鼠抗人Fas单克隆抗体的制备及鉴定

采用Ｊｕｒｋａｔ细胞Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备１株抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａ１,它能特异性识别Ｊｕｒｋａｔ,Ｒａｊｉ,ＴＨＰ－１细胞膜表面５０ＫＤ左右的蛋白,并能与ＳｒＦａｓ标准蛋白反应,其识别的细胞膜蛋白与单抗特异性抗人Ｆａｓ ＰｃＡｂＮ－１８相一致。ｌｅｑ     

旋毛虫Ts87抗原单克隆抗体的制备及其识别肽段的研究

将原核系统成功表达的Ts87重组蛋白纯化后免疫动物,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗Ts87抗原的单克隆抗体.通过ElISA、免疫印迹、免疫组化等方法筛选出能分泌抗Ts87御抗原的抗体的阳性克隆,在1000个融合的杂交瘤细胞中,有3株融合细胞分泌的单克隆抗体(2A2,5A3,6G12)鉴定结果为阳性.这3株融合细胞分泌的抗体均能识别Ts87重组蛋白、旋毛虫成虫和幼虫的Ts87抗原以及旋毛虫幼虫组织切片.获得的抗Ts87抗原的单克隆抗体在将来的研究中可作为旋毛虫病的诊断试剂.为了进一步鉴定抗体识别的相应抗原表位和模拟抗原表位,选择了其中一株单克隆抗体5A3筛选噬菌体十二肽库.噬菌体M7展示的肽段是抗体识别Ts87抗原的线性表位,其他的噬菌体克隆展示的肽段是Ts87抗原的模拟表位.该技术为旋毛虫病多表位疫苗的构建奠定了基础.     

抗人C1q McAb轻链可变区基因结构特点

运用计算机进行基因序列分析在分子生物学研究中起重要作用，已被越来越多地用于研究大量累积的序列数据，获得许多重要发现。对抗人Ｃ１ｑ轻链可变基因（Ｃ１ｑＶ_Ｌ）的分析结果表明：Ｃ１ｑＶＬ属鼠ＩｇＶＫ基因家族，但与其它种属的Ｉｇ基因也显示较高同源性。它的另─个显著特点是与自身抗体编码基因高度同源。研究结果对我们进─步认识抗－Ｃ１ｑ抗体生理、病理作用具有─定价值。     

新的识别人活化B细胞分化抗原5C5单克隆抗体（5C5－G＿1）的制备和鉴定

新制备的抗人活化Ｂ细胞分化抗原５Ｃ５单克隆抗体５Ｃ５－Ｇ＿１经Ｗｅｓｔｅｒ印迹分析表明，该分化抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（还原条件下）显示五条带，分子量分别为９２ｋＤ、５２ｋＤ±（两条）、４０ｋＤ和２０ｋＤ。用单抗５Ｃ５和单抗５Ｃ５－Ｇ＿１的混合物，从３Ｄ５细胞的λｇｔｌｌｃＤＮＡ文库中筛选到７个阳性ｃＤＮＡ克隆。     

抗HSV糖蛋白单克隆抗体重链可变区DNA的克隆及序列分析

作者从分泌具有高中和活性和高保护作用的抗ＨＳＶ型共同性糖蛋白Ｃ的鼠源性单抗的杂交瘤细胞１Ａ１２／４Ｄ５中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ。用合成的寡核苷酸引物从中扩增了抗体的重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑取两个阳性克隆进行核苷酸序列分析，见所克隆基因确可编码小鼠抗体的重链可变区。     

鼠抗人IL－5单克隆抗体研制及初步应用探讨

Ｔ细胞杂交瘤来源的人ＩＬ—５免疫小鼠。用鼠鼠杂交瘤技术获得两株分沁抗人ＩＬ—５特异性单抗（Ｓ１７和Ｓ６６）的杂交瘤，并对Ｓ１７单抗的特性进行了探讨。实验结果表明；两株单抗皆为ＩｇＧ１亚类；Ｓ１７单抗能显著抑制ＭＴＨｈ５Ｒ细胞的增殖，不能竞争性抑制ＮＣ１７单抗与人ＩＬ—５的结合。利用Ｓ１７单抗作为包被抗体建立的检测人ＩＬ—５ＥＬＩＳＡ法具有较高的敏感性，提示其在临床上检测病人血中ＩＬ—５浓度应用的可能性。     

PATHOGENICITY AND SEQUENCE ANALYSIS OF A MOUSE MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST HUMAN ACETYLCHOLINE RECEPTOR IN MYASTHENIA GRAVIS

通过对乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）自身抗体分子结构以及与致病性关系的研究探讨重症肌无力（ＭＧ）及其动物模型——实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）的发病机理。ＡＣｈＲ抗体被动转移至大鼠后诱导出明显的ＥＡＭＧ。全身肌肉ＡＣｈＲ损失率和体重减轻率达４７．２±１５．３％和１３．４±２．２％。这株ＡＣｈＲ抗体的重链可变区基因由小鼠Ｑ５２胚系基因编码，其同源性为９４．８％，将这株抗体的重链和轻链可变区、尤其是互补决定区（ＣＤＲ）的核苷酸和氨基酸序列与其他致病性ＡＣｈＲ抗体比较发现，能诱导ＭＧ和ＥＡＭＧ的致病性ＡＣｈＲ抗体的结构并不是完全一致的。     

6株抗rhlL－8单克隆抗体识别表位的鉴定及双单克隆抗体夹心法ELISA检测IL－8方法的建立

采用酶标抗体竞争结合试验对６株抗ＩＬ－８单克隆抗体识别的表位进行了鉴定。按识别表位的不同可将６株单克隆抗体分为两组，一组包括２Ｇ２、４Ｃ３和４Ｅ１，识别相同或相近的表位；另一组包括４Ｄ７、５Ｃ９和５Ａ４，识别相同或相近的表位。在表位鉴定的基础上，选择识别不同表位的单克隆抗体用于建立双单克隆抗体夹心法ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－８，其中以４Ｄ７为包被抗体，４Ｃ３为酶标抗体的组合可获得最高的敏感性，对单核细胞源性ｒｈＩＬ－８（ＭＩＬ－８）及内皮细胞源性ｒｈＩＬ－８（ＥＩＬ－８）检测的敏感性可分别达到１５６ｐｇ／ｍｌ及３１２ｐｇ／ｍｌ。     

AN IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY OF TAL-1 PROTEIN EXPRESSION IN LEUKAEMIAS AND LYMPHOMAS WITH A NOVEL MONOCLONAL ANTIBODY, 2TL 242

Fifty formalin fixed, paraffin-embedded cases of T-acute lymphoblastic leukaemia (T-ALL) from 12 bone marrow trephines and 38 lymph nodes were stained with a new monoclonal antibody, 2TL 242, raised against recombinant TAL1 protein. The antibody recognizes TAL-1 polypeptides of molecular weight 39 and 41 kD (full length). In addition, a variety of other leukaemias and lymphomas were also stained with 2TL 242. Twenty-four of the 50 cases of T-ALL showed nuclear positivity, ranging from 10 to 90 per cent of leukaemic cells. A positive staining reaction was nuclear and stippled in pattern. Nuclear staining was not seen in any other type of leukaemia or lymphoma. Five cases of follicular lymphoma showed diffuse cytoplasmic staining of variable intensity. Although some background staining is obtained with this antibody, positive nuclear staining is easily distinguishable. This monoclonal antibody has a potential role in primary diagnosis and in the detection of minimal residual disease in T-ALL.     

肝细胞生长因子对肺癌细胞运动和侵袭的影响及原癌基因C-met的表达

肝细胞生长因子（ＨＧＦ）可调节许多细胞的运动和生长，检测了ＨＧＦ对５种人类非小细胞肺癌细胞运动和侵袭的作用，有３种细胞的运动和侵袭力在ＨＧＦ刺激后增加。用ＲＮＡ印迹检测ＨＧＦ受体——原癌基因Ｃ－ｍｅｔ产物，可证实这几种细胞均有Ｃ－ｍｅｔｍＲＮＡ存在。细胞蛋白印迹检测进一步证实了ＨＧＦ受体的存在。这些结果表明ＨＧＦ可能在人类非小细胞肺癌的侵袭和转移方面扮演重要角色。     

恶性疟原虫环子孢子蛋白单链抗体与按蚊cecropin A融合基因的构建、原核表达及生物学活性的初步分析

根据按蚊偏嗜性密码子对鼠源性恶性疟原虫环子孢子蛋白单链抗体2a10基因进行改造,并融合按蚊抗菌肽cecropin A编码基因。将获得的cecrop-m2a10融合基因克隆入原核表达载体pET32a（＋）中,对表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析并利用琼脂糖扩散法检测其抗菌活性。结果对鼠源性环子孢子蛋白单链抗体2a10中6种氨基酸的170个核苷酸进行了改造,融合cecropinA编码基因,成功构建了cecrop-m2a10融合基因。靶基因在大肠杆菌中以融合蛋白和包涵体的形式高效表达,包涵体经尿素溶解变性及透析复性后表达蛋白的纯度达75%并具备抗大肠杆菌DH5α的活性。本实验为进一步研究cecrop-m2a10在转基因蚊中的多重抗病原效应提供了基础。     

卵母细胞骨架与染色体行为及质膜表面Con A结合位点关系的研究

用体外培养和荧光双重标记技术研究小鼠卵母细胞骨架，染色体及细胞质膜表面（微绒毛，Ｃｏｎ Ａ结合位点）三者间相互关系。结果表明，不同的细胞骨架成分对染色体行为及质膜表面变化影响不同，中期微管主要聚合成纺锤体，构成减数分裂器的支架，影响染色体在赤道板上有序地排列和分离，微丝在卵母细胞皮质区呈极性分布，它是牵引减数分裂器（或染色体团）从细胞中央移到细胞皮质区的关键成分，同时微丝也参与后期和末期成对染色体     

猫骶尾髓胆碱能神经成分的形态和分布——胆碱乙酰化酶单克隆抗体的免疫组织化学方法研究

本实验应用单克隆抗胆碱乙酰化酶(ChAT)血清、卵白素—生物素复合体、AEC成色的免疫组织化学方法,对8只猫的骶尾髓进行了免疫组化染色观察。结果为:1.ChAT免疫反应阳性细胞:在L_7～Co_1节段前角各核团可见大量ChAT阳性神经元,它们可分为大、中、小3型。大、中型多极运动神经元的染色强度为淡至中等;小型神经元染色浓深,三者在核团内混杂存在。在骶髓中间带外侧核、中间带内侧核均可见梭形、圆形或椭圆形的副交感节前神经元,呈中等到深染;中介核内可见成色较淡的横向排列的长梭形神经元。在Ⅶ层内还可见成色深的中型多极神经元。在X层室周灰质中亦可见较深染的中、小型神经元。本文证明,后连合核区的腹侧部存在相当数量的小型阳性神经元,而在背侧部仅偶见于S_2节段。后角偶见小型淡染的神经元,散在于Ⅲ～Ⅴ层。2.ChAT免疫反应阳性纤维和终末在灰质各板层内均有分布,其密度依次为前角、中间带、中央灰质和后连合核区、后角。后角Ⅲ层者较密,Ⅰ层次之,而Ⅱ层甚为稀疏。前角诸核团内部及周围有阳性纤维分布,可见大量终扣与大、中型阳性神经元接触,还可见一些轴突末支上生有成串的终扣,围绕着一个细胞的胞体和树突基部,与之形成多个接触点。在中间带各核团间有横行纤维联系。     

表达人HGF／MBP融合蛋白的pMAL—MBP／HGF重组质粒的构建及鉴定

将人ＨＧＦ完整编码区ｃＤＮＡ片段插入ＭＢＰ表达型ｐＭＡＬ－Ｃ２载体质粒中，构建了表达人ＨＧＦ／ＭＢＰ融合蛋白的ｐＭＡＬ－ＭＢＰ／ＨＧＦ重质粒。表达的ＨＧＦ／ＭＢＰＧＥ分析分子量约为１１０ｋＤ，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ表明能被兔抗ＭＢＰ抗体和抗人ＨＧＦＭｃＡｂ所识别。     

Nesprins,but not sun proteins,switch isoforms at the nuclear envelope during muscle development

Nesprins are a family of nuclear transmembrane proteins anchored via Sun proteins to the nuclear membrane. Analysis of nesprins during human muscle development revealed an increase in nesprin‐1‐giant during early myogenesis in vitro. During the transition from immature to mature muscle fibres in vivo, nesprin‐2 partly replaced nesprin‐1 at the nuclear envelope and short nesprin isoforms became dominant. Sun1 and Sun2 proteins remained unchanged during this fibre maturation. In emerin‐negative skin fibroblasts, nesprin‐2‐giant was relocated from the nuclear envelope to the cytoplasm, not to the endoplasmic reticulum, while nesprin‐1 remained at the nuclear envelope. In emerin‐negative keratinocytes lacking nesprin‐1, nesprin‐2 remained at the nuclear envelope. HeLa cell nuclear envelopes lacked nesprin‐1, which was the dominant form in myoblasts, while a novel 130‐kD nesprin‐2 isoform dominated Ntera‐2 cells. The results suggest the possibility of isoform‐specific and tissue‐specific roles for nesprins in nuclear positioning. Developmental Dynamics 239:998–1009, 2010. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.     

THE PHYSIOLOGICAL CONCOMITANTS OF REACTION TIME PERFORMANCE AS A FUNCTION OF PREPARATORY INTERVAL AND PREPARATORY INTERVAL SERIES

The cardiac deceleration which occurs during the preparatory interval (PI) of a reaction time (RT) task was examined with reference to a facilitatory feedback model in contrast with a model which viewed the response as part of a somatic inhibitory response. Sixty-three male Ss were run in three independent groups in an RT study. Two groups received 96 trials (divided into blocks of 24) with PIs of 2, 4, 8, and 16 sec presented in a regular series counterbalanced for order. The third group received the same number of trials of each PI in a restricted random order. Heart rate (HR), chin electromyograph (EMG), eye blinks, and eye movements were recorded as dependent variables. Results indicated an orderly, time-locked decline in EMG, eye blinks and movements, which was closely concomitant with a deceleration in HR during the PI. With some exceptions, the various measures demonstrated similar functional relationships with Group and PI variables. The results failed to differentiate between the feedback and somatic inhibitory models because the only combination of variables which eliminated HR deceleration also eliminated the inhibition of the somatic measures. This fact is consistent with the somatic inhibitory model, but is neutral with respect to the feedback model. Different statistical methods for examining the cardiac-somatic concomitance were discussed.     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛A细胞的结构和功能变化

目的　探讨胰岛Ａ细胞参与溃疡自愈调节的可能途径。　方法　应用形态计量、放射免疫测定及透射电镜方法，研究大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛Ａ细胞的面数密度、超微结构及血清胰高血糖素的变化。　结果　与正常组及盐水组比较，Ａ细胞面数密度于溃疡后６ｄ、１０ｄ 明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。溃疡后１４ｄ 开始呈减小趋势，２８ｄ 基本恢复正常。Ａ细胞超微结构变化在溃疡后第６～１４ｄ 较明显，主要表现为：（１）细胞核增大，异染色质减少，核周隙扩张；（２）部分Ａ 细胞粗面内质网增多，有的呈板层状排列，有的扩张成囊泡；（３）部分Ａ 细胞内分泌颗粒增多，大小不等，密度不一。血浆胰高血糖素水平从溃疡后１４ｄ 到２１ｄ 呈增高趋势（Ｐ＜ ０．０１），２８ｄ 时接近正常。　结论　胰岛Ａ细胞的形态和功能变化表明，它通过增加其细胞数目及增强其合成与分泌胰高血糖素的功能，积极参与了胃溃疡自愈的调节过程。     

以HRP及氚水作示踪剂研究脑脊液的回流途径

目的 研究脑脊液（ＣＳＦ）的正常回流途径。方法 将ＨＲＰ氚水作为示踪剂分别缓慢注入两组大白鼠侧脑室。应用光，电镜技术和液闪，放射自显影技术对ＨＲＰ和氚水脑组织中分布状况进行观察。结果 在脑室周围器官及脑室周围室管膜，软脑膜层有ＨＲＰ反应产物的聚集，在鼻中隔的鼻粘膜下组织间隙，嗅丝周围间隙及静脉周围和管腔也可见到ＨＲＰ反应产物；     

胶体金标记人外周血白细胞表面 Con A 受体及其定位和定量分析

本实验用刀豆球蛋白 A-辣根过氧化物酶胶体金(Con A-HRP-G)法定量分析了戊二醛固定后的人外周血白细胞表面受体的分布和密度,可见所有白细胞以及血小板均显示具有 Con A受体。细胞表面平均每μm 周长金标 Con A 复合物的定量分析表明,细胞表面 Con A 受体标记密度因细胞类型而不同。各类血细胞 Con A 受体的标记密度依次为:分叶核中性粒细胞<单核细胞>NK 细胞>杆状核中性粒细胞>嗜碱粒细胞>嗜酸粒细胞>淋巴细胞。小淋巴细胞的密度明显多于大淋巴细胞。NK 细胞表面的受体有极性分布。以上结果说明:1.Con A 受体与细胞功能活性有关,细胞越活跃,则其表面 Con A 受体越多;2.Con A 受体可能与细胞的识别功能有关,如NK 细胞 Con A 受体呈极性分布的现象;3.Con A 受体数目与细胞的成熟程度有关,细胞越成熟,其表面 Con A 受体越多。     

雷公藤T4组分对人脐带静脉内皮细胞增殖及产生IL－6的影响

本文报道雷公藤Ｔ４组分对血管内皮细胞增殖及产生白细胞介素－６（ＩＬ－６）的影响研究，将人脐带静脉血管内皮细胞与Ｔ４不同剂量（２．５，５，１０和２０ｎｇ／ｍｌ）一起培养２４小时，ＭＴＴ比色法测定发现，Ｔ４浓度为２０ｎｇ／ｍｌ时显著抑制内皮细胞的增殖（Ｐ＜０．０５），经ＥＬＩＳＡ法显示，Ｔ４浓度５ｎｇ／ｍｌ时始显著抑制内皮细胞产生ＩＬ－６（Ｐ＜０．０５）。这些抑制作用与Ｔ４剂量呈依赖趋势。