lncRNA HEIG对宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响及其分子机制

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HEIG在宫颈癌组织和细胞中的表达及其生物学功能。方法:采用实时荧光定量PCR检测患者癌组织和癌旁组织、正常宫颈上皮细胞HCerEpic、宫颈癌细胞Hela和C33A中lncRNA HEIG的表达;敲低Hela细胞中HEIG表达,MTT法和流式细胞术分别检测Hela细胞的增殖、凋亡情况;Transwell小室法检测Hela细胞的迁移侵袭能力;Western blot检测AKT信号通路的变化。结果:lncRNA HEIG在宫颈癌组织和细胞中高表达;敲低HEIG可显著抑制宫颈癌细胞Hela的细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭能力,同时抑制AKT信号通路的活化。结论:lncRNA HEIG有可能作用于AKT信号通路抑制宫颈癌细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制细胞迁移侵袭。     

沉默GOLM1对宫颈癌Siha细胞放射敏感性影响和机制研究

目的:研究GOLM1对人宫颈癌Siha细胞放射敏感性影响和可能机制。方法:构建慢病毒载体敲低宫颈癌细胞Siha中GOLM1的表达，qPCR检测干扰效率。采用4 Gy X线照射细胞后利用MTT实验检测细胞活性。将经射线照射后的宫颈癌细胞分为GOLM1-SiRNA组、NC-SiRNA组、GOLM1-SiRNA联合IGF1组，观察细胞形态，细胞侵袭和迁移实验观察侵袭和迁移能力，克隆形成实验检测细胞增殖能力。Western blot检测上皮间充质转化相关蛋白及PI3K/Akt通路蛋白。结果:经射线照射后，敲低Siha细胞中GOLM1表达组细胞活性下降最明显，细胞侵袭能力、迁移能力降低，克隆形成能力下降。GOLM1-SiRNA联合PI3K/Akt信号转导通路激活剂IGF1组细胞侵袭、迁移能力增加，克隆形成能力增强。降低GOLM1的表达增强了上皮标记蛋白E-cadherin的表达，同时降低了间质标记蛋白N-cadherin和p-Akt的表达，加入IGF1后E-cadherin蛋白的表达降低，N-cadherin和p-Akt蛋白的表达增强。结论:GOLM1表达降低增加了射线照射后宫颈癌细胞对放射线的...     

SOX1对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

[目的]探究性别决定区Y框蛋白1(sex determining region Y-box,SOX1)对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。[方法]选择稳定表达SOX1基因的HeLa细胞株为实验组,同时选择稳定表达空白质粒的He La细胞株和HeLa细胞为对照组。采用二甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SOX1对HeLa细胞增殖的影响;通过细胞基质黏附实验、体外细胞迁移实验、体外细胞侵袭实验分别研究SOX1对HeLa细胞粘附、迁移、侵袭能力的影响;采用明胶酶谱法检测细胞内相关蛋白的水平。[结果]在研究第1天,两组的增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05),实验组在研究第3天(0.526±0.067)、第5天(1.169±0.148)、第7天(1.160±0.134)的增殖能力均显著性低于对照组(P<0.05)。实验组黏附率(0.754±0.041)显著性低于对照组(0.931±0.135)(P<0.05);实验组在24h(5.84±1.20)、48h(10.28±3.01)、72h(14.51±2.31)迁移距离均显著性小于对照组(P<0.05);实验组侵袭细胞的数量(120.09±10.04个)明显较对照组(215.67±6.98个)少(P<0.05)。实验组基质金属蛋白酶2(0.981±0.199)、基质金属蛋白酶9(0.536±0.033)、波形纤维蛋白(0.429±0.029)表达水平显著性低于对照组,SOX1、E钙黏附蛋白水平明显高于对照组(P<0.05)。[结论]SOX1表达水平升高,会使宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭抑制,MMP2、MMP9、Vimentin蛋白表达水平降低,Ecadherin表达水平升高。     

三七皂苷R1对HL-60细胞凋亡及survivin、p53表达的影响

[目的]探讨三七皂苷R1对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡作用及其机制。[方法]光镜下观察三七皂苷R1作用下HL-60细胞形态．采用MTT比色法观察三七皂苷R1对HL-60细胞增殖的抑制作用。采用流式细胞术检测细胞凋亡改变．并以RT-PCR检测凋亡调节基因survivin、p53的表达。[结果]三七皂苷R1 75μg／ml～1200μg／ml可抑制HL-60细胞的生长，且呈时间和浓度依赖性。三七皂苷R1作用后细胞呈现凋亡特征．流式细胞术显示凋亡细胞比例升高，凋亡率随作用剂量的增高而升高。RT-PCR检测可见在三七皂苷R1150μg／ml作用下p53mRNA表达显著增加，而survivin mRNA表达减少。[结论]三七皂苷R1能诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡，其作用可能与凋亡调节基因p53的上调和survivin的下调有关。     

Wnt7a对肝癌细胞凋亡、迁移及侵袭的影响

目的:检测Wnt7a在肝癌中的表达,分析Wnt7a对肝癌细胞活性、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨Wnt7a在肝癌中的作用。方法:分别采用免疫组织化学染色和Western blot检测组织和细胞系中Wnt7a的表达情况;Hep3B细胞经人重组Wnt7a蛋白（rWnt7a）处理后,MTT法检测细胞活性改变,流式细胞仪检测细胞凋亡变化,Transwell分析细胞迁移及侵袭能力变化。结果:相对于癌旁组织,肿瘤组织低表达Wnt7a蛋白;经rWnt7a处理后,Hep3B细胞活性降低、细胞凋亡增多且迁移与侵袭能力下降。结论:Wnt7a蛋白能抑制Hep3B细胞生长、迁移与侵袭能力,可能在肝癌中发挥抑癌作用。     

沉默TUG1对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的:研究长非编码RNA牛磺酸上调基因1(Taurine-upregulated gene 1,TUG1)对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭的影响.方法:通过RNA干涉技术沉默Hela细胞中TUG1的表达,通过荧光实时定量PCR(RT-QPCR)检测Hela细胞中TUG1的沉默效果;MTT法检测沉默TUG1对Hela细胞增殖的影响,流式细胞术检测TUG1对Hela细胞凋亡的影响,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果:TUG1-siRNA可有效沉默TUG1在Hela细胞的表达,沉默Hela细胞中TUG1的表达可以明显抑制Hela细胞的增殖及侵袭能力,而促进Hela细胞的凋亡能力.结论:TUG1在宫颈癌的进展及转移中发挥着重要作用.     

下调Rab11基因对宫颈癌HeLa/SiHa 细胞侵袭迁移的影响及机制探讨

背景与目的：Rab11基因在宫颈癌细胞中高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究采用RNA干扰技术下调Rab11基因表达,并探讨其对宫颈癌HeLa/SiHa细胞侵袭迁移的影响及可能的相关机制。方法：将HeLa/SiHa细胞分为2组：阴性对照组(转染阴性对照的小干扰RNA)和Rab11 siRNA干扰组(转染小干扰Rab11siR-NA)。蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Rab11干扰效果,检测转染Rab11 siRNA后,侵袭相关蛋白Rac1、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9表达的变化;细胞划痕损伤实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;细胞免疫荧光实验从形态学角度探索在小干扰Rab11后Rac1蛋白在细胞膜上聚集位置的变化。结果：转染小干扰Rab11siRNA到HeLa/SiHa细胞后,Rab11蛋白表达受到高效抑制(P<0.01);细胞迁移、侵袭能力受到抑制(P<0.05),Rac1蛋白表达明显下调(P<0.01),MMP2、MMP9蛋白表达下调(P<0.05), Rab11 siRNA处理组细胞运动前端细胞膜下Rac1蛋白聚集量减少。结论：Rab11基因表达下调可以抑制HeLa/SiHa细胞的迁移和侵袭,其机制可能与Rac1、MMP2和MMP9蛋白表达量下降及Rac1定位的改变有关。     

miR-198靶向MAPK1调控宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡和侵袭

目的 探究miR-198对宫颈癌细胞增殖、凋亡和侵袭的作用及其机制。方法 用miR-198 mimic转染HeLa细胞,qRT-PCR检测miR-198和丝裂原活化蛋白激酶1 （Mitogen-activated protein kinase1, MAPK1）的mRNA水平;荧光素酶实验检测miR-198和MAPK1的靶向关系;用pcDNA3.0-MAPK1（pc-MAPK1）和miR-198 mimic转染细胞,CCK-8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot检测蛋白的表达。结果 miR-198 mimic转染细胞后,miR-198表达水平明显升高,MAPK1 mRNA表达水平明显降低;荧光素酶报告实验表明miR-198序列上存在MAPK1结合位点;miR-198过表达能显著降低宫颈癌细胞增殖倍数、诱导细胞凋亡,同时还能明显降低HeLa细胞侵袭能力;此外,miR-198 mimic能显著抑制MAPK1下游基因核糖体S6激酶2（Ribosomal S6 kinase 2, RSK2）、c-Myc和c-fos的蛋白表达;pc-MAPK1能明显减弱miR-198 mimic对HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及对MAPK1下游蛋白表达的调控作用。结论 miR-198过表达能通过靶向MAPK1抑制宫颈癌细胞的增殖和侵袭能力并诱导细胞凋亡。     

DKK1对乳腺癌细胞迁移侵袭能力影响的研究

  目的  探讨Dikkopf 1（DKK1）对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响。  方法  采用免疫组织化学方法检测DKK1在乳腺癌组织中的表达,并通过免疫荧光对DKK1在细胞中的定位进行分析;DKK1过表达的真核表达载体转染乳腺癌细胞MDA231,应用Western blot检测转染后乳腺癌细胞MDA231中DKK1蛋白表达水平。划痕实验检测转染后MDA231细胞的迁移能力,Transwell实验检测MDA231细胞侵袭能力的改变。  结果  免疫组织化学检测到乳腺癌组织原发病灶及转移病灶DKK1表达明显高于对应的癌旁组织（P < 0.05）。DKK1表达的阳性率在有淋巴结转移组织中明显比无淋巴结转移组织中低。免疫荧光结果显示DKK1主要呈细颗粒状散在分布于细胞质中。Western blot检测表明DKK1过表达明显。过表达DKK1的MDA231细胞迁移和侵袭能力明显比阴性对照组和空白组低。  结论  DKK1的表达与乳腺癌细胞迁移和侵袭能力呈负相关。      

光甘草定对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制

目的:探讨光甘草定对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法:以0、1、2.5、5、10和20 μmol/L光甘草定作用于体外培养的Hela细胞24 h后,采用细胞计数（CCK-8)法检测细胞存活率并计算出光甘草定的半抑制浓度。将体外培养的Hela细胞分别以0、2.5和5 μmol/L光甘草定处理后,采用Transwell小室检测细胞侵袭变化,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期变化,免疫印迹法检测细胞中Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和生存素（Survivin）的表达情况。结果:与对照（0 μmol/L）组相比,1、2.5、5、10和20 μmol/L 光甘草定处理组细胞存活率均明显降低（P<0.05）,且呈浓度依赖性;同时,光甘草定对Hela细胞的半抑制浓度为4.56 μmol/L。与对照（0 μmol/L）组相比,2.5和5 μmol/L光甘草定处理组中侵袭细胞数和细胞在S期与G2/M期的百分比以及细胞中Wnt1、β-catenin、CyclinD1、MMP-2、Survivin蛋白的表达水平均明显减少,而细胞凋亡率和细胞在G0/G1期百分比明显升高（P<0.05）,且5 μmol/L光甘草定处理组细胞的变化更为显著。结论:光甘草定可抑制Hela细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。     

地塞米松对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及机制研究

目的:探讨地塞米松(DXMS)通过抑制细胞外信号调节激酶(ERK)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对前列腺癌(PCa)PC-3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养PCa细胞系PC-3,并分为对照组(二甲基亚砜)、DXMS低剂量组(0.01μmol/L DXMS)、DXMS中剂量组(0.1μmol/L DXMS)、DXMS高剂量组(1μmol/L DXMS)和DXMS高剂量+TPA组(1μmol/L DXMS和50μmol/L ERK/AKT信号通路激活剂TPA),采用qRT-PCR检测糖皮质激素受体(GR)表达;CCK-8检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测GR、细胞凋亡(pro-caspase-3、cleaved-caspase-3、pro-caspase-9、cleaved-caspase-9、Bcl-2、Bax)、转移(Vimentin、N-cadherin、E-cadherin)及ERK、AKT蛋白表达。建立PC-3细胞异种移植裸鼠,当肿瘤直径达到0.5～0.6 cm时开始腹腔注射DXMS,共设置4组...     

延龄草总皂苷抑制宫颈癌Hela细胞转移的作用及机制

目的:观察延龄草总皂苷对宫颈癌Hela细胞侵袭与迁移的影响及其机制.方法:培养宫颈癌细胞Hela,加入延龄草总皂苷(1、2 mg/L)24 h后,采用细胞侵袭实验、划痕实验观察延龄草总皂苷对Hela细胞侵袭与迁移的影响,以Western blot方法检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达.结果:延龄草总皂苷能够有效地抑制Hela细胞的侵袭与迁移,浓度依赖性地降低MMP-2、MMP-9的蛋白表达.结论:延龄草总皂苷可能通过降低MMP-2、MMP-9的表达发挥抑制宫颈癌细胞Hela侵袭与迁移的作用.     

三七总皂苷对前列腺癌PC-3细胞增殖及迁移的抑制作用

探讨三七总皂苷对人前列腺癌PC-3细胞增殖及迁移的抑制作用,初步研究该药物的作用机制,并为前列腺癌的药物治疗及扩展tPNS的临床应用提供实验依据。方法：采用MTT实验、细胞计数、伤口愈合实验等方法检测tPNS对PC-3细胞增殖及迁移的影响;采用Western blot及明胶酶图分析等方法对增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、血管细胞间黏附分子1（vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1）及迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinases 2,MMP-2）等进行检测。通过检测p38 MAPK及ERK途径的磷酸化变化,探讨tPNS对PC-3细胞作用的可能信号途径。结果：tPNS可抑制PC-3细胞增殖,随着tPNS浓度（200、400、800 mg/L）的增加,对PC-3细胞的抑制率分别增加至13.0%、29.5%和35.9%（P<0.05）。tPNS下调PC-3细胞增殖标志物PCNA的表达水平,该效应呈量效及时效关系。tPNS（200、400、800 mg/L）可显著抑制PC-3细胞迁移。tPNS还可显著下调迁移相关蛋白MMP-2及黏附分子VCAM-1的表达水平。tPNS可显著增加p38 MAPK的磷酸化水平,但对ERK磷酸化影响不明显。结论：tPNS抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及迁移活性,这些生物学作用可能与该药抑制PCNA、VCAM-1、MMP-2的表达及激活p38 MAPK信号通路有关。     

下调基因PTTG1 对人胶质瘤细胞SHG44增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响

背景与目的：研究表明垂体瘤转化基因1（pituitary tumor-transforming gene 1，PTTG1）在多种癌症中高表达。该研究旨在探讨其对胶质瘤细胞SHG44增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法：用PTTG1 siRNA干扰胶质瘤细胞SHG44的基因表达，通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）分别在mRNA和蛋白质水平上评估PTTG1沉默效率，进一步检测其对SHG44细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果：沉默PTTG1基因表达可以显著抑制SHG44细胞增殖（P<0.05）、迁移（P<0.01）和侵袭（P<0.001）能力，增加细胞凋亡（P<0.05）。结论：下调PTTG1的表达可以降低神经胶质瘤的恶化程度，有望成为临床胶质瘤治疗的新靶点。     

RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响

[目的]研究RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。[方法]①采用Western blot法和免疫荧光法检测RIN1在MKN28细胞中表达;②采用Burd-U标记检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞增殖能力变化;③采用Transwell法、细胞划痕法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞侵袭和迁移能力变化;④采用AV/PI染色法、Hoechst染色法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞凋亡情况。[结果]①RIN1在MKN28细胞中呈高表达,表达量是空载对照组的3.22倍,且主要分布在细胞质中;②Burd-U染色结果显示,RIN1高表达MKN28细胞的阳性率显著性升高,与空载对照组相比为75.6%±5.4%vs 25.6%±1.1%（P〈0.01）;③RIN1高表达MKN28细胞的侵袭和迁移能力明显增强,与空载对照组相比分别为122.0±7.0 vs 65.00±2.52（P〈0.01）和54.22%±3.45%vs 38.6%±2.45%（P〈0.01）;④RIN1高表达MKN28细胞株细胞凋亡数显著性减少,与空载对照组相比为21.63%±2.60%vs 8.07%±1.60%（P〈0.01）。[结论]RIN1过表达促进MKN28细胞增殖、侵袭和迁移,抑制MKN28细胞凋亡;RIN1可能是介导胃癌发生的癌基因之一。     

UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究泛素结合酶E2C（ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C）在宫颈癌细胞中的表达情况,并明确UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:首先查阅GEPIA数据库,了解UBE2C在宫颈癌中的表达;其次通过qRT-PCR和Western blotting 法明确UBE2C在宫颈癌HeLa细胞及正常宫颈上皮细胞End1/E6E7中表达差异,然后分别构建si-UBE2C及si-NC转染宫颈癌HeLa细胞,检测转染后细胞中 UBE2C mRNA和蛋白表达;最后采用CCK-8 实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化,并鉴定UBE2C下游靶基因PTEN、P-p53的表达情况。结果:UBE2C在宫颈癌中高表达,能够促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并下调抑癌基因PTEN、P-p53的表达。结论:UBE2C能够加重宫颈癌细胞恶性表型;UBE2C可能作为宫颈癌诊断及治疗的判定指标之一。     

沉默 ABCE1 基因对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响

目的：探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1（ATP-binding cassette protein E1, ABCE1 ）基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法：合成靶向 ABCE1 的siRNA序列（ABCE1-siRNA）以及阴性对照序列（NC-siRNA）,电转法转染至EC109细胞,分别形成ABCE1-EC109、NC-siRNA-EC109细胞。RT-PCR、Western blotting检测转染后EC109细胞中 ABCE1 mRNA与蛋白的表达情况,流式细胞术检测EC109细胞周期及凋亡,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell法分别检测EC109细胞的增殖、迁移以及侵袭的能力。结果： ABCE1-EC109细胞中 ABCE1 mRNA和蛋白表达较NC-siRNA-EC109细胞明显降低\[(0.47±0.04) vs (0.67±0.05),(0.63±0.09) vs (0.86±0.11);均P<0.05\]。与NC-siRNA-EC109细胞相比,ABCE1-EC109细胞的增殖速度明显减慢\[（2.20±0.10） vs （2.91±0.13）,P<0.05\],细胞周期阻滞在G0/G1期细胞数目明显增多\[（76.5±3.1)% vs (56.1±2.7)%, P<0.05）\];细胞的凋亡率明显升高\[（15 .46±3.12）% vs (0.54±024）%,P<001\],迁移、侵袭能力均显著下降\[迁移：（8.12±0.23） vs （1.91±0.11）μm,P<0.05;侵袭：（42.56±4.68） vs (68.78±6.98)个,P<001\]。结论：电转法沉默 ABCE1 基因的表达可促进食管癌EC109细胞的凋亡,抑制其体外增殖、侵袭及迁移。     

Pannexin1通道对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖和侵袭迁移的影响及可能机制

摘 要：［目的］ 探究Pannexin1对乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭迁移的影响及可能机制。［方法］ MTT法检测0、12.5、25、50、100、200μmol/L甘珀酸（CBX）对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响;集落克隆检测CBX对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响;采用实时荧光法检测细胞间荧光传递能力;化学发光法检测细胞外ATP浓度。使用100μmol/LCBX处理乳腺癌细胞MCF-7后,Transwell法检测MCF-7细胞的侵袭迁移能力;Western 印迹法检测乳腺癌细胞中相关蛋白p-ERK1/2、ERK1/2、Vimentin、MMP-9蛋白的表达。［结果］ MTT实验结果表明,200μmol/L CBX可显著性抑制MCF-7细胞增殖能力（P<0.05）,而100μmol/L CBX对MCF-7细胞增殖能力无显著性抑制作用（P>0.05）。集落克隆实验结果表明,200 μmol/L CBX可显著性抑制MCF-7细胞增殖能力（P<0.05）。实时荧光法和化学发光法实验结果表明,100μmol/L和200μmol/L CBX显著性抑制Pannexin1通道功能（P<0.05）;Transwell实验和划痕实验结果表明,100μmol/L CBX显著性抑制乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力（P<0.05）;Western印迹法结果表明,CBX抑制Pannexin1后,乳腺癌细胞MCF-7中ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-9和Vimentin蛋白表达量下降（P<0.05）。［结论］ 200μmol/L CBX抑制Pannexin1通道后,乳腺癌MCF-7细胞活性和增殖能力减弱,而100μmol/L CBX可降低乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力,其机制可能与ERK1/2表达量下降有关。     

Musashi1在结肠癌中的表达及对细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨Musashi1(Msi1)基因在结肠癌中的表达,分析其对结肠癌HCT116细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测Msi1在结肠癌组织及癌旁正常组织中的表达情况。通过慢病毒载体构建稳定低表达Msi1的HCT116细胞株(shMsi1组),同时设置空白对照组和NC组。MTS实验检测增殖,流式细胞术检测凋亡,划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力。Western blotting检测沉默Msi1表达对Wnt和Notch信号通路关键分子的影响。结果结肠癌组织中Msi1表达量为3.36±0.75,明显高于癌旁正常组织的0.69±0.33,差异具有统计学意义(P<0.05)。沉默Msi1表达后,shMsi1组24、48、72 h的细胞增殖率分别为(128.00±3.13)%、(162.70±4.28)%、(191.86±7.72)%,明显低于空白对照组和NC组(P<0.05);shMsi1组48h细胞凋亡率为(8.47±1.04)%,明显高于空白对照组的(4.66±0.75)%和NC组的(4.83±1.07)%,差异具有统计学意义(P<0.05);shMsi1组细胞划痕愈合率为(27.38±9.63)%和侵袭细胞数为51.67±13.50,明显低于空白对照组的(58.12±8.54)%、219.00±24.56和NC组的(60.87±10.08)%、212.33±13.58,差异具有统计学意义(P<0.05)。下调Msi1表达后,shMsi1组Frat1蛋白表达量为0.53±0.10,低于空白对照组的1.00±0.16和NC组的0.94±0.13,而shMsi1组Numb蛋白表达量为1.74±0.09,明显高于空白对照组的1.00±0.17和NC组的0.73±0.09,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Msi1可能通过调控Frat1及Numb表达增强结肠癌HCT116细胞增殖、迁移和侵袭能力,并抑制其凋亡。     

CAAP1抑制肝癌HepG2细胞凋亡而促进其增殖、迁移和侵袭

目的:探讨CAAP1对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:构建CAAP1过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体pSilencer 2.l-U6 neo/shR-CAAPl,转染肝癌HepG2细胞后,qPCR和WB实验分别检测CAAP1mRNA和蛋白的表达水平.实验分为过表达对照组(p...