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相似文献
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1.
人IL-28A、IL-28B和IL-29是由外周血单个核细胞(PMBC)和树突状细胞(DC)等产生的细胞因子,组成一个新的细胞因子家庭。其基因结构与IL-10相近似,但氨基酸水平与干扰素(IFN)更接近,故Kotenko等也将它们相应地称为IFN-λ1(IL-29)、IFN-λ2(IL-28A)和IFN-λ3(IL-28B)。其基因均位于人19号染色体(19q13.13)。IL-29与IL-28氨基  相似文献   

2.
藏猪白细胞介素4基因Cdna的克隆及序列分析   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的:克隆藏猪白细胞介素4基因cDNA。方法:从体外ConA刺激70小时的藏猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增,pMD-T载体连接,常规转化后,进行酶切及序列测定进行鉴定。结果:研究表明克隆得到的IL-4基因cDNA与成华猪的IL-4同源性达到99%,与长白杂交猪的同源率为98%。结论:从藏猪外周血淋巴细胞中成功地分离到IL-4基因。  相似文献   

3.
应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,参照国外发表的白细胞介素17(hIL-17)cDNA全基因序列,利用自行设计合成的1对引物,从PHA活化的正常人外周血单个核细胞中,扩增出hIL_17cDNA基因,并定向插入PUC18载体,构建了hIL-17基因重组体,经DNA序列测定,确认为hIL-17基因,这为是一步研究hIL-17的生物学功能提供可靠的物质基础。  相似文献   

4.
人白细胞介素13cDNA克隆及序列分析范灵芝,杨新科,段淑敏,刘彦仿,侯云德白细胞介素13(Interleukin-13,IL-13)是近年来发现的一种新的免疫调节介质[1],它主要由激活的T淋巴细胞产生,具有调节单核细胞及B淋巴细胞的功能,在病毒免...  相似文献   

5.
应用PCR技术扩增了人白细胞介素2受体α基因第三内含子2.5kb片段,并成功地克隆到pBS-SK载体中,构建了一系列亚克隆并测定了2.5kb全核苷酸序列,其中2228bp碱基序列为国内外首次测定,其数据已被GenBank接受,接受号为U56389。  相似文献   

6.
人白细胞介素10(hIL—10)基因的克隆和序列测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,自行设计并合成一对引物,成功地从活化的正常人外周血单个核细胞中扩增出hIL-10cDNA基因。并定向插入pUC18载体,经DNA序列测定最终确定为hIL-10cDNA基因,这将为今后hIL-10基因探针的制备和基因表达,进一步在基因水平上探讨hIL-10的生物学功能提供了物质基础。  相似文献   

7.
白细胞介素-28 B(Interleukin-28B,IL-28 B)属于Ⅲ型干扰素家族,是一种新型的白细胞介素.它通过活化JAK- STAT信号通路,调节干扰素刺激基因转录,发挥抗病毒等生物学效应.新近研究发现,IL-28B基因多态性与丙型病毒性肝炎的发病、抗病毒治疗应答和疾病转归等密切相关.因此,通过对二者相关性的研究,可能有助于临床医师更合理的选择丙型肝炎的治疗措施、开展个性化治疗、及早判断患者的预后.  相似文献   

8.
应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,自行设计并合成一对引物,成功地从活化的正常人外周血单个核细胞中扩增出hIL-10cDNA基因。并定向插入pUC18载体中,经DNA序列测定最终确定为hlL-10cDNA基困,这将为令后hIL-10基因探针的制备和基因表达,进一步在基因水平上探讨hIL-10的生物学功能提供了物质基础。  相似文献   

9.
用限制性内切酶EcoRI和SalI将恶性疟原虫复合抗原基因PfCMR从质粒pWR450-1/PfCMR中切下,插入质粒pBV220/IL-2中人白细胞介素-2(IL-2)基因的EcoRI位点。重组质粒转化大肠杆菌DH5a,通过PCR扩增和酶切鉴定,筛选出正向插入的重组载体pBV220/PfCMR-IL-2。为表达PfCMR-IL-2融合蛋白打下基础。  相似文献   

10.
目的:构建人NYD-SP28基因原核表达载体,表达其原核蛋白,制备其多克隆抗体,以探讨其在精子发生中的作用。方法:以原始质粒为模板,用PCR法扩增人的NYD-SP28基因开放阅读框全长,将其克隆到原核表达质粒pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a-NYD-SP28。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导原核蛋白的表达,纯化蛋白以免疫小鼠,制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体的滴度。结果:成功构建了用于原核蛋白表达的重组质粒,并在BL21菌中表达NYD-SP28原核蛋白,用亲和层析Ni柱进行纯化得到NYD-SP28原核蛋白。用纯化的NYD-SP28蛋白免疫小鼠2个月后,得到相应的多克隆血清抗体,经ELISA检测,滴度达到1/10万。结论:成功构建人NYD-SP28原核表达载体,并获得了高纯度的NYD-SP28蛋白及鼠抗NYD-SP28多克隆抗体,为进一步研究NYD-SP28的功能奠定了基础。  相似文献   

11.
用RT-PCR方法从人Jurkat细胞克隆了CD28 cDNA,将CD28全编码区基因片段重组入PUC质粒,测序证实所获得的为人CD28基因。以痘苗病毒天坛株国载体,构建表达人CD28的重组痘苗病毒株,并在重组病毒感染的细胞膜上表达人CD28膜抗原,拟用该抗原免疫小鼠以制备抗CD28的抗体。  相似文献   

12.
幽门螺杆菌ureB基因的克隆及序列分析   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的 对幽门螺杆菌(Hp)ureB核苷酸序列及推定氨基酸序列进行同源性比较分析,确定Hp菌株的ureB基因差异性,为疫苗的研究和诊断用品的评价提供依据。方法 自选设计引物,PCR扩增来自国内不同病人的4株Hp菌株的ureB基因,与pGEM-T载体克隆连接、测序;进一步同GenBank上发表的其他4株国外Hp菌株ureB的全基因序列进行比较分析。结果 8株Hp菌株的ureB基因序列出现了33种长度,CAPMF3和CPM630分别为1269bp和1680bp,其他为1710bp。6株1710bp的ureB基因序列的分析表明,国外3株Hp的ureB同源性较高,三者氨基酸的同源性达到100%。国内3株Hp的ureB变异较大,推定氨基酸同源性为98.7%-98.9%。结论 UreB作为保护性同时存在免疫保护覆盖率问题,研究疫苗和诊断用品时要注意选择使用在人群中流行占优势的Hp菌株的高度保守的UreB抗原肽,使其具有更高的覆盖率。  相似文献   

13.
为了弄清萍乡地区TT病毒 (TTV)感染情况 ,分析本地区TTV株基因结构特点 ,我们对江西省萍乡地区 8例TT病毒株进行了部分基因的克隆及序列测定。1 材料和方法1 1 材料 血清标本采用本地区流行病学调查和本院的临床阳性标本。T载体、XL1 Blue菌为美国Invitrogen公司产品。Taq酶、dNTPs及T4DNA连接酶购自华美公司。PCR试剂由中国军事医学科学院提供。1 2 引物合成 根据Okamoto等报道的TTV基因序列 ,采用Goldkey软件在TTVORF保守区设计两对套式引物 ,引物序列如下 :外…  相似文献   

14.
鸡干扰素基因的分子克隆与序列测定   总被引:8,自引:1,他引:7  
目的:从接种新城疫F48E9病毒的La Sota疫苗免疫鸡体外有丝分裂原刺激的脾淋巴细胞中克隆鸡干扰素基因。方法:应用逆转录多聚酶链式反应技术扩增,常规平端连接、转化及序列测定技术进行验证。结果:研究表明克隆得到的基因与国外报道的鸡胚成纤维细胞干扰素基因。结论:鸡在该状态下其脾淋巴细胞表达鸡胚成纤维细胞干扰素mRNA。  相似文献   

15.
目的:克隆小鼠甘露聚糖结合凝集素-A(MBLA)基因的全长编码区cDNA。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/c小鼠的肝细胞中,分离出MBL-A基因cDNA片段,克隆入pUC-T载体,测序并进行分析。结果:扩增得到的小鼠MBL-A基因cDNA全长720bp,编码240个氨基酸残基,包含了完整的富含半胱氨酸区、胶原区、颈区和糖识别域。分析表明,与Genbank中发表的序列具有99.9%的同源性。结论:获得小鼠MBL-A基因的克隆,为进一步研究MBL-A分子在体内的生物学功能奠定了一定基础。  相似文献   

16.
目的 研究thyA基因天然缺陷菌株thyA*基因的改变。方法 用PCR插入法将thyA*基因克隆到pUC18上,进行序列测定及分析。结果 突变的thyA基因其第131位碱基T突变为碱基A。结论 thyA基因缺陷的大肠杆菌的thyA基因第131位碱基T突变为碱基A,是导致该基因功能丧失的直接原因。  相似文献   

17.
中国人IL—18结构蛋白cDNA的克隆和序列分析   总被引:6,自引:1,他引:5  
傅奕  赵惠仁 《免疫学杂志》2000,16(4):254-256
目的克隆人白介素 - 18结合蛋白 (h IL- 18BP)的 c DNA,以研究其结构与功能的关系。方法从中国汉族人的胎盘组织中提取总 RNA,以 RT- PCR方法扩增出全长 5 85个 bp的 IL- 18BP c DNA,将其与表达载体 pc DNA3连接 ,转化大肠杆菌 DH5 α,建立了 h IL- 18BP的 c DNA克隆。结果序列分析表明 ,与国外文献报道的人 IL- 18BP的 c DNA序列完全一致。结论 h IL- 18BP已成功地得到克隆。  相似文献   

18.
致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因的克隆及序列分析   总被引:8,自引:3,他引:5  
目的 对致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)132株的papA基因进行克隆和序列分析。方法 根据F13型papA基因序列设计引物,并在二引物5′端加上限制性内切酶EcoRⅠ和BanHⅠ的酶切位点。采用此引物扩增132菌株p菌毛粘附基因群的papA基因,扩增产物克隆人质粒,选取阳性重组质粒进行核苷酸序列分析。结果 UPEC132株经PCR法扩增获得约700bp的papA片段,经克隆获得阳性重组质粒pCT2  相似文献   

19.
目的:寻找人肝肿瘤细胞选择性的白细胞介素-7(IL-7)剪接变异体。方法:运用自行设计的IL-7引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,分离正常肝组织、原发肝癌组织、培养肝癌细胞株IL-7mRNA,再对电泳所获条带进行克隆、测序。结果:正常肝组织、原发肝癌组织、培养肝癌细胞株(BEL-7402和SMMC-7721)都能检测到IL-7mRNA,而且从肝癌组织、培养肝癌细胞株分离出1条新带,经亚克隆及测序,证实该条带系人IL-7基因cDNA第4外显子缺乏所致。结论:肝癌组织及培养的肝癌细胞株存在选择性IL-7剪接变异体。该变异体的发现,为肝癌病人的免疫调节紊乱以及肝癌病人的临床免疫治疗提供了新的研究方向。  相似文献   

20.
白细胞介素7(IL-7)选择性剪接变异体的筛选和序列测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:寻找人肿瘤细胞选择性的白细胞介素7(Interleukin-7)剪接变异体。方法:运用自行设计的IL-7引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,分离正常肝组织、原发肝癌组织、正常胃组织和胃癌组织IL-7mRNA,再对电泳所获条带进行克隆、测序。结果:正常肝组织、原发肝癌组织、正常胃组织和胃癌组织都能检测到IL-7mRNA,而且从肝癌组织、胃癌组织中各分离出一条新带,经亚克隆及测序,证实这两条带分别是人IL-7基因eDNA第四外显子(肝癌组织)和第五外显子(胃癌组织)缺乏所致。结论:肝癌组织和胃癌组织存在不同选择性IL-7剪接变异体。这些变异体的发现,为肿瘤病人的免疫调节紊乱以及肿瘤病人的临床免疫治疗提供了新的研究方向。  相似文献   

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