结核性脑膜炎实验诊断及病情评价方法的研究

目的:通过评价脑脊液抗酸杆菌(AFB)、结核杆菌DNA(TB-DNA)、抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体(LAM-IgG)、腺苷脱氨酶(ADA)等指标诊断结核性脑膜炎(结脑)及评价病情的价值,选择更实用的结脑实验诊断及评价病情的方法.方法:对脑脊液标本(结脑组121例、对照组49例)进行改良罗氏法培养结核杆菌、PCR法检测TB-DNA、离心甩片一步法和经典法检查AFB、斑点免疫金渗滤试验法检测LAM-IgG、酶促反应终点法检测ADA,比较各种方法的特异性和敏感性.结果:结脑组的阳性率,培养结核杆菌6.7%、TB-DNA81.7%、经典法AFB16.7%、离心甩片一步法AFB64.3%、LAM-IgG50.4%、ADA59.1%.对照组有16例ADA阳性结果,余均无阳性发现.TB-DNA、离心甩片一步法检查AFB和LAM-IgG的特异性与常用方法一致(100%),敏感性显著性高于常用方法(P＜0.01);ADA的敏感性也显著性高于常用方法(P＜0.01),但特异性显著性低于常用方法(P＜0.01).结论:在实验诊断结脑方面,PCR法检测TB-DNA和离心甩片一步法检测AFB既具有较高的特异性和敏感性,应用价值高于其他方法;TB-DNA LAM-IgG或AFB LAM-IgG联合试验诊断效率最佳.在评价病情方面,ADA具有良好的价值.     

一步法检测AFB和斑点法检测LAM-IgG诊断结核性脑膜炎

目的 :评估联合应用一步法检测抗酸杆菌 (AFB)和斑点法检测抗阿拉伯糖甘露糖脂 Ig G抗体(L AM- Ig G)方法诊断结核性脑膜炎 (结脑 )的价值。方法 :结脑患者为实验组 ,采集脑脊液本本 (CSF)为标本 ,应用一步法检测 AFB、斑点法检测 LAB- Ig G。结果 :实验组 ,一步法检测 AFB阳性率为 6 7.4 %(6 2 /92 )、斑点法检测 LAM- Ig G阳性率为 5 7.6 % (5 3/92 )、两者联检的阳性率为 71.7% (6 6 /92 ) ,较常规方法的阳性率有显著性提高 (ρ<0 .0 0 1)。结论 :对 CSF标本联合应用一步法检测 AFB和斑点法检测LAM- Ig G,在诊断结脑方面有较高的应用价值     

联检TB-DNA、LAM-IgG和ADA诊断小儿结核性脑膜炎

目的评价联检脑脊液结核杆菌DNA(TB-DNA)、抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体(LAM-IgG)和腺苷脱氨酶(ADA)指标诊断小儿结核性脑膜炎(结脑)及评价病情的价值。方法结脑组67例、非结核组38例,脑脊液标本应用聚合酶链反应法检测AFB、斑点免疫金渗滤试验法检测LAM-IgG、酶动力学终点法检测ADA。结果TB-DNA LAM-IgG诊断结脑的特异性为100%、阳性率为86.1%。结脑病情进展,ADA呈升高趋势;病情好转,ADA呈下降趋势。结论在诊断结脑方面,TB-DNA LAM-IgG联合试验的应用价值明显高于经典方法;在动态了解病情方面,ADA有较高的应用价值。三者联合应用可提高对小儿结脑诊断和评价的价值。     

应用脑脊液细胞沉淀器提高CSF抗酸菌检出率的研究

目的：评价应用CSF细胞离心沉淀器方法在检测CSF标本抗酸杆菌（AFB）诊断结核性脑膜炎（结脑）中的应用价值。方法：应用CSF细胞离心沉淀器，将CSF中的有形成份直接离心涂布于载波片上，然后进行抗酸染色，在显微镜下检测AFB。结果：应用此方法，112份结脑患CSF标本AFB的检出率为67．8％（76／112），显性高于常规方法的AFB检出率（P＜0．001）。32例对照组的CSF标本均未检查出AFB阳性结果。结论：CSF细胞离心沉淀器法检测CSF标本AFB的敏感性远高于常规方法，有较高的应用价值。     

TB-DNA、分枝杆菌快速培养和T-SPOT.TB及联合检测对结核性脑膜炎的诊断价值

目的 探讨TB-DNA、分枝杆菌快速培养和T-SPOT.TB对结核性脑膜炎(tuberculosis meningitis TBM简称"结脑")的诊断价值.方法 回顾性分析了2012年3月~2014年11月已确诊的106例初治结脑患者脑脊液(cerebrospinalfluid,CSF)的TB-DNA、分枝杆菌快速培养及T-SPOT.TB检测结果,并收集了45例非结脑的CSF作为对照组,对结果进行比较分析.结果 结脑组的TB-DNA、分枝杆菌培养、T-SPOT.TB、TB-DNA+分枝杆菌快速培养联合检测的检测方法的敏感性分别为23.1%、21.8%、80.9%和45.5%,在非结脑组中其特异性分别为100%、100%、88.9%和100%.结论 T-SPOT.TB敏感性最高,TB-DNA+分枝杆菌培养联合检测也可以提高检出率,为结脑早期诊断及治疗提供有效的辅助检查依据.     

结核菌PCR检测在附睾结核诊断中的应用

目的 探讨结核菌PCR检测在附睾结核诊断中的价值.方法 68例附睾结节患者中40例患者取精液做结核杆菌PCR检测,28例患者取附睾结节穿抽标本做结核杆菌PCR检测.结果 40例精液标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性13例,阳性率为32.5%; 28例附睾结节穿抽标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性8例,阳性率为28.5%.68例标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性21例,总阳性率为30.8%.结论 精液和附睾结节穿抽标本结核杆菌PCR检测,有助于提高附睾结核的诊断率,具有临床应用价值.     

脑脊液检测LAM-IgG与TB-IgG实验诊断结脑的比较

目的 :比较检测脑脊液 (CSF)标本抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体 (LAM IgG)和抗结核杆菌IgG抗体 (TB IgG)诊断结核性脑膜炎 (结脑 )的价值。 方法 :应用斑点免疫金渗滤试验检测CSF中LAM IgG和TB IgG ,其中结核性脑膜炎 (结脑组 ) 132份、对照组 5 5份。应用卡方检验比较两种方法检测结果的差别。结果 :结脑组检测LAM IgG和TB IgG的阳性结果分别为 6 8份 (5 1.5 % )和 5 3份 (4 0 .2 % ) ,对照组无阳性结果 ,两个指标检测结果的差别具有极显著性 (P <0 .0 1)。结论 :在诊断结脑方面 ,LAM IgG指标的价值高于TB IgG。检测CSF中LAM IgG有助于结核性脑膜炎的诊断。     

荧光定量PCR检测痰结核杆菌DNA及其临床应用

目的 探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测痰中结核杆菌DNA的诊断价值及其临床应用.方法 对51例初步诊断为肺结核的初治患者,20例其他肺病患者痰标本进行直接涂片、浓集涂片找抗酸杆菌,痰结核杆菌培养和FQ-PCR检测TB-DNA.结果 FQ-PCR法敏感度最高,与其他三种检测方法比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 涂片检查结核杆菌应提倡浓集法,FQ-PCR法检测TB-DNA应列入TB实验诊断的常规项目.     

检测RNA病毒及其IgM抗体在病脑病原学诊断中的应用

目的：探讨检测RNA病毒和相应IgM抗体在病脑病原学诊断方面的应用价值。方法：RT－PCR方法检测脑脊液（CSF）中B组萨奇病毒（COX－B）和风疹病毒（RV）；用ELISA方法检测CSF和血液中相应病毒的IgM。结果：101例病脑患，其CSF标本COX－B和RV的检出率分别为32．7％和7．9％；其COX－IgM和RV－IgM的检测阳性率，血液标本37．6％和7．9％，CSF标本无1例阳性结果；成人组和儿童组的检出率比较，COX系列差别无显性（P＞0．05），RV系列差别有显性（P＜0．05）。32例对照组，其CSF中未检出RNA病毒和IgM抗体；而血液中COX－IgM检出率均为6．2％。结论：RT－PCR方法可以用作病脑的病原学诊断手段，用RT－PCR方法检测脑脊液中的RNA病毒与用ELISA方法检测血清中抗体相结合，能增加实验诊断资料的可靠性。     

胸水ADA、TB-DNA联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的:探讨胸水腺苷脱氨酶(ADA)、TB-DNA检测,以及ADA、TB-DNA联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:采用临床流行病学诊断试验的方法,检测97例疑为结核性胸膜炎患者胸水中ADA、TB-DNA的含量,ADA用酶法连续监测法,TB-DNA采用PCR方法,用金标准将患者分为患病组和对照组,计算敏感性、特异性和准确性。结果:胸水ADA对结核性胸膜炎的诊断敏感性、特异性和准确性分别为87.7%,90%,88.5%;TB-DNA对结核性胸膜炎的诊断敏感性、特异性、准确性分别为70.2%,83.3%,74.7%;ADA和TB-DNA联合检测的诊断敏感性、特异性和准确性分别为93.0%,93.3%,93.1%。结论:胸水ADA联合TB-DNA检测可提高结核性胸膜炎诊断的敏感性,特异性和准确性,能基本满足临床需要。     

ELISA法测定部分种子和果实类中药黄曲霉毒素B1含量

目的 间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA)法测定部分种子果实类黄曲霉毒素B1的含量.方法 间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA法).结果 样品均有不同程度的污染黄曲霉毒素B1(AFB1),并且在贮藏过程中有发霉现象者含量较高.结论 建立黄曲霉毒素B1含量限度标准非常必要.     

肝癌癌变的实验病理研究

本文短期饲喂大鼠黄曲霉毒素B_1诱发肝癌,并应用病理组织学、组织化学、形态定量及电子显微镜术观察肝癌前病变的发展及其与肝癌的关系。发现诱癌早期肝小叶周边首先出现嗜硷性小肝细胞增生,进一步形成增生灶,嗜硷性增生灶和嗜酸性增生灶都可癌变。本文还探讨了与癌变有关的酶组织化学改变。     

Inhibition of AFB1-induced liver cancer and induction of increased microsomal enzyme activity by dietary constituents

A long-term study, using male Wistar rats, was initiated to determine whether the effects of dietary constituents on AFB1-induced liver cancer could be associated with altered microsomal enzyme activity. They were maintained on mice pellets mixed with specific dietary constituents for 7 days and then given a single carcinogenic dose of AFB1 (500 micrograms/rat). After three months, the dietary constituents were discontinued and the animals were left on mice pellets and drinking water only for a period of about 20 months. At the end of the trial period, it was observed that dietary mixtures containing small quantities of either beta-carotene, ascorbic acid, GSH, vitamin E, selenium salt, or uric acid, effectively inhibited the development of AFB1-induced liver cancer and induced increased microsomal enzyme activity. Whereas beta-carotene and uric acid were the most effective inhibitors, vitamin E was the least, yet a significant inhibitor of liver cancer. Hepatic levels of cytochrome P-450, aniline hydroxylase and chlorpromazine demethylase were significantly induced in rats fed fortified food followed by AFB1 treatment than in control animals. The inhibition of liver cancer by dietary factors was probably due to their ability to induce the activity of hepatic microsomal enzymes. Increased enzyme activity could lead to rapid activation of AFB1 metabolism, resulting in loss of activated AFB1 metabolites that attack cell components. Inhibition of liver cancer is therefore associated with induction of increased microsomal enzyme activity.     

滤纸吸水法收集可疑肺结核病人痰标本提高痰涂片AFB检出率的探讨

目的 探讨可疑肺结核病人痰标本滤纸吸水法AFB阳性率.方法 同时采用滤纸吸水收集和常规收集两种不同的方法,对516例可疑肺结核病人的1007份痰标本进行痰涂片AFB检测结果比较.结果 滤纸吸水收集法的阳性病例检出率(25.4%,131/516)高于常规收集法(18.4%,95/516),且不同性质和不同时段的痰标本用滤纸吸水收集法检测的AFB阳性率均不同程度地高于常规收集法.结论 滤纸吸水收集法能提高AFB阳性检出率,且简便、易行,可考虑推广应用.     

Diagnostic evaluation of extrapulmonary tuberculosis by fine needle aspiraton (FNA) supplemented with AFB smear and culture

One hundred forty-three patients, 72 males and 71 females, with extrapulmonary tuberculosis were aspirated and subjected to cytological (Ziehl-Neelsen stain) examination and culture in Lowenstein-Jensen media. Routine haematological examination and Mantoux test were done in all the cases, x-ray chest in 112, skeletal x-ray in 3 relevant cases and sputum was examined for AFB in 16 cases where pulmonary tuberculosis was associated/suspected with extrapulmonary tuberculosis. HIV status was evaluated in 51 cases and 9 (7.64%) were seropositive. FNA cytology in 102 cases (71.3%) had caseating epithelioid granulomas while smear for AFB was positive in 57 cases (39.8%). Both culture and smear were positive in 29 (20.2%) cases. Combining both smear and culture yielded positive results in 47.5% cases. It was observed that AFB positivity was higher in untreated patients and with HIV positive cases. Further more, the triad of FNAC, AFB smear and culture were cheaper, foolproof and confirmatory than costlier tests like TB IgG, IgM, RTPCR and BACTEC.     

原发性肝细胞癌中黄曲霉素B1-DNA加合物暴露水平分析

目的检测原发性肝细胞肝癌(HCC)中黄曲霉素B1-DNA(AFB1-DNA)加合物暴露水平,结合临床病理资料,探讨其在HCC及非HCC组织中的暴露水平差异及其临床意义。方法收集我院收治的宁夏地区2006年1月-2010年9月行手术切除的50例肝癌患者和40例非肝癌患者肝脏组织的蜡块标本,采用AFB1-DNA加合物免疫组化染色法(ABC法)检测上述标本中AFB1-DNA加合物水平,分析其与临床各病理因素间相互关联性。结果 AFB1-DNA加合物在HCC中阳性结果定位于细胞核。HCC中AFB1-DNA加合物阳性率明显高于癌旁及非HCC肝组织,其差异有统计学意义(P<0.05)。AFB1-DNA加合物暴露水平与血清甲胎蛋白(AFP)含量有显著的相关性(P=0.003),与肝癌的TNM分期(P=0.799)、肿瘤大小(P=0.693)、病理分级(P=0.437)及肝外转移(P=0.247)无明显相关性。结论 AFB1是引起肝癌发生发展的重要因素之一,分析其与临床各病理因素之间关系对于进一步研究AFB1相关HCC的致癌机制具有一定的参考价值。     

Influences of V5-epitope tag on the metabolic activation of AFB1 by human cytochrome P450 2A13

INTRODUCTION A flatoxin B1 (AFB1) , which is produced by Aspergillus flavus and Aspergillus parasitus, is a potent carcinogen in human and animals. Al- though AFB1 is best known as a liver carcinogen, it also induces lung tumors in animals and epidemio- logical studies show a positive association between human lung cancer occurrence and inhalation expo- sure to AFB1-containminated grain dust. As most of environmental carcinogens, metabolic activation cat- alyzed by cytochrome P450 (C…     

自噬参与促进AFB1致肝细胞DNA损伤的修复进程

目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)肝毒性修复进程中细胞自噬的作用。方法以经50μmol/L AFB1预处理24 h的永生化人正常肝L02细胞建立模型,检测AFB1处理撤除不同时间点的细胞DNA双链损伤指标γH2AX蛋白和自噬标志物LC3-Ⅱ蛋白的表达水平;采用免疫荧光法检测AFB1撤除后细胞中γH2AX蛋白荧光焦点和自噬体形成情况;在AFB1撤除后联合应用自噬抑制剂3-MA进行干预实验,检测细胞内γH2AX蛋白的表达水平。结果L02细胞中γH2AX蛋白的动态表达在AFB1处理撤除12 h后达到最高,并在24 h后逐渐降低;自噬蛋白LC3-Ⅱ和自噬体的形成在AFB1处理撤除后逐渐增强;3-MA可明显减缓AFB1撤处理后细胞内γH2AX蛋白的降低进程。结论细胞自噬参与了AFB1诱导肝细胞毒性损伤的修复进程,与促进DNA损伤的修复有关。     

GSTM1基因多态性与AFB_1-DNA加合物水平的关系

目的探讨解毒酶基因谷胱甘肽S-转移酶M1(Glutathione S-transferase M1,GSTM1)多态性对黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)高污染区广西人群AFB1-DNA加合物水平的影响。方法采用竞争性酶联免疫吸附法检测研究对象(966例)AFB1-DNA加合物水平,而GSTM1基因型分析则通过PCR-RFLP来完成。结果研究结果显示GSTM1缺失型(GSTM1-null)与高AFB1-DNA加合物水平相关,其校正风险值(OR)为2.09(95%可信区间,即95%CI值为1.61~2.71)。结论 AFB1在带有易感基因型GSTM1-null的人群更易诱导产生DNA损伤(AFB1-DNA加合物)。