砷致小鼠肝纤维化模型的建立

目的 探讨不同价态水砷暴露及高脂饲料加水砷暴露小鼠肝纤维化模型的建立方法,并进行比较.方法 小鼠240只,随机分为正常对照组、亚砷酸钠(iAs3+)组、砷酸钠(iAs5+)组、高脂饲料对照组、高脂饲料+iAs3+组和高脂饲料+iAs5+组6个组,每组40只.正常对照组和高脂饲料对照组(饮用自来水),iAs3+组和高脂饲料+iAs3+组(饮用300 mg/L iAs3+水),iAs5+组和高脂饲料+iAs5+组(饮用300 ms/L iAs5+水).饮水砷暴露3、6、10个月后处死小鼠,检测各组小鼠血清肝功能,HE染色及胶原特殊染色(Masson染色)观察各组小鼠肝组织病理学变化.结果 造模3个月时,正常对照组、iAs3+组、iAs5+组、高脂饲料+iAs3+组和高脂饲料+iAs5+组的血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平分别为(36.7±5.7)U/L和(110±22)U/L、(55.6±4.6)U/L和(249±41)U/L、(52.6±8.8)U/L和(161±15)U/L、(311.3±19.7)U/L和(484±15)U/L、(515.0±60.8)U/L和(671±24)U/L,各砷组均高于对照组(均P<0.05).各砷组动物肝组织HE染色就显示有不同程度肝损伤,表现肝细胞水样变性、脂肪样变性,点状或灶性坏死及炎性细胞浸润,并有不同程度的肝细胞再生及纤维增生,随着暴露时间的延长,各砷组肝组织病理损伤逐渐加重.10个月Masson染色显示汇管区及中央静脉区纤维条索状增生,正常对照组、iAs3+组、iAs5+组、高脂饲料+iAs3+组和高脂饲料+iAs5+组小鼠肝脏纤维组织面积的均值分别为0.1333、0.5584、0.5250、0.7534、0.7200,各砷组与对照组相比差异有统计学意义(均P<0.05).结论 成功建立了不同价态水砷暴露及高脂饲料加水砷暴露小鼠肝损伤、肝纤维化的模型,并进行了评价,为砷致肝损伤、肝纤维的研究提供了较理想的动物模型.     

博莱霉素静脉注射制备小鼠肺间质纤维化模型

目的经尾静脉一次性注射博莱霉素(BLM)复制小鼠肺间质纤维化动物模型,并观察模型的肺组织病理学变化。方法8周龄雌性C57BL/6小鼠66只,随机分为BLM80组18只、BLM150组19只、BLM300组19只和对照组10只,分别经尾静脉一次性注射BLM80、150、300 mg/kg和生理盐水。结果①BLM80组和BLM150组小鼠最低体重分别为BLM注射前的84%和65%。②BLM80组、BLM150组、BLM300组和对照组小鼠的生存率分别为:100%、43%、0和100%。③BLM150组BLM注射后14 d、28 d,右肺羟脯氨酸含量分别为738±46 nmol、886±83 nmol,与对照组(360±75 nmol)比较差异均有显著性意义(P<0.01)。④BLM150组小鼠BLM注射28 d,在胸膜下及血管周围形成广泛、稳定、明显的纤维化改变。BLM150组与BLM80和对照组比较,肺纤维化病理评分分别呈明显增高(P值均小于0.001)。结论C57BL/6小鼠经尾静脉一次性注射BLM150mg/kg可以制备肺间质纤维化动物模型。     

肝纤维化的实验动物模型

本文讨论了建立肝纤维化动物模型的技术与存在的问题,以大鼠为主要动物讨论了目前常用的几种造模方法、每种造模方法的致病机理、造模途径、效果,同时比较了不同造模方法的优缺点及各自的用途,提出了肝纤维化动物模型领域的研究方向。     

小鼠血管损伤后再狭窄模型的造模方法比较研究

目的 应用显微外科手术，建立3种小鼠血管损伤后再狭窄模型，分别比较造模方法和血管内膜病变形成的特征。方法 16．24周的C57BL／6小鼠，分别应用塑料微导管损伤、金属丝损伤及金属直弹簧丝损伤3种方法。对小鼠的股动脉、颈动脉进行造模，研究3种方法的关键技术要点，并分别于造模后1、2、4周后观察受损动脉内膜病变形成特点。结果 3种小鼠血管损伤后再狭窄模型的造模方法中，以微导管股动脉损伤模型最易操作，金属直弹簧丝股动脉损伤模型次之，金属丝颈动脉损伤模型难度较大。C57BL／6小鼠股动脉塑料微导管损伤后内膜增生病变不明显，但apoE缺损小鼠却见非常显著的内膜肥厚病变。金属直弹簧丝股动脉损伤模型稳定性较高，而金属丝颈动脉损伤模型内膜病变的个体差异较大。结论 目前最常用的3种小鼠血管损伤后再狭窄模型在关键技术及病变形成上具有一定的共性，但病变形成的病理过程和模型的稳定性不尽一致。     

小鼠代谢性高尿酸血症模型的复制方法初探

目的本实验分别单独使用或联合使用次黄嘌呤、尿酸氧化酶抑制剂复制小鼠代谢性高尿酸血症模型，观察造模后受试动物血清尿酸值的变化，以确定次黄嘌呤、尿酸氧化酶抑制剂造模的最佳方式、给药途径和剂量，并通过阳性药验证该模型的可行性。方法采用次黄嘌呤灌胃或腹腔注射给药，尿酸氧化酶抑制剂腹腔或皮下注射给药，分别测定造模后不同时段小鼠血尿酸值。结果复制小鼠高尿酸血症模型，采用腹腔注射次黄嘌呤500mg／kg，皮下注射尿酸氧化酶抑制剂50mg／kg，1、3、5h后，血尿酸值明显高于正常组（P〈0．01），且阳性药可显著降低升高的尿酸值（P〈0．01）。结论腹腔注射次黄嘌呤500mg／kg和皮下注射尿酸氧化酶抑制剂50mg／kg配合使用，是复制小鼠高尿酸血症模型的适当组合。     

肝缺血再灌注诱导大鼠肝纤维化动物模型的建立

目的 建立肝缺血再灌注诱导大鼠肝纤维化动物模型.方法 将16只SD雄性大鼠分为假手术组(Sham组)及肝纤维化模型组(HF组),每组8只.HF组用无创动脉夹夹闭大鼠肝左叶和中叶的肝动脉、门静脉,造成70％的肝脏缺血,夹闭90min后,开夹,继续饲养4周.Sham组仅行肝蒂部骚扰.4周后处死动物,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、放射免疫法测定血清透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN)水平;测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)水平;Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达量;苏木素-伊红(HE)染色观察肝纤维化的程度.结果 与Sham组比较,HF组血清ALT、AST、HA及LN水平明显升高(P＜0.05),肝组织Hyp水平升高(P＜0.05).Western blot结果显示,HF组α-SMA蛋白的表达量明显高于Sham组(P＜0.05).光镜下HF组肝细胞变性和坏死程度较Sham组明显加重,炎性细胞浸润明显,部分有纤维隔的形成.结论 肝缺血再灌注操作可以成功诱导大鼠肝纤维化动物模型.     

转基因小鼠模型在特应性皮炎中的应用研究进展

特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种慢性、复发性皮肤炎症性疾病,易反复发作,伴剧烈瘙痒,严重影响了患者的生活质量,近年来发病率呈逐年升高的趋势。该病确切发病机制尚不清楚,可能涉及遗传、免疫、感染等众多因素。     

腹膜纤维化大鼠模型研究进展

腹膜纤维化大鼠模型是研究腹膜纤维化的重要工具。腹膜纤维化大鼠模型按照造模方法不同主要分为细菌性腹膜炎致腹膜纤维化大鼠模型、化学性腹膜炎致腹膜纤维化大鼠模型、非生物相容性腹膜透析液致腹膜纤维化大鼠模型和转基因动物腹膜纤维化大鼠模型4类。各个研究组所采用的腹膜纤维化模型在诱导方法、腹膜功能评价及取材部位等方面均各不相同,因此建立稳定、可靠、符合临床的大鼠模型有重要意义。     

硫唑嘌呤致小鼠急性肝组织损伤模型的建立

[目的]探讨硫唑嘌呤(AZA)诱导小鼠制作急性肝组织损伤模型的最佳条件.[方法]分别灌胃给予各组小鼠50,100,150,200mg/LAZA,给药后24h测定血清中AST,ALT值;分别灌胃给予各组小鼠150mg/LAZA,给药后4,8,12,16,20,24,28,32h测定血清中AST,ALT值.[结果]随着给予AZA剂量的增加,小鼠血清中AST,ALT值升高;随着给药时间的延长,小鼠血清中AST,ALT值在12h时最高,之后逐渐下降.[结论]利用AZA制作急性肝组织损伤小鼠模型时,AZA的最佳给药剂量为150mg/kg,最佳作用时间为给药后12h.     

糖尿病肾病小鼠模型的研究现状

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）已成为导致终末期肾病的主要原因之一。小鼠是研究人类疾病最常用的实验动物优势明显。目前常用的DN小鼠模型难以完全模拟人类DN病变,限制了DN发病机制和治疗措施的进展。近年来应用基因工程技术和杂交技术建立了一些新的DN小鼠模型,其中部分模型能较好地模拟人类DN的典型病变。本文总结常见DN小鼠模型特点的基础上,对新建立的DN小鼠模型疾病表现、肾病特点及应用进行了分析,从而有助于DN发病机制的深入认识及DN研究中动物模型的合理选择。     

FTY720对实验性肝纤维化小鼠肝损伤的保护作用

目的:观察FTY720对刀豆蛋白A(Con A)所致肝纤维化小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)建立小鼠肝纤维化动物模型,取40只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、FTY720低剂量(1 mg·kg^-1)组和FTY720高剂量(4 mg·kg^-1)组,每组10只。测定各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和肝脏指数,观察肝脏组织学病理变化。结果:FTY720低剂量组和高剂量组ALT、AST 活性明显低于模型组(P<0.05 或P<0.01)。光学显微镜观察,模型组有炎性细胞浸润,肝细胞坏死。Masson 染色,模型组血管周围有明显纤维条束,肝小叶发生融合;与模型组比较,FTY720低剂量组和高剂量组损伤程度较轻,且随FTY720剂量增加肝组织损伤程度逐渐减轻。结论:FTY720对实验性肝纤维化小鼠的保护作用可能是通过降低ALT 和AST活性,进而减轻肝脏损伤程度而延缓纤维化进程。     

不同剂量刀豆蛋白A诱导Balb/c小鼠肝纤维化的量效关系

目的观察不同剂量刀豆蛋白A（Con A）诱导小鼠肝纤维化的效果,探讨建立小鼠肝纤维化动物模型所需最佳剂量及成模时间。方法实验组Balb/c小鼠18只,再分为A组、B组、C组,每组6只,经尾静脉分别注射10 mg/kg、12.5 mg/kg、15 mg/kg的Con A,每周1次。对照组6只,经尾静脉注射等量PBS,每周1次。各组均于每次注射后24 h采血,测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）;于实验第5、7、9周,每组各处死2只小鼠,取血清检测血清透明质酸,留肝脏作病理检查。结果A组第9周、B组第7周出现肝纤维化,C组第5周出现肝纤维化,但死亡2只。实验组ALT、AST、明显高于对照组（P〈0.05）。结论12.5 mg/kg Con A经尾静脉注射小鼠是合适的剂量,每周1次,注射6次可建立肝纤维化动物模型。     

Emodin on hepatic fibrosis in rats

Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｒａｔｈｅｐａｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓｍｏｄｅｌｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆ 4 0 %ＣＣｌ4 (ｔｗｉｃｅａｗｅｅｋｆｏｒ 6ｗｅｅｋｓ)ｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎｏｌｉｖｅｏｉｌ Ｔｈｅｅｍｏｄｉｎ ｔｒｅａｔｅｄｒａｔｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｌｏｗ ｄｏｓｅ ,ｍｅｄｉａｔｅ ｄｏｓｅａｎｄｈｉｇｈ ｄｏｓｅｅｍｏｄｉｎ ( 2 0 ,4 0ａｎｄ 80ｍｇ/ｋｇｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ,ｏｎｃｅａｄａｙｆｏｒ 4 2ｄａｙｓ)ｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎ 0 5%ｓｏ…     

血清学指标在兔肝纤维化模型中的实验研究

目的探讨肝纤维化血清学指标(HA、PCⅢ、LN及Ⅳ-C)与肝纤维化程度的关系。方法 45只实验兔随机分为实验组(n=36)和正常对照组(n=9)。实验组腹腔注射四氯化碳(CCl4)制作肝纤维化模型,于首次注射后第6,9,12周分批行肝纤维化血清指标检查,同时取兔肝脏行病理检查,并按病理结果分期、分级。结果共30只实验兔完成检测,其中正常肝脏9例,轻度肝纤维化6例,中度肝纤维化7例,重度肝纤维化8例。随着肝纤维化程度加重,HA、PCⅢ、LN及Ⅳ-C均逐渐增高,与肝纤维化分期之间存在正相关关系(P<0.05),其中以Ⅳ-C与纤维化分期之间关系最密切(r=0.718,P<0.05)。结论血清学指标可以反映肝纤维化的严重程度,其中以Ⅳ-C的价值较高。     

小鼠肝纤维化肝脏细胞上皮-间质转换的研究

目的探讨小鼠肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）时,肝细胞发生的上皮-间质转换（epithelial-mesenchymal transitions, EMT）的变化。方法建立小鼠CCl4诱导HF模型,随机分为模型组与正常对照组,每周2次,分别于第2、4、6、8、10、12周分批处死大鼠。用密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法分离培养小鼠肝细胞,免疫荧光方法对细胞表型进行鉴定,采用H．E及Massion染色等观察E-钙粘附素（E-cadherin,E-cad）、成纤维细胞特异性蛋白-1（ fibroblast specific protein-1, FSP-1 ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscleactin,α-SMA）的表达。用免疫荧光显微镜及激光共聚焦定位分析观察EMT蛋白[FSP-1、白蛋白（albumin）、α-SMA、波形蛋白（vimentin,VM）、胶原I（collagen I）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）、N-钙粘附素（N-cadherin,N-cad）、E-cad]表达情况。结果小鼠HF时,肝细胞存在EMT现象。H-E、Massion染色及免疫荧光均显示,随着HF的程度加重,小鼠肝上皮细胞标志（E-cad、Albumin）逐渐减低,肝间质细胞标志（N-cad、FSP-1、VM、Collagen I、FN及α-SMA）逐渐升高（P〈0．05）。结论实验性小鼠HF的进程中,肝细胞发生EMT现象。     

结缔组织生长因子与肝纤维化关系的研究进展

肝纤维化的形成是一个多因素、多细胞参与的复杂过程,近来研究发现,结缔组织生长因子对促进纤维化的发生发展起正调节作用。结缔组织生长因子是一种多功能的分泌性多肽,可以调节细胞增殖、分化以及黏附等生物学活性,在肝组织损伤修复、细胞外基质合成、临床上肝纤维化的诊断及治疗等方面发挥重要作用。     

Erythropoietin decreases carbon tetrachloride-induced hepatic fibrosis by inhibiting transforming growth factor-beta

Background  In addition to hematopoietic effect, the erythropoietin is known as a multifunctional cytokine with anti-fibrosis and organ-protective activities. The purpose of this study was to evaluate the effect of recombinant human erythropoietin (rhEPO) on hepatic fibrosis and hepatic stellate cells (HSCs).

Methods  Carbon tetrachloride (CCl₄) induced hepatic fibrosis mice models were used for in vivo study and HSCs line for in vitro study. CCl₄ and rhEPO (0, 200 or 1000 U/kg) was injected intraperitoneally in BALB/c mice three times a week for 4 weeks. Immunohistochemistry and immunoblotting were performed to evaluate expressions of transforming growth factor-β1 (TGF-β1), α-smooth muscle actin (α-SMA), and fibronectin in explanted liver. Immunoblotting of α-SMA, phophorylated Smad-2 and Smad-2/3 was performed in HSCs treated with TGF-β1 and/or rhEPO.

Results  Expressions of TGF-β1, α-SMA, and fibronectin were increased in CCl₄ injected mice livers, but significantly attenuated by co-treatment with CCl₄ and rhEPO. Co-treatment of rhEPO markedly suppressed fibrosis in Masson’s trichrome compared with treatment of only CCl₄. TGF-β1 increased phosphorylated α-SMA, Smad-2 expressions in HSCs, which were decreased by rhEPO co-treatment.

Conclusions  Treatment of rhEPO effectively suppressed fibrosis in CCl₄-induced liver fibrosis mice models. Anti-fibrosis effect of rhEPO could be related to inhibition of TGF-β1 induced activation of HSCs.

     

蛋白聚糖诱导小鼠关节炎模型的研究进展

蛋白聚糖诱导的小鼠关节炎模型(PGIA)是由人类关节软骨来源的蛋白聚糖免疫BALB/c小鼠或C3H小鼠的某些亚系而产生的系统性自身免疫性脊柱关节炎小鼠模型.该模型是目前唯一侵犯中轴骨系统的系统性自身免疫小鼠模型,已成为脊柱关节炎动物模型的研究热点.本文旨在通过回顾国内外PGIA相关研究文献,对普遍关注的PGIA动物模型的诱导、表型鉴定、免疫学特性及骨化相关信号通路等进行综述,为脊柱关节炎动物模型研究提供理论基础.     

四氯化碳和硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化的对比研究

目的：采用四氯化碳（CCL4）和硫代乙酰胺（thioacetamide,TAA）两种试剂分别制备大鼠肝纤维化模型,探讨两种方法的优缺点及适用范围.方法：将60只SD大鼠随机分为4组,用CCL4和TAA制备肝纤维化模型并分别设立对照组.观察大鼠一般情况并于第28,56日称体质量,测定血清谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）以及透明质酸（HA）和IV型胶原（CIV）、肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）,取肝组织进行HE和Masson染色,分别观察肝组织的损伤程度和胶原增生的情况.结果：第28日,两模型组的各项指标与其对照组比较均有显著差异,而模型组之间无显著差异;第56日,CCL4组各项指标有明显好转,部分指标与对照组无差异,而TAA组的各项指标进一步恶化,部分指标与CCL4组对比有显著差异.结论：CCL4所致的肝纤维化模型更适用于肝纤维化自发逆转机制以及相关治疗策略的研究.TAA所致的肝纤维化模型适用于肝纤维化的机制研究、治疗药物的筛选和肝纤维化血清学标记物的可靠性评价等.