肝细胞癌患者脂代谢异常的特征、脂肪酸结合蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨肝细胞癌（HCC）患者脂代谢异常的特征、脂肪酸结合蛋白（L-FABP）表达情况及其临床意义。方法 选取2020年1月—2022年9月武汉市中西医结合医院确诊的60例肝细胞癌患者作为HCC组、60例肝硬化患者作为肝硬化组，选取同期来该院体检的60例健康者作为对照组。对比各组患者血清载脂蛋白A（ApoA）、载脂蛋白B（ApoB）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、胆碱酯酶（CHE）、总胆红素（TBIL）、L-FABP表达变化，并按照Child-pugh分级标准将HCC组患者进行分层比较。结果 HCC组、肝硬化组患者的ApoA水平低于对照组（P <0.05），HCC组的ApoA、ApoB、ApoA/ApoB水平高于肝硬化组（P <0.05）；肝硬化组患者的ApoB、HDL-C水平均低于对照组和HCC组（P <0.05），肝硬化组的TG、TC、LDL-C水平均高于对照组和HCC组（P <0.05）。HCC组、肝硬化组ALT、AST、LDH、ALP、TBIL水平高于对照组（P <0.05），CHE低于对照组（P <0.05）；HCC组患者的TBIL值低于肝硬化组（P <0.05）。HCC组L-FABP阳性率高于肝硬化组、对照组（P <0.0125）；肝硬化组与对照组患者的L-FABP阳性率比较，差异无统计学意义（P >0.0125）。肝功能Child-pugh分级C级患者ApoA、ApoA/ApoB、HDL-C低于A、B级患者（P <0.05），C级患者TG、LDL-C高于A、B级患者（P <0.05）。肝功能Child-pugh分级C级患者ALT、AST、LDH、TBIL高于A、B级患者（P <0.05），CHE低于A、B级患者（P <0.05）。肝功能Child-pugh分级C级患者L-FABP阳性率高于A、B级患者（P <0.05）。结论 HCC患者存在一定程度的脂代谢功能减弱、L-FABP表达增强的特征，且HCC与患者肝功能受损程度有一定的关系。     

高压氧治疗一氧化碳中毒迟发脑病的疗效分析及其机制研究

目的 研究高压氧对一氧化碳中毒迟发脑病（DEACMP）患者Toll样受体4（TLR4）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路及预后的影响。方法 选取2018年10月—2019年10月在南昌大学第一附属医院神经内科就诊的90位DEACMP患者。根据抽中奇偶数的结果将患者分成两组，偶数患者作为实验组，奇数患者作为对照组，每组45例。对照组采取常规治疗，实验组在对照组基础上使用高压氧治疗，比较两组临床疗效，治疗前后TLR4 mRNA、NF-κB p65水平及洛文斯顿作业治疗用认知评定量表（LOTCA）、日常生活能力量表（ADL）、Wahlund改良脑白质疏松分级量表（ARWMC）评分，治疗后3个月、6个月、12个月改良Rankin（mRS）评分。结果 观察组总有效率高于对照组（P <0.05）。实验组治疗前后TLR4 mRNA、NF-κB p65相对表达量的差值大于对照组（P <0.05）。实验组治疗前后LOTCA、ADL的差值大于对照组（P <0.05），ARWMC的差值小于对照组（P <0.05）。实验组与对照组治疗后3个月、6个月和12个月mRS评分比较，采用重复测量设计的方差分析，结果 ①不同时间点mRS评分有差异（F =122.783，P =0.000）；②实验组与对照组mRS评分有差异（F =43.885，P =0.000）；③两组mRS评分变化趋势有差异（F =66.939，P =0.000）。结论 高压氧治疗DEACMP患者临床疗效较好，可通过调控TLR4/NF-κB信号通路来改善患者预后，有较高的临床价值。     

维生素D水平与溃疡性结肠炎患者TLR4/NF-κB信号通路及疾病活动度的相关性分析

目的 研究维生素D水平与溃疡性结肠炎（UC）患者Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路及疾病活动度的相关性。方法 选取2020年1月—2021年12月胜利油田中心医院消化内科门诊收治的100例UC患者为观察组,另选取同期该院健康体检中心50例体检正常者为对照组。比较两组的血清红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、粪便钙卫蛋白（FC）、TLR4、NF-κB、25-羟维生素D₃［25（OH）D₃］;绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析ESR、CRP、FC、TLR4、NF-κB、25（OH）D₃对UC的诊断价值。根据25（OH）D₃水平将观察组患者分为维生素D充足组［25（OH）D₃≥ 20 ng/mL］20例、维生素D不足组［10 ng/mL≤ 25（OH）D₃< 20 ng/mL］25例及维生素D缺乏组［25（OH）D₃< 10 ng/mL］55例;比较3组的ESR、CRP、FC及TLR4、NF-κB mRNA相对表达量;采用Person相关系数分析ESR、CRP、FC、TLR4、NF-κB与25（OH）D₃的相关性。通过改良Mayo评分评估疾病活动度,分为临床缓解组（改良Mayo评分≤ 2分）20例、轻度组（改良Mayo评分3～5分）32例、中度组（改良Mayo评分6～10分）33例及重度组（改良Mayo评分≥ 11分）15例;比较4组的ESR、CRP、FC、25（OH）D₃及TLR4、NF-κB mRNA相对表达量;采用Spearman相关系数分析ESR、CRP、FC、TLR4、NF-κB、25（OH）D₃与疾病活动度的相关性。结果 观察组ESR、CRP、FC及TLR4、NF-κB mRNA相对表达量高于对照组（P <0.05）,25（OH）D₃水平低于对照组（P <0.05）;ROC曲线分析结果显示,ESR≥ 19.814 mm/h、CRP ≥ 10.758 mg/L、FC ≥ 103.354 μg/g、25（OH）D₃ ≤ 18.035 ng/mL、TLR4 ≥ 1.515、NF-κB ≥ 1.426时,其诊断UC的曲线下面积（AUC）分别为0.840（95% CI：0.769,0.910）、0.790（95% CI：0.712,0.869）、0.807（95% CI：0.729,0.885）、0.862（95% CI：0.800,0.935）、0.843（95% CI：0.776,0.910）、0.858（95% CI：0.790,0.926）,敏感性分别为81.0%（95% CI：0.715,0.925）、78.0%（95% CI：0.725,0.830）、81.0%（95% CI：0.774,0.823）、85.0%（95% CI：0.704,0.937）、82.0%（95% CI：0.750,0.912）、88.0%（95% CI：0.764,0.965）,特异性分别为84.0%（95% CI：0.628,0.972）、84.0%（95% CI：0.705,0.971）、82.0%（95% CI：0.659,0.864）、86.0%（95% CI：0.769,0.936）、84.0%（95% CI：0.726,0.936）、84.0%（95% CI：0.751,0.981）。维生素D充足组、维生素D不足组的ESR、CRP、FC及TLR4、NF-κB mRNA相对表达量低于维生素D缺乏组（P <0.05）;临床缓解组、轻度组、中度组ESR、CRP、FC及TLR4、NF-κB mRNA相对表达量低于重度组（P <0.05）,25（OH）D₃高于重度组（P <0.05）;ESR、CRP、FC、TLR4、NF-κB与疾病活动度呈正相关（P <0.05）;25（OH）D₃与疾病活动度呈负相关（P <0.05）。结论 UC患者的ESR、CRP、FC、25（OH）D₃及TLR4、NF-κB表达与健康人群有显著差异,不同25（OH）D₃水平UC患者的ESR、CRP、FC及TLR4、NF-κB表达均有差异,不同疾病活动度UC患者的ESR、CRP、FC、25（OH）D₃及TLR4、NF-κB表达也存在差异。25（OH）D₃检测可用于UC患者的临床营养治疗及长期随访管理中,通过补充维生素D提升UC治疗效果。     

久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠TLR4及NF-κB p65表达的影响

目的 探讨久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB p65蛋白基因的表达的影响.方法 通过灌服大黄水煎液,肌肉注射氢化可的松并结合TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)混合乙醇灌肠建立动物模型.将90只大鼠随机分为空白组、模型组、久泻灵颗粒治疗7、14、21 d组及阳性对照(SASP)组,用药治疗后采用免疫组化SP法和RT-qPCR法分别检测大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB p65蛋白和基因的表达.结果 结肠黏膜形态学评分结果显示,各治疗组评分均有降低,差异有显著性(P <0.01);免疫组化SP法结果显示:TLR4、NF-κB p65在模型组大鼠中表达均显著增强(P<0.01);药物干预后各治疗组大鼠TLR4、NF-κB p65表达均减弱(P<0.05);RT-qPCR法结果显示:与空白组比较,模型组大鼠TLR4、NF-κB p65表达增强(P<0.01);与模型组比较,治疗后各组大鼠TLR4、NF-κB p65表达减弱(P<0.05).结论 久泻灵颗粒可减轻结肠黏膜炎症反应,起到修复黏膜的作用,其原因与降低脾肾阳虚型UC模型大鼠结肠组织中 TLR4、NF-κB p65基因的转录和蛋白的表达有关.     

肝硬化患者小肠细菌过度生长与外周血内毒素水平、TLR2、TLR4表达的关系

目的 探讨肝硬化患者小肠细菌过度生长与内毒素及TLR2、TLR4表达的关系。方法 58例肝硬化患者和26例健康志愿者,采用显色基质鲎试剂试管法检测外周血内毒素浓度,流式细胞术检测外周血PBMC表面TLR2、TLR4的表达,乳果糖氢呼气试验（LHBT）评估小肠细菌过生长情况。结果 肝硬化组SIBO发生率为43.10%,显著高于健康对照组的7.69%（χ²=10.32,P=0.001）;肝硬化组LHBT小肠集值、外周血内毒素浓度、TLR2、TLR4高于健康对照组（t值分别为11.573、9.958、12.380、10.319,P均<0.05）;在肝硬化患者中SIB0阳性患者LHBT集值、外周血内毒素浓度、TLR2、TLR4水平高于SIBO阴性患者（t值分别为12.746、8.067、11.804、6.258,P均<0.05）。Pearson相关分析结果显示,肝硬化组、肝硬化SIBO阳性组的LHBT小肠集值与内毒素浓度、TLR2、TLR4呈正相关（P均<0.05）,且内毒素浓度与TLR2和TLR4呈正相关（P均<0.05）。结论 肝硬化患者小肠细菌过度生长更易出现高内毒素血症,并通过TLR2、TLR4的高表达引发炎症损伤,加重肝硬化病情。     

替格瑞洛对急性心肌梗死患者TLR4/My D88/NF-κB信号通路的影响研究

目的 探讨替格瑞洛对急性心肌梗死患者Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/NF-κB信号通路的影响。方法 选择南京中医药大学附属常州市中医医院于2021年1月至2022年6月收治的142例急性心肌梗死患者,采用随机数字表法分为观察组与对照组各71例。对照组采用常规药物治疗,观察组在对照组基础上加用替格瑞洛片治疗。治疗疗程4周。比较两组疗效,治疗前后心功能,血小板聚集率,TLR4、MyD88和NF-κB mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结果 观察组总有效率高于对照组（P<0.05）。相比治疗前,两组治疗后左心室射血分数（LVEF）均显著升高,左心室后壁厚度（LVPWT）、左心室舒张末期内径（LVDD）、血小板聚集率均显著降低,TLR4、MyD88和NF-κB相对表达量均显著降低,TLR4、MyD88和NF-κB mRNA蛋白表达灰度值均显著降低,差异均有统计学意义（均P<0.05）。治疗后观察组LVEF显著升高,LVPWT、LVDD、血小板聚集率显著降低,TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量显著降低,TLR4、MyD88和NF-κB蛋...     

基于TLR4/MyD88/MAPK信号通路探讨脉络舒通丸抗血栓性浅静脉炎的作用机制研究

[目的] 探讨脉络舒通丸抗血栓性浅静脉炎（STP）的作用机制。[方法] 将36只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、脉络舒通丸低、中、高剂量组、地奥司明组（阳性药对照），每组6只。除正常组外，其余各组均采用耳缘静脉注射20%甘露醇建立STP兔模型。造模同时各给药组连续灌胃给药14 d。苏木精-伊红（HE）染色法检测各组兔耳组织病理变化；酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的水平；测定凝血4项；蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测耳组织Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、细胞外信号调节激酶（ERK1/2）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和c-氨基酸末端激酶（JNK）蛋白表达及相关磷酸化水平。[结果] 与正常组比较，模型组病理损伤评分显著增加（P<0.01）；血清中IL-1β、TNF-α和IL-6的表达水平明显升高（P<0.05）；活化部分凝血酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）缩短，纤维蛋白原（FIB）含量升高（P<0.05）；TLR4、MyD88、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK，包括p38MAPK、ERK1/2和JNK）蛋白及相关磷酸化水平均显著上调（P<0.01）。与模型组比较，脉络舒通丸低、中、高剂量组、地奥司明组兔耳组织病理损伤显著改善，病理损伤评分明显降低（P<0.05或P<0.01）；血清中IL-1β、TNF-α和IL-6的表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）；APTT、PT、TT明显延长，FIB含量明显降低（P<0.05或P<0.01）；TLR4、MyD88、MAPK（p38MAPK、ERK1/2和JNK）蛋白及相关磷酸化水平均显著下调（P<0.05或P<0.01）。[结论] 脉络舒通丸可能通过抑制TLR4/MyD88/MAPK信号通路，减轻炎症反应，改善凝血功能，从而发挥抗血栓性浅静脉炎作用。     

基于microRNA-92a-3p靶向SIRT1调控氧糖剥夺再灌注诱导脑微血管内皮细胞炎症反应的作用机制研究

目的 探讨基于microRNA-92a-3p（miR-92a-3p）靶向调控SIRT1氧糖剥夺再灌注（OGD/R）诱导小鼠脑微血管内皮细胞（bEnd.3）炎症反应的作用机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定miR-92a-3p、SIRT1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）mRNA的表达；Western blotting明确SIRT1、核转录因子-κB（NF-κB）p65、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）p65、TNF-α和IL-1β蛋白的表达；双荧光素酶报告基因验证miR-92a-3p与SIRT1靶向关系；划痕实验检测bEnd.3细胞的迁移能力。结果 OGD/R组miR-92a-3p相对表达量较对照组升高（P <0.05）。M_SIRT1 WT+mimics+TK组荧光素酶活性较M_SIRT1 WT+mimics NC+TK组低（P <0.05）。OGD/R组SIRT1蛋白和mRNA相对表达量较对照组降低（P <0.05），OGD+92a抑制剂组较OGD+92a抑制剂内参组升高（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组NF-κBp65/p-NF-κBp65蛋白较模拟物内参组高，SIRT1蛋白和mRNA表达较模拟物内参组低（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组IL-1β、TNF-α蛋白和mRNA相对表达量较模拟物内参组高（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组伤口愈合率较模拟物内参组低（P <0.05）。结论 miR-92a-3p通过靶向抑制SIRT1表达，促进OGD/R诱导的脑微血管内皮细胞炎症反应。     

右美托咪定对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠TLR4/MyD88信号通路的影响

目的：　探究右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）对博莱霉素（bleomycin,BLM）诱导的肺纤维化小鼠的保护作用以及对Toll样受体4/髓样分化因子（toll-like receptor 4/myeloid differentiation factor88,TLR4/MyD88）信号通路的影响。方法：　通过注射BLM诱导实验性小鼠肺纤维化。将小鼠分为生理盐水（Sham）组、BLM组、BLM+DEX组、BLM+PFD组和BLM+DEX+LPS组。苏木素-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色和Masson染色分析肺组织病理学变化;免疫组织化学检测纤连蛋白（fibronectin,Fn）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ）表达情况;原位缺口末端标记法（TdT mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测肺组织中细胞凋亡;检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总细胞数量及蛋白质含量;Western blot检测肺组织中TLR4/MyD88信号通路和细胞凋亡相关蛋白水平。结果：　与Sham组相比,BLM刺激后肺组织中肺泡炎评分[（2.56±0.24）分vs.（0.15±0.02）分]和Ashcroft评分[（5.68±0.52）分vs.（0.09±0.01）分]明显增高,Fn[（63.63±5.48）% vs.（25.12±2.16）%]、α-SMA[（58.63±5.03）% vs.（17.56±1.25）%]和collagen Ⅰ[（55.32±5.16）% vs.（12.03±1.20）%]表达升高（P<0.05）,肺部炎症程度和纤维化程度增加;同时TUNEL阳性细胞率增高,细胞中bcl-2相关X蛋白（bcl-2 associated X protein,Bax）水平增高,B淋巴细胞瘤-2蛋白（B-cell lymphoma-2 protein,Bcl-2）水平降低（P<0.05）;BALF中总细胞数量[（3.54±0.06）×10⁵个/mL vs.（0.98±0.07）×10⁵个/mL]和蛋白质含量[（2.85±0.20）mg/mL vs.（0.29±0.03）mg/mL]升高（P<0.05）;肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平升高（P<0.05）。DEX治疗可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化和炎症,降低TUNEL阳性细胞率,并逆转Fn、α-SMA、collagen Ⅰ、Bax和Bcl-2表达（P<0.05）;同时DEX也降低BLM诱导的小鼠BALF中总细胞数量和蛋白质含量（P<0.05）。此外,DEX降低BLM诱导的小鼠肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平（P<0.05）。吡非尼酮（pirfenidone,PFD）与DEX具有相似的作用效果。脂肪酶（lipase,LPS）可以部分逆转DEX对BLM诱导的肺纤维化小鼠保护作用（P<0.05）。结论：　DEX可能通过抑制TLR4/MyD88信号通路改善BLM诱导的小鼠肺纤维化。     

不同鼠龄小鼠甲型流感病毒H1N1/FM1株感染TLR4-NF-κB信号通路改变比较研究

目的 比较不同鼠龄小鼠感染流感病毒后TLR4-NF-κB P65信号通路的改变情况。方法 采用免疫组化和RT-PCR技术检测不同鼠龄鼠肺组织中TLR4和NF-κB P65的蛋白及mRNA的表达,比较不同鼠龄感染流感病毒后信号通路的改变情况。结果(1)肺组织TLR4蛋白表达:幼龄模型组TLR4蛋白表达最强,与正常组和成龄模型组比较,差异均具有显著性(P<0.05)。(2)肺组织NF-κB P65蛋白表达:幼龄模型组表达最强,且随着时间变化表达逐渐增强,每一时间点与前一时间点比较差异具有显著性(P<0.05)。(3)肺组织TLR4 mRNA表达:幼龄模型组表达最强,明显高于正常组和成龄模型组,差异具有显著性(P<0.05)。(4)肺组织NF-κB P65 mRNA表达:幼龄模型组表达最强,随着病程进展表达逐渐增强;与正常组和成龄模型组比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论 TLR4-NF-κB P65信号通路的过度活化,可能是幼龄鼠肺脏免疫病理损伤严重的机制之一。