卵巢癌COC166-9单克隆抗体片段的制备及其在放射免疫显像中的应用

目的：制备抗卵巢上皮性癌ＣＯＣ１６６－９单克隆抗体片段Ｆ（ａｂ′）２，并进行放射免疫（放免）显像。方法：采用无花果酶消化ＣＯＣ１６６－９单克隆抗体，其酶切产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定及ＤＥＡＥ－３２离子交换柱纯化获得Ｆ（ａｂ′）２片段。采用１３１Ｉ标记的Ｆ（ａｂ′）２（片段组）、ＣＯＣ１６６－９（全抗体组）和正常鼠ＩｇＧ（对照组），分别进行荷人卵巢癌裸鼠移植瘤放免显像，并对其放免结果进行比较。结果：（１）片段Ｆ（ａｂ′）２的产率为５４％，为最大理论产率的８０％。酶联免疫吸附和免疫细胞化学染色实验均证实其保留较好的免疫活性。（２）７２小时显像可见Ｆ（ａｂ′）２片段组移植瘤部位有高的放射性物质浓集，图像清晰，胸、腹腔高本底区几乎无放射性物质分布，肿瘤与非肿瘤放射性活度的比值（Ｔ／ＮＴ）高于全抗体组和对照组。结论：利用无花果酶可获得免疫活性好、产率高的单克隆抗体片段。应用其进行放免显像，图像清晰度优于全抗体。     

流产患者外周血肿瘤坏死因子可溶性白细胞介素-2受体及T淋巴细胞亚群的测定

对８５例早期流产患者采用酶联免疫吸附法测定外周血肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）以及采用流式细胞仪检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群（总Ｔ淋巴细胞，ＣＤ３；Ｔ辅助，ＣＤ４；Ｔ抑制，ＣＤ８）。流产患者分为三组：２５例难免或不全流产（ＥＡ），先兆流产２０例治疗失败（ＴＡＦ）及３８例治疗成功（ＴＡＳ）。选择正常早孕妇女（ＮＰ）及非孕妇女（ＮＮＰ）各２０例为对照。结果：①血清ＴＮＦ－α、ｓＩＬ－２Ｒ水平在ＥＡ、ＴＡＦ、ＴＡＳ组分别明显高于ＮＰ组（Ｐ＜０．０５），且在ＥＡ、ＴＡＦ组较ＴＡＳ组明显升高（Ｐ＜０．０５）。血清ＴＮＦ－α、ｓＩＬ－２Ｒ水平在ＮＰ组与ＮＮＰ组没有明显差异（Ｐ＞０．０５）。②ＣＤ８细胞在ＥＡ、ＴＡＦ组分别明显低于ＴＡＳ、ＮＰ组（Ｐ＜０．０５），ＣＤ３、ＣＤ４在各组没有明显差异（Ｐ＞０．０５）。提示：自然流产可能与机体免疫异常有关。     

抗兔附睾特异性蛋白ESP－2单克隆抗体及其抗生育研究

兔附睾液中分离纯化了两个特异性蛋白ＥＳＰ－１和２，分子量分别为４２ＫＤ和２０ＫＤ。应用基因克隆技术，又从人睾丸λ－ｇｔｌｌ表达性。ＤＮＡ基因库中筛选分离出一个１．９Ｋｂ的编码ＥＳＰ－２ｃＤＮＡ片段，为了进一步深入研究ＥＳＰ－２做为抗生育疫苗的可能性，本研究用半固体融合细胞培养基法成功地制备了抗ＥＳＰ－２的单克隆抗体，经三轮筛选后获得阳性克隆３８个，经定量分析ＯＤ值均为０．５以上，其中三株命名为ＥＳＰ－２ｍＡｌ、ＥＳＰ－２ｍＡ３和ＥＳＰ－２ｍＡ９，接种于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔之后，腹水滴度均达１∶１００，０００。本研究采用体内外结合的被动免疫抗生育实验，即用抗体处理精子后进行体内抗生育实验，用小鼠双侧子宫互为对照和实验，证明ＥＳＰ－２ｍＡ３，ＥＳＰ－２ｍＡ９单抗对小鼠受精有明显的抑制作用，Ｐ＜０．０５和＜０．０１。对上述两株ＥＳＰ－２抗体的抗受精机理需进一步探讨。     

抗兔附睾特异性蛋白ESP－2单克隆抗体及其抗生育研究

兔附睾液中分离纯化了两个特异性蛋白ＥＳＰ－１和２，分子量分别为４２ＫＤ和２０ＫＤ。应用基因克隆技术，又从人睾丸λ－ｇｔｌｌ表达性。ＤＮＡ基因库中筛选分离出一个１．９Ｋｂ的编码ＥＳＰ－２ｃＤＮＡ片段，为了进一步深入研究ＥＳＰ－２做为抗生育疫苗的可能性，本研究用半固体融合细胞培养基法成功地制备了抗ＥＳＰ－２的单克隆抗体，经三轮筛选后获得阳性克隆３８个，经定量分析ＯＤ值均为０．５以上，其中三株命名为ＥＳＰ－２ｍＡｌ、ＥＳＰ－２ｍＡ３和ＥＳＰ－２ｍＡ９，接种于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔之后，腹水滴度均达１∶１００，０００。本研究采用体内外结合的被动免疫抗生育实验，即用抗体处理精子后进行体内抗生育实验，用小鼠双侧子宫互为对照和实验，证明ＥＳＰ－２ｍＡ３，ＥＳＰ－２ｍＡ９单抗对小鼠受精有明显的抑制作用，Ｐ＜０．０５和＜０．０１。对上述两株ＥＳＰ－２抗体的抗受精机理需进一步探讨。     

卵巢癌单克隆抗体—脂质体—药物交联物制备及其体…

以我室自制卵巢上皮癌单克隆抗体ＣＯＣ１６６－９与包载阿霉素或顺铂的脂质体结合，制备出单克隆抗体（单抗）脂质体阿霉素交联物（ＭＬＡ）和单抗脂质体顺铂交联物（ＭＬＰ）。并用ＭＬＡ和ＭＬＰ对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３进行生长抑制实验，结果表明，在较高浓度时ＭＬＡ与阿霉素的杀伤ＳＫＯＶ３细胞能力相同；当浓度减低时，ＭＬＡ明显强于阿霉素。而ＳＫＯＶ３对ＭＬＰ和顺铂都不敏感。     

人卵巢癌细胞分泌转化生长因子－β对外周血单个核细胞增殖的影响

观察人卵巢癌细胞株ＣＯＣ＿１和ＣＯＣ＿２来源的患者癌性腹水（ＡＳ＿１，ＡＳ＿２）、癌细胞无血清条件培养液（ＳＦＣＭ＿１，ＳＦＣＭ＿２）及荷瘤裸鼠血清（ＮＳ＿１，ＮＳ＿２）对植物血凝素（ＰＩＩＡ）和白细胞介素－２（ＩＬ－２）诱导的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）增殖的作用，及与转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）的关系。结果：ＡＳ＿１和ＡＳ＿２对ＰＢＭＣ增殖有剂量依赖性抑制作用。ＳＦＣＭ和ＮＳ也具有明显抑制ＰＢＭＣ增殖的作用；但在浓度很低时，ＳＦＣＭ＿２对ＰＨＡ诱导，ＳＦＣＭ＿１、ＮＳ＿１和ＮＳ＿２对ＩＬ－２诱导的ＰＢＭＣ增殖，具有一定促进作用。上述作用特点与ＴＧＦ－β作用相似，并可被抗ＴＧＦ－β中和抗体部分阻断。提示：人卵巢癌细胞可通过产生ＴＧＦ－β，抑制宿主免疫。     

肿瘤标记物联合检测对卵巢恶生肿瘤的诊断价值

应用放免及生化法对１０７例卵巢肿瘤患者及５０例正常健康妇女血清ＳＦ（铁蛋白）、β２－ＭＧ（β２－微球蛋白）、ＣＥＡ、ＬＤＨ、ＡＦＰ和β－ｈＣＧ进行定量检测。结果表明：①卵巢恶性肿瘤组血清ＳＦ、β２－ＭＧ、ＣＥＡ及ＬＤＨ含量均显著高于卵巢良性肿瘤组及正常对照组（Ｐ〈０．０１）；ＳＦ含量与肿瘤分期呈正相关，随卵巢恶性肿瘤临床期别增高而递增。ＡＦＰ、β－ｈＣＧ含量在卵巢良、恶性肿瘤组间及正常对照组间均无     

肿瘤标记物联合检测对卵巢恶性肿瘤的诊断价值

应用放免及生化法对１０７例卵巢肿瘤患者及５０例正常健康妇女血清ＳＦ（铁蛋白）、β２－ＭＧ（β２－微球蛋白）、ＣＥＡ、ＬＤＨ、ＡＦＰ和β－ｈＣＧ进行定量检测。结果表明：①卵巢恶性肿瘤组血清ＳＦ、β２－ＭＧ、ＣＥＡ及ＬＤＨ含量均显著高于卵巢良性肿瘤组及正常对照组（Ｐ＜０．０１）；ＳＦ含量与肿瘤分期呈正相关，随卵巢恶性肿瘤临床期别增高而递增。ＡＦＰ、β－ｈＣＧ含量在卵巢良、恶性肿瘤组间及正常对照组间均无显著差异，提示血清ＳＦ、β２－ＭＧ、ＣＥＡ和ＬＤＨ检测，对卵巢恶性肿瘤的诊断及卵巢良、恶性肿瘤的鉴别诊断有一定临床意义。②ＳＦ、β２－ＭＧ、ＣＥＡ及ＬＤＨ诊断卵巢恶性肿瘤的准确性分别为７９．４４％、６９．１６％、６５．４０％及５６．０７％，四项联合准确性可提高到８３．１８％，提示：联合检测可提高临床诊断价值，优于单项检测结果。联合检测并结合病史及临床检查，可作为卵巢癌的初筛检查。     

中度高原地区正常及妊高征孕妇血脂及脂质过氧化变化…

测定了未孕妇女、正常孕妇和妊高征患者的血胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白－－胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）及亚组（ＨＤＬ３－Ｃ、ＨＤＬ２－Ｃ），低密度脂蛋白－胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ０、超氧化物皮化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）和维生素Ｅ（ＶＥ）的水平。结果显示：孕妇血中各项血脂均明显高于未孕妇女（Ｐ〈０．０１），妊高征组与正常孕妇组相比，ＴＣ、ＴＧ更高（Ｐ〈０．０１），ＨＤＬ－Ｃ有下降趋势，ＨＤＬ     

抗人上皮性卵巢癌单克隆抗体的制备与鉴定

应用卵巢浆液性乳头状囊腺癌可溶性相关抗原ＣＡ＿（９２５）免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，与ＮＳ－１骨髓瘤细胞株融合制各单克隆抗作（ＭｃＡｂ），获得５株持续性分泌抗体的细胞株，以融合孔为代号，分别为ＯＣ＿（４Ｄ９），ＯＣ＿（７Ｅ１０），ＯＣ＿（１Ｂ４），ＯＣ＿（３Ｂ８），ＯＣ＿（９Ｂ９）。５种ＭｃＡｂ的滴度分别为１：１０￣７，１：１０￣７，１：１０￣６，１：１０￣４，１：１０￣５，免疫球蛋白亚型为ＩｇＭ和ＩｇＧ型，染色体呈双亲染色体特点。所获得５种ＭｃＡｂ与ＣＡ＿（９２５）有特异性反应（阳性反应）；与正常卵巢组织及子宫平滑肌瘤未呈阳性反应；与肺癌、胃癌、肾癌、食管癌、直肠癌组织有弱阳性反应。     

血清铁蛋白、β_2－微球蛋白和癌胚抗原放免测定对诊断卵巢恶性肿瘤的初步评价

目的探讨血清铁蛋白（ＳＦ）、β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）和癌胚抗原（ＣＥＡ）在诊断卵巢恶性肿瘤中的价值。方法用放射免疫法测定卵巢肿瘤６１例和健康女性３５例的ＳＦ、β２－ＭＧｆｏＣＥＡ水平。结果卵巢恶性肿瘤患者的ＳＦ、β２－ＭＧ和ＣＥＡ均高于良性肿瘤组和正常对照组；Ⅲ～Ⅳ期者ＳＦ高于Ⅰ～Ⅱ期者；ＳＦ和β２－ＭＧ联合检测优于单项检测，Ⅰ～Ⅱ期患者的诊断敏感性达６３．６４％。结论ＳＦ和β２－ＭＧ测定简单易行，是卵巢恶性肿瘤的良好诊断指标。     

流产患者外周血肿瘤坏死因子可溶性白细胞介素—2受体…

对８５例早期流产患者采用酶联免疫吸附法测定外周血肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）以及采用流式细胞仪检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群（总Ｔ淋巴细胞，ＣＤ３；Ｔ辅助，ＣＤ４；Ｔ抑制，ＣＤ８）。流产患者分为三组，２５例难免或不全流产（ＥＡ），先兆流产２０例治疗失败（ＴＡＦ）及３８例治疗成功（ＴＡＳ）。选择正常早孕妇女（ＮＰ）及非孕妇女（ＮＮＰ）各２０例为对照，结果：（１）血清Ｔ     

羊水栓塞75例分析

目的：总结、分析上海市１９８５～１９９５年间的７５例羊水栓塞（ＡＦＥ）患者，以冀今后降低ＡＦＥ的发生，保障母亲的安全。方法：研究ＡＦＥ患者的临床表现、诊断及处理。结果：７５例ＡＦＥ患者中死亡５４例，占６８％；存活２４例、占３２％。诱发ＡＦＥ的因素以宫缩过强、急产、胎膜早破、人工破膜，催产素引产等为主，有一种以上诱因者更易发生ＡＦＥ。ＡＦＥ着重预防，治疗推荐ＤＲＯＰ－ＣＨＨＥＢＳ方案，并应予以正确的产科处理。２４例存活者均因此种措施而获救。结论：ＤＲＯＰ－ＣＨＨＥＢＳ方案与正确、适时地结束分娩是抢救ＡＦＥ患者成功的经验。     

缺氧缺血性脑病的足月窒息新生儿脑多普勒超声改变

研究对象及方法：根据Ｓａｒｎａｔ的方法将生后５天内３９例足月窒息儿进行缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）分度。对照组为３５例正常新生儿。在生后１０小时至５天最少行３次脑超声检查及ＣＢＦＶ测量,分为４个时间段：（１２±２）小时,２４～３５－９小时,３６～７１－９小时,７２～１２０小时。在大脑前动脉（ＡＣＡ）及中动脉（ＭＣＡ）测量ＣＢＦＶ,包括收缩峰值流量速率（Ｓ）,平均流量速率,舒张末峰值流量率（Ｄ）,（阻力指数）ＲＩ＝（Ｓ－Ｄ）／Ｓ。同时监测心率、血压、血红蛋白、血糖、氧分压及二氧化碳分压。应用非参数试验…     

自泌性转化生长因子－β对人卵巢癌细胞生长的影响

目的：我们以往观察到，人卵巢癌细胞系ＣＯＣ１和ＣＯＣ２在无血清培养条件下，可以分泌转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）类似物，本研究进一步观察该ＴＧＦ－β类似物对自身细胞生长的作用。方法：分别制备ＣＯＣ１和ＣＯＣ２ＲＰＭＩ１６４０无血清培养条件的培养液ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２；观察ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２对体外培养和接种ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞生长的影响，并与ＴＧＦ－β标准品相比较。结果：ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２对体外培养的自身细胞ＣＯＣ１和ＣＯＣ２均表现为剂量依赖性促进作用，ＳＦＣＭ２明显促进ＣＯＣ２细胞在裸鼠体内生长。放射性受体分析结果显示，ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞均表达ＴＧＦ－β受体（结合部位）；上述ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２的促进作用均可以被抗ＴＧＦ－β中和抗体部分阻断。结论：在ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞存在ＴＧＦ－β自分泌环调节机制，该机制可能与ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞自主性无止境生长有关。     

六项免疫指标在妇科肿瘤诊断中的临床价值

目的 探讨六项免疫指标在妇科肿瘤诊断中的临床价值。方法 利用皮肤ＯＴ试验（ＯＴ皮试）、Ｔ淋巴细胞转化试验（＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法）、间接免疫荧光法测Ｔ淋巴细胞亚群、酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ法）测定血清中肿瘤球死因子（ＴＮＦ）、可溶性白细胞介素Ⅱ受体（ｓｏｌｕｂｌｅ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＳＩＬ－２Ｒ）水平、放射免疫分析（ＲＩＡ）法测定血清中β２－微球蛋白（β２－ｍ）含量共     

白细胞介素2基因转导对卵巢癌细胞系SKOV3免疫原性的影响

目的 探讨白细胞介素２（ＩＬ－２）基因转导对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３免疫原性的影响。方法 应用流式细胞术,测定ＳＫＯＶ３细胞组织相容性白细胞抗原（ＨＬＡ）ＨＬＡ－ＡＢＣ、ＨＬＡ－ＤＱ及ＨＬＡ－ＤＲ分子的表达,＾５１Ｃｒ－４ｈ释放实验显示ＳＫＯＶ３、ＳＫＯＶ３／Ｎｅｏ、ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞对自然杀伤（ＮＫ）细胞和淋巴因子激活杀伤（ＬＡＫ）细胞杀伤的敏感性。结果 ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞中ＨＬＡ－Ａ     

稳定期系统性红斑狼疮孕妇外周血淋巴细胞亚群及白细胞介素-2受体的变化

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）孕妇在ＳＬＥ稳定期外周血中的Ｔ淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞（ＮＫ细胞）及可溶性血清白细胞介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）的改变。方法：采用流式细胞仪对１４例ＳＬＥ稳定期（仅服用小剂量激素）的患者妊娠时（ＳＬＥ＋ＮＰ组）的Ｔ细胞亚群和ＮＫ细胞进行检测，同时用固相酶联反应法（ＥＬＩＳＡ）检测其ＳＩＬ－２Ｒ。并以１８例稳定期ＳＬＥ未孕妇女（ＳＬＥ组）、２０例正常未孕妇女（ＮＮＰ组）和２０例正常孕妇（ＮＰ组）作对照。结果：ＳＬＥ＋ＮＰ组的辅助性－诱导性Ｔ细胞（ＣＤ４＋）细胞数量较其他３组有明显下降（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ４＋／细胞毒性－抑制性Ｔ细胞（ＣＤ８＋）值，ＳＬＥ＋ＮＰ组较ＳＬＥ组和ＮＮＰ组有显著下降（Ｐ＜０．０１），ＮＰ组也有下降，ＳＬＥ＋ＮＰ组和ＮＰ组之间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ＮＫ细胞数在４组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；ＳＬＥ＋ＮＰ组ＳＩＬ－２Ｒ有明显增高（Ｐ＜０．０１），其他３组变化不显著（Ｐ＞０．０５）。结论：ＳＩＬ－２Ｒ和ＣＤ４＋细胞数量变化可能对判断稳定期ＳＬＥ孕妇病情进展有重要作用     

单克隆抗体片段在卵巢癌诊断和治疗上的进展

单克隆抗体片段在诊和治疗卵巢中有其特点。抗体去掉Ｆｃ段，分子变小，易于进入组织间隙，达到肿瘤细胞表面；减少了抗体的非特异性结合；排泄加快、鼠源性抗体的免疫原性减弱，因为异源性ＩｇＧ的免疫原性主要在Ｆｃ段，Ｆ（ａｂ＇）２较好地保留了抗原的结合能力，而Ｆａｂ缩短了诊断的时间。     

卵巢功能早衰患者抗卵巢抗体及细胞免疫功能的测定

目的：探讨卵巢功能早衰（ＰＯＦ）患者细胞免疫功能的变化及其与抗卵巢抗体（ＡＯＡｂ）之间的关系。方法：检测３０例正常妇女（对照组）和３０例ＰＯＦ患者（ＰＯＦ组）的血清ＡＯＡｂ、外周血Ｔ淋巴细胞亚群及对卵巢抗原的白细胞促凝血活性（ＬＰＣＡ）。结果：对照组血清ＡＯＡｂ水平为１．３９±０．７２ｋＵ／Ｌ，ＰＯＦ组血清ＡＯＡｂ水平为６．８０±１．９１ｋＵ／Ｌ，两者比较，差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）。与对照组比较，ＰＯＦ组ＣＤ＋３、ＣＤ＋４细胞百分率（分别为６５．４２±５．３１％和４４．７９±５．９０％）明显升高，ＣＤ＋８细胞百分率（２５．６３±４．２６％）明显降低，ＣＤ４＋／ＣＤ＋８比值（１．６６±０．２７）增加（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值升高者的ＡＯＡｂ阳性率（８５．７％，１８／２１），明显高于ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值正常者（３／９，Ｐ＜０．０１）。ＡＯＢｂ阳性的ＰＯＦ患者ＬＰＣＡ水平上升，且与ＡＯＡｂ之间有非常显著的相关性（χ２＝８．３７８，Ｐ＜０．０１）。结论：ＰＯＦ患者对卵巢抗原同时产生细胞免疫和体液免疫反应，ＰＯＦ的发病可能与免疫因素有关。