甘草次酸对白血病细胞株K562增殖及其分化的影响

目的探讨甘草次酸（GA）对白血病细胞株K562增殖和分化的作用。方法采用液体培养实验、MTT法、集落培养实验观察GA对K562细胞增殖的影响；采用联苯胺染色法观察细胞内血红蛋白含量变化，采用流式细胞术检测CD71分化抗原评价GA对K562细胞的诱导分化作用。结果GA可明显抑制K562细胞生长、MTT值、集落生长，并呈浓度依赖性；GA可升高细胞内血红蛋白含量，同时上调K562细胞膜CD71分化抗原的表达量。结论GA具有抑制K562细胞增殖和诱导其分化的作用。     

奋乃静对K562白血病细胞的诱导分化作用

目的：观察吩噻嗪类抗精神病药奋乃静对K562白血病细胞的诱导分化作用。方法：采用液体培养实验，MTT实验，集落培养实验观察奋乃静对K562细胞增殖能力的影响，采用 W-G染色观察细胞形态学变化和流式细胞术检测膜CD71分化抗原观察K562细胞功能变化三个方面评价奋乃静对K562细胞的诱导分化作用。结果：吩噻嗪类抗精神病药奋乃静可上调K562细胞膜CD71分化抗原的表达量，升高细胞内Hb含量，抑制 K562 细胞增殖并在形态上有趋向分化的改变。结论：奋乃静有诱导K562细胞分化的作用。     

人参皂甙协同EPO和GM-CSF对K562细胞诱导分化的实验研究

目的 研究人参总皂甙(Total saponins of panax ginseng，TSPG)协同细胞因子(EPO、GM-CSF)对人红白血病细胞株(K562)诱导分化的影响。方法 采用细胞体外培养技术，光镜和电镜观察细胞形态变化；联苯胺染色、POX染色、α-NAE细胞化学染色分别检测细胞血红蛋白、过氧化物酶、非特异性脂酶α-NAE；免疫细胞化学检测细胞表面分化抗原CD15、HIR2、EPO-R、GM-CSF-R。结果 TSPG协同细胞因子对K562细胞的诱导作用与TSPG单独作用相比，①K562细胞形态学更趋向于成熟；②K562细胞血红蛋白(Hb)、过氧化物酶(POX)的表达明显增加；③细胞表面分化抗原CD15、HIR2、EPO-R、GM-CSF-R的表达明显增强。结论 TSPG协同细胞因子作用能明显诱导K562细胞向成熟方向分化。     

氨基甾体H42648对K562白血病细胞系的抑制增殖和诱导分化作用

目的：探讨氨基甾体H42648对K562白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用。方法：采用液体培养实验,MTT实验,集落培养实验观察H42648对K562细胞增殖能力的影响,采用Wright-Gi-emsa染色,联苯胺染色和流式细胞术观察H42648对K562细胞的诱导分化作用。结果：H42648作用K562细胞1～5d后,细胞计数和集落计数明显减少,第5d处理组的MTT值显著低于对照组,并呈剂量依赖关系;联苯胺染色OD值升高,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,形态学观察其趋向成熟分化。流式细胞术检测药物处理4d后K562细胞膜上CD71表面标记表达阳性率为89．19％。结论：氨基甾体H42648可抑制K562细胞增殖并诱导其向红系分化,提示该药可作为一种新型慢粒白血病细胞的诱导分化剂。     

人参多糖对K562细胞增殖抑制及诱导分化的实验研究

目的　研究人参多糖(GPS)对人白血病细胞株(K562)增殖抑制及诱导分化的影响。方法　采用细胞体外培 养技术,MTT法检测细胞增殖抑制,光镜和电镜观察细胞形态变化;联苯胺(Benzidine)、糖原染色(PAS)、过氧化物酶 (POX)、非特异性脂酶(α- NAE)细胞化学染色分别检测K562细胞向红系、粒系、巨核系分化的特征;免疫细胞化学检测细胞 表面分化抗原及因子表达(CD14、CD15、HIR2、EPO、GM CSF);FAS及FAS L等检测细胞凋亡情况。结果　GPS对K562细胞 的增殖有明显抑制作用并能诱导K562细胞向红系或粒系细胞分化,表现为:①K562细胞的增殖受到抑制;②K562细胞形 态学上可见细胞体积缩小,核直径减小,核仁减少或消失,核染色质浓缩,胞浆丰富,核浆比例降低,可见中晚期粒、红系细 胞;③K562细胞血红蛋白(Hb)、糖原、α- NAE的表达明显增加,而过氧化物酶(POX)的表达与对照无显著性差异;④细胞表 面分化抗原CD15、HIR2、EPO、GM CSF的表达明显增强,CD14的表达与对照无显著性差异;⑤细胞凋亡明显增加。结论　人 参多糖(GPS)能明显抑制K562细胞增殖并能诱导其凋亡并使K562细胞向成熟方向分化。     

当归多糖对K562细胞增殖抑制及定向红系细胞分化的实验研究

目的:研究当归多糖(Angelica polysaccharide,APs)对人红白血病细胞株(K562)增殖抑制及定向红系细胞分化的影响.方法:采用细胞体外培养技术、MTT法、台盼蓝拒染法与流式细胞术检测APS对K562细胞增殖的影响.光镜观察细胞形态变化;联苯胺染色与分光光度法检测经APS诱导后K562细胞向红系分化的特征和血红蛋白含量的变化.结果:APS对K562细胞的增殖有明显的抑制作用,抑制强度与APS的剂量和作用时间密切相关;经APS诱导后K562细胞的联苯胺染色阳性率增高,合成血红蛋白的量提高.结论:APS在体外对K562细胞有明显的增殖抑制及诱导其向红系细胞分化的作用.     

维甲酸类衍生物诱导K562细胞分化的活性筛选

目的 探讨维甲酸类衍生物对白血病细胞株K562细胞的抑制增殖和诱导分化活性,以寻找新的具有抗瘤活性的药物.方法 在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对细胞生长抑制的作用;瑞氏染色法观察细胞形态学改变;硝基四唑氮蓝(NBT)还原实验法分析细胞的分化指标;利用流式细胞术检测细胞表面分化抗原及细胞周期的变化情况.结果 维甲酸类衍生物作用3 d后,细胞增殖抑制率最高可达到 57.74%,IC50为2.82E-05 ;油镜下观察发现细胞形态学趋向成熟,NBT还原实验也表明维甲酸类衍生物具有诱导K562细胞株分化成熟的作用;细胞周期分析显示细胞表面分化抗原CD11b表达量增加,G0/G1期细胞增加,而S期减少.结论维甲酸类衍生物对K562细胞具有诱导分化并对其克隆生长有抑制作用,其中以2a-03、4a-01、4a-02和5a-02的作用较为突出,进一步研究开发有一定的价值.     

多巴胺诱导白血病细胞系K562凋亡的实验研究

目的:观察多巴胺对白血病细胞系K562的诱导凋亡作用.方法:采用液体培养实验、MTT实验、集落培养实验观察多巴胺对K562细胞增殖的影响,采用瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学变化和流式细胞术检测多巴胺作用后K562细胞凋亡峰的出现,三方面评价多巴胺对K562细胞的诱导凋亡作用.结果:液体培养结果,MTT及集落培养结果显示多巴胺能抑制K562细胞增殖;瑞氏-吉姆萨染色显示的形态学结果及流式细胞术结果显示多巴胺诱导K562细胞亚二倍峰的出现,表明多巴胺有诱导K562细胞凋亡的改变.结论:多巴胺有诱导K562细胞凋亡的作用.     

高三尖杉酯碱诱导K562和CML细胞凋亡及分化的实验研究

目的 明确三尖杉酯碱（HHT）治疗慢性粒细胞性白血病（CML）的机理。方法 应用细胞长曲线、克隆形成能力、细胞内血红蛋白含量测定、细胞形态,结合DNA凝胶电泳、流式细胞仪等方法,观察HHT对K562细胞株及CML慢性期细胞的作用方式。进一步用RT－PCR方法研究bcr-abl、c-myc 、max基因在转录水平的改变。结果 低浓度HHT抑制K562细胞的克隆形成能力并使K562细胞内血红蛋白含量增加;0.1umol /L 及以上浓度HHT可诱导K562细胞及CML细胞凋亡;细胞周期分析发现细胞阻滞于G1期。c-myc基因在加药24h开始下凋; bcr-abl和max基基的表达未见明显改变。结论 低浓度HHT可抑制K562 细胞增殖并诱导其向红系分化;超过一定“ 阈浓度”HHT可诱导K562细胞和CML慢性期细胞凋亡;HHT可通过抑制c-myc/max 表达来阻 滞细胞周期。     

全反式维甲酸诱导K562细胞分化过程中线粒体铁蛋白表达的研究

目的 研究K562白血病细胞在全反式维甲酸(ATRA)诱导分化过程中线粒体铁蛋白(MtF)、运铁蛋白受体1(TfR1)和铁蛋白(Fn)mRNA表达水平的变化情况,探讨MtF在白血病细胞增殖和铁代谢方面的作用.方法 K562细胞加入ATRA(终浓度1 μmol/L)中诱导培养,分别于第1、3、5 d收集细胞,分别进行:①瑞士染色观察各时间点的细胞形态;流式细胞学检测细胞表面分化抗原CD13的表达;②Trizol法提取各时间点细胞的RNA,通过半定量RT-PCR方法 检测各时点MtF、TfR1和Fn基因的表达水平.同时设未用ATRA诱导培养的K562细胞为对照组.结果 1 μmol/L的ATRA可诱导K562细胞向粒系细胞分化,诱导培养第5 d,细胞表面CD13的表达水平增加,诱导分化率为21.2%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导分化前K562细胞即有MtF mRNA表达,但随细胞诱导时间的延长,MtF和TfR1 mRNA表达呈下降趋势,诱导分化第5 d的表达水平分别为诱导分化前的86.5%和79.2%;而Fn mRNA的表达呈上调趋势,诱导分化第5 d表达水平为诱导分化前的1.21倍.结论 ATRA诱导K562细胞向粒系细胞分化过程中,MtF和TfR1 mRNA表达下调,而Fn mRNA表达上调,这种协调变化有助于降低细胞通过TfR1介导的铁摄取,从而抑制或影响细胞增殖潜能.     

Dopamine inhibits proliferation, induces differentiation and apoptosis of K562 leukaemia cells

Background Dopamine exerts its effects mainly in nervous system through D1, D2 or D3 receptors. There are few reports dealing with the effects of dopamine on leukaemia cells. However, some dopamine agonists or antagonists do show biological effects on some types of leukaemia cells. Here, we report the effects of dopamine on the proliferation, differentiation and apoptosis of K562 leukaemia cells.Methods Proliferation was determined by MTT assay and cell counting both in liquid and semisolid cultures. Differentiation was verified by morphology, benzidine staining and flow cytometry. Apoptosis was checked by Hoechst 33258 staining and flow cytometry. The two groups were untreated group and treated group (dopamine 10(-9) mol/L―10(-4) mol/L).Results In liquid culture, MTT assay and colony assay, dopamine inhibited proliferation of K562 cells. Inhibition rate was 29.28% at 10(-6) mol/L and 36.10% at 10(-5) mol/L after culture for 5 days in MTT assay. In benzidine staining and CD71 expression, dopamine induced K562 cells toward erythroid differentiation by increased 155% at 10(-6) mol/L and by 171% at 10(-5) mol/L after culture for 5 days in benzidine staining. In Hoechst 33258 staining and flow cytometry, dopamine induced K562 cells toward apoptosis. The sub G1 peak stained by PI was 14.23% at 10(-4) mol/L dopamine after culture for 3 days compared with the control (0.81%) in flow cytometry.Conclusion Dopamine inhibites proliferation and induces both differentiation and apoptosis of K562 leukaemia cells.     

氯霉素诱导白血病细胞系K562凋亡的实验研究

[目的]观察氯霉素(CAP)对白血病细胞系K562的诱导凋亡作用。[方法]采用四唑盐(MTT)实验,集落培养实验观察CAP对K562细胞增殖的影响,采用Hoechest 33258荧光染色观察细胞形态学变化和流式细胞术(FCM)检测CAP作用后K562细胞凋亡峰的出现三方面评价CAP对K562细胞的诱导凋亡作用。[结果]CAP抑制K562细胞增殖,诱导细胞亚二倍峰的出现,并在形态上有诱导凋亡的改变。[结论]CAP有诱导K562细胞凋亡的作用。     

氯化锂对K562白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究氯化锂(LiCl)在体外对K562白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用液体培养试验，四唑盐(MTT)比色试验，集落培养试验为指标观察LiCl对：K562细胞增殖的影响，采用DNA片段凝胶电泳及细胞形态学改变为指标检测细胞凋亡。结果：①不同浓度的LiCl(10～50mmoL／L)对K562细胞具有抑制增殖的作用，这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系。②在LiCl(30mmol／L)作用下，K562细胞形态学上可见凋亡细胞，且DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见“梯形带”(DNA ladder)。结论：LiCl能抑制K562白血病细胞增殖和诱导其凋亡。     

氯化锂对K562白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 :研究氯化锂 (LiCl)在体外对K5 6 2白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法 :采用液体培养试验 ,四唑盐 (MTT)比色试验 ,集落培养试验为指标观察LiCl对K5 6 2细胞增殖的影响 ,采用DNA片段凝胶电泳及细胞形态学改变为指标检测细胞凋亡。结果 :①不同浓度的LiCl(10～ 5 0mmol/L)对K5 6 2细胞具有抑制增殖的作用 ,这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系。②在LiCl(30mmol/L)作用下 ,K5 6 2细胞形态学上可见凋亡细胞 ,且DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见“梯形带”(DNAladder)。结论 :LiCl能抑制K5 6 2白血病细胞增殖和诱导其凋亡。     

哌唑嗪对K562白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究α1受体拮抗剂哌唑嗪在体外对K562白血病细胞系增殖及凋亡的影响。方法：采用四唑盐（MTT）比色实验、集落形成实验为指标观察哌唑嗪对K562细胞增殖作用的影响;采用细胞形态学、Hochset33258荧光染色实验、流式细胞术检测细胞凋亡。结果：哌唑嗪能抑制K562细胞的增殖,这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系。在5×10-6mol/L哌唑嗪作用下,K562细胞在形态学上可以看见凋亡细胞;流式细胞术也可检测到凋亡峰。结论：哌唑嗪能抑制K562白血病细胞的增殖,并能诱导其凋亡。     

抗氧化剂An7845对K562白血病细胞的增殖抑制和凋亡诱导活性

目的：观察抗氧化剂An7845在体外对K562白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用液体培养实验,MTT实验,集落培养实验观察抗氧化剂An7845对K562细胞增殖的影响,采用细胞形态学及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果：不同浓度的An7845（5×10-8～5×10-5 mol/L）对K562细胞具有抑制增殖的作用,并呈剂量依赖关系。经An7845（5×10-7 mol/L）处理后,K562细胞在形态学上可见明显凋亡细胞,DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见DNA梯形带。结论：抗氧化剂An7845能抑制K562白血病细胞增殖和诱导其凋亡。