一次离心法制备大、小鼠富血小板血浆实验条件的优化

目的探讨一次离心法制备大、小鼠富血小板血浆(PRP)的最佳离心条件。方法分别采用股动脉插管和心脏穿刺的方法获取大、小鼠动脉血,14%CPDA-1抗凝,滤除白细胞后分装入无菌EP管中,不同条件下(离心力:300×g～600×g,离心时间:4～12min)离心制备大、小鼠PRP,利用血液分析仪分别对抗凝全血、滤除白细胞后的血样及PRP进行细胞计数,比较不同方法间的血小板回收率。结果大、小鼠抗凝全血滤除白细胞后分别以400×g和300×g的离心力离心8min时,血小板回收率最高。结论选择合适的离心力和离心时间,达到白膜形成前的临界状态,是一次离心法制备PRP的关键。     

普通血袋常温保存分离后富含血小板血浆24 h再制备浓缩血小板的质量观察

目的探讨普通血袋常温分离富含血小板血浆(PRP)后保存24 h再制备的浓缩血小板(PC)质量。方法将采集的400 mL全血50袋,保存在20-24℃的恒温保存箱内,采集后4 h经1次轻离心分离出PRP,容量(200±10)mL/份,再每份均分成2袋存放于普通血袋中,分别标识为实验组:将PRP放置20-24℃的恒温保存箱内过夜,次日2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,24 h完成制备;对照组:将PRP立即2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,6 h完成制备。采集后24和48 h,分别检测2组PC中血小板、红细胞含量和pH值。结果 2组PC中红细胞混入量和pH值差异甚小(P0.05),实验组与对照组血小板含量(×1010/袋)分别为1.36±0.33和2.63±0.46(P0.05);对照组3项指标均合格,实验组只有红细胞混入量与pH值合格。结论分离PRP后,在普通血袋常温保存24 h再制备浓缩血小板,质量达不到《全血与成分血质量要求》。     

浓缩血小板制备方法的改良

目的改良制备浓缩血小板的方法,降低红细胞混入量,保证浓缩血小板质量达到国家标准。方法采用改良PRP方法,增加预离心和后处理,使用折断式压延袋,制备低红细胞混入量的浓缩血小板。结果采用改良法由400 ml全血制备的浓缩血小板每袋血小板总数达（4.58±0.42）×10^10/袋,红细胞总数为（1.56±0.37）×10^9/袋,红细胞混入量与传统法相比差异有统计学意义（P〈0.01）。结论用改良方法制备的浓缩血小板具有较高血小板含量,同时红细胞的混入量较低。     

两种离心方法制备手工血小板的比较

目的：比较两种离心方法（富浆法和白膜法）对制备手工血小板的影响。方法：两种方法各取100袋400 ml的6 h之内采集的新鲜全血,富浆法是先以1630×g/min,温度22℃,离心7 min,分离出富小板血浆后,再以2 800×g/min,离心12 min,制备成血小板。白膜法是先以2800×g/min,温度22℃,离心12 min,分离出白膜层和血浆,然后再以700×g/min,离心7 min制备成血小板。结果：富浆法制备的血小板含量高。而白膜法制备的手工血小板含量相对较低。结论：两种离心方法制备手工血小板相比较,富浆法制备的血小板符合国家标准,但制备过程中要轻拿轻放,防止混入过多的红细胞。     

白膜法手工制备血小板与机制血小板的质量分析

目的比较手工分离及机器分离两种方法制备血小板的相关质量指标。方法对来源于街头采集的400 ml全血60袋,分别采用机器及手工分离白膜层,比较两种制备方法的白膜层血小板回收率、终产品血小板回收率、血小板含量、红细胞混入量、产品容量。结果机器分离血小板白膜层的血小板回收率及产品血小板回收率均高于手工分离制备(P0.05)。两种制备方法的红细胞混入量的差异无统计学意义(P0.05)。手工分离血小板终产品容量变异系数高于机器制备血小板(P0.05)。结论机器制备浓缩血小板所收集的血小板回收率及容量均优于手工制备血小板。     

由轻度酸化的CPD血快速制备浓缩血小板

制备浓缩血小板(PC)一般是通过两次离心程序来完成。先将抗凝全血离心制备富血小板血浆(PRP),再以更高的离心力第二次离心。结果沉淀中常含有不易再混悬的血小板聚集物。有两种方法可使压实的血小板沉淀物容易再混悬:(1)在第二次离心前加ACD,使PRP的pH降低;(2)在第二次离心后将PC在室温静置1小时。本文比较了从CPD全血制备PC的这两种方法。作者对14名健康人,每人采450ml全血,置含有63mlCPD抗凝剂的标准塑料袋中。在采血过程中不断摇动血袋,采后1小时内将血袋在20℃以275g离心     

全自动血液分离机和传统手工法制备浓缩血小板的质量比较

目的考察全自动血液分离机和传统手工制备的浓缩血小板的质量差异。方法将采集的40袋400ml全血随机分为2组:全自动血液分离机分离组和传统手工法分离组,对分离出的浓缩血小板进行红细胞、白细胞、血小板含量检测。结果全自动血液分离机分离法白细胞混入量、红细胞混入量显著低于传统手工分离法,存在显著性差异(P0.05),2种分离方法的血小板计数无明显性差异(P0.05)。结论全自动血液分离机分离出的浓缩血小板质量比传统手工分离浓缩血小板好。     

富血小板血浆血小板浓度与全血血小板浓度和红细胞比容相关性探讨

目的 探讨富血小板血浆(PRP)血小板浓度与全血血小板浓度、红细胞比容(HCT)相关性.方法 随机收集162例门诊体检志愿者静脉血标本,以EDTA-K2,枸橼酸钠抗凝.枸橼酸钠抗凝血800 r/min(离心半径19 cm)离心5 min,分离富含血小板血浆(PRP),应用Sysmex XE-2100血液分析仪测定全血血小板浓度(X1)和HCT(X2),PRP血小板浓度(Y).以HCT 0.35为界,将数据分为正常组和低值组.结果 所得数据采用多元相关性统计分析得到回归方程Y总=1.309 51X1 +744.294 5X2-262.068(R2 =0.897 8);Y正常组=1.380 208X1 +855.884 8X2-323.374(R2=0.892 9);Y低值组=1.088 972X1 +465.228 8X2-123.101(R2=0.961 1).结论 全血血小板浓度、红细胞比容与富血小板血浆血小板浓度相关显著,由全血血小板浓度和红细胞比容可初步推算富血小板血浆血小板浓度.     

改良白膜法制备汇集浓缩血小板的临床应用

目的本研究旨在改进手工制备浓缩血小板方法，提高血小板制备质量。方法在白膜法的基础上，延长血小板解聚时间，汇集多人份白膜层，第2次离心时采用二元无聚梯度离心原理，收集血小板。结果7份按本法制备的汇集浓缩血小板（10U／袋），其血小板计数、血小板回收率及白细胞、红细胞混入量、容量分别为（2．90±0．32）×10^11、（66±4）％、（4．2±1．9）×10^8／袋、（7．2±2．3）×10^9／袋、250～300ml。结论本法制备的手工血小板回收率较高，质量指标全部超过全血和成分血国家质量标准，适宜血站推广应用。     

不同性别供血者对浓缩血小板质量的影响

浓缩血小板输注对白血病、DIC等疾病引起的出血有肯定的治疗作用，其质量对于临床输注效果有十分重要的意义．为了考察不同性别的供血者对浓缩血小板制剂质量的影响，我们对制备的部分浓缩血小板进行回顾性研究，现报告如下．1材料和方法1．1血小板分离方法　　采用富含血小板血浆（PRP）法．将400ml全血于采集后4h内在1220g离心5min，温度为20～24℃，分出上层血浆，然后在4650g离心6min，温度为20～24℃，分出上层少血小板血浆，留50ml血浆于血小板中，即得产品1单位（U），取样检测．1.2血小板计数采用Cell－Dyn1600血细胞分析仪进行…     

骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理

目的:富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)含有多种高浓度生长因子,可促进骨愈合及软组织修复。探讨通过离心法制作富血小板血浆的原理,为临床利用PRP修复组织缺损提供实验依据。方法:从肘前静脉取血5mL,选用4种不同离心次数、离心力和离心时间的PRP制作方法,制作的PRP均为0.7mL,对比研究各种PRP和全血中的血小板计数和活化率。结果:全血标本的平均血小板计数是214.41×109L-1。在不同方法制作的PRP中,血小板计数均明显高于全血,分别是629.95×109L-1(Anitua法),1093.00×109L-1(Petrungaro法),1323.80×109L-1(Landesbergo法)和1347.05×109L-1(Aghaloo法),是全血血小板计数的2.92,5.10,6.17和6.28倍。PRP中血小板计数与全血血小板计数呈正相关,相关系数分别为rAnitua=0.79,rPetrungaro=0.83,rLandesberg=0.93和rAghaloo=0.89。活性检测,CD62P的表达在全血中是0.85%,Anitua法4.87%,Petrungaro法9.79%,Landesberg法6.05%,Aghaloo法9.12%。PRP的CD62P表达率与全血的CD62P表达率以及各PRP之间均呈显著性差异。结论:二次离心法制作的PRP其血小板浓度和血小板回收率显著高于一次离心法。在这4种方法中,以Landesberg法制作的PRP中血小板浓度高、活化率小。     

对混合白膜层制备的血小板浓缩物贮存条件的评价

作者通过测定pH和血小板旋涡现象(旋涡评分分为0、1、2和3。旋涡评分为0表示旋涡现象消失,旋涡评分为3表示旋涡现象良好),对延长高浓度血小板浓缩物(PCs)贮存期的两种方法进行了评价。 用含有63ml CPD抗凝剂的四联袋采集全血470ml。每一单位全血于22℃6 h内经4000rpm离心12.5min,分离血浆、红细胞和白膜层。白膜层(血比积54％、体积55ml)在原袋中不摇动,室温贮存3～16h。由5个白膜层制备PCs,用270ml血浆稀释,将混合白膜层和2个毛重130g袋于700g离心6min12s。以恒定的速度(1ml/s)将上清液中的PCs收集到1L聚链烯塑料袋     

去白膜法分离血小板的研究进展

目前,浓缩血小板的手工分离制备方法有:富含血小板血浆法(PRP法)和去白膜法(BC法)2种。我们就去白膜法分离血小板的研究进展做一综述。1富含血小板血浆法分离制备血小板(PRP法)20世纪70—80年代,富含血小板血浆法为血小板分离制备的标准方法。此方法是先将全血经轻离心后分离制     

全血成分分离机最佳参数的设定和影响因素分析

目的应用全血成分分离机采用白膜法制备浓缩血小板,寻找分离机的最佳参数。方法选择不同的运行参数制备血小板,对血小板及红细胞回收率进行比较,分析重新离心和轻微脂肪血对回收率的影响。结果确定参数posdetl（光电探头第1次探测的位置,决定富含血小板血浆层的转移量）为4时,血小板回收率最高约为70％,重新离心对血小板回收率无影响,轻微脂肪血的血小板回收率偏低。结论posdetl为4是白膜法机器分离血小板的最佳参数。     

骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理

目的：富血小板血浆(platelet-rich plasma，PRP)含有多种高浓度生长因子，可促进骨愈合及软组织修复。探讨通过离心法制作富血小板血浆的原理，为临床利用PRP修复组织缺损提供实验依据。方法：从肘前静脉取血5mL，选用4种不同离心次数、离心力和离心时间的PRP制作方法，制作的PRP均为0．7mL，对比研究各种PRP和全血中的血小板计数和活化率。结果：全血标本的平均血小板计数是214．41&;#215;10^9L～^-1。在不同方法制作的PRP中，血小板计数均明显高于全血，分别是629．95&;#215;109L～^-1(Anitua法)，1093．00&;#215;109L～^-1(Petrungaro法)，1323．80&;#215;109L～^-1(Landesbergo法)和1347．05&;#215;109L～^-1(Aghaloo法)，是全血血小板计数的2．92，5．10，6．17和6．28倍。PRP中血小板计数与全血血小板计数呈正相关，相关系数分别为rAnitua=0．79，rpetrungaro=0．83，rLandesberg=0．93和rAghaloo=0．89。活性检测，CD62P的表达在全血中是0．85％，Anitua法4．87％，Petnmgaro法9．79％，Landesberg法6．05％，Aghaloo法9．12％。PRP的CD62P表达率与全血的CD62P表达率以及各PRP之间均呈显著性差异。结论：二次离心法制作的PRP其血小板浓度和血小板回收率显著高于一次离心法。在这4种方法中，以Landesberg法制作的PRP中血小板浓度高、活化率小。     

机器分离与手工制备的血小板质量比较

目的比较全自动血液成分分离仪分离血小板(简称机分血小板)与手工制备血小板的质量,探讨白膜法机分血小板的优越性。方法分别对50袋机分血小板和手工制备血小板的容量、血小板含量、白细胞混入量、红细胞混入量进行测定,同时计算血小板回收率,并进行U检验和χ2检验。结果机分血小板的容量及血小板含量显著高于手工制备血小板(U=16.13、20.00,P<0.01),白细胞和红细胞的混入量明显低于手工制备的血小板(U=25.32、5.15,P<0.01)。机分血小板与手工制备血小板的回收率差异有统计学意义(χ2=7.63,P<0.01)。结论白膜法机分血小板的质量明显优于手工制备的血小板,值得推广和使用。     

调整优化采血联袋后制备浓缩血小板的质量分析

目的对两种不同采血联袋制备浓缩血小板的质量进行评价,为高质量制备血小板的开展提供参考依据。方法采用白膜法分别对原一次性使用去白细胞采输血器和调整优化后的一次性使用去白细胞采输血器所采集的全血制备浓缩血小板,全血采集量为400 mL,共60袋。分两组,A组(一次性使用去白细胞采输血器原袋)30袋,白膜成分袋尺寸为15×12 cm; B组(一次性使用去白细胞采输血器调整袋)30袋,白膜成分袋尺寸为11×9 cm。结果比较红细胞混入量、血小板含量、血小板回收率指标,2组红细胞混入量、血小板含量、血小板回收率3项比较,差异有统计学意义(P0.05),A组红细胞混入量、血小板含量、血小板回收率分别为(2.62±0.57)×10~9/mL、(4.41±0.31)×10~(10)/mL、(55.03±0.06)%,B组红细胞混入量、血小板含量、血小板回收率分别为(1.37±0.35)×10~9/mL、(6.21±0.63)×10~(10)/mL、(79.23±0.09)%。结论优化尺寸为11×9 cm的白膜成分袋制备的浓缩血小板质量更优,更好地提高临床输血的安全性及有效性。     

用前到腺素E_1制备的浓缩血小板在体内的恢复与存活

贮存5-7天的浓缩血小板(PC)在输注后恢复和存活不如新鲜血小板。作者首先在新鲜富血小板血浆(PRP)中加入一种生化激活剂后进行制备,并与常规PC制备法对照。方法:采集至少10天未服药的男性献血者全血,枸橼酸-磷酸-葡萄糖(CPD)抗凝,室温离心(1000g,7分钟)制备PRP。加入用正常盐水稀释的前列腺素E_1(PGE_1)使其最终浓度为1.3×10(~-8)M,然后室温3500g离心7分钟制备PC。PC于22℃±1℃贮存5天后,在使用前2-3小时以自身血浆浸泡血小板,然后弃液体,计数血小板、白细胞,测定pH,按Kunickl法作形态学积分,每个单位浓缩血小板加入250μCi铬酸钠(~(51)Cr)标记,22℃孵育30分钟,以自身血浆洗涤后配成30ml悬液,于输入后1.5、2.0、24、     

富含血小板血浆凝胶的超微结构

目的观察富含血小板血浆(PRP)凝胶的超微结构。方法采用二次离心法制备PRP,分别计数全血和PRP血小板,用酶联免疫吸附法测定全血和PRP凝胶中转移生长因子(TGF)-β1及血小板源性生长因子(PDGF)-AB的浓度;同时,对PRP凝胶行大体观察、HE染色、透射及扫描电镜观察。结果 PRP中的血小板浓度达到全血的4.58倍;PRP凝胶中含有高浓度的TGF-β1、PDGF-AB;扫描电镜及透射电镜观察均显示PRP凝胶主要由大量纤维蛋白网和血小板构成。结论 PRP可能是构建可注射组织工程髓核的理想支架材料。     

新白膜法与富浆法制备浓缩血小板的质量比较

目的分析新白膜法与富浆法制备浓缩血小板的质量差异。方法将采集的40袋400ml全血随机分为两组:新白膜法制备组和富浆法制备组,对分离出的浓缩血小板进行红细胞混入量、p H值、血小板计数检测比较。结果新白膜法制备组血小板计数显著高于富浆法制备组,二者存在统计学显著性差异(P0.05),两种制备方法的红细胞混入量及p H值无显著性差异(P0.05)。结论新白膜法分离出的浓缩血小板质量优于富浆法分离出的浓缩血小板。