LC-MS/MS测定人血浆中的辛伐他汀

目的建立测定人血浆中辛伐他汀的方法。方法采用LC-MS/MS法,血浆样品中加入内标洛伐他汀,经乙腈沉淀蛋白后,以正离子多反应监测(MRM)方式测试,用于定量的离子为m/z441.2→325.2(辛伐他汀)和m/z427.2→325.2(洛伐他汀)。色谱柱为Restek Allure C18(50 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液(70:30)。结果血浆中辛伐他汀的线性范围为0.1-50.0 ng.ml-1,定量限为0.1 ng.ml-1,方法回收率为98%~102%,日内RSD<3.6%,日间RSD<5.6%。结论所建方法专属性好、灵敏度高,符合血浆样品测定的要求,适用于辛伐他汀的临床药物动力学研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中阿罗洛尔浓度

目的 建立LC- MS/MS方法测定人血浆中阿罗洛尔的浓度。方法 人血浆样品用乙酸乙酯提取后,选用ZORBAX Extend C₁₈(2.1 mm×100 mm,3.5 mm)色谱柱,以乙腈-水(80∶20,含0.1%甲酸)为流动相,流速为0.30 mL·min^-1,采用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z372.3→315.9(阿罗洛尔)和m/z 267.2→145.0(内标阿替洛尔)。结果 血浆中阿罗洛尔的线性范围为0.5~1 000 ng·mL^-1(r=0.995 2),定量下限为0.5 ng·mL^-1;日内、日间RSD均<15%; 低、中、高3 个浓度的提取回收率分别为(80.6±1.6)%,(83.2±3.1)%和(87.5±4.5)%。结论 该方法快速、灵敏、准确,专属性强,重复性好,适用于人血浆中阿罗洛尔浓度的测定,可应用于阿罗洛尔的血药浓度检测和药动学研究。     

HPLC—MS测定人血浆中格列吡嗪及其药动学研究

目的：建立HPLC—MS测定人血浆中格列吡嗪的方法,并研究其在健康人体内的药动学特征。方法：以格列本脲为内标,血样经乙酸乙酯提取,采用Lichrospher ODS（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵水溶液（80：20）为流动相,流速1．0ml·min^-1;质谱选择性检测阴离子质荷比（m／z）444．2。24名健康受试者随机分成两组,分别进行高、中、低剂量和中剂量多次给药药物动力学试验。结果：格列吡嗪的线性范围为3．0～2000ng·ml^-1（r=0．9995,n=5）,提取回收率〉92％,日内和日间RSD均≤11．1％。格列吡嗪的t1/2为3．64h～3．90h,MRT为5．62h～5．91h;多次给药后pss—min为（85．20±18．98）ng·ml^-1,DF为（2．01±0．36）,R为（0．91±0．10）。结论：该法灵敏、准确、简便。在本研究剂量范围内,格列吡嗪呈线性动力学特征且在健康受试者体内不存在累积现象。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸

目的 采用LC-MS/MS法同时测定人血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸.方法 采用BEH C18色谱柱(50 mm ×2.1mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵(72∶28),流速0.15 mL·min-1,柱温40℃,进样量8μL.辛伐他汀、辛伐他汀酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419.43→199.12、437.38→303.26、405.45→199.14.结果 辛伐他汀、辛伐他汀酸的线性范围分别为0.241 ～61.76 ng·mL-1(r =0.999)、0.344 ～ 88.16 ng·mL-1(r =0.997).在人血浆基质中,高、中、低浓度(0.482、3.86、30.88 ng· mL-1)的日内、日间RSD均小于15％,方法回收率分别为95％～104％、97％ ～108％.样品预处理方法对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸测定无干扰.结论 所用方法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,可为辛伐他汀制剂的药动学研究提供方法.     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中维拉帕米和代谢产物去甲维拉帕米

建立一种简便、灵敏的同时测定人血浆中维拉帕米和去甲维拉帕米浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的分析方法,并用于健康人体的药代动力学研究。血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,使用Agilent Zorbax Eclipse C18色谱柱(50 mm×4.6 mm, 5μm)分离,以0.1%甲酸-5%乙腈-10 mmol·L^-1甲酸铵水溶液作为水相,甲醇-乙腈(50∶50, v/v)溶液作为有机相, 0.5 m L·min-1的流速进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),多反应(MRM)正离子监测模式对维拉帕米、去甲维拉帕米及内标维拉帕米-d6进行定量检测,监测离子对分别为m/z 445.0→165.2、m/z 441.0→165.2和m/z 461.1→165.2。本文建立的同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度的LC-MS/MS方法的定量下限(LLOQ)为0.1 ng·m L^-1,且在0.1～50 ng·m L^-1浓度内线性关系良好(r²> 0.997)。维拉帕米及去甲维拉帕米的基质效应...     

用LC-ESI-MS测定人血浆中替米沙坦的浓度及其药动学和生物利用度研究

目的建立测定人血浆中替米沙坦的液质联用方法。方法采用乙腈直接沉淀血浆蛋白后由ODS柱分离,质谱检测器测定。结果该方法的线性范围为2~500μg.L-1(r=0.999 2),方法回收率在95.8%~105.2%之间,日内和日间精密度都<10%。采用自身对照交叉试验,单剂量分别给予20名男性健康志愿者2种国产替米沙坦片40 mg,其主要药动学参数ρmax为(220.70±95.80)和(233.11±105.52)μg.L-1,AUC0→96为(1 908.54±650.43)和(1 986.26±553.24)μg.h.L-1,t1/2为(24.1±4.2)和(24.8±3.8)h;tmax为(1.8±0.6)和(1.7±0.7)h。结论两种制剂间的主要动力学参数无明显差异,为生物等效制剂,其相对生物利用度为(95.6±6.4)%。     

LC/MS联用法测定人血浆中右美沙芬的浓度及其药动学研究

目的:建立以液/质联用法测定人血浆中右美沙芬浓度的方法,并研究其在健康人体的药动学。方法:以曲马多为内标,血浆样品经液-液萃取后,采用Zorbax Extend-C18色谱柱进行分离,通过Q TRAPTM四极杆-线性离子阱质谱仪,以多反应检测方式进行测定。结果:右美沙芬的线性范围为0.05~10.0ng.mL-1(r=0.999 5);平均相对回收率在97.7%~99.5%之间;日内、日间精密度的RSD均小于6.8%,右美沙芬的定量下限为0.05ng.mL-1。结论:本法快速、简便、准确、灵敏,适用于右美沙芬的人体药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物的浓度

目的:建立测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物浓度的方法。方法:血样以叔丁基醚提取后,采用液-质联用(LC-MS/MS)法进样测定。色谱柱为Waters C18,流动相为5 mmol/L醋酸铵-甲酸-甲醇(70∶0.1∶30),流速为0.3 ml/min,柱温为30℃,内标为氨溴索;采用电喷雾离子化(ESI)离子源,以多反应监测(MRM)模式检测,伊伐布雷定、去甲伊伐布雷离子对的m/z分别为469.2/177.1、455.2/177.1。结果:伊伐布雷定、去甲伊伐布雷定血药浓度分别在0.48¹20、0.16120、0.16⁴0 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.999 8和0.999 7);方法回收率分别为96.35%40 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.999 8和0.999 7);方法回收率分别为96.35%⁹8.33%、96.20%98.33%、96.20%¹02.50%;日内、日间RSD均<7%;血浆样品长期冻存(-20℃冷冻1个月)稳定性良好,反复冻融3次及室温放置4 h条件下,样品浓度均无显著变化。结论:本方法快速、简便、灵敏、准确,可用于伊伐布雷定的药动学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度。方法:血浆样品用甲基叔丁基醚提取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行UPLC-MS/MS测定。色谱柱:BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.01 mol.L-1醋酸铵(72∶28);流速:0.15 mL.min-1;柱温:40℃,进样量:8μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419→199,437→303,405→199。结果:血浆样品中辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸线性范围分别为0.241～61.76 ng.mL-1(r=0.999,n=5)和0.344～88.16 ng.mL-1(r=0.997,n=5),日内、日间精密度(RSD)均小于15%,方法的平均回收率分别为100.6%和106.0%,血浆基质对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸测定无干扰。结论:建立的UPLC-MS/MS法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为辛伐他汀制剂的临床药代动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中阿托伐他汀及其活性代谢产物

目的 建立LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀、邻羟基阿托伐他汀及对羟基阿托伐他汀的方法,并应用于CYP3A酶诱导模型大鼠和正常大鼠体内阿托伐他汀的药动学研究。方法 采用甲基叔丁基醚-乙酸乙酯（50︰50）液液萃取法提取大鼠血浆中药物。使用XBridge C₁₈（2.1 mm×250 mm,3.5 μm）色谱柱,柱温35℃;流动相为0.1%甲酸-乙腈（40：60）,等度洗脱4.4 min,流速0.2 mL·min^-1;进样体积10 μL。质谱采用电喷雾离子（ESI）源,以正离子多反应监测（MRM）模式进行定量分析,选择m/z 559.1→440.1（阿托伐他汀）,m/z 575.3→440.2（邻羟基阿托伐他汀/对羟基阿托伐他汀）,m/z 564.3→445.3（阿托伐他汀-d₅,内标）作为检测离子对。以地塞米松80 mg·kg^-1·d^-1连续灌胃给药4 d,建立CYP3A酶诱导模型,取正常及模型大鼠给药后0,0.083,0.17,0.25,0.33,0.5,0.75,1,1.5,2,3,4,6 h血样于肝素抗凝管中,离心收集血浆,冷冻保存直到进行测定。结果 阿托伐他汀及其2种代谢产物在0.49~500.00 ng·mL^-1内均有良好的线性关系（r²>0.99）;批内、批间精密度RSD<15%（n=6）;方法的提取回收率和基质效应均满足生物样品的检测要求;含药血浆在室温放置4,24 h、4℃放置3 d稳定。诱导组大鼠血浆中阿托伐他汀血药浓度达峰时间（T_max）提前,血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-t）显著低于正常组,消除速率常数K和清除率CL略高于正常组。结论 新建立的方法简便、稳定、灵敏,能够用于大鼠血浆内阿托伐他汀及其活性代谢产物的浓度测定和药动学研究。进入CYP3A酶诱导模型大鼠与正常大鼠体循环的活性药物成分差异显著。     

人血浆中辛伐他汀的HPLC-MS/MS测定

建立了HPLC-MS／MS法测定人血浆中辛伐他汀的浓度，并以24名健康志愿者进行了两种辛伐他汀片的生物等效性研究。采用C18柱，流动相为0．5％甲酸溶液和乙腈，梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子化，定量分析离子分别为m/z482．0-441．0（辛伐他汀）和m／z468．0→427．0（洛伐他汀，内标）。辛伐他汀在0．2-50ng／ml范围内线性关系良好。方差分析和双单侧t检验表明两制剂生物等效。     

超高效液相色谱-串联质谱测定保健食品中马兜铃酸A

目的建立测定保健食品中马兜铃酸A的超高效液相色谱-串联质谱法。方法采用Zorbax Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸(含10 mmol.L 1甲酸铵)(60∶40);流速:0.2 mL.min 1;质谱条件为电喷雾电离源(ESI+),以多重反应监测(MRM)方式进行检测,用于定量分析的反应离子为m/z 359→324。结果马兜铃酸A在2~200 ng.mL 1内线性关系良好,方法平均回收率为105.3%,RSD为0.8%,最低检测限为0.2μg.kg 1。结论本法专属性强,灵敏度和准确度高,可用于保健食品中马兜铃酸A的测定。     

UHPLC-MS/MS同时检测大鼠血浆中5种CYP450探针药物

目的 采用UHPLC-MS/MS同时检测大鼠血浆中非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔、咪达唑仑的血药浓度。方法 血浆样品经乙腈沉淀,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）;流动相为乙腈-含0.1%甲酸的水,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1。检测采用电喷雾离子源,多反应监测。非那西丁：[M+H]⁺,m/z 180.1→109.9;甲苯磺丁脲：[M+H]⁺,m/z 271.1→91.0;奥美拉唑：[M+H]⁺,m/z 346.1→135.9;美托洛尔：[M+H]⁺,m/z 268.2→115.0;咪达唑仑：[M+H]⁺,m/z 326.1→290.8;内标卡马西平：[M+H]⁺,m/z 237.1→194.0。6只♂ SD大鼠,单剂量口服灌胃10 mg·kg^-1非那西丁,1 mg·kg^-1甲苯磺丁脲,10 mg·kg^-1奥美拉唑,10 mg·kg^-1美托洛尔和10 mg·kg^-1咪达唑仑,分别在给药后多点尾静脉采血。用DAS计算药动学参数。结果 血浆中非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔和咪达唑仑在各自浓度范围内线性关系良好。日内及日间RSD均<15%,提取回收率>75%,稳定性考察结果良好。非那西丁的AUC_0-t为（5 868.30±2 062.87）ng·mL^-1·h;甲苯磺丁脲的AUC_0-t为（58 056.34±15 569.16）ng·mL^-1·h;奥美拉唑的AUC_0-t为（14 181.67±4 085.40）ng·mL^-1·h;美托洛尔的AUC_0-t为（1 123.67±180.469）ng·mL^-1·h;咪达唑仑的AUC_0-t为（946.91±322.03）ng·mL^-1·h。结论 该方法灵敏度高、操作方便、结果准确,可作为CYP450酶活性及相关研究的测定方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中非索非那定的浓度及其应用

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定人血浆中非索非那定的浓度,并用于灯盏花素对人P-糖蛋白体内活性影响的研究。方法：200 μL血浆经500 μL乙腈沉淀蛋白后,采用Waters ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈柱（50 mm×2.1 mm,1.7 μm）为色谱柱,以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1;质谱采用电喷雾正离子模式离子化（ESI⁺）和多反应监测模式（MRM）扫描,非索非那定和苯海拉明（内标）的定量离子对分别为m/z 502.2→466.5和m/z 256.1→167.1。结果：非索非那定和苯海拉明的保留时间分别为2.19 min和1.89 min。人血浆中非索非那定的提取回收率、方法过程效率和基质效应均值分别为84.3%~89.6%、86.3%~90.8%和101.2%~104.2%;线性范围为1.00~1 000 ng·mL^-1（r=0.999 5）;日内、日间精密度RSD ≤ 10.9%,准确度RE%为-7.6%~5.0%;稳定性RSD和RE均在±15%内。18名志愿者给予灯盏花素或安慰剂后,非索非那定的达峰浓度C_max为（699±321）vs（710±331）ng·mL^-1、0到24 h的血浆浓度-时间曲线下面积AUC_0-24为（2 687.3±1 188.8）vs（3 015.0±1 550.2）ng·h·mL^-1、表观口服清除率CL/F为（51.3±23.8）vs（49.6±26.3）L·h^-1。结论：建立的基于UHPLC-MS/MS测定人血浆中P-糖蛋白底物非索非那定浓度的分析方法灵敏、简单,并成功应用于灯盏花素对人P-糖蛋白体内活性影响的研究。     

UHPLC-MS/MS同时检测人血浆中5种麻醉药物

目的 建立UHPLC-MS/MS同时检测人血浆中瑞芬太尼、舒芬太尼、依托咪酯、右美托咪定、地佐辛5种麻醉药物的分析方法,为指导临床用药提供参考。方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白质后进样分析,以普鲁卡因为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈（2.1 mm×150 mm,2.7 μm）色谱柱进行色谱分离;以甲醇-10 mmol·L^-1甲酸铵溶液（28：72,用甲酸调节pH至3.5）为流动相,流速0.2 mL·min^-1;采用电喷雾电离源正离子检测模式,以多反应监测方式进行分析。结果 人血浆中瑞芬太尼、舒芬太尼、依托咪酯、右美托咪定、地佐辛分别在0.25~25.32（r=0.998 7）,0.27~27.48（r=0.999 2）,1.54~154.05（r=0.999 5）,0.51~51.35（r=0.999 2）,0.56~56.19（r=0.998 8）ng·mL^-1内线性关系良好。日内和日间精密度RSD均<10.0%,提取回收率均处于92.8%~107.3%之间。该方法成功应用于30例临床患者血浆样本分析。结论 该方法操作简单快速、灵敏度高、专属性高且稳定,适用于人血浆中瑞芬太尼、舒芬太尼、依托咪酯、右美托咪定、地佐辛5种麻醉药物的分析,能够服务于临床治疗药物监测。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法。方法血浆样品中加入内标,用乙醚提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定。结果血浆样品中辛伐他汀线性范围为0.1～20ng·mL-1(r=0.9999);萃取回收率为94.3%。结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于辛伐他汀片人体药动学及生物等效性研究。     

UHPLC-MS/MS测定人血浆中依匹哌唑浓度及其生物等效性研究

目的 建立简便灵敏的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UHPLC-MS/MS)测定人血浆中依匹哌唑浓度,并应用于2种片剂的生物等效性研究。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈-甲醇(50∶50,含0.1%甲酸)(B)梯度洗脱,流速0.4 mL·min^–1,进样量为2μL,柱温40℃,以正离子MRM模式测定依匹哌唑(m/z 434.2→273.2)的浓度,依匹哌唑-d₈(m/z 442.4→281.3)作为内标,离子源为ESI源。血浆样本加入内标,加入甲醇后进行蛋白沉淀,取上清液稀释后进样检测。结果 依匹哌唑在0.2～50 ng·mL^–1呈线性关系,定量下限为0.2 ng·mL^–1,质控样品批内、批间精密度CV≤5.0%,准确度相对偏差在标示值–1.7...     

UHPLC-MS/MS同时测定中药饮片中4种恩镰孢菌素

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）检测中药饮片中4种恩镰孢菌素含量的分析方法。方法 样品采用70%甲醇超声处理后,以2 mmol·L^–1醋酸铵、甲醇-乙腈为流动相,经Agilent Infinity Lab Poroshell 120 SB-C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）梯度洗脱分离,在电喷雾电离（electrospray ionization,ESI）正离子模式下采用多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）进行测定,基质外标法定量。结果 在高、中、低3个加标水平下,4种恩镰孢菌素的平均回收率为92.15%~118.67%,各恩镰孢菌素在线性范围内线性关系良好,相关系数均≥0.999,方法检出限为0.002~0.02 μg·kg^–1,定量限为0.01~0.1 μg·kg^–1,结果显示4种恩镰孢菌素对17种样品均有不同程度的污染。结论 该方法简便、快速、准确,适用于中药饮片中4种恩镰孢菌素筛查。药饮片中恩镰孢菌素检出率较高。     

LC/MS/MS法测定辛伐他汀血浆浓度及其在健康人体内的药物动力学研究

目的:建立人体血浆中辛伐他汀的LC/MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在男性健康志愿者体内的药物动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:采用两制剂双周期自身对照试验设计。18名男性健康志愿者随机交叉服用单剂量辛伐他汀试验片剂和参比片剂20mg,采用液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)分析方法测定血浆辛伐他汀的浓度。采用DAS2.0程序计算药物动力学参数和相对生物利用度,并进行等效性评价。结果:测定单剂量口服20mg辛伐他汀参比片剂和试验片剂的AUC_((0→24))分别为(14.90±5.86)和(14.37±4.94)ng·h·ml~(-1),AUC_((0→∞))分别为(15.62±6.29)和(14.78±5.02 )ng·h·ml~(-1);C_(max)分别为(4.54±2.11)和(4.00±1.34)ng·ml~(-1);T_(max)分别为(1.75±0.79)和(1.39±0.65)h。以AUC_((0→24))与AUC_((0→∞))计算相对生物利用度分别为(108.0±52.7)%和(106.4±52.5)%。结论:该法准确灵敏,测得的数据可靠,统计分析表明两种制剂生物等效。     

LC/MS/MS法测定人血浆中非那雄胺的浓度及其药代动力学研究

目的:建立LC/MS/MS法测定人血浆中非那雄胺的浓度,并研究其在中国男性健康人体内的药代动力学。方法:采用LC/MS/MS(APCI源)测定非那雄胺的血浆浓度,并计算其药代动力学参数。结果:非那雄胺线性范围为0.2～50.0μg·L~(-1),定量下限为0.2μg·L~(-1)。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,准确度(PE)在±3％内。应用本法测得18名中国男性健康志愿者口服5mg非那雄胺片后主要药代动力学参数为:t_(1/2ke)为5.57±1.60h,K_e为0.12±0.06H~(-1),t_(max)为2.31±0.82h,C_(max)为4O.31±10.89μg L~(-1);AUC_(0-t)和AUC(0-∞)分别为267.9±75.0μg h L~(-1)和286.6±88.6μghL~(-1)。结论:该法操作简便、快速、灵敏,可用于测定血浆中非那雄胺浓度。