神经元性一氧化氮合酶活性在app/ps1双转基因AD模型小鼠皮质和海马的分布

本实验用 4～ 5月龄和 15～ 16月龄的 app/ ps1dtg小鼠各 5只 ,同龄野生型小鼠每个年龄组各 5只 ,用β-NADPH组织化学染色显示神经元一氧化氮合酶活性 ,刚果红组织学染色显示神经炎性斑 ,无偏性体视学计量皮质和海马神经炎斑的总体积 ,研究神经元一氧化氮合酶活性在 app/ ps1双转基因 (app/ ps1dtg) AD模型小鼠大脑皮质和海马的异常分布 ,探讨其在该模型小鼠及 AD患者脑内病理改变中的作用。结果显示 ,n NOS阳性神经元在各组小鼠皮质和海马内的分布没有区别 ,4～ 5月龄 app/ps1dtg小鼠皮质和海马可见神经炎斑 (NP)和营养不良性 NOS阳性神经突 (DTN) ;15～ 16月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质和海马内NP的体积分别是 4～ 5月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质 NP的 5倍 (P<0 .0 0 5 )和 8倍 (P<0 .0 0 1) ;15～ 16月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质内 DTN的体积明显增大 (P<0 .0 1) ;且伴有 NOS阳性神经元形态的改变及海马 CA1 区 NOS阳性神经元数量的减少 (P<0 .0 5 ) ,DTN的形成与 NP呈正相关关系 (r=0 .85 ,P<0 .0 5 )。本实验结果表明 ,app/ ps1dtg小鼠能够模拟 AD患者脑内 NOS阳性神经元的病理改变 ,DTN的形成可能与 Aβ的毒性作用有关 ,DTN产生的 NO可能参与 app/ ps1dtg小鼠和 AD的神经病理过程。     

app/ps1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内胶质细胞的激活及iNOS的表达

目的研究10～12月龄雌性app／ps1双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠(app／ps1，dtg)脑内小胶质细胞和星形胶质细胞的激活，以及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide，iNOS)的表达。方法免疫组织化学结合刚果红组织学染色，普通光学显微镜观察。结果在app／ps1 dtg小鼠皮质和海马内有广泛的神经炎斑形成，围绕在神经炎斑周围的小胶质细胞和星形胶质细胞处于活化状态，且活化的星形胶质细胞表达iNOS。结论app／ps1 dtg小鼠能够模拟AD病人脑内的主要病理过程。神经胶质细胞的激活及iNOS的表达在app／ps1 dtg小鼠和AD脑内病理过程中具有重要的作用。     

雷公藤甲素抑制APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马内Aβ沉积和老年斑形成

目的 研究雷公藤甲素(T10)对APP/PS1双转基因AD模型小鼠(APP/PS1dtg)β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积与老年斑(SP)形成的影响。 方法 取18只45月龄健康雄性APP/PS1dtg, 随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/(kg&#8226;d) (T10 H组)、1μg/(kg&#8226;d) (T10 L组)和等容量的溶媒灌胃（PLC组）,共计45d。45d后取材,左侧半大脑切片,6E10免疫组织化学方法染色和刚果红染色结合无偏性体视学定量分析,研究T10对海马Aβ沉积和SP形成的影响;分离右侧半海马,免疫印迹法分析海马Aβ蛋白水平的变化。 结果 与PLC组比较, T10 H组海马6E10阳性的Aβ沉积总面积减少了35％(P<0.001),SP总面积减少了32％(P<0.001); T10 L组海马Aβ斑总面积减少了18％(P<0.05), SP总面积减了21％(P<0.05); T10呈剂量依赖性抑制Aβ在APP/PS1dtg 海马的沉积和SP的形成,减少海马内Aβ蛋白水平; 免疫印迹分析也显示,T10 H组海马Aβ蛋白水平最低,PLC组Aβ蛋白水平最高,T10 L组Aβ蛋白水平介于两者之间。     

雌激素对老年雌性小鼠齿状回和海马CA1区神经胶质细胞的影响——形态学观察和无偏性体视学定量分析

切除 2 0～ 2 4月龄 C5 7BL /6NIA小鼠双侧卵巢 ,随后于颈部皮下植入可持续释放 60 d的含 1.7mgβ-雌二醇 (E2 )或含等剂量胆固醇的安慰剂。用免疫组织化学结合无偏性体视学方法 ,分析小鼠齿状回和海马 CA1区小胶质细胞和星形胶质细胞形态和数量的变化。结果发现 :60 d E2处理老年雌性小鼠不仅可以抑制神经胶质细胞的激活 ,而且可以明显降低小胶质细胞和星形胶质细胞的总数 ;神经胶质细胞在脑内免疫和炎症反应过程中起着非常重要的作用。本实验的结果提示 ,雌激素可能通过调节胶质细胞介导的脑内炎症反应通路 ,发挥其神经保护作用。     

β-淀粉样蛋白在Alzheimer病中的神经毒性

文综述了β淀粉样蛋白多肽(βamyloid peptide,Aβ)在老年性痴呆症(Alzheimer's disease,AD)中的毒性作用。Aβ是老年斑形成的始动因子,也是老年斑核中的核心成分;Aβ沉积所形成的神经炎性斑,即老年斑是AD脑内特征性病理变化之一;Aβ本身也可形成自由基损伤神经元;Aβ引起的细胞凋亡在AD病神经元丢失中起着重要作用;Aβ可作用于胆碱能神经元末梢,通过抑制胆碱的摄取而减少乙酰胆碱合成,减少海马和皮质脑片释放乙酰胆碱。总之,Aβ是通过多个环节引发神经毒性作用的。     

CB-Aβ抗体偶联物抑制痴呆小鼠脑内Aβ纤维斑块形成

目的研究CB-Aβ多肽抗体(IgG)是否能高效的进入痴呆小鼠脑内,发挥抑制Aβ纤维斑块形成的作用。方法用改良过碘酸钠法制备CB-IgG偶联物;鼻腔给予C57小鼠CB-IgG后用间接ELISA法测定脑内抗体量;给予C57小鼠抗体3 h后用间接ELISA测血清和脑区抗体量;5XFAD小鼠分为CB-IgG IN组,IgG IN组,IgG IV组,阳性对照组和阴性对照组,抗体干预14周后,双抗夹心ELISA检测脑内Aβ水平,免疫组化染色观察Aβ沉积和老年斑。结果鼻腔给予CB-IgG 0.3 h时在脑内即可检测到Aβ抗体的存在(P<0.05),3 h后达峰值(P<0.01);抗体给予3 h后,CB-IgG IN组海马区的抗体量高于IgG IN组和IgG IV组10倍以上(P<0.05),IgG IV组与IgG IN组脑内的抗体量接近;CB-IgG IN组小鼠脑内Aβ水平比阳性对照组显著降低(P<0.05);CB-IgG IN组海马和皮层区的老年斑面积与阳性对照组相比分别减少了80%以上(P<0.05)。结论鼻腔给予CB-IgG的方式,在提高抗体入脑量、抑制痴呆鼠脑内Aβ纤维斑块形成等方面均优于其他途径和措施。     

阿尔茨海默病转基因小鼠不同脑区老年斑的观测

目的:观测阿尔茨海默病转基因小鼠不同脑区,比较改良Bielshowsky镀银染色法与免疫组织化学染色法检测老年斑的可靠性。方法:应用体视学方法分别对改良Bielshowsky镀银染色与Aβ免疫组织化学染色结果计数,统计分析两者相关性。结果:Aβ免疫组织化学染色与改良Bielshowsky镀银染色均可检测到AD转基因小鼠不同脑区的老年斑,阳性物计数结果呈正相关性(r=0.228,P0.01);Aβ免疫组织化学染色法可观察胞质内Aβ的分布。结论:老年斑在AD转基因小鼠不同脑区的分布有差异,改良Bielshowsky镀银染色法与Aβ免疫组织化学染色法均可作为阿尔茨海默病病理特征老年斑的检测手段。     

APPswe转基因小鼠海马结构中谷氨酸和γ-氨基丁酸能神经元的数量变化

目的:探讨谷氨酸和γ-氨基丁酸在阿尔茨海默病(AD)发生、发展中的作用.方法:利用硫磺素S染色技术检测APPswe转基因小鼠脑内沉积的老年斑;免疫荧光技术标记正常及APPswe转基因小鼠海马发育过程中谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)阳性细胞. 结果: 模型组小鼠海马CA1、CA3区以及齿状回谷氨酸阳性细胞的数量明显少于正常对照组,而海马各区的GABA阳性细胞在两者之间变化不明显.结论: 谷氨酸与GABA能神经元数量的改变与Aβ诱导的神经元凋亡以及AD的病理发生有关.     

外源性神经生长因子对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节。方法:鼻腔给予小鼠NGF治疗14周,应用免疫组织化学检测小鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)老年斑的分布,应用免疫印迹检测小鼠脑内糖原合酶激酶3β(GSK3β)、p-GSK3β、β-连环蛋白(β-catenin)和p-β-catenin的表达。结果:Aβ免疫组织化学显色结果显示,与对照组小鼠大脑内的Aβ老年斑相比较,NGF治疗组转基因小鼠大脑内的Aβ老年斑数量减少了30.22%,沉积减少了35.85%,差异有统计学意义。免疫印迹结果显示,外源性NGF减少APP/PS1转基因小鼠脑内GSK3β的表达,增加β-catenin的表达。结论:外源性NGF可能通过抑制GSK3β的活性和增加β-catenin的活性,激活Wnt/β-catenin信号通路,对神经元起保护作用。     

雷帕霉素通过激活LC3介导的细胞自噬改善ApoE4/5×FAD小鼠的认知功能

目的:探讨表达不同人载脂蛋白E(ApoE)亚型的5个家族性阿尔茨海默病(FAD)突变基因(5×FAD)转基因小鼠(EFAD小鼠)的海马组织细胞自噬功能是否存在差异,以及雷帕霉素能否通过增强细胞自噬减少β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积而改善EFAD小鼠的认知功能。方法:6月龄ApoE3/5×FAD(E3FAD)小鼠和ApoE4/5×FAD(E4FAD)小鼠每日给予雷帕霉素(1 mg/kg)灌胃,持续6周,给药结束后通过Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力,透射电镜观察各组自噬体超微结构特点,免疫组织化学染色法观察脑内淀粉样斑块沉积情况,Western blot方法检测海马内自噬相关蛋白p-mTOR和LC3-II的表达,ELISA法测定海马组织可溶性和不溶性Aβ1-42水平。结果:与溶媒组E3FAD小鼠相比,溶媒组E4FAD小鼠Morris水迷宫训练潜伏期延长(P0.05),探索实验时穿越平台次数少(P0.05),距离平台平均距离更长(P0.05)。雷帕霉素干预可改善E3FAD和E4FAD小鼠的认知功能,降低2组小鼠海马组织可溶性Aβ1-42水平和E4FAD小鼠海马组织不溶性Aβ1-42水平(P0.05),缩小了E3FAD和E4FAD小鼠之间的认知差距(P0.01)。同时,溶媒组E4FAD小鼠马组织自噬标志物LC3-II表达比E3FAD小鼠低(P0.05),雷帕霉素可降低E3FAD和E4FAD小鼠海马组织p-mTOR水平(在E4FAD小鼠中作用更为明显)、升高LC3-II表达、增强细胞自噬功能(P0.05)。结论:ApoE4加重了5×FAD转基因小鼠的认知功能障碍,增加了脑内Aβ沉积和细胞自噬。雷帕霉素通过抑制mTOR、激活LC3介导的自噬减轻Aβ沉积,从而改善EFAD小鼠的认知功能。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.