 amu,累积时间200 ms;子离子扫描范围50~1 000 amu,累积时间80 ms。大鼠ig给予五味子酯甲(15 mg/kg),收集并分析给药前后的尿样。结果:共鉴定代谢产物7种(M1~M7),即五味子醇乙、14-OH-五味子醇乙、1-OH-五味子醇乙或3-OH-五味子醇乙、2-OH-五味子醇乙、7-脱羟基-五味子醇乙、7-甲氧基-五味子醇乙。结论:该研究首次报道了五味子酯甲在大鼠体内的代谢物质,均为Ⅰ相代谢产物;其在大鼠体内的主要代谢途径是脱去苯甲酸,发生氧化反应和还原反应。     

五味子酯甲在大鼠体内代谢产物的鉴定

目的 考察五味子酯甲在大鼠体内的代谢转化。方法 采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-TOF-MS/MS)分析鉴定大鼠灌胃五味子酯甲后,其在尿样中的代谢产物。Phenomenex UPLC C₁₈色谱柱,流动相为乙腈-1‰甲酸水,梯度洗脱,质谱仪离子源为电喷雾离子源(ESI),正离子方式检测。结果 经代谢物软件处理后,根据MS/MS给出质谱碎片信息对五味子酯甲代谢产物进行结构推测,共检测到5种代谢产物。结论 五味子酯甲在大鼠体内的代谢途径主要为氧化反应和还原反应。     

五味子含药血清中木脂素类成分的UPLC-MS/MS分析北大核心CSCD

目的分析五味子含药血清中的木脂素类成分。方法 UPLC-MS/MS检测,经与五味子提取物、空白血清总离子流色谱图比较,发现含药血清中的药源性成分;经与对照品的保留时间和质谱数据相比对,对部分原形成分进行鉴定;经与提取物相同保留时间色谱峰质谱数据比较并参考相关文献,对部分原形成分进行推测。结果大鼠灌胃给予五味子提取物后,含药血清中产生了药源性成分,包括代谢产物和原形成分。鉴定了其中4个原形成分:五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素;推测了另外10个原形成分:戈米辛D、巴豆酰戈米辛H、当归酰戈米辛H、当归酰戈米辛P、五味子酯乙、五味子酚、戈米辛O、戈米辛N、6-O-苯甲酰戈米辛O和五味子丙素,所有14个成分均为联苯环辛烯类木脂素。结论五味子含药血清中的药源性成分主要为联苯环辛烯类木脂素。     

基于UHPLC-Q/TOF-MS技术鉴定青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的 研究青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法 采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q/TOF-MS)鉴定大鼠血清中的化学成分,通过比对青钱柳叶、空白血清和含药血清的图谱差异,解析青钱柳水提液经大鼠灌胃后血清中的原型成分和代谢产物。结果 共鉴定得到15个入血成分,6个为原型成分,9个为原型成分的代谢产物。入血的原型成分主要为咖啡酰奎宁酸类、黄酮类和皂苷类,代谢途径主要有甲基化和羟基化。结论 该研究表明入血的原型成分可能是青钱柳叶的有效成分,为阐明其药效物质基础提供了一定的依据。     

HPLC法同时测定五酯胶囊中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量

目的高效液相色谱法测定五酯胶囊中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量。方法采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,柱温为40℃,变换波长法。结果五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素分别在0.010 55~2.110μg、0.012 11~2.422μg、0.013 45~2.690μg、0.009 34~1.868μg范围内呈现良好的线性关系,平均回收率分别为99.36%、99.53%、99.23%、99.78%,RSD均小于2.0%。结论该方法准确,灵敏度高,重复性好,为五酯胶囊的质量评价提供参考。     

复方荷叶胶囊血清药物化学的初步研究

目的：对复方荷叶胶囊的入血成分进行分析研究,进而探讨其药效物质基础。方法：采用血清药物化学研究方法,在建立复方荷叶胶囊高效液相色谱指纹图谱的基础上,通过比较复方荷叶胶囊原药、荷叶给药后含药血清、车前草给药后含药血清、番泻叶给药后含药血清、复方荷叶胶囊给药后含药血清、空白血清的液相特征图谱,鉴定复方荷叶胶囊口服给药后的血中移行成分。结果：口服复方荷叶胶囊后,从血清中发现18个入血成分,其中14个为复方荷叶胶囊中原形吸收入血的成分,其余入血成分可能为原形成分的代谢产物。结论：18个入血成分可能是复方荷叶胶囊的体内直接作用物质,对其进行深入研究将有助于为复方荷叶胶囊的药效物质基础及药效机制奠定基础。     

HPLC法测定康舒宁胶囊中五味子酯甲的含量

目的测定康铲宁胶囊中五味子酯甲的含量。方法采用TLC法对康舒宁胶囊中的南五味子进行定性鉴别;运用HPLC法测定康舒宁胶囊中五味子酯甲的含量。结果在4．936-24．880g·mL^-1。范围内五味子酯甲峰面积与进样量呈良好的线性关系。r=0．9997;样品加样回收率为98．80％,RSD为1．82％。结论方法简便快速、结果准确,可有效控制康舒宁胶囊的质量。     

以五味子乙素含量为指标优选复方五仁醇胶囊含药血清制备方法

目的：以五味子乙素含量为指标优选复方五仁醇胶囊含药血清的制备方法。方法：采用L8（2^7）正交设计给药和取血方案，将复方五仁醇灌胃给予大鼠并取血，高效液相色谱法测定含药血清或血浆中五味子乙素，并对结果进行统计分析。结果：综合方差分析和极差直观分析，各因素对五味子乙素含量的影响大小依次为：B（给药间隔时间）、C（取血时间）、D（取血成分）、A（动物是否造模），其中给药间隔时间对结果有显著影响（P〈0．05），末次给药后2h取血优于1h，但无统计学意义（P〉0．05），前两者之间存在交互作用（P〈0．05），血浆的影响优于血清，模型动物略优于正常动物，但均无统计学意义（P〉0．05）。结论：复方五仁醇胶囊含药血清较优的的制备方法为模型大鼠连续灌胃给药3d，上、下午各1次，末次给药后2h取血分离血浆。     

基于 UPLC-Orbitrap-HRMS技术鉴定当归-川芎药对化学成分及大鼠体内入血成分

目的 鉴定当归-川芎药对化学成分及大鼠ig后的入血原型成分和代谢产物。方法 基于超高效液相色谱-静电场轨道阱-高分辨率质谱技术（UPLC-Orbitrap-HRMS）,结合对照品图谱、自建数据库、相关文献信息及Compound Discoverer3.3、Xcalibur qual browser 4.3等软件对当归-川芎药对的化学成分进行分析鉴定;大鼠经ig给药后制得含药血清,通过比对含药血清与对照组血清,鉴定入血原型成分和代谢产物。结果 共在当归-川芎药对中鉴定出69个化学成分,主要包括苯酞类24个、有机酸类24个、氨基酸类8个、含氮类7个、香豆素类4个、木脂素类1个、黄酮类1个;在含药血清中共鉴定出30个入血原型成分,包括苯酞类15个、有机酚酸类13个、香豆素类2个;鉴定出45个代谢产物,包括32个苯酞类代谢产物,13个有机酚酸类代谢产物。结论 明确了当归-川芎药对的化学成分及入血原型成分和代谢产物。     

基于UPLC-Q-Qrbitrap HRMS和网络药理学探究芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的作用机制

目的 通过超高效液相色谱-四级杆/轨道肼高分辨质谱（UPLC-Q-Qrbitrap HRMS）技术和整合网络药理学,探究苗药芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的作用机制。方法 将18只大鼠随机数字表法分为空白组和实验组,每组9只。空白组ig蒸馏水1 mL,实验组ig芪胶升白胶囊混悬液1 mL（取芪胶升白胶囊的内容物,用蒸馏水超声溶解成混悬液）,剂量为2.0g/kg,连续给药3 d,末次给药剂量为4.0 g/kg。末次给药后,用1%的戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉大鼠,于15、30、60、120、240 min从大鼠眼眶静脉丛和尾静脉交替取血,采集含药血清和空白血清;运用UPLC-Q-Qrbitrap HRMS技术定性检测芪胶升白胶囊胶囊成分、含药血清成分和空白血清成分,比对分析得到芪胶升白胶囊的入血成分,再对入血成分构建网络药理学分析模型,通过成分拓扑分析、蛋白相互作用网络（PPI）分析和通路富集分析,得到芪胶升白胶囊的关键成分、关键靶点和富集通路。结果 检测出芪胶升白胶囊中的成分51种,包括淫羊藿苷、苦参碱、槲皮素等;入血成分58种,其中原型入血成分17种,代谢成分41种,包括金雀异黄酮、...     

芪附汤对大鼠抗阿霉素心脏毒性作用的血清气相色谱-质谱代谢组学研究

目的 采用基于气相色谱-质谱（GC-MS）血清代谢组学技术研究芪附汤抗阿霉素心脏毒性的作用,并初步探讨其作用机制。方法 将24只大鼠分为正常组、阿霉素组和芪附汤治疗组,给予4周相应的干预治疗后,采集大鼠血清进行GC-MS分析,结合多变量和单变量统计分析,研究阿霉素诱导的心脏毒性损伤大鼠血清中内源性代谢物的变化,以及芪附汤对其的干预作用,寻找其抗阿霉素心脏毒性潜在的生物标志物,采用代谢通路分析鉴定芪附汤靶向代谢通路。结果 GC-MS血清代谢组学分析鉴定了17种阿霉素心脏毒性潜在生物标志物,芪附汤对其中10种代谢物具有显著的逆转作用,代谢通路分析表明,三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢（简称二羧酸代谢）、花生四烯酸代谢是芪附汤主要的靶向代谢通路。结论 芪附汤能够通过调节失衡的三羧酸循环、二羧酸代谢和花生四烯酸代谢而发挥抗阿霉素心脏毒性的作用。     

肉桂多次ig给药在肾阳虚大鼠体内的积累和代谢分析

目的 考察肉桂多次ig给予肾阳虚大鼠后,鉴定大鼠肾脏、血液、尿液、粪便中原型成分和代谢产物。方法 采用ip氢化可的松方法制备大鼠肾阳虚模型,造模成功后按照生药量1.35g·kg^-1·d^-1ig肉桂提取物,连续15d。末次给药后,收集大鼠血浆、尿液、粪便和肾组织样品,进行UPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析。根据色谱保留时间、精确相对分子质量、多级质谱碎片信息结合文献报道对各样本中的成分进行确认,并推测代谢物的代谢途径。结果 从肾阳虚模型大鼠各样本中共鉴定出24个成分,其中3个原型成分,21个代谢产物,包括12个原花青素类、8个木脂素类、2个二萜类、2个有机酸。结论 肉桂成分在肾阳虚大鼠体内代谢广泛,代谢途径主要包括甲基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化反应。尿液中检出的化学成分最多,其次为血液、肾组织、粪便。长期给药情况下以原型存在于靶器官和血中成分很少,推测代谢物发挥药效的可能性较大。     

五酯胶囊联合替诺福韦酯治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的观察五酯胶囊联合替诺福韦酯治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法选取2018年1月—2018年12月东部战区总医院收治106例患者,随机分为对照组和治疗组,每组各53例。对照组口服口服富马酸替诺福韦二吡呋酯片,300 mg/次,1次/d;治疗组在对照组治疗基础上口服五酯胶囊,2粒/次,3次/d。两组均连续治疗12周。观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-22(IL-22)、乙肝病毒基因(HBV-DNA)的变化情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别是69.81%、88.68%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组ALT、AST、IL-17、IL-22、HBV-DNA均较治疗前显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组这些指标显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论五酯胶囊联合替诺福韦酯治疗慢性乙型肝炎临床疗效确切,化验指标改善明显,具有一定的临床推广应用价值。     

异欧前胡素在大鼠体内代谢产物的UHPLC-HRMS鉴定分析

目的 分析鉴定异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢产物。方法 大鼠灌胃给药后,收集正常组和给药组大鼠的血浆、尿液和粪便样本,并以固相萃取柱提纯生物样品。采用UHPLC-HRMS(Q-Exactive Orbitrap MS)高分辨质谱对生物样品进行分析,并对代谢产物筛选鉴定。结果 在正、负离子模式下,根据所获得的精确分子质量、色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及文献报道,最终分析鉴定了32个代谢产物。其代谢途径主要包括呋喃环开环、内酯水解、氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化以及它们的复合反应。其中,葡萄糖醛酸化产物为首次发现。结论 本研究较为全面地阐明了异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢转化情况,可为其进一步的药效学研究提供依据,并为呋喃香豆素类物质的代谢产物分析提供借鉴。     

基于UPLC/QTOF-MS技术的丹蛭降糖胶囊防治2型糖尿病血管病变大鼠的血清代谢组学研究

目的: 本实验运用UPLC/QTOF-MS技术对丹蛭降糖胶囊防治2型糖尿病血管病变大鼠进行血清的代谢组学研究,探求该中药制剂防治糖尿病血管病变可能的物质基础。方法: SD大鼠随机分成正常组、模型组和丹蛭降糖胶囊组,高脂饲料喂养4周后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ35mg·kg^-1)复制2型糖尿病大鼠模型。造模成功后,灌胃给予丹蛭降糖胶囊(1.26g·kg^-1·d^-1)连续4周。给药4周后,处死大鼠,腹主动脉取血,去胸主动脉HE染色做病理切片。采用UPLC/QTOF-MS技术结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)分析其代谢谱变化,鉴定差异化合物,分析相关代谢通路。结果: 病理切片发现模型组大鼠血管内皮细胞较正常组大鼠的有明显损坏,丹蛭降糖胶囊组大鼠的血管内皮细胞受损较轻。PCA和PLS-DA分析表明各组大鼠之间代谢谱存在明显差异,可实现分离。研究在正、负离子模式下分别筛选出11个和4个差异性标志物。代谢通路分析结果表明,差异性标志物分别于氨基酸代谢、胆汁酸和脂代谢以及氧化应激状态相关。结论: 丹蛭降糖胶囊可以保护血管内皮细胞,防治2型糖尿病血管病变,其作用机制可能在于调节氨基酸代谢、胆汁酸和脂代谢以及氧化应激状态相关。     

金芪降糖片入血成分的UPLC-ESI-MS研究

目的 通过对金芪降糖片血清药物化学研究方法的建立,探讨其口服吸收后的入血成分。方法 利用超高效液相色谱-电喷雾串联四级杆质谱（UPLC-ESI-MS）和多重反应监测（MRM）对金芪降糖片样品及ig给予金芪降糖片后大鼠血清样品进行分析,比较各样品分析结果,确认金芪降糖片的血中移行成分。结果 ig给予金芪降糖片后大鼠血清中发现16种原形产物,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、木兰花碱、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、黄连碱、表小檗碱、药根碱、小檗碱、巴马汀、黄芪甲苷。结论 确定了金芪降糖片的血中移行成分,为阐明其有效成分及作用机制提供参考。     

基于血浆代谢组学的新生化颗粒对急性血瘀大鼠作用机制研究

目的 研究新生化颗粒对急性血瘀大鼠血浆中内源性代谢物的影响,探讨新生化颗粒治疗急性血瘀证的可能机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、复方丹参滴丸（阳性药,0.10 g·kg^-1）组和新生化颗粒低、高剂量（4.86、9.72 g·kg^-1）组,给药体积10 mL·kg^-1,对照组和模型组大鼠ig给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）,每天早晚各ig给药1次,共7次。第5次给药后,除对照组外,采用sc盐酸肾上腺素和冰水浴制备大鼠急性血瘀模型。通过测定全血黏度（WBV）、血浆黏度（PV）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）,观察不同剂量的新生化颗粒对急性血瘀大鼠血液流变学和凝血功能的影响;采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用（UHPLCQTOF-MS）法检测各组大鼠血浆中的内源性代谢物,通过多变量统计分析筛选潜在生物标志物,结合质谱信息、数据库检索和标准品比对鉴定潜在生物标志物,并将鉴定到的生物标志物导入MetaboAnalyst 5.0数据库推测其可能的代谢通路。结果 与模型组比较,新生化颗粒显著降低急性血瘀大鼠WBV、PV和FIB,显著延长APTT、PT和TT（P＜0.05、0.01）。代谢组学结果显示,从急性血瘀大鼠血浆中共鉴定出21个差异代谢物（准确鉴定7个）,与对照组比较,模型组大鼠血浆中乳酸、肉碱和肌酐等10个内源性代谢物显著上调,苹果酸、琥珀酸和色胺等11个内源性代谢物显著下调（P＜0.05、0.01）;除了硫酸吲哚酚和脱氧胞苷外,新生化颗粒对其他19个生物标志物均有显著回调作用（P＜0.05、0.01）。这些标志物主要涉及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、苯丙氨酸代谢、亚油酸代谢、三羧酸循环和色氨酸代谢。结论 新生化颗粒对急性血瘀大鼠体内紊乱代谢物有较好的回调作用,其作用机制主要与调节苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,亚油酸代谢,三羧酸循环和色氨酸代谢通路有关。