MicroRNA在人结肠癌干细胞中的表达谱

目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA)在人结肠癌干细胞中的表达,为进一步研究miRNA调控结肠癌干细胞向结肠癌细胞分化的分子机制奠定基础.方法:应用miRNA表达谱芯片检测人结肠癌干细胞和已分化结肠癌细胞中miRNA的表达谱.利用实时定量PCR技术检测两种细胞中差异表达的miRNA,验证miRNA芯片结果的可靠性.应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的靶基因进行预测.结果:与已分化结肠癌细胞相比,人结肠癌干细胞中表达上调超过1.5倍的miRNA有35个.为:hsa-miR-192,hsa-miR-29b,hsa-miR-215,hsa-miR-194,hsa-miR-33a,hsa-miR-32等:表达下调超过1.5倍的miRNA有11个,为:hsa-miR-93,hsa-miR-1231,hsa-miR-524-3p,hsa-miR-886-3p等.PCR技术验证,与miRNA芯片结果相符合.表达显著上调miRNA的共同靶mRNA有:AFF2、MTF1、RUNDC2C和ZFHX4.表达显著下调miRNA的共同靶mRNA有:ONECUT2、SH3TC2、PTPRT、RNABP10、NR3C1、RGSL1、RNASEL和TANC2.结论:筛选出的差异表达miRNA可能参与结肠癌的发病.为该病诊治提供了新的思路.其共同靶基因可能具有重要的调控结肠癌干细胞生长和分化的作用.     

microRNA在HBV相关肝病中的研究进展

microRNA是一类内源性染色体上的非编码单链RNA,能够引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,对基因进行转录后的表达调控,在体内发挥诸如发育、细胞分化、细胞增殖、细胞死亡、染色体改变、病毒发病机制和癌变等众多重要的生物学功能.乙型肝炎病毒感染宿主后可发生慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭、肝癌等病理变化,乙型肝炎病毒和宿主之间通过miRNA进行的相互调节对HBV相关肝病的发生发展很重要,因此miRNA在HBV相关肝病的研究中具有重要的意义.本文对miRNA在HBV相关肝病中的最新研究进展做一综述.     

乙型肝炎病毒基因变异、p16蛋白失活与肝癌的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因变异及肿瘤抑制基因p16蛋白失活与肝癌发生的关系。方法用基因芯片和核苷酸序列分析技术对114例HBV感染者（观察组）血清和43份肝组织标本中HBV DNA（前C区1814、1896、BCP区1762、1764位）进行分析,用流式细胞荧光染色法检测观察组和20例正常献血者（正常对照组）外周血白细胞中p16蛋白表达。结果观察组慢性重症乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清HBV基因总突变率显著高于慢性乙型肝炎患者（P〈0．01）,肝硬化、肝癌肝组织HBV基因总突变率显著高于正常组织;正常对照组外周血自细胞中p16蛋白阳性率显著低于慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者,肝硬化、肝癌患者阳性率显著高于慢性乙型肝炎患者。结论HBV变异可能是肝癌发生的始动因子,而p16蛋白失活是肝癌发生的重要因素。     

肝泡型包虫病特异microRNA的筛选及初步研究

目的肝泡型包虫病由多房棘球蚴感染造成,通过对肝泡型包虫病患者组织和血浆中差异表达的miRNA进行筛查,寻找肝泡型包虫病新的生物标志物。方法纳入2016年6月—2018年5月在青海大学附属医院确诊的肝泡型包虫病患者,选取2例肝泡型包虫病患者的病灶边缘组织和3例临近病灶边缘的正常组织,以及3例肝泡型包虫病患者和3例健康对照者的血浆样本,使用Agilent Human miRNA芯片检测组织和血浆的miRNA表达谱,根据差异倍数(FC>1.2)和P值(P<0.05)筛选差异表达的miRNA,根据差异miRNA的靶基因预测结果,结合文献报道,选择与肝脏疾病相关的血浆miRNA和组织miRNA进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。计量资料2组间比较采用t检验,相关性分析采用Spearman相关分析。结果肝泡型包虫病患者中的microRNA表达谱与健康人相比有显著不同,qRT-PCR验证发现6个microRNA中有3个miRNA(hsa-miR-4644,hsa-miR-136-5p,hsa-miR-483-3p)在肝泡型包虫病患者中显著差异表达(P<0.05)。其中hsa-miR-4644和hsa-miR-483-3p在肝泡型包虫病患者中显著上调表达(P值均<0.05),hsa-miR-136-5p显著下调表达(P<0.05)。通过TargetScan,PITA,microRNAorg数据库对差异miRNA进行靶基因预测,对三个数据库预测到的靶基因取交集,共有137个基因和miRNA之间有靶向关系。差异的hsa-miR-483-3p靶向调控参与人体免疫反应及与肝脏疾病有关的基因(IL-17A,IL-5,CD40LG,TAP2,TNF)。通过GO与KEGG分析发现,hsa-miR-483-3p的靶基因在免疫缺陷(Primary immunodeficiency)信号通路,IL-17信号通路,TNF信号通路中起重要作用。结论肝泡型包虫病有独特的microRNA表达谱,其中hsa-miR-483-3p可作为肝泡型包虫病的一种新的生物学标志物,其调控的靶基因主要参与Primary immunodeficiency信号通路,IL-17信号通路,TNF信号通路。但这些miRNA与肝泡型包虫病之间的调控关系有待进一步验证。     

microRNA在HBV感染相关疾病中的作用

microRNA(miRNA)通过调控转录后基因表达在病毒性疾病中发挥重要作用。miRNA可影响HBV在宿主细胞内复制和基因表达,而HBV则可通过调节宿主miRNA的表达为自身存活和复制提供有利的环境。这种miRNA介导的HBV与宿主的相互关系是HBV感染相关疾病发病机制的重要基础。阐述了miRNA在HBV感染相关慢性乙型肝炎﹑肝硬化﹑肝细胞癌中的作用进展。     

MicroRNA在直肠癌中的表达谱

目的:研究直肠癌microRNA(miRNA)表达谱,以期发现直肠癌发生过程和正常直肠黏膜组织的miRNA差异表达谱,并理论上预测可能受其调控的靶基因.方法:选择2011-01/03于中国人民解放军第306医院肠镜检查的进展期直肠癌患者,对直肠癌及正常组织进行miRNA芯片检测,筛选直肠癌、正常直肠组织差异表达的miRNA,并运用Gomir分析软件筛选TargetScan、PicTar、miRanda3个预测软件同时预测出的靶基因.结果:选择直肠癌组织、正常直肠黏膜组织标本各2例,通过Affymetrix miRNAs芯片检测,发现直肠腺癌与正常直肠黏膜相比,上调的miRNA为miR-15a、miR-18a、miR-18a*、miR-21、miR-24-2*、miR-27a等37种,下调的为miR-139-5p、miR-139-3p、miR-215、miR-200b、miR-133a、miR-150等18种.依据Ratio值,选择其中最高者miR-31和最低者miR-375进行预测其靶基因.预测ZFHX4可能为miR-375的靶基因,预测BACH2、FZD3等可能为miR-31的靶基因.结论:直肠癌和正常直肠黏膜相比有其特异的miRNA表达谱,miRNA在直肠癌的发生中可能起到重要作用,受其调控的靶基因及作用方式值得进一步研究.     

肝癌发生过程中的差异基因表达

目的:应用寡核苷酸芯片研究正常肝脏、慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌的基因表达谱,筛选肝癌相关基因.方法:分别对正常肝组织及肝炎、肝硬化和肝癌组织进行总RNA抽提并纯化,反转录得到cDNA,生物素标记cRNA探针,分别与含有19378个已知基因的寡核苷酸芯片进行杂交,Gene Scanner 3000激光系统扫描,GenePix Pro3.0分析软件读取处理杂交信号.结果:在慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌组织中,筛选出共同差异表达基因81个,其中持续上调表达基因53个,持续下调表达基因数28个.结论:寡核苷酸基因表达谱芯片能够快速筛选出肝癌相关基因,有多种基因共同参与肝癌发生的整个过程.     

癌胚抗原阳性的结直肠癌患者微小核糖核酸表达谱的初步研究

目的 探讨血清癌胚抗原(CEA)阳性结直肠癌患者微小核糖核酸(miRNA)表达谱的改变.方法 选取6例结直肠癌患者的冰冻组织标本,其中3例血清CEA水平高于正常.提取肿瘤组织标本的miRNA,用荧光染料Cy3标记,并与Agilent miRNA寡核苷酸基因芯片杂交.用扫描仪扫描荧光信号,并用Feature Extraction软件分析处理扫描结果,初步研究CEA阳性结直肠癌miRNA表达谱.为了验证微阵列表达谱的结果,选择miR-143行实时定量RT-PCR.结果 CEA 阳性与阴性结直肠癌相比,11个miRNA出现表达差异,其中hsa-miR-125a-3p、hsa-miR-134、hsa-miR-224、hsa-miR-574-5p、hsa-miR-575表达上调,hsa-miR-1、lisa-miR-143、hsa-miR-143*、hsa-miR-21、hsa-miR-23a、hsa-miR-27a表达下调,712个miRNA无明显表达差异.实时定量RT-PCR结果显示,miR-143在CEA阳性的结直肠癌组织中表达下降明显,低于CEA阴性结直肠癌组织,与miRNA微阵列检测结果一致.结论 CEA阳性与阴性结直肠癌相比,具有不同的miRNA表达谱,这为结直肠癌的分子分型与个性化治疗提供了理论基础.     

1型糖尿病大鼠心肌纤维化microRNA表达变化筛选

目的应用链脲佐菌素(STZ)诱导1型糖尿病大鼠心肌纤维化模型,检测心肌组织miRNA表达谱,对差异miRNA调控的靶基因进行初步预测。方法 STZ诱导大鼠心肌纤维化,微距阵基因芯片技术筛选大鼠心肌组织差异表达的miRNA,对差异表达的miRNA调控的靶基因生物信息学分析。结果与对照组比较,模型组大鼠心肌组织中差异倍数改变大于2倍的miRNA共有25个,其中hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-551a、hsa-miR-34a-5p、hsa-miR-885-5p等表达上调,hsa-miR-208a、hsa-miR-150-5p等表达下调。生物信息学分析,差异miRNA调控的靶基因多与细胞增殖、凋亡、糖代谢及血管生成等生物学功能相关。结论 STZ诱导的1型糖尿病大鼠心肌纤维化模型心肌中,miRNA表达谱有明显差异,其中有些miRNA可能靶向与1型糖尿病心肌纤维化发生发展密切相关。     

血清miRNA表达谱在肝细胞癌中的差异性研究

[目的]探讨肝细胞癌、肝硬化患者与正常人血清miRNA表达水平的差异性;筛选出肝癌中差异较明显的血清miRNA谱。[方法]分别收集4例肝癌患者、3例肝硬化患者和3例同期正常体检人员的血清,采用Qiagen miRNA PCR Array芯片法筛查肝癌、肝硬化患者和正常人差异表达的血清miRNA。[结果]初步筛查出了差异表达的血清miRNA,与正常人比较,以相差2倍为分界,肝癌血清miRNA共128个下调,98个上调;肝硬化血清miRNA共131个下调,74个上调;其中,肝癌和肝硬化患者血清miRNA同时下调的有76个,同时上调的有53个。与肝硬化比较,以相差2倍为分界,肝癌血清miRNA共108个下调,103个上调;结合文献、P值及CT值进一步筛选出差异最有意义的7个与肝癌相关的血清miRNA(miR-373-5p,miR-1290,miR-4516,miR-134-5p,miR-144-5p,miR-125a-5p,miR-126-3p)。[结论]差异表达的miRNA谱与肝癌的发生、发展有一定的相关性。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.