葡萄糖及胰岛素对巨噬细胞清道夫受体BⅠ表达的影响

用不同浓度葡萄糖和（或）胰岛素处理U937巨噬细胞，研究其对巨噬细胞清道夫受体（SR）BⅠ表达的影响，结果表明基础生理水平胰岛素促进巨噬细胞SR—BⅠ蛋白表达，而胰岛素浓度达到100μU／ml以上时，SR-BⅠ表达反而下降。胰岛素水平的变化对SR—BⅠ mRNA表达无显著影响。葡萄糖与胰岛素水平同时升高对巨噬细胞SR—BⅠ明显的下调作用也许与代谢综合征同时存在2型糖尿病患者动脉粥样硬化发生较早，发展迅速有关。     

葡萄糖和厄贝沙坦对单核巨噬细胞系凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体表达的影响

目的研究不同浓度葡萄糖和厄贝沙坦对人单核巨噬细胞系(THP-1)凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白表达的影响,并探讨其可能的机制。方法 THP-1细胞经0.16μmol/L佛波酯诱导分化72 h后,将细胞分为对照组、不同浓度葡萄糖组(5、8、12和15 mmol/L)和厄贝沙坦干预组,葡萄糖组将不同浓度葡萄糖与诱导分化的巨噬细胞孵育24 h,厄贝沙坦干预组用厄贝沙坦预先孵育2 h后,再加入15 mmol/L葡萄糖共同孵育24 h。用荧光定量PCR和细胞酶联免疫法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,5 mmol/L葡萄糖组凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白表达差异无显著性(P>0.05),其余高糖组该受体mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),并且其表达呈浓度依赖性;厄贝沙坦可显著抑制此作用,使该受体表达明显降低。结论高糖以浓度依赖方式上调凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA和蛋白的表达,这可能是导致动脉粥样硬化发生的机制之一;厄贝沙坦可显著抑制这一作用,可能在抗动脉粥样硬化中起作用。     

糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体蛋白表达的影响

目的　研究诱导分化及糖基化终产物 (AGEs)对人单核 /巨噬细胞 (U937细胞 )高密度脂蛋白受体 (SR BI)蛋白表达的影响 ,探讨AGEs和巨噬细胞SR BI在动脉粥样硬化中的作用。方法　U937细胞经PMA诱导分化 ,并将不同浓度或同一浓度AGEs与诱导分化 48h后的U937细胞共同孵育 ,用免疫细胞化学法和Western印迹法检测SR BI蛋白的表达。结果　诱导分化后U937细胞SR BI表达在 2 4、48h逐渐升高 ,72h下降 ;1 0 0、2 0 0和 40 0 μg/mlAGEs刺激后细胞表面SR BI蛋白表达量分别是BSA组的 1 44、2 38和 2 77倍 (P <0 0 5) ;40 0 μg/ml的AGEs作用 6、1 2、2 4、48h后 ,U937巨噬细胞SR BI蛋白表达量分别为 0h的 1 38、2 49、3 76和 4 2 5倍 (P <0 0 5)。结论　AGEs可增加U937巨噬细胞SR BI蛋白表达且呈浓度和时间依赖性。     

糖基化终产物促进U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体的表达

目的　研究糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响。方法　将糖基化终产物与诱导分化4 8h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和半定量逆转录聚合酶链反应检测细胞清道夫受体BI蛋白及mRNA的表达。结果　免疫细胞化学法检测10 0、2 0 0和4 0 0mg/L糖基化终产物刺激后U937巨噬细胞清道夫受体BI蛋白表达的平均积分光密度值分别为18.94±3.5 6、2 7.86±4 .39及35 .0 8±2 .37,较牛血清白蛋白组明显升高(13.76±3.74 ,P <0 .0 5 ) ;4 0 0mg/L糖基化终产物作用6、12、2 4及4 8h后,细胞清道夫受体BI表达的平均积分光密度值分别为16 .87±5 .6 5、2 5 .6 8±6 .97、35 .0 8±8.37及39.6 8±9.37,较0h组明显升高(12 .0 2±3.4 7,P <0 .0 5 )。半定量逆转录聚合酶链反应结果显示,4 0 0mg/L牛血清白蛋白及10 0、2 0 0和4 0 0mg/L糖基化终产物刺激后细胞清道夫受体BImRNA相对表达量分别是0 .32±0 .0 3、0 .5 3±0 .0 5、0 .6 4±0 .0 4和0 .89±0 .0 5 ;4 0 0mg/L糖基化终产物作用0、6、12、2 4及4 8h后,U937巨噬细胞清道夫受体BImRNA相对表达量分别为0 .4 1±0 .0 1、0 .6 2±0 .0 5、0 .80±0 .0 8、0 .87±0 .0 5、1.2 4±0 .13。结论　糖基化终产物可增加U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体蛋白     

低密度脂蛋白对THP-1源性巨噬细胞PCSK9和低密度脂蛋白受体表达的影响

目的用低密度脂蛋白处理THP-1源性巨噬细胞后,检测低密度脂蛋白受体和PCSK9(proprotein convertase subtilisin/kexintype9)的表达并研究PCSK9与低密度脂蛋白受体之间的相关性。方法160nmol/L佛波酯孵育THP-1源性巨噬细胞24h,使其诱导分化成贴壁的巨噬细胞后,分别用0、10、20和     

低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞源性巨噬细胞胆固醇代谢及低密度脂蛋白受体表达的影响

目的 研究动脉粥样硬化过程中低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞源性巨噬细胞胆固醇代谢和低密度脂蛋白受体表达的影响。方法 以佛波酯刺激分化的THP-1细胞作为单核细胞源性巨噬细胞模型。通过胆固醇酶联法测定细胞内胆圊醇含量，逆转录-聚合酶链反应检测细胞低密度脂蛋白受体mRNA的表达，Western blot检测细胞低密度脂蛋白受体蛋白的表达。结果 与低密度脂蛋白组、阴性组及IgG免疫复合物组比较，低密度脂蛋白免疫复合物组细胞内胆固醇水平明显增高，并且低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白的表达增加。结论 低密度脂蛋白免疫复合物能显著增加巨噬细胞内胆固醇含量，亦能够促进低密度脂蛋白受体mRNA与蛋白的表达，提示低密度脂蛋白免疫复合物在动脉粥样硬化进展过程中起重要的作用。     

轻度修饰低蜜度脂蛋白对小鼠肝脾中清道夫受体mRNA表达的影响

小鼠静脉注射轻度修饰低密度脂蛋白（ｍｉｌｄｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ｍｍ－ＬＤＬ）可使其肝、脾清道夫受体（ｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＳＲ）ｍＲＮＡ水平分别比静脉注射天然ＬＤＬ小鼠增加２．０倍（Ｐ＜０．０５）及５．９倍（Ｐ＜０．０１）；巨噬细胞克隆刺激因子（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＭＣＳＦ）ｍＲＮＡ水平亦分别增加３．２倍（Ｐ＜０．０１）和３．０倍（Ｐ＜０．０１）。而静脉注射ＭＣＳＦ时又可使其肝脾ＳＲｍＲＮＡ分别增高３．６倍（Ｐ＜０．０５）及３．０倍（Ｐ＜０．０１），并有一定的量效关系。首次报道了ｍｍ－ＬＤＬ静脉注射可直接诱导肝脾中ＳＲｍＲＮＡ表达，或间接通过刺激ＭＣＳＦ表达，进而诱导ＳＲｍＲ－ＮＡ表达，并讨论了此现象在全身及局部动脉粥样硬化形成中的意义。     

脂蛋白(a)对巨噬细胞清道夫受体-A表达的影响

目的研究脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]对巨噬细胞清道夫受体A(scavengerreceptorclassAtypeIandtypeⅡ,ScR-A)的影响.方法利用细胞培养、受体摄取配体及Northern印迹杂交方法,观察Lp(a)对从人类单核细胞株细胞形成的巨噬细胞受体摄取乙酰化LDL(acetylatedLDL,Ac-LDL)以及对THP-1细胞形成的巨噬细胞ScR-AmRNA表达的影响.结果人类单核细胞株细胞形成的巨噬细胞对Ac-LDL的结合量随Lp(a)浓度的增加而增加,而天然LDL对此无影响.加入50μg/ml(a),巨噬细胞对Ac-LDL结合量为(188.06±16.80)ng/mg蛋白,与对照组的(48.26±5.61)ng/mg蛋白比较显著增加(P＜0.01);巨噬细胞对Ac-LDL的摄入量为(363.80±11.77)ng/mg蛋白,与对照组的(228.15±17.07)ng/mg蛋白比较显著增加(P＜0.05);巨噬细胞对Ac-LDL的降解量为(948.17±31.43)ng/mg蛋白与对照组的(608.68±38.11)ng/mg蛋白比较显著增加(P＜0.05).加入50μg/ml(a),其ScR-AmRNA表达明显增强,与对照组比较增强43.56%.结论Lp(a)可增强从THP-1细胞形成的巨噬细胞ScR-A基因的表达,Lp(a)的这种作用可能参与了动脉粥样硬化形成和发展的病理过程.     

C反应蛋白和高密度脂蛋白对血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的观察C反应蛋白和高密度脂蛋白对单核细胞株THP-1来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达的影响,以及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的变化与细胞内胆固醇含量变化的关系。方法THP-1单核细胞株经佛波酯诱导分化为巨噬细胞。用不同浓度C反应蛋白或高密度脂蛋白在体外干预巨噬细胞,测定干预前后巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达的变化,并采用高效液相色谱测定巨噬细胞内胆固醇含量的变化。结果与对照组相比,C反应蛋白或高密度脂蛋白均可以诱导THP-1来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),C反应蛋白使巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量显著增加(P<0.01),而高密度脂蛋白使细胞内总胆固醇和胆固醇酯显著降低(P<0.01)。结论C反应蛋白和高密度脂蛋白都能引起THP-1来源的巨噬细胞表面血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达上调,提示血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1并不是介导巨噬细胞参与炎症反应病理生理变化的关键性受体。     

不同磷脂配比构成的脂蛋白对J774巨噬细胞胆固醇转运的影响

目的研究不同磷脂配比构成的脂蛋白rHDL-A1、rHDL-A2、rHDL-A3、rHDL-B1、rHDL-B2对J774巨噬细胞胆固醇转运的影响。方法取新鲜抗凝血浆,用超速离心法进行密度梯度离心,收集LDL、HDL3。将LDL置于含10μmol/L CuSO4的PBS溶液(pH7.2)中,37℃温育24h;氧化修饰后的LDL置含200μmol/     

低密度脂蛋白对胰岛细胞功能的影响

目的探讨低密度脂蛋白（LDL）受体在胰岛β细胞（NIT-1细胞）上的表达及其LDL和氧化型LDL对胰岛β细胞功能的影响。方法实验室培养NIT-1细胞,用RT-PCR扩增后电泳检测LDL受体在NIT-1细胞上的表达;检测LDL及氧化型LDL对胰岛β细胞活性和胰岛素分泌及胰岛素mRNA表达的影响。结果LDL受体在NIT-1细胞上表达;与对照组相比,LDL及氧化型LDL对胰岛β细胞的活性无明显影响（P〉0．05）;LDL对胰岛β细胞胰岛素分泌无明显影响（P〉0．05）,氧化型LDL能显著抑制胰岛β细胞胰岛素的分泌（P〈0．01）;LDL对胰岛β细胞胰岛素mRNA表达无明显影响（P〉0．05）,氧化型LDL能显著抑制胰岛β细胞胰岛素mRNA表达（P〈0．01）。结论LDL受体在NIT-1细胞表达;LDL及氧化型LDL对胰岛β细胞活性无明显影响,但氧化型LDL显著降低胰岛β细胞胰岛素的分泌和细胞胰岛素mRNA的表达。     

血浆低密度脂蛋白和高密度脂蛋白亚组分的临床意义及检测研究进展

血浆低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)是临床心血管疾病(CVD)的重要生物化学指标。一些脂代谢异常疾病如肥胖、糖尿病、高血压和高脂血症尤其是动脉粥样硬化等都是CVD的危险因素,许多新的研究证明这些疾病患者的血浆LDL和HDL亚组分存在异常,其临床意义大于LDL和HDL总体异常。血浆LDL和HDL异常亚组分作为CVD临床检测指标已引起了广泛研究与关注。本文旨在对血浆LDL和HDL亚组分的临床意义及检测研究进展加以论述。     

糖尿病患者低密度脂蛋白与内皮细胞受体结合的研究

用荧光法检测正常组、糖尿病HbA1C<7.0%组和HbA1C>7.0%组的低密度脂蛋白(LDL)糖化值分别为(17.7±2.31)、(34.29±5.73)和(48.79±7.82)Glycogroups/LDL,用酶联免疫受体法检测上述3组LDL与人内皮细胞LDL受体的特异结合活性分别为(37.65±5.20)、(27.36±4.34)和(15.07±2.23)ng/mg细胞蛋白,2组糖尿病的LDL糖化值均高于对照组(P<0.01),HbA1C>7.0%组高于HbA1C<7.0%组(P<0.01),而LDL与其受体结合的结果相反.

Abstract：

The levels of low-density lipoprotein(LDL)glycation from control group,diabetic HbA1C < 7.0%,and HbA1C>7.0% groups were(17.7±2.31),(34.29±5.73),and(48.79±7.82)Glycogroups/LDL by fluorimetry.The LDL binding to its receptor in three groups were(37.65±5.20),(27.36±4.34),and(15.07± 2.23)ng/mg cell protein measured by enzyme-linked immunoreceptor assay.The glycated levels in two diabetic groups were higher than that in control group,and higher in HbA1C>7.0% group than in HbA1C<7.0% group(all P< 0.01).The results of LDL binding capacity to its receptor were just the opposite.     

Calcium and lipoprotein lipase synergistically enhance the binding and uptake of native and oxidized LDL in mouse peritoneal macrophages

The influence of Ca²⁺ and Mg²⁺, together with lipoprotein lipase (LPL), on the binding and uptake of Eu³⁺-labeled native and oxidized low density lipoprotein (LDL) to mouse peritoneal macrophages (MPM), and on the deposition of esterified cholesterol in these macrophages, were studied. We found that both LPL and Ca²⁺ (but not Mg²⁺) increased the binding and uptake of native and mildly or moderately oxidized LDL, and the subsequent deposition of cholesterol esters in MPM. When added together, LPL and Ca²⁺ synergistically increased the binding and uptake of native and oxidized LDL, and the deposition of esterified cholesterol derived from native and mildly or moderately oxidized LDL, in MPM. Since both calcium and LPL are found in the atherosclerotic lesions, our results suggest that Ca²⁺ and LPL may synergistically promote foam cell formation and atherogenesis. Furthermore, future research in the metabolism of lipoproteins should take into account the calcium levels in the experimental conditions.     

脂质对大鼠肝星状细胞低密度脂蛋白、高密度脂蛋白受体的影响

目的研究脂质（甘油三酯和极低密度脂蛋白）对大鼠HSC低密度脂蛋白（low-densitylipoprotein,LDL）、高密度脂蛋白（high-densitylipoprotein,HDL）受体的影响。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSC;应用125I-LDL和125I-HDL3配体进行放射性配基结合实验测定脂质对HSC膜LDL、HDL受体的影响。结果HSC膜表面存在LDL、HDL受体;脂质可增加LDL受体对LDL的亲合力,但降低HDL受体对HDL3的亲合力。结论HSC膜上的LDL、HDL受体对脂蛋白代谢及胆固醇的调节有重要作用,为阐明脂肪肝肝纤维化的发生提供了新的实验依据。     

高糖对HDL调节THP-1巨噬细胞CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ表达的影响

目的　观察高糖对　HDL调节THP-1巨噬细胞清道夫受体CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ（PPARγ）表达的影响。方法　用50　mg/L　ox-LDL、50　mg/L　ox-LDL+50　mg/L　HDL、50　mg/L　ox-LDL+50　mg/L　HDL+20　mmol/L　D-葡萄糖、50　mg/L　HDL、50　mg/L　HDL+20　mmol/L　D-葡萄糖孵育THP-1巨噬细胞24　h,采用油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况,　RT-PCR和Western　Blot分别检测CD36、PPARγ、p-PPARγ　mRNA和蛋白的表达。结果　加用HDL组明显减少脂质蓄积,加用HDL组的CD36　mRNA　和蛋白的表达下调,PPARγ的mRNA　和蛋白及p-PPARγ的蛋白表达上调;而同时加用50　mg/L　HDL和　20　mmol/L葡萄糖组CD36和PPARγ的mRNA及蛋白表达上调,而p-PPARγ的表达下调（P<0.05）,并促进脂质蓄积。结论　高糖可使HDL　抑制CD36表达及脂质蓄积的作用减弱。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对内皮细胞表面低密度脂蛋白受体分布的影响

为研究垂体腺苷酸环化酶激活肽对内皮细胞表面低密度脂蛋白受体分布的影响，以胶体金─低密度脂蛋白为示踪物，结合透射电镜技术观察垂体腺苷酸环化酶激活肽作用于体外培养的内皮细胞后，其表面低密度脂蛋白受体分布变化情况。结果表明，垂体腺苷酸环化酶激活肽作用于内皮细胞后，内皮细胞光镜及电镜下的形态与对照组无明显差异，但内皮细胞表面低密度脂蛋白受体分布发生了变化，胶体金─低密度脂蛋白颗粒单独出现率升高（P＜0．05），内皮细胞内吞胶体金─低密度脂蛋白减少。提示垂体腺苷酸环化酶激活肽可能通过影响内皮细胞表面低密度脂蛋白受体的分布状态而减少低密度脂蛋白入胞代谢，进而减少低密度脂蛋白通过内皮细胞进入内膜下的机会，从而在抗动脉粥样硬化方面发挥作用。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对内皮细胞表面低密度脂蛋白受体分布的影响

为研究垂体腺苷酸环化酶激活肽对内皮细胞表面低密度脂蛋白受体分布的影响，以胶体金－低密度脂蛋白为示踪物，结合透射电镜技术观察垂体腺苷酸环化酶激活肽作用于体外培养的内皮细胞后，其表面低密度脂蛋白受体分布变化情况，结果表明；垂体腺苷酸环化酶激活肽作用内皮细胞后，内皮细胞光镜及电镜下的形态与对照组无明显差异，但内皮细胞表面低密度脂蛋白受体分布发生了变化，胶体金－低密度脂蛋白颗粒单独出现率升高（Ｐ〈０．０５     

胆固醇对糖尿病患者低密度脂蛋白受体结合的影响

探讨不同浓度胆固醇对低密度脂蛋白（LDL）细胞受体结合的影响。方法：用超离心法从人体血清中提取LDL，测糖化值并予以酶标，用酶联免疫受体法测定不同浓度胆固醇（0、5．0、10．0、25．0、50．0、100．0mm。l／L。）对正常组（HbA1c为4．76士0．25％，n=10）及糖尿病Ⅰ组（HbA1c为6．80士0．43％，n=1O）和Ⅱ组（HbA1c为11．57士1．83％，n=1O）的LDL细胞特异受体结合。结果：正常组、Ⅰ及Ⅱ组LDL糖化值分别为18．45士2．15、31．30士4．56、69．10士6．32Glycogroups／LDL，LDL受体结合在无胆固醇时最大，最高浓度胆固醇时最小。结论：胆固醇增高可引起糖尿病患者LDL受体结合的下降。     

Circulating desialylated low density lipoprotein

Accumulation of lipids is the central event in the development of atherosclerotic lesion. Circulating low-density lipoprotein (LDL) particles are known to be the major source of cholesterol and other lipids stored in atherosclerotic plaque. However, not all LDL particles possess atherogenic properties. In order to induce lipid accumulation in arterial cells, LDL particles have to undergo modifications. Although among such modifications the oxidation remains the most studied one, other atherogenic LDL modifications have been described. According to a series of studies conducted with blood serum and LDL from atherosclerotic patients, desialylation is one of the earliest if not the first atherogenic modification of LDL. Desialylation occurs in the bloodstream and is followed by a cascade of other modifications, including the reduction of LDL particle size and increase of its density, acquisition of negative electrical charge, oxidation and formation of highly atherogenic complexes. In this mini-review we will discuss the concept of multiple atherogenic modification of LDL leading to initiation and progression of atherosclerosis.