羧甲基壳聚糖与阿霉素联合用药的体外抗肿瘤作用

目的：探讨羧甲基壳聚糖与阿霉素联合应用对人宫颈癌Hela细胞及人结肠腺瘤IS174-T细胞增殖的影响。方法：采用MTT比色法测定单独和合用羧甲基壳聚糖与阿霉素对癌细胞的生长抑制作用。应用金氏公式进行联合用药分析。结果：羧甲基壳聚糖和阿霉素均可有效地抑制癌细胞生长,且同时给药对癌细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果。序贯给药法中先给阿霉素后给羧甲基壳聚糖结果为协同作用,先给羧甲基壳聚糖后给阿霉素为拮抗作用。结论：羧甲基壳聚糖与阿霉素同时联合用药可产生协同作用,序贯联合用药产生单向协同作用。     

姜黄素与阿霉素联合用药的体外抗肿瘤作用

目的　了解姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病K5 6 2细胞及人肝癌Bel 740 2细胞的杀伤作用。方法　采用MTT法测定药物的体外杀伤作用 ,应用金氏公式进行联合用药分析。结果　姜黄素 2 0 4μmol·L-1～ 16 2 9μmol·L-1,阿霉素 0 70 μmol·L-1～ 5 5 2 μmol·L-1同时给药对K5 6 2细胞及Bel740 2细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果。序贯给药法中先给姜黄素后给阿霉素结果为协同作用 ,先给阿霉素后给姜黄素为拮抗作用。结论　姜黄素与阿霉素同时联合用药可产生协同作用 ,序贯联合用药产生单向协同作用。     

姜黄素逆转人白血病多药耐药细胞株HL—60／ADR的多药耐药性

目的 研究姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病多药耐药细胞系HL-60／ADR耐药性的逆转作用。方法 采用MTT法测定药物的体外杀伤作用，应用金氏公式进行联合用药效果分析。应用流式细胞术分析细胞周期和测定细胞内药物浓度。结果 姜黄素2．00μmol／L～16．001μmol／L，阿霉素0．801μmol／L～6．401μmol／L同时给药对HL-60／ADR细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果，对HL-60／ADR细胞周期的影响也有协同作用，HL-60／ADR细胞内ADR积聚增加是其原因之一。序贯给药法中先给姜黄素后给阿霉素结果为协同作用，先给阿霉素后给姜黄素为拮抗作用。结论 姜黄素与阿霉素同时联合用药可产生协同作用，有效逆转多药耐药。序贯联合用药仅产生单向协同作用。     

环丙沙星增强抗体偶联药物(RC48)对HER2阳性肿瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨环丙沙星与抗HER2抗体药物偶联物RC48联合用药时的抑瘤活性及机制。方法CCK-8法分别检测环丙沙星单药、RC48单药及两者联合用药(在不同配比条件下同时或序贯用药)对HER2阳性肿瘤细胞增殖的抑制作用。联合指数法评价2种药物联用的效果。结果RC48单药对SK-BR-3及NCI-N87细胞增殖有显著的抑制作用,IC₅₀分别为(4.91±1.15)ng·mL^–1及(14.54±0.85)ng·mL^–1,最大抑制率分别为87.2%及82.3%。环丙沙星单药剂量在234.38～7 500 ng·mL^–1内无显著的抗肿瘤作用。当环丙沙星与RC48同时给药时,显著降低了RC48的抗肿瘤活性(P<0.05),两者表现为拮抗作用;但当其与RC48序贯给药(先给RC48后给环丙沙星,用药间隔为6～48 h)时,抗肿瘤活性显著升高(P<0.05),2种药物表现为协同作用,且在联合药效高达95.3%时,依然保持协同作用。结论RC48与环丙沙星序贯给药(间隔6～48 h,6 h最佳)可增强抗肿瘤效果...     

吉非替尼与5－氟尿嘧啶、紫杉醇联合对胃癌细胞MKN－45的抑制作用

目的：探讨吉非替尼与5－氟尿嘧啶（5－FU）、紫杉醇（ Paclitaxel）联合序贯对人胃癌细胞MKN－45的抑制作用,筛选出体外对胃癌有效的联合用药方案。方法采用免疫组化法鉴定MKN－45细胞内EGFR相关抗原,采用MTT法测定5－FU、紫杉醇与吉非替尼联合对 MKN－45细胞的抑制作用。利用combidrug软件分析联合用药的作用效果。结果表明MKN－45细胞内 EGFR相关抗原表达阳性。先用化疗药物24h序贯吉非替尼48h方式给药时,5－氟尿嘧啶,紫杉醇与吉非替尼均有协同作用,CI值＜1;先用吉非替尼48h序贯化疗药物24h方式给药时,5－氟尿嘧啶,与吉非替尼有协同作用,CI值＜1,紫杉醇与吉非替尼在fa＞0．85时,CI值＞1,呈拮抗作用。结论5－氟尿嘧啶与吉非替尼具有协同作用,联合效果不受序贯给药顺序的影响。先用紫杉醇24h序贯吉非替尼48h具有协同作用,联合效果优于其余两种给药方案。     

蛋白激酶C抑制药enzastaurin对吉非替尼耐药的人非小细胞肺癌细胞株生长的影响

目的：观察新型靶向制剂enzastaurin单独或联合吉非替尼对耐药人非小细胞肺癌细胞株的影响,设计合理的治疗药物组合。方法：CCK8法检测细胞增殖,Chou-Talalay联用指数法判定联合用药效果,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：单药吉非替尼及enzastaurin作用NCI-H460耐药肺癌细胞72 h的半数抑制浓度（IC50）分别为6.99μmol·L-1（95%CI 3.55~13.79μmol·L-1）,7.25μmol·L-1（95%CI 4.77~1.02μmol·L-1）。两药联合应用对肺癌细胞的抑制作用增强（P 〈0.05）,同时给药组抑制效果更显著（P〈0.01）。同时给药组、序贯给药组（先用吉非替尼）和序贯给药组（先用enzastaurin）吉非替尼对H460细胞的IC50值分别为0.006μmol·L-1（95%CI 0.002~0.020μmol·L-1）,0.02μmol·L-1（95%CI 0.011~0.037μmol·L-1）,0.085μmol·L-1（95%CI 0.042~0.170μmol·L-1）。联合指数法显示在吉非替尼浓度0.05μmol·L-1以上时,同时给药组联合指数均〈1。细胞周期分布实验结果显示同时给药组可显著提高G0/G1期细胞比例（P〈0.05）,阻滞细胞于G1期。结论：蛋白激酶C抑制药enzastaurin与EGFR抑制药吉非替尼联用具有较好的协同作用,两药联合应用可能是出现吉非替尼耐药的非小细胞肺癌后续治疗的一个新选择。     

赫赛汀与健择以序贯方式联合应用对乳腺癌细胞抑制作用的研究

目的:探讨赫赛汀与化疗药物健择联合作用于乳腺癌细胞时,在进行化疗的同时何时应用赫赛汀疗效最好及赫赛汀对于化疗药物作用的影响,从而为临床治疗提供实验依据。方法:利用MTT法测定单纯赫赛汀组、单纯化疗组以及不同时间点的赫赛汀结合化疗组对人乳腺癌细胞(MDA-MB543)的抑制率。结果:赫赛汀与健择联合作用时,各序贯方式与单药健择相比无明显差别(P=0.447),健择作用6h后应用赫赛汀的序贯方式有拮抗作用的趋向,其抑制率(40.18%)低于单药(42.91%),其他序贯方式略高于单药,以两药同时使用时抑制率最高(48.78%)。赫赛汀对于健择的抑制率的影响,各种序贯方式均使健择对于细胞的抑制作用减弱,即发挥拮抗作用,尤其健择作用6h后应用赫赛汀的序贯方式抑制率为26.40%,明显低于单药健择的42.91%(P<0.01);先赫赛汀后健择的序贯方式拮抗作用略弱于先健择后赫赛汀的序贯方式。结论:赫赛汀与健择联合没有明显提高健择对乳腺癌细胞的毒性作用,两药同时使用的序贯方式略优于其他序贯方式及单药健择;在各种序贯方式中,赫赛汀对健择起拮抗作用,健择使用后6h应用赫赛汀此拮抗作用最强,先健择后赫赛汀及同时使用的序贯方式的拮抗作用较弱。     

姜黄素与阿霉素合用对KB及KB_(v200)细胞的杀伤作用

目的　了解姜黄素与阿霉素联合应用对人口腔上皮癌KB细胞及其多药耐药KBv2 0 0 细胞的杀伤作用及其作用机制。方法　采用MTT法测定药物的体外杀伤作用 ,应用金氏公式进行联合用药分析 ;采用荧光分光光度法进行细胞内阿霉素蓄积测定 ,以荧光探针DPH标记 ,用荧光偏振法测定细胞膜流动性。结果　姜黄素 4 2 5～ 17 0 0 μmol·L-1与阿霉素合用 ,对KB及KBv2 0 0 细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果。姜黄素对阿霉素蓄积的影响 ,在KBv2 0 0 细胞显示增加 ,而在KB细胞则显示降低 ;膜流动性实验表明 ,姜黄素对KB及KBv2 0 0 细胞膜流动性均无影响。结论　姜黄素与阿霉素同时联合用药可产生协同作用。其机制在KBv2 0 0 细胞与增加细胞内阿霉素蓄积有关 ;在KB细胞可能与药效协同作用有关 ;但姜黄素对两种细胞的作用均与细胞膜流动性改变无关     

曲妥珠单抗与依托泊苷序贯联合应用对乳腺癌细胞抑制作用的研究

目的：探讨体外试验中曲妥珠单抗（HER）与依托泊苷（VP16）联合的最佳序贯方式、HER对VP16作用的影响及机制。方法：利用MTT法及流式细胞技术分别测定HER、VP16及不同序贯方式联合应用对人乳腺癌细胞的抑制率及细胞周期的影响。结果：VP16化疗前应用HER组及两药同时应用组对乳腺癌细胞抑制率均明显高于单药VP16组（P〈0.01）,为相加作用,其中以HER作用6h后应用VP16组效果最好。细胞周期检测提示：VP16化疗前应用HER组及两药同时应用组对细胞S期的阻滞增强。结论：VP16化疗前6h应用HER对乳腺癌细胞的抑制率最高,为最佳序贯联合方式,其内在机制可能与细胞周期的变化有关。     

组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275联合化疗药物体外抑制膀胱癌

目的：观察组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275联合DNA化疗药物对膀胱癌T24细胞的抑制作用。方法：用MTT法测定MS-275单用及分别与阿霉素、丝裂霉素C和顺铂联用对T24细胞的抑制率，用金氏公式法判断联合用药的效果。结果：MS-275分别与阿霉素、丝裂霉素C、顺铂联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加，MS-275与丝裂霉素C联用的协同作用最明显，而MS-275与阿霉素和顺铂在中低剂量下联用亦表现为协同作用。结论：组蛋白去乙酰酶抑制剂可明显增强DNA化疗药物对膀胱癌细胞的细胞毒作用，为应用于晚期膀胱癌的化疗方案中提供可能。     

姜黄素与紫杉醇联用对人子宫内膜癌细胞增殖的影响及其机制研究

目的探讨姜黄素（CCM）与紫杉醇（PIX）联用对人子宫内膜癌细胞（Ishikawa）增殖的影响及其机制。方法（1）设置对照组（不加药物）、CCM组（不同浓度的CCM）、PIX组、联合组（PIX联合不同浓度的CCM）;（2）采用MTT法检测不同浓度的CCM联合PIX对细胞活力的影响;（3）流式细胞术检测细胞凋亡率;（4）免疫组化法检测Caspase-3蛋白表达情况。结果CCM联用PIX能抑制人子宫内膜癌细胞的增殖（P〈0．05）,且随CCM浓度的增加,抑瘤作用增加;两种药物均可诱导细胞凋亡,且各组凋亡率与药物浓度呈正相关（P〈0．05）;免疫组化结果显示随着染毒浓度的增加和联合作用,Caspase-3蛋白的表达升高（P〈0．05）。两药联用抗瘤作用增强。结论CCM、PIX均可抑制人子宫内膜癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡、上调细胞Caspase-3表达,呈剂量依赖性,且两者联用具有协同作用。     

塞来昔布与氟尿嘧啶联用对人胃癌细胞系SGC7901增殖的影响

目的：体外研究选择性环氧酶-2抑制剂塞来昔布（Celecoxib）与氟尿嘧啶（5-FU）联用对人胃癌细胞系SGC7901细胞增殖的相互作用。方法：采用MTT法观察不同浓度Celecoxib、5-FU单独和联合应用对SGC7901细胞生长的抑制作用,并使用中效原理判定两药合用的效果。结果：两种药物单独应用时,对细胞的抑制作用呈明显的剂量效应依赖关系;Celecoxib的中效浓度（IC50）为37.537μmol.L-1,5-FU的中效浓度为133.487μmol.L-1,这两种药物联用时存在＂加速抑制作用＂。应用中效原理分析显示,两种药物联用时存在协同效应,而与药物应用的先后顺序无关。结论：Celecoxib与5-FU在联合应用时的相互作用为协同效应,研究结果对提高胃癌的治疗效果具有一定的临床参考价值。     

蟾酥注射液对HL60/ADM细胞多药耐药的逆转作用研究

目的:研究蟾酥注射液对人耐阿霉素(ADM)的急性髓性白血病细胞HL60/ADM多药耐药(MDR)的逆转作用。方法:采用MTT法分别考察蟾酥注射液对HL60/ADM细胞增殖能力和对ADM敏感性的变化,并采用高效液相色谱法考察HL60/ADM细胞对ADM的摄取能力。结果:蟾酥注射液能抑制细胞增殖;非细胞毒剂量蟾酥注射液预作用后,ADM对HL60/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),HL60/ADM细胞对ADM摄取能力显著增加(P<0.01)。结论:蟾酥注射液可部分逆转HL60/ADM细胞对ADM的耐药性。     

雷公藤内酯醇联合5-氟尿嘧啶对结肠癌的作用研究

目的研究雷公藤内酯醇（TPL）与5-氟尿嘧啶（5-Fu）联合应用对结肠癌细胞增殖、凋亡及瘤体生长的影响并观察其在结肠癌化疗中的毒副作用。方法常规培养HT-29细胞，应用四甲基偶氮唑蓝比色法、流式细胞术检测TPL、5-FU联合应用对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响；中效原理评价两药的联合作用；建立裸鼠荷人结肠癌动物模型，分别及联合应用0．25mg／（kg·d）TPL和12mg／（kg·d）5-FU对其进行治疗，观察荷瘤裸鼠一般情况、瘤体的生长及化疗毒副作用。结果（1）TPL和5-FU分别及联合应用，在一定浓度范围内对结肠癌细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用，并且联合用药作用明显强于单独用药，48h凋亡率高达（41．71±1．38）％；（2）TPL和5-Fu单独应用均可抑制结肠癌瘤体的生长，肿瘤抑制率分别为78．53％、84．16％；2者联合应用时作用更为明显，肿瘤抑制率达96．78％；（3）整个化疗过程中除偶尔出现全身散在红斑、丘疹外，未见明显造血系统、肝肾功能损害等毒副作用。结论TPL与5-Fu联合应用比单独应用对结肠癌细胞株增殖抑制作用更强；TPL与5-FU在小剂量联合应用时协同抑制肿瘤细胞增殖，抑制瘤体生长，并能促进结肠癌细胞凋亡，在体外实验中毒副作用小。     

丹参酮ⅡA对阿霉素抑制肿瘤细胞生长作用的影响

目的：观察丹参酮ⅡA对阿霉素诱导2种肿瘤细胞（K562和Bel-7402细胞）死亡作用的影响。方法：MTT法检测细胞存活率,Hoechst33342染色从形态学上反映肿瘤细胞凋亡情况。结果：丹参酮ⅡA本身对2种肿瘤细胞均有抑制增殖、促凋亡的作用,不会干扰阿霉素诱导肿瘤细胞死亡的作用,甚至对其对K562细胞的促凋亡作用有协同效果。结论：丹参酮ⅡA对阿霉素抑制肿瘤细胞生长有协同作用,但对肿瘤细胞有一定的选择性。     

抗人stathmin单克隆抗体及其联合紫杉醇对人乳腺癌细胞的生长抑制作用

目的：探讨抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别单用或联用对乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制及促凋亡作用。方法：以不同浓度的抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别组成单药组和联合用药组,另设不加药的空白对照组,分别作用于MCF-7细胞24、48、72、96h,观察细胞数量和形态的变化。MTT法检测单克隆抗体、紫杉醇单用组、联用组以及对照组对MCF-7细胞的增殖抑制作用,用流式细胞仪通过AnnexinV/PI双染法检测各组细胞凋亡率的改变。结果：不同浓度的各实验组作用后细胞数量明显减少、形态不规则,部分细胞核固缩和胞质减少,而对照组细胞生长状态良好。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能抑制MCF-7细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,联用组细胞抑制率较单药组明显增高,差异具有统计学意义（P〈0.05）,两药联用有交互效应（P〈0.05）。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能诱导MCF-7细胞凋亡,联合组更为明显（P〈0.05）。结论：抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能抑制MCF-7细胞增殖,诱导其凋亡;两药联合作用于人乳腺癌MCF-7细胞具有协同作用。     

三氧化二砷与甲磺酸伊马替尼对慢性粒细胞白血病原代细胞增殖与凋亡的协同作用研究

目的：探讨三氧化二砷（Arsenic trioxide,ATO）对甲磺酸伊马替尼（STI571）在慢性粒细胞白血病（CML）原代细胞中对细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察STI571单独使用与联用ATO对慢性粒细胞白血病原代细胞增殖抑制的变化情况。流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：无毒剂量的ATO（0.15μmol·L-1）联用STI571（IC500.324±0.011μmol·L-1）较单独使用STI571（0.580±0.007μmol·L-1）时对细胞抑制率显著增大,IC50下降1.79倍（P〈0.05）。细胞经ATO（0.15μmol·L-1）、STI571（0.5μmol·L-1）联合处理24h、48h时,细胞凋亡率增大为15.6%、50.7%,协同作用为增强（＋＋）。结论：ATO能增强STI571对CML原代细胞敏感性,能促进细胞凋亡与STI571具有增强的协同作用。