组蛋白去乙酰化酶抑制剂促进肺腺癌A549细胞株凋亡机理的研究

收集2×106个A 549肺腺癌细胞,以含10%胎牛血清培养后,随机分为观察组及对照组各1×106个细胞,观察组分别加入0.1、0.2、0.5μm o l/L浓度的曲古抑菌素A(TSA),对照组不予处理。观察两组A 549细胞凋亡、细胞周期及caspase-8、caspase-9表达情况。结果观察组A 549细胞凋亡率明显高于对照组,呈现时间、浓度依赖性效应关系,药物作用后72 h,0.5μm o l/L TSA处理的A 549细胞凋亡率最高,达50%;而对照组A 549细胞凋亡率在各时间点均无明显变化。观察组细胞主要积聚在G2/M期,呈浓度依赖性,0.1、0.2、0.5μm o l/L的TSA处理后,细胞积聚在G2/M期的比例分别为23.4、35.8、39.7,与对照组比较P均<0.05。W estern b lot检测证实,TSA诱导了A 549肺腺癌细胞caspase-8、caspase-9裂解活化,随着TSA作用时间延长,其蛋白着色深度逐步升高。证实TSA可诱导A 549细胞株凋亡,其机制可能为触发一种存在于正常细胞的G2检测点功能,引发cas-pase蛋白酶的级联反应。     

急性肝衰竭大鼠肝组织组蛋白去乙酰化酶2的表达

目的观察D-氨基半乳糖盐酸盐诱导急性肝衰竭模型大鼠在丙酮酸乙酯保护下,组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的表达情况。方法将78只雄性Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、EP干预组和EP治疗组。采用免疫组织化学法检测肝组织HDAC2表达;采用ELISA法检测肝组织匀浆HDAC2水平。结果与正常组比,模型组HDAC2的表达量减少(P0.05),其中造模12h和24h肝组织HDAC2表达的IOD/Area值分别为0.0817±0.0118和0.0726±0.0111,明显低于正常组(0.1125±0.0047,P0.01);EP干预组和治疗组与模型组间HDAC2的表达无明显差异(P0.05)。结论 EP虽然对肝脏有保护作用,但不能影响HDAC2的表达。HDAC2的减少在急性肝衰竭的进展过程中,可能发挥重要的作用。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对小鼠T细胞的影响

以环磷酰胺（CTX）作为阳性对照组,生理盐水作为阴性对照,采用不同浓度曲古抑菌素A（TSA）作用于小鼠,以荧光标记的单克隆抗体分别作用于小鼠外周血及脾脏中T淋巴细胞,流式细胞仪观察T细胞数量及CD4^＋和CD4^＋亚群的变化情况。结果TSA可以显著减少外周血及脾脏中T淋巴细胞数量,且与浓度相关,同时TSA还引起T细胞亚群CD4^＋和CD4^＋T细胞数量减少,同时也减少了CD4^＋／CD4^＋比值。本实验为应用TSA抑制T细胞的免疫应答和诱导免疫耐受提供了依据。     

组蛋白乙酰化酶及去乙酰化酶与肺部疾病

组蛋白乙酰化酶与组蛋白去乙酰化酶町通过调节染色体结构而影响炎症基因的表达,亦可以通过调节非组蛋白的乙酰化和去乙酰化参与疾病的进程。在肺部疾病中,两者的相互平衡导致基因的异常表达或者相关调控因子的异常表达与肺癌、COPD、哮喘、激素抵抗等疾病密切相关,这也为各种组蛋白去乙酰化酶类药物应用于肺部疾病的治疗提供了理论基础。     

组蛋白去乙酰化酶6的研究进展

本文介绍了组蛋白去乙酰化酶6的发现和发展,并详细叙述了它的分子结构及其与肿瘤发生、细胞迁移、蛋白质降解等相关的生物学功能。     

经典组蛋白去乙酰化酶在中枢神经系统中作用

<正>表观遗传学是指不改变脱氧核糖核酸(DNA)序列而产生的可遗传变化,其在调节基因组功能中发挥关键作用,影响基因表达和(或)转录,从而调控机体的生长、发育及病理过程^[1]。表观遗传学修饰主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码核糖核酸(RNA)等。组蛋白乙酰化核酸修饰是调节DNA功能的重要方式,近年来,研究表明组蛋白乙酰化在神经系统疾病发生发展中起重要作用^[2]。     

组蛋白去乙酰化酶在结缔组织病中的作用

组蛋白的乙酰化状态影响基因的表达水平,受组蛋白乙酰化酶与组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)共同调控。细胞异常状态下,组蛋白去乙酰化酶活性明显增强,打破原有的基因表达平衡状态,导致一些影响细胞增殖和调控细胞周期的分子表达失衡,则会导致疾病的发生。越来越多的研究证实组蛋白可逆性的乙酰化和去乙酰化在免疫反应调节中具有重要作用。本文从组蛋白去乙酰化酶结构功能出发,综述其在结缔组织病中可能的作用。     

组蛋白去乙酰化酶:缺血性脑卒中治疗的潜在新靶点

<正>缺血性脑卒中病理生理机制主要包括以神经细胞死亡、炎症发生、血脑屏障破坏等组织损伤为特征的急性期和以神经血管恢复为特征的后期,目前缺乏有效的治疗药物〔1〕。以往研究〔2〕显示仅仅针对脑卒中病理生理机制中单一环节的药物,即使在动物模型中可以有较好的效应,均无法在临床实验中取得相应的疗效。目前认为,只有作用于脑卒中发生发展的多个病理环节并发挥强大神经保护作用的药物才有可能成为有效的脑卒中治疗新药〔2〕。越来越多的研究表明表观遗传学机制如     

慢性阻塞性肺疾病组蛋白去乙酰化酶与糖皮质激素抵抗

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种慢性气道炎症,炎症基因的表达受组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)和组蛋白乙酰化酶(histone acetyltransferase,HAT)调控,通常组蛋白乙酰化增高促进基因转录,降低则抑制基因转录.糖皮质激素(glucocorticoid,GC)的一个重要作用是募集HDAC2到基因表达位点,使基因组蛋白乙酰化程度降低,从而抑制炎症基因表达.由吸烟引起的COPD患者,香烟烟雾氧化应激使得HDAC2减少,降低了GC的抗炎作用,导致GC抵抗,而GC抵抗是COPD抗炎治疗的主要障碍.本文讨论GC抵抗的一些分子机制,为COPD患者治疗方案的制定及改善预后提供理论参考依据.     

组蛋白去乙酰化酶及去甲基化酶抑制剂在胃肠道肿瘤的研究进展

组蛋白甲基化及乙酰化修饰的平衡失调与多种肿瘤的发生、发展、侵袭、转移密切相关,多种胃肠道肿瘤中发现组蛋白去乙酰化酶(HDAC)及组蛋白赖氨酸特异性去甲基酶1(LSD1)异常增高.相应的,一些组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)和LSD1抑制剂已在胃肠道肿瘤的研究中取得进展,如异羟肟酸类HDACi在胃肠道抗肿瘤研究中取得...     

组蛋白脱乙酰基酶抑制剂曲古霉素对心肌细胞肥大的影响

目的利用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞,研究曲古霉素(TSA)对血管紧张素II(Ang II)诱导的心肌细胞肥大的影响,并探讨相关机制。方法分离乳鼠心肌细胞进行原代培养,应用血管紧张素Ⅱ制备心肌细胞肥大模型。分别给予不同浓度的TSA预处理心肌细胞,观察TSA对心肌细胞面积、3H亮氨酸掺入率、心房利钠肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)的mRNA表达水平的影响。同时通过检测乙酰化组蛋白3的蛋白表达水平,观察AngⅡ和TSA对组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)活性的影响。应用Western blot检测AngⅡ和TSA处理后磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达水平的变化。结果10-6mmol/L AngⅡ作用48 h后,心肌细胞面积增加至对照组的(1.63±0.46)倍(P<0.01),而10-7mmol/L和3×10-7mmol/L TSA预处理可以剂量依赖性的抑制AngⅡ引起的心肌细胞面积增大。TSA干预也阻断了AngⅡ引起的蛋白合成速率增加以及ANP和BNP的蛋白表达水平的增加(均为P<0.05)。AngⅡ刺激心肌细胞使乙酰化组蛋白3的蛋白表达水平降低,TSA可逆转这一效应。同时TSA抑制了AngⅡ介导的磷酸化JNK表达水平的升高。结论 TSA可显著抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大和HDAC活性增加,可能通过抑制JNK的激活而发挥抑制心室肥厚的作用。     

缓慢持续型慢加急性肝衰竭与慢性肝衰竭的甄别

肝衰竭是多种因素引起的严重肝脏合成和代谢功能紊乱,以黄疸、凝血功能障碍为主要表现的一组临床症候群.临床常见肝衰竭类型包括慢加急性肝衰竭( acute-on-chronic liver failure,ACLF )和慢性肝衰竭.缓慢持续型ACLF与慢性肝衰竭的临床表现类似,部分缓慢持续型ACLF 患者可发展为慢性肝衰竭,...     

慢加急性肝衰竭与慢性肝衰竭临床特征对比性分析

目的了解慢加急性肝衰竭(ACLF)与慢性肝衰竭(CLF)的临床特征及预后差异。方法 103例慢性重型肝炎患者按肝衰竭诊疗指南分为ACLF组(35例)和CLF组(68例),比较两组临床及实验室指标、常见并发症、MELD评分及预后。结果 CLF在慢性重型肝炎中占66.02%(68/103),患者年龄较大、病程较长;两组在血常规参数(WBC、HB、PLT、MPV)和凝血指标(PT、APTT、TT)均有差异(P<0.05,P<0.01);ACLF组肝功能AST、ALT、TBIL、ALB高于CLF组,GLO、TBA低于CLF组(P<0.05,P<0.01);两组腹水和肝性脑病发生率差异有统计学意义(P<0.01);ACLF组MELD分值低于CLF组,其预后优于CLF组(P<0.05,P<0.01)。结论 ACLF和CLF在好发年龄、病程、血常规参数、凝血功能、肝功能指标、并发症腹水和肝性脑病发生率、MELD评分及预后均有差异。肝衰竭指南符合国情,有重要的临床应用价值。     

Serum levels of miRNA in patients with hepatitis B virus-associated acute-on-chronic liver failure

Background: Hepatitis B virus(HBV)-associated acute-on-chronic liver failure(HBV-ACLF) is a lifethreatening condition and its exact pathophysiology and progression remain unclear. The present study aimed to assess the role of serum mi RNAs in the evaluation of HBV-ACLF and to develop a model to predict the outcomes for ACLF.Methods: Serum was collected from 41 chronic hepatitis B and 55 HBV-ACLF patients in addition to30 chronic asymptomatic HBV carriers as controls. The mi RNAs expressions were measured by real-time quantitative PCR(q-PCR). Statistical analyses were conducted to assess the ability of differentially expressed mi RNAs and other prognostic factors in identifying ACLF prognosis and to develop a new predictive model.Results: Real-time q-PCR indicated that serum miR-146 a-5 p, mi R-122-3 p and mi R-328-3 p levels were significantly upregulated in ACLF patients compared to chronic hepatitis B and chronic asymptomatic HBV carriers patients. In addition, multivariate regression analyses indicated that Na+, INR, gastrointestinal bleeding and mi R-122-3 p are all independent factors that are reliable and sensitive to the prognosis of HBV-ACLF. Therefore, we developed a new model for the prediction of HBV-ACLF disease state: Y = 0.402 × Na+-1.72 × INR-4.963 × gastrointestinal bleeding(Yes = 0; No = 1)-0.278 ×(mi R-122-3 p) + 50.449. The predictive accuracy of the model was 95.3% and the area under the receiver operating characteristic curve(AUROC) was 0.847.Conclusions: Expression levels of these mi RNAs(miR-146 a-5 p, mi R-122-3 p and mi R-328-3 p) positively correlate with the severity of liver inflammation in patients with ACLF and may be useful to predict HBV-ACLF severity.     

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者血清IL-10和GP73水平检测及其临床意义

目的 探讨HBV相关慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）患者血清IL-10和GP73水平变化及其临床意义。方法 在56例HBV-ACLF患者、32例慢性乙型肝炎（CHB）患者和20例健康人,采用酶联免疫吸附法检测基线血清IL-10和GP73水平。随访HBV-ACLF患者3个月,进行重复检测。结果 基线时HBV-ACLF组血清IL-10水平为（32.4±14.8） pg/ml,显著高于CHB组的（15.2±6.3） pg/ml或健康人的（6.1±1.9） pg/ml （P<0.05）; HBV-ACLF组血清GP73 水平为（283.4±95.4） ng/ml,显著高于CHB组的（129.7±58.1） ng/ml或健康人的（45.5±16.2） ng/ml （P<0.05）;33例生存的HBV-ACLF患者基线血清IL-10 水平为（34.6±15.3） pg/ml,显著高于23例死亡患者的（30.1±14.3） pg/ml（P<0.05）,但生存组与死亡组血清GP73水平差异无统计学意义【（279.7±94.6） ng/ml 对（287.2±96.2） ng/ml,P=0.36】;治疗2周时,HBV-ACLF生存组血清IL-10水平为（30.1±14.0） pg/ml,仍显著高于死亡组的（24.9±11.2） pg/ml（P<0.05）,但不同于基线时,治疗2周时生存与死亡患者血清GP73水平出现了统计学差异【（258.7±85.9） ng/ml对（331.2±107.5） ng/ml,P<0.05】。结论 HBV-ACLF患者血清IL-10 水平高者可能预后相对较好,而动态观察血清GP73水平变化可能对预测HBV-ACLF患者的短期预后也有一定的价值。     

High neutrophil-lymphocyte ratio indicates poor prognosis for acute-on-chronic liver failure after liver transplantation

AIM:To investigate the significance of pre-transplant neutrophil-lymphocyte ratio(NLR) in determining the prognosis of liver transplant(LT) recipients with acuteon-chronic liver failure(ACLF).METHODS:Data were collected from the liver transplantation data bank.The NLR values and other conventional inflammatory markers were evaluated for their ability to predict the prognosis of 153 patients with ACLF after LT.The NLR cut-off value was based on a receiver operating characteristic curve analysis.A Kaplan-Meier curve analysis and univariate and multivariate Cox regression models were used to define the independent risk factors for poor outcomes.RESULTS:The optimal NLR cut-off value was 4.6.Out of 153 patients,83(54.2%) had an NLR ≥ 4.6.The 1-,3-,and 5-year overall survival rates were 94.3%,92.5% and 92.5%,respectively,in the normal NLR group and 74.7%,71.8% and 69.8%,respectively,in patients with high NLRs(P 0.001).Furthermore,there was a significant difference in infectious complications after LT between the high and normal NLR groups.There were no significant differences for other complications.In the multivariate Cox regression model,a high NLR was defined as a significant predictor of poor outcomes for LT.CONCLUSION:A high NLR is a convenient and available predictor for prognosis of LT patients and can potentially optimize the current criteria for LT in ACLF.     

再论慢加急性肝衰竭新的临床分型及临床意义

正在《中华肝脏病杂志》2020年第四期的肝衰竭重点专刊上,首都医科大学附属北京佑安医院、天津市第三中心医院、全国疑难及重症肝病攻关协作组(CNSLD)提出了慢加急性肝衰竭新的临床分型,即基于临床转归的动态分型新标准~([1]),基于预后、时间     

血清M30抗原水平对HBV相关慢加急性肝衰竭的预后评估价值

目的探索HBV感染后不同疾病阶段的肝细胞凋亡水平及其对HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)预后的评估价值。方法前瞻性纳入40例慢性乙型肝炎(CHB)、40例乙型肝炎肝硬化(HBV-LC)以及54例HBV-ACLF患者,同时设立40例健康对照(HC)。针对HBV-ACLF患者随访3个月,根据随访结果分为存活组及死亡组。检测所有研究对象血清角蛋白18凋亡特异性裂解片段M30抗原水平作为反映肝细胞凋亡水平的间接指标。结果 CHB、HBVLC及HBV-ACLF组血清M30抗原水平分别为145.24(IQR86.31,206.39)U/L,213.42(IQR147.30,391.28)U/L及762.67(IQR492.45,1395.24)U/L,均显著高于HC组[60.34(IQR50.58,67.64)U/L](P0.01)。随着疾病严重程度升高,血清M30抗原呈现递增趋势,尤以HBV-ACLF组最高,显著高于CHB(P0.01)及HBV-LC组(P0.01)。M30抗原与ALT、AST、TBil、PT、INR以及HBV DNA呈显著正相关(均P0.01),与Alb呈显著负相关(P0.01)。HBVACLF随访3个月死亡组患者血清M30抗原水平[1175.18(IQR756.57,3224.94)U/L]显著高于存活组患者[491.39(IQR264.23,657.17)U/L](P0.01)。血清M30抗原能够良好地预测HBV-ACLF患者3个月预后情况,曲线下面积为0.86(95%CI0.75~0.96,P0.01)。结论肝细胞凋亡水平与HBV感染后的疾病严重程度密切相关,血清M30抗原可能成为HBV相关慢加急性肝衰竭早期预后的候选指标。     

Predictors of outcome in acute-on-chronic liver failure in children

Background and aims  

Acute-on-chronic liver failure (ACLF) is associated with a high mortality rate in the absence of liver transplantation. There is limited data on predictors of survival in ACLF in children. Therefore, we prospectively studied the predictors of outcome of ACLF in children.