低浓度NaOH对小鼠精子DNA完整性的影响

目的用精子DNA完整性评价NaOH溶液对小鼠精子进行头尾分离的最优条件。方法取2～3月龄雄鼠附睾尾精子,稀释到合适浓度（5×10^6～10×10^6／ml）,0～37℃下,加入不同浓度NaOH溶液孵育,显微镜下观察精子的头尾分离率,流式细胞仪检测精子的质膜完整性及DNA完整性。结果NaOH对精子头尾分离的效果,与碱浓度、作用时间和作用温度呈正相关,作用温度越高,时间越长,头尾分离效果越好,但同时对精子DNA的损伤程度也就越大。本研究证实精子在10mmol／LNaOH溶液,0℃下孵育2h,精子头尾分离的效率可达55％,而精子DNA损伤与空白对照相比,则无显著性差异。结论在本研究条件下低浓度NaOH处理小鼠精子,方法简单易行,可有效去除小鼠尾巴,而又不使其DNA受损。     

雷公藤多甙及其单体T4对大鼠精子发生影响的初步观察

雷公藤多甙(GTW)抗生育作用部位主要在睾丸内,可致圆形精子细胞向长形精子转变过程受阻,附睾中出现大量头部异常的精子,精子头尾分离和贮积大量不活动精子。从雷公藤多甙分离的有效抗生育单体T_4,抗生育剂量为GTW的1/200,主要作用于附睾精子,对睾丸形态结构及精子形态的影响不明显。提示T_4作用部位较理想。     

精液中活动精子分离法的研究

精液中活动精子分离法的研究江苏省计划生育科学技术研究所王信心吴周亚从精液中分离活动精子是体内授精、体外授精以及有关生殖基础研究中的重要课题。近代应用各种方法如游泳法、蛋白柱或玻璃纤维滤过法等获得活动精子［１～５］。我们采用改良的精子游泳法，分离活动精...     

葡聚糖凝胶过滤分离人x精子的研究

本文对提高人X精子在精液标本中的比率进行了研究,用葡聚糖凝胶过滤法,发现凝胶柱高18cm时可使X精子从分离前的 55.6％提高到 78.3％,精子运动率从分离前的 76.8％提高到89.2％。本法有助于人工授精预先选择子代的性别,防止某些伴性遗传性疾病的发生。     

输精管分离钳钝性分离在睾丸活检中的应用

目的 探索输精管分离钳钝性分离在睾丸活检中的应用价值.方法 选择82例无精子症患者,要求睾丸体积≥8 mL,FSH≤30 U·L-1,在精索阻滞下采用输精管分离钳钝性分离进行睾丸活检,所取得睾丸组织,若有精子则冷冻备行辅助助育,若无精子则送病理检查评估生精功能.结果 所有患者均取得1~3 mm3睾丸组织,无明显痛感,出血少,术后无不适,有精子者38例(46.34%),病理检查提示有生精细胞者37例(45.12%),唯支持细胞综合征7例(8.54%).结论 输精管分离钳钝性分离应用于睾丸活检安全、有效、简便、微创,可以作为睾丸活检的一种手段.     

单次上游单闪离心高活力精子分离与宫腔内授精

介绍了一种用于宫腔内授精（ＩＵＩ〖）的高活力业郛分离方法－单次上游单次离心法，活性精子提取率为（１９．９±６．３％），其中，ａ精子提取率为（３２．０±１３．８％）。提取的精子悬液中，ａ精子率为（８３．８±５．５％），精子活动率约９５％，畸形精子率下降了６个百分点。应用上述方法进行精子分离对２７例男性少、弱、畸精子症致不育夫妇进行了４０个周期的ＩＵＩ治疗，妊娠率（ＰＧＲ）２０％，ＩＵＩ中精子数量超过     

王氏管精子优选法的应用及效果

目的 探讨王氏管精子优选法在精子优选的应用,并与传统的精子上游法进行比较。方法 随机选择５７份精液,采用两种方法进行配对处理,比较两种方法分离前后、两者精子活动率、形态以及精子顶体形态和精子染色质等参数的变化。结果 两种方法处理后的精子活动率、精子形态差异有显著性（Ｐ〈０．０１）,王氏管法处理后精子顶体完整率、正常染色质率亦显示出显著的差异（Ｐ〈０．０１）。结论 王氏管精子优选法和精子上游在精子处     

染色体和遗传

贝刃月22人精子抗原墓因表达产物HSGZAg的纯化和鉴定/林敏…//男性学杂志一l卯5.9(3).一!69一172 本文作者在前阶段研究的基础上,运用离子交换层析法,分离纯化人精子抗原基因表达克隆HSq的溶原蛋白,并用ELISA法鉴定其中的表达产物HSqAg。结果显示:(l)经离子交换层析法分离HS仪溶原蛋白为12个主要蛋白峰;(2)用抗人精子杭体和纯化的人SIT阳性血清经ELISA法识别,在HS份溶原蛋白中,第3峰为人精子抗原基团表达克隆HS(先的表达产物HSGZAg。提示用上述方法分离和纯化的HSqAg纯化度高,特异性高,适合应用于抗精子抗体检测试剂盒的制备…     

单次上游单次离心高活力精子分离与宫腔内授精

介绍了一种用于宫腔内授精（ＩＵＩ）的高活力精子分离方法一单次上游单次离心法，活性精子提取率为（１９．９±６．３）％，其中，ａ精子提取率为（３２．０±１３．８）％。提取的精子悬液中，ａ精子率为（８３．８±５．５）％。精子活动率约９５％，畸形精子率下降了６个百分点。应用上述方法进行精子分离对２７对男性少、弱、畸精子症致不育夫妇进行了４０个周期的ＩＵＩ治疗，妊娠率（ＰＧＲ）２０％。ＩＵＩ中精子数量超过６×１０＿６，ＰＧＲ为３２％，而不足６×１０＿６者无一例妊娠（Ｐ＜０．０５）。     

体外改善精子质量宫内人工授精25例分析

采用体外改善精子质量后的丈夫精子,对25对不育夫妇进行了宫内人工授精,其中包括少精子2例,精子活力低下症11例,精液不液化症9例,免疫性不育症3例(男2例,女1例)。妊娠5例,妊振率为20%,其中精子活力低下症2例,精液不液化症3例,所有治疗病例均未出现不良反应和并发症。活动精子的分离采用精子上游一沉淀技术,避免了离心过程中精子的损伤。     

人精子甘露糖受体纯化及其对受精能力的影响

目的　探讨人精子甘露糖受体 (MR)对受精能力的影响。　方法　采用改良的亲和层析法分离纯化 MR,L owry法测定其蛋白质浓度 ,在精子穿透试验 (SPA)模型中定量研究其对精卵融合能力的影响并检测其细胞生物学活性 ;以已知浓度的纯化甘露糖受体 (p MR)干预精子半透明带试验 ,观察用 p MR预处理半透明带对精子与透明带结合的影响。　结果　 (1) MR分子量为 6 7.8± 1.6 k D,1× 10 6 个精子中可分离纯化到 p MR 19.6± 7.1ng;(2 )人精子 p MR作用浓度为 0 .95μg/ m L能抑制人精子穿透金黄地鼠卵母细胞 (P <0 .0 5 ) ,浓度 >2 .86μg/ m L时完全抑制 (P<0 .0 5 ) ;(3)用浓度为 2 .84μg/ m L的人精子 p MR预处理透明带半膜 ,不能抑制精子与透明带的结合 (t=1.2 5 ,P<0 .0 5 )。　结论　人精子 MR在精子与透明带识别结合中可能不起介导作用 ,其对精卵融合能力可能具有影响。     

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的：评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响。方法：收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态。结果：①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前（P<0.05）,上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率（P<0.05）。上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后（P<0.05）。结论：Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善, 此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法。     

混合斑中精子细胞的分离方法研究进展

［摘要］混合斑中的精子细胞的分离一直是性犯罪案件侦破的关键点和难点,就各种常见的精子分离方法、优缺点及研究进展进行概述．     

死精症精液细菌学分析与药敏试验

目的：了解死精症患者的致病菌分布及药敏情况，为死精症患者的治疗提供科学指导，探讨精子死亡的原因。方法：采用细菌分离培养、药敏纸片抑菌实验进行精液细菌学分析与药敏试验。用细菌抑制精子动力实验及凝胶分子筛层析方法分离抑制精子活性。结果：从100例死精症患者精液标本中分离出12种细菌83株，其中口菌6株，占7．2％：G菌77株占92．8％，以大肠杆菌、嗜水气单胞菌、催产克雷伯氏菌为主要优势菌。所选六种抗菌素纸片的药敏试验，以环丙沙星、丁胺卡那霉素抑菌非常显著，头孢三嗪和泰能也有较好的抑菌作用。从凝胶分子筛层析分离结果看抑制精子的活性物质为蛋白质类物质。结论：对死精症的诊治过程中，细菌分离培养是非常必要的，且抗菌素的应用必须科学合理，才能有效的治疗死精症。     

重楼皂苷类化合物体外抗生育功效研究

目的 筛选并确证重楼皂苷类化合物的抗生育功效。方法 以重楼分离纯化获得的偏诺皂苷(PHAC-A)和薯蓣皂苷(PHAC-B)为实验材料,运用体外孵育小鼠精子测定其活性,研究其对体外精子活性的影响。结果 PHAC-A,PHAC-B体外均具抗生育活性,与阳性对照醋酸棉酚比较,能显著抑制精子活力和精子成活率,且PHAC-B抗生育效果优于PHAC-A,其抗生育活性存在剂量依存关系。结论 PHAC-A,PHAC-B抑制精子活力和精子成活率的功效显著,为高活性抗生育物质,其中PHAC-B为重楼中具抗生育能力的主要活性物质。     

人类辅助生殖技术中精子制备技术的研究进展

<正>精液优化选择是人工授精和体外受精-胚胎移植过程中的重要环节,目的是将液化精液中的精子和精浆分离,减少或去除精浆内前列腺素、免疫活性细胞、抗精子抗体、死亡或畸形精子等,从而防止子宫痉挛而抑制受精[1-3]。除去精浆还可以减少传染某些疾病的风险,减少精液的黏稠性[4]。目前,辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)中主要使用的精子制备方法为密度梯度离心法和直接上游法[5-6]。使用这两种精子优化技术均可以提高精子标本的活力[7-9]。但是这     

Percoll梯度离心法分离牛X精子及配种试验

用改良Ｐｅｒｃｏｌｌ梯度柱离心分离牛精子，并将分离后富含Ｘ精子的底层精液进行配种实验。结果发现，底层精子活率正常，含Ｆ小体的Ｙ精子仅１０．２％。将其鲜精直接配种母牛１３头；冻精配种８１头。鲜精组产仔率８４．６％，冻精组为７２．８３％，与对照组比较无差异。母犊出生率，鲜精组为８１．８０％，冻精组为７１．１８％，分别比对照组提高３６．３８％与２５．７８％（Ｐ＜０．０１）。结果表明，此分离方法可提供富含Ｘ精子的精液；应用于人工配种，必将促进奶牛事业的发展     

死精症患者精液细菌学分析

目的 了解致精子死亡的原因及死精症惠者的致病菌分布及药敏情况，为死精症息者的治疗提供科学指导。方法 采用细菌分离培养、药敏纸片抑菌实验进行精液细菌学分析与药敏试验。用细菌培养液做抑制精子动力实验，及应用凝胶分子筛层析技术分离抑制精子活性的大分子物质。结果 100例死精症患者精液标本中分离出12种细菌83株，其中G^＋菌6株，占7．2％；G-菌77株占92，8％，以大肠杆菌、嗜水气单胞菌、催产克雷伯氏菌为主要优势菌；对所选6种抗菌素纸片的药敏试验，以环丙沙星、丁胺卡那霉素抑茼非常显著，头孢三嗪和泰能也有较好的抑菌抑菌作用；凝胶分子筛层析分离结果表明，抑制精子的活性物质为细菌分泌的蛋白质。结论 对死精症的诊治过程中，细菌分离培养非常必要，合理应用抗菌素，以有效的治疗死精症。     

血小板激活因子受体mRNA在小鼠附睾精子内的表达

①目的检测血小板激活因子受体(PAFR)mRNA在小鼠附睾精子内的表达,探讨PAFR对受精过程的影响.②方法分离提取小鼠附睾精子mRNA,经逆转录(RT)合成PAFR-cDNA.利用聚合酶链反应(PCR)扩增PAFR-cDNA,DNA序列分析验证扩增产物的准确性.③结果小鼠附睾精子表达PAFR-mRNA;DNA序列分析验证PCR产物为小鼠PAFR-cDNA.④结论小鼠附睾精子有PAFR-mRNA的表达.     

Percoll梯度离心法分离牛X精子及配种试验

用改良Ｐｅｒｃｏｌｌ梯度柱离心分离牛精子，并将分离后富含Ｘ精子的底层精液进行配种实验。结果发现，底层精子活率正常，含Ｆ小体的Ｙ精子仅１０．２％。将其鲜精直接配种母牛１３头；冻精配种８１头。鲜精组产仔率８４．６％，冻精组为７２．８３％，与对照组比较无差异。母犊出生率，鲜精组为８１．８０％，冻精组为７１．１８％，分别比对照组提高３６．３８％与２５．７８％（Ｐ〈０．０１）。结果表明，此分离方法可提供富含