角质形成细胞相关基因的研究进展

角质形成细胞是表皮的主要构成细胞，很多皮肤病都有不同程度的角质形成细胞受累，而角质形成细胞受累经常涉及到基凶的变化，目前已知与角质形成细胞相关的基因主要有癌基因、抑癌基因、凋亡调节基因等。     

体外角质形成细胞生长DNA合成动态观测-银屑病细胞动力学探讨

目的 观察银屑病角质形成细胞体外生长合成，探讨其病因。方法 应用体外角质形成细胞培养技术对１８例银屑病患者受累、未受累的表皮角质形成细胞进行了培养，并将其角朊细胞在孵育期中的＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率及标记指数与正常对照做了比较。结果 银屑病病人受累，未受累表皮角质形成细胞＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率在孵育期的第３－４天升高，与正常人相比均有显著差异。     

皮肤科学基础

20131668 PML基因诱导角质形成细胞凋亡及其Fas,Fasl和Bcl-2表达/王琼玉(西安交大医学院二附院皮肤科),马慧群,王世捷…//中国皮肤性病学杂志.-2013,27(6).-550~596通过流式细胞仪及AnnexinV法检测经PML基因转染的角质形成细胞凋亡;采用免疫组织化学、基因探针杂交测定经PML基因作用后的角质形成细胞Fas,Fasl和Bcl-2表达。结果:PML基因上调角质形成细胞Fas及Fasl表达(P<0.01),抑制Bcl-2基因表达,诱导     

反义寡核苷酸阻遏角蛋白14的表达

目的 研究脂质体介导角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)阻遏人角质形成细胞K14基因和蛋白的表达及抑制体外增殖活性的效果.方法 人表皮角质形成细胞原代培养,3~10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞,应用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(SABC)方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.结果 脂质体介导的K14反义寡核苷酸转染角质形成细胞后,能有效地抑制角质形成细胞中K14基因的表达;48h后可阻遏K14蛋白表达;流式细胞仪检测见反义寡核苷酸处理组细胞周期发生明显改变,G₁期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降.而正义寡核苷酸1组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此变化.结论 应用反义技术封闭K14基因,可以阻遏角蛋白K14基因和蛋白的表达,并可以抑制体外培养的角质形成细胞的增殖.     

银屑病角质形成细胞p14ARF基因甲基化的研究

目的:检测银屑病皮损角质形成细胞p14ARF基因启动子区甲基化,探讨其与银屑病发病的关系。方法:利用甲基化特异性PCR技术检测37例银屑病及35例正常人角质形成细胞p14ARF基因启动子区甲基化状态。结果:37例银屑病皮损角质形成细胞p14ARF基因启动子区甲基化阳性率为43.2%(16/37),显著高于正常对照(χ2=13.5,P<0.05)。结论:p14ARF基因启动子区甲基化与银屑病角质形成细胞过度增殖具有一定的关系。     

皮肤科学基础

20042639　角蛋白K14反义寡核苷酸对角质形成细胞增殖的影响/陈玉欣(四军大西京医院全军皮肤性病中心)…//临床皮肤科杂志.-2004,33(5).-263～265采用脂质体将人工合成的正义、反义及错配寡核苷酸基因片段导入体外培养的角质形成细胞,应用细胞生长抑制实验、透射电镜和流式细胞仪分别检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的增殖、超微结构和细胞增殖周期的影响。结果显示,脂质体介导的K14反义寡核苷酸对角质形成细胞的增殖活性有明显抑制作用;电镜下见角质形成细胞中角蛋白合成明显减少;流式细胞仪检测见细胞周期发生明显改变,G1期细胞百分率上…     

β—半乳糖苷酶基因转染角质形成细胞的瞬时表达检测

为了解角质形成细胞作靶细胞进行基因转染,基因表达的可行性,用ｐＳＬＸＣＭＶ－βｇａｌ转染原代皮肤角质形成细胞,并观察其瞬时表达情况,发现转染后３６小时细胞即可表达β－半乳糖苷酶,表现为细胞蓝染,４８小时蓝染细胞最多,约占总细胞数的１．５％。提示外源基因能够在角质形成细胞中有效地表达。     

UVB诱发皮肤癌的分子机制研究进展

皮肤癌系表皮角质形成细胞恶性增生的结果,是人类最常见的恶性肿瘤。中波紫外线是诱发皮肤癌的主要因素;但其诱发皮肤癌的确切机制尚未完全阐明。其中,中波紫外线对角质形成细胞的DNA损伤,是诱发皮肤癌的基础;而执行DNA的损伤修复,维持基因组完整性的管理基因的缺陷,和控制细胞信号传导,调控细胞的增殖、分化和凋亡的看门基因,如p53、patched基因的突变,是皮肤癌发生的关键。     

皮肤科学基础

20 0 4 196 7　反义寡核苷酸阻遏角蛋白 14的表达 /陈玉欣 (四军大西京医院皮肤科 )… / /中华皮肤科学杂志 .-2 0 0 4 ,37( 4) .- 2 2 4～ 2 2 6人表皮角质形成细胞原代培养 ,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配 K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞 ,应用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)和免疫组化 ( SABC)法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响。结果显示 ,应用反义技术封闭K14基因 ,可以阻遏角蛋白K14基因和蛋白的表达 ,并可以抑制体外培养的角质形成细胞的增殖。提示以 K14为靶…     

角蛋白16在皮肤屏障功能中的作用

角蛋白16是表皮角质形成细胞主要的结构蛋白之一,在维持细胞功能及皮肤屏障功能方面起着重要作用.角蛋白16的表达不仅高度依赖角质形成细胞状态和分化程度,在不同类型的上皮细胞内表达程度也不同,当角蛋白16的表达异常时,病变部位的皮肤屏障功能会受到不同程度的破坏,未受累皮肤的屏障功能也会受到影响,不仅皮肤渗透屏障功能受到影响,还会引起皮肤炎症反应和免疫反应,导致机体受到进一步损害.     

非节段型白癜风患者皮损单细胞转录图谱的初步研究

【摘要】 目的 采用单细胞RNA测序技术鉴定和区分白癜风皮损真表皮细胞亚群，并研究它们之间的关系。方法 2019年9月在杭州市第三人民医院皮肤科门诊收集2例健康人（无免疫及系统性疾病）正常皮肤和2例非节段型稳定期白癜风患者皮损样本，采用10 × Genomics单细胞RNA-Seq技术检测，对所有样本的11 000个细胞进行单细胞转录组测序。通过Seurat软件分析、筛选和统计细胞亚群。结果 对2例正常皮肤基因表达的聚类分析发现包括角质形成细胞、成纤维细胞、神经及黑素细胞、内皮细胞、组织干细胞和以树突细胞及T细胞为主的免疫细胞群。2例白癜风皮损中分化和数量异常的有成纤维细胞和4类角质形成细胞亚群，其中，成纤维细胞占比为0，低于正常皮肤（0.4%），角质形成细胞亚群5、6、10、12占比（8.03%、7.36%、3.52%、0.91%）均显著高于正常皮肤（4.47%、3.53%、2.69%、0.28%，均P＜0.01）。上述亚群的角质形成细胞处于细胞分化的末端，同时还具有极显著且特异的标记基因，分析显示，标记基因主要与细胞间相互作用和细胞稳态密切有关，GO和KEGG分析显示，角质形成细胞亚群5、6主要与细胞间连接和细胞黏附及细胞骨架功能相关，角质形成细胞亚群10与细胞稳态紧密相关。结论 国内首次报道通过单细胞测序手段研究白癜风皮损的转录表达谱，初步发现4群数量及功能差异的角质形成细胞，提示角质形成细胞亚群的异常分化与功能异常可能影响白癜风的发生发展。     

缺氧在银屑病发病机制中的作用

银屑病是一种以鳞屑性红斑、丘疹、斑块为主要临床表现的皮肤病,其表皮角质形成细胞的过度增殖使其具备类似肿瘤的生物学行为,与肿瘤组织一样,均存在局部缺氧现象.缺氧可使角质形成细胞低氧诱导因子1 α及其相关的多种基因,如血管内皮生长因子、一氧化氮合酶、基质金属蛋白酶2、环氧合酶2、胰岛素样生长因子2、神经生长因子、组蛋白去乙酰化酶1和LL37等因子的表达升高,从而促进炎症细胞浸润、表皮细胞增生和血管形成.缺氧还可使角质形成细胞糖酵解有关酶的表达增高,使得细胞糖酵解功能增强,从而满足细胞快速增殖的能量需求.     

角质形成细胞异常诱发银屑病：基因工程动物模型的启示

银屑病的发病机制目前尚未完全阐明［1］。30年来,学术界一直对角质形成细胞和免疫细胞的功能异常在银屑病发病中孰为因果存在争论［2］。起初认为银屑病是由于角质形成细胞异常增殖引起的,但随着研究的深入,在皮损区发现Th1和Th17细胞浸润,遂将注意力转向T细胞介导的免疫反应,并逐渐将其作为银屑病发病机制的核心［1］。近年来,基因工程银屑病动物模型研究发现,角质形成细胞在银屑病皮肤炎症的启动和维持中均发挥关键作用。根据基因工程技术的特点,银屑病小鼠模型主要分为条件性基因敲除和先天性基因表达异常小鼠模型。前者是在小鼠成年以后,通过注射枸橼酸他莫昔芬特异性敲除角质形成细胞内的某些蛋白质而诱发银屑病,更接近于人类银屑病的发生过程。后者是通过特异性细胞内基因敲除或插入技术,使小鼠出生时即有角质形成细胞内蛋白质表达增多或缺失,更接近于先天性疾病的发病模式。本文简述几种银屑病基因工程动物模型以及相关研究,并结合近年我们团队取得的一些研究成果,分析并深入理解角质形成细胞在银屑病发病机制中的作用……     

UVB诱发皮肤癌的分子机制研究进展

皮肤癌系表皮角质形成细胞恶性增生的结果，是人类最常见的恶性肿瘤。中波紫外线是诱发皮肤癌的主要因素；但其诱发皮肤癌的确切机制尚未完全阐明。其中，中波紫外线对角质形成细胞的DNA损伤，是诱发皮肤癌的基础；而执行、DNA的损伤修复，维持基因组完整性的管理基因的缺陷，和控制细胞信号传导，调控细胞的增殖、分化和凋亡的看门基因，如p53、patched基因的突变，是皮肤癌发生的关键。     

nicastrin基因沉默的HaCaT细胞基因表达谱分析

【摘要】 目的 通过沉默人永生化角质形成细胞HaCaT细胞中nicastrin（NCSTN）基因的表达,研究其下游细胞增殖及分化相关信号通路的改变。方法 将HaCaT细胞分为干扰组、阴性对照组和空白对照组：干扰组转染特异性NCSTN-siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组转染等量转染试剂。实时PCR及Western印迹检测各组NCSTN mRNA和蛋白表达验证转染效率。运用Agilent人类全基因组表达谱芯片技术研究干扰组HaCaT细胞基因表达谱与阴性对照组之间的差异,以表达上调或者下调倍数 ≥ 2.0且P ≤ 0.05为标准,将差异基因用GO分析进行富集,筛选出表达差异显著且与角质形成细胞增生分化相关的基因,用实时PCR验证结果。结果 干扰组HaCaT细胞NCSTN mRNA及蛋白相对表达量分别为0.287 ± 0.090、0.443 ± 0.085,明显低于阴性对照组（0.969 ± 0.127、1.047 ± 0.114）以及空白对照组（1.000 ± 0.151、1.000 ± 0.111）,差异均有统计学意义（F值分别为30.787、31.139,P值均为0.001）。表达谱芯片显示,与阴性对照组相比,干扰组表达下调基因605条,上调基因444条。GO分析显示,干扰后差异表达基因富集到上皮发育、上皮细胞分化、角质形成细胞分化、角化4种生物学过程。对表达差异显著且与角质形成细胞增生分化相关的Sprouty相关蛋白2基因、表皮生长因子7基因、胰岛素样生长因子结合蛋白5基因、人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2基因和骨形成发生蛋白6基因通过实时PCR验证,验证结果与芯片结果显示的差异趋势一致。结论 NCSTN基因功能缺失有可能通过调节其下游细胞增殖及分化相关信号通路的表达,影响角质形成细胞的正常增殖和分化。     

中波紫外线诱导皮肤角质形成细胞凋亡机制的研究进展

紫外线照射表皮后引起DNA损伤的表皮细胞通过日晒伤细胞(凋亡的角质形成细胞)的形成来清除。p53、Fas、Trp53等基因的表达促进角质形成细胞凋亡,而survivin的表达则抑制角质形成细胞凋亡。紫外线照射后皮肤可产生环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物,这两种光产物可以作为UVB诱导凋亡的起始信号。凋亡在清除DNA损伤的皮肤起着重要作用。在皮肤中通过凋亡清除DNA损伤的细胞,防止日光诱导癌变,而不是依赖于DNA损伤的校正修复。silibinin对中波紫外线引起人HaCaT永生化角质形成细胞凋亡具有双向调控作用。对UVB引起角质形成细胞凋亡的调控药物,值得进一步研究。     

角质形成细胞生长因子与银屑病的关系

角质形成细胞生长因子是近年来发现的有着重要生物学功能的生长因子 ,它属于成纤维细胞生长因子家族 ,由成纤维细胞产生。角质形成细胞生长因子可刺激角质形成细胞的增生、分化、移行 ,促进上皮细胞的再生、增厚 ,对银屑病的发病机制及其治疗可能有一定的启示。本文就角质形成细胞生长因子的生物学功能及其与角质形成细胞及银屑病的关系做一综述。     

外源基因转导入角质形成细胞的方法

外源基因转移至角质形成细胞内的基因转移技术是研究基因功能和调控及基因治疗的有力工具。表皮的可进入性使表皮的基因转移在治疗学上具有重要意义。本文较系统地介绍近年来用于角质形成细胞的外源基因转移技术及其特点和进展     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人角质形成细胞促增殖作用

表1MTT测定牛碱性成纤维细胞生长因子对人角质形成细胞增殖的影响表2MTT测定牛碱性成纤维细胞生长因子对人角质形成细胞促增殖作用的最低有效浓度碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的主要作用是促进成纤维细胞的增殖。有文献报道bFGF可以促进角质形成细胞(KC)的生长和分化过程^[1],且在伤口愈合过程中出现bFGF和角质形成细胞生长因(KGF)的表达^[2,3]。噻唑蓝(MTT)染色光吸收实验法是近年来在国内外广泛用于分析药物对细胞作用的方法,具有简便、准确和快速等优点^[4]。我们用体外培养正常人KC,MTT法和细胞直接计数法观察了基因重组牛bFGF对体外培养正常人KC增殖作用的影响。     

人乳头瘤病毒与角质形成细胞增殖关系的研究进展

近年来国外文献报道了人乳头瘤病毒 (HPV)可使培养角质形成细胞成倍增殖的现象 ,现综述如下。在 HPVS中 ,HPV16和 HPV18与 90 %以上的宫颈癌有关 ,HPV16脱氧核糖核酸能诱发角质形成细胞和子宫颈细胞的不可移动及变化。 E6和 E7病毒基因与P53 和 Rb 细胞肿瘤抑制基因相互作用 ,有可能在这一过程中起重要作用。尽管如此 ,应用全基因组所产生的转移效率低 ,表明了对于基因的作用。HPV转染影响角质形成细胞 ,而角质形成细胞对于导致使它们要求降低的具有威胁性的增长因素极敏感。表皮细胞生长因子受体 (EGFR)水平的特定增长 ,已经在 …