灵芝多糖对多柔比星诱导心肌细胞损伤保护作用的研究

目的:研究灵芝多糖对多柔比星所致心肌损伤的保护作用,探讨多柔比星对心肌细胞损伤的机制.方法:将不同浓度多柔比星(1、2、4、6μmol/L)与H9C2心肌细胞共培养6、12、24h,计算不同作用时间及药物浓度的细胞抑制率;将H9C2心肌细胞与不同质量浓度(0,3.125,6.25,12.5,25mg/L)的灵芝多糖共培养,1h后加入多柔比星,24h后观察细胞形态变化,并计算细胞抑制率;将灵芝多糖与MCF-7,KB,K562共培养24h,1 h后加入多柔比星,48h后计算细胞生长抑制率.结果:2μmoL/L多柔比星与心肌细胞共培养24h的细胞抑制率最高,25mg/L灵芝多糖可明显降低多柔比星诱导的心肌细胞死亡,且不降低药物抗肿瘤作用.结论:灵芝多糖对心肌细胞具有直接保护作用,且不减弱多柔比星抗肿瘤作用.     

柚皮素对缺氧损伤大鼠心肌细胞的保护作用

目的 探究柚皮素对缺氧损伤的大鼠心肌细胞是否有保护作用.方法 用大鼠心肌细胞系H9c2细胞制备心肌细胞缺氧损伤模型,并用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒进行模型鉴定.实验分为5组:对照组,模型组,以及柚皮素低、中、高剂量组(20、40、80μmol/L).用CCK-8检测细胞增殖抑制率,间接免疫荧光法检测细胞肥大...     

参芪益心方抑制阿霉素诱导心肌细胞凋亡作用研究

目的:证实参芪益心方可以抑制阿霉素诱导的心肌细胞凋亡。方法:用SD大鼠制备含药血清,用阿霉素诱导H9c2心肌细胞凋亡建立模型,将细胞设置为空白对照组、模型组、含药血清高剂量组(8%)、含药血清中剂量组(4%)、含药血清低剂量组(2%)和卡托普利组。含药血清提前预处理,阿霉素造模72 h后进行试验检测,倒置显微镜下观察H9c2心肌细胞形态,MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI双染法检测H9c2心肌细胞凋亡。结果:H9c2心肌细胞形态:参芪益心方含药血清高、中、低剂量组及卡托普利组可改善细胞凋亡现象,其中以含药血清高剂量组、卡托普利组改善最为明显。MTT法检测H9c2心肌细胞增殖率:模型组OD值、增殖率与空白对照组比较差异具有统计学意义(P0.01);含药血清高、中、低剂量组及卡托普利组OD值、增殖率与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05,P0.01);含药血清高剂量组与卡托普利组OD值比较,差异无统计学意义(P0.05)。流式细胞仪测得结果示:与空白对照组比较,模型组细胞凋亡数量(Q2+Q4)明显增多;含药血清预处理后(Q2+Q4)明显降低,含药血清高、中剂量组及卡托普利组与模型组比较差异具有统计学意义(P0.01)。结论:参芪益心方可以抑制阿霉素诱导的细胞凋亡。     

血塞通胶囊通过抑制炎症因子表达对心肌细胞缺氧损伤的保护作用

目的 通过建立心肌损伤大鼠模型,并应用血塞通胶囊处理损伤的心肌细胞,探讨血塞通胶囊对心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法 将25只SD雄性大鼠采用随机数字表法分为空白对照组、心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型组和血塞通胶囊低、中、高剂量组,每组5只,取每组大鼠心肌细胞进行培养,各组心肌细胞凋亡率采用流式细胞仪检测,各组炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平和氧化应激指标[乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平采用ELISA测定,应用Western blotting法检测核因子κB(NF-κB)表达量。结果 H/R组心肌细胞凋亡率[(22.85±1.78)%]高于对照组[(3.45±0.42)%]及血塞通胶囊低、中、高剂量组[(10.25±2.02)%、(8.96±1.23)%、(5.88±1.45)%],均P<0.05;H/R组血清IL-6、TNF-α、LDH、MDA及NF-κB表达量较对照组及血塞通胶囊低、中、高剂量组显著提升(P<0.05),而H/R组SOD活力较对照组及血塞通胶囊低、中、高剂量组显...     

银杏内酯B对阿霉素致心肌细胞凋亡的保护作用

目的:探讨银杏内酯B对阿霉素损伤心肌细胞的保护作用及相关机制研究。方法:通过体外H9C2大鼠心肌细胞加入阿霉素5μmol/L构建损伤模型,将银杏内酯B 50μmol/L加入细胞中,共同培养,分为银杏内酯B组、银杏内酯B+阿霉素组、阿霉素组及空白对照组。通过FCM检测各组大鼠心肌细胞的凋亡率,通过Realtime PCR与Western blot技术检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、Caspase-3、Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平。结果:阿霉素组H9C2细胞凋亡率为(46.23±4.98)%,银杏内酯B+阿霉素组凋亡率为(24.87±9.05)%,空白对照组凋亡率为(2.43±0.35)%,阿霉素组凋亡率较空白对照组显著升高,银杏内酯B+阿霉素组细胞凋亡率较阿霉素组显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。Real-time PCR与Western blot检测结果显示,阿霉素能够上调H9C2细胞AKT、JNK、Caspase-3、Caspase-12的mRNA水平及蛋白水平表达(P0.05),银杏内酯B+阿霉素组与阿霉素组相比,能够显著下调阿霉素损伤后H9C2细胞的AKT、JNK、Caspase-3、Caspase-12的mRNA水平及蛋白水平表达,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:银杏内酯B可能通过抑制细胞凋亡的途径减轻阿霉素对心肌细胞的损伤,起保护心肌细胞的作用。     

RRx-001介导Nrf2减弱DOX诱导的心肌细胞损伤

目的 探究RRx-001对阿霉素(Doxorubicin,DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤及氧化应激的影响,并研究其机制.方法 使用阿霉素处理H9c2细胞12 h诱导心肌细胞损伤,通过RRx-001提前1 h预处理H9c2细胞,使用MTT实验检测细胞活力变化;检测细胞上清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶...     

TLR9敲除可减轻阿霉素诱导的心肌损伤

目的 探究TLR9对阿霉素性心肌损伤的影响及机制。方法 选取8周龄健康雄性C57B/6J、TLR9-KO小鼠,分为WT组、TLR9-KO组、WT+DOX组、TLR9-KO+DOX组,阿霉素皮下注射建立DOX模型;分别检测心肌细胞损伤标志物、心功能及血流动力学指标,HE染色观察心肌细胞面积,TUNEL染色及 Western blot法检测细胞凋亡;H9C2细胞传代爬片后,分为PBS组、PBS+ODN2088组、DOX组、DOX+ODN2088组,TUNEL染色观察细胞凋亡。结果 予以DOX刺激后,野生型小鼠的心功能、心肌细胞横截面积均降低,细胞凋亡增加,而TLR9敲除组的心功能、心肌细胞横截面积比野生型小鼠增加,细胞凋亡也有所降低;TLR9抑制剂ODN2088可明显降低DOX所致的H9C2细胞凋亡。结论 TLR9敲除可通过抑制凋亡减轻阿霉素诱导的心肌损伤,改善心功能。     

IL-6、IL-10及氧自由基在大鼠急性酒精性心肌损伤中的作用及意义

目的 观察急性酒精引起大鼠心肌组织病理形态学改变,探讨氧自由基、IL-6及IL-10在大鼠急性酒精性心肌损伤中的表达及意义.方法 采用灌胃法制备大鼠酒精性心肌损伤模型,用HE染色观察心肌组织病理变化,利用放射免疫分析法测定IL-6和IL-10值,用硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(MDA)的含量,用黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)的含量.结果 ①模型组与对照组比较,部分心肌细胞水肿,胞浆染色变淡,水肿区横纹不清,部分可见嗜酸性变.②模型组血清MDA水平高于对照组(P<0.01),血清SOD活性相反(P<0.01),MDA含量与SOD活力呈负相关(P<0.01,r=-0.639).③血清IL-6、IL-10水平高于对照组(P<0.01);两者之间无相关性(P>0.05,r=0.279).结论 大鼠急性酒精性心肌损伤过程中脂质过氧化程度明显增加,而抗氧化能力显著下降.大鼠急性酒精性心肌损伤的发生、发展过程与IL-6和IL-10有密切关系.     

葛根素抑制阿霉素诱导的H9c2心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察葛根素对阿霉素诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法H9c2心肌细胞分为空白对照组、阿霉素诱导损伤组和葛根素低、中、高浓度处理组。除空白对照组不做任何处理外,其他各组加入阿霉素及相应浓度葛根素。采用MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测各组Caspase-3、Cleaved-caspase-3、Akt和p-Akt蛋白表达水平的变化。结果与空白对照组比较,阿霉素诱导损伤组细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3/Caspase-3比值增加,p-Akt/Akt比值降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。与阿霉素诱导损伤组比较,葛根素高浓度处理组细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3/Caspase-3比值降低,p-Akt/Akt比值增加,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论葛根素可能通过激活Akt蛋白来抑制阿霉素诱导的H9c2心肌细胞凋亡,提示葛根素可能是一种潜在的心肌保护剂。     

Notch2、Jagged-2在缺氧合并高糖大鼠心肌细胞中的表达研究

目的:探讨Notch2、Jagged-2在缺氧合并高糖大鼠心肌细胞中的表达。方法:选取H9C2细胞(购自中国科学院上海细胞库),进行常规细胞传代培养、冻存,将其随机均分为H9C2(正常组)、缺氧组、高糖组、缺氧+高糖组。H9C2心肌细胞常规培养,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测大鼠心肌中Notch2和Jagged-2 mRNA的表达水平,采用Western blot方法检测各组大鼠心肌中Notch2和Jagged-2蛋白的表达水平。结果:缺氧组和高糖组的Notch2、Jagged-2 mRNA和蛋白表达水平均高于H9C2组、缺氧+高糖组,比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论:Notch通路在缺氧和高糖刺激下的H9C2心肌细胞中被激活,而缺氧+高糖同时作用于心肌细胞Notch通路的受体和配体表达明显降低。